美國FDA用無菌工藝生產(chǎn)滅菌藥品的指引1987年

美國FDA用無菌工藝生產(chǎn)滅菌藥品的指南1987年用無菌工藝消費滅菌藥品

的指南1987年TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument".目的 4.導(dǎo)言 4\o"CurrentDocument".廠房和設(shè)備 6\o"CurrentDocument".組分 9\o"CurrentDocument"V,容器/密封件 10\o"CurrentDocument".時限 11\o"CurrentDocument".消費和工藝控制驗證 11\o"CurrentDocument"vm.實驗室控制 16\o"CurrentDocument".無菌檢驗 17\o"CurrentDocument".參考資料 20I.目的本指南為有關(guān)人員提供用無菌工藝消費滅菌藥品的一些操作和規(guī)程.這些操作和規(guī)程是由契合現(xiàn)行藥品消費質(zhì)量管理規(guī)范有關(guān)局部的合格方法所組成(21CFR210和211局部)。應(yīng)該留意，對21CFR600-680局部中規(guī)則的生物制品而言,210.2(a)和211.1(b)局部規(guī)則,同時遵守600-800局部和分篇210與2同的適當(dāng)規(guī)則是不能夠的，關(guān)于這些生物制品將制定特殊的規(guī)則。因此，生物制品的無菌檢驗和用于這樣檢驗的培育基必需契合610.12局部的要求。n.導(dǎo)言本指南依據(jù)21CFR10.90而發(fā)布，它所表達(dá)的通用原那么和方法不是法定的,但是為FDA所認(rèn)可。廠家可依據(jù)本指南確保FDA的認(rèn)可，或許遵照其他不同的規(guī)程。廠家采用不同規(guī)程時，可事前同F(xiàn)DA商榷但并非必需這樣)，以免日后為FDA所否認(rèn)而糜費人力和財力。假設(shè)當(dāng)局以為需求，可以經(jīng)過它在法規(guī)上的努力和有關(guān)人員提出的意見與建議，不時地修訂本指南。用無菌工藝和用最后滅菌方法消費滅菌藥品有不同之處。最后滅菌方法通常包括在高質(zhì)量環(huán)境條件下產(chǎn)品容器的灌裝和密封；產(chǎn)品、容器和密封件通常具有高度的微生物學(xué)的質(zhì)量要求，但不是無菌的。為降低產(chǎn)品的微生物含量并確保隨后的滅菌處置成功，重要的是灌裝和密封在高質(zhì)量的環(huán)境中停止。然后對在其最終容器中的產(chǎn)品停止滅菌處置--通常用加熱法或輻射法。在無菌工藝中，產(chǎn)品、容器和密封件都區(qū)分經(jīng)過滅菌處置，然后放到一起。因產(chǎn)品裝入其最終容器后不再停止滅菌處置，所以為堅持產(chǎn)品的無菌性，在極高質(zhì)量的環(huán)境下停止產(chǎn)品灌裝和容器封鎖至關(guān)重要。此外，無菌工藝比最終滅菌法通常有更多的變量，這一要素使得確保最終產(chǎn)品無菌更為困難，例如在無菌灌裝前，最終產(chǎn)品的不同局部經(jīng)過不同的滅菌處置----如玻璃器皿的枯燥加熱、膠塞經(jīng)高壓蒸汽處置、液體劑型的過濾，每一處置都需求完全有效并處于控制之下。每一處置都有出錯的能夠性(另一方面，因最終滅菌的藥品通常只要一次滅菌處置，因此出錯的能夠性有限),而且已滅菌的藥品、容器、密封件等的操作在直至停止最終包裝之前就有污染的風(fēng)險，必需慎重控制。這些工藝的不同引出了有關(guān)無菌工藝的假定干效果，關(guān)系到FDA認(rèn)可的契合現(xiàn)行藥品消費質(zhì)量管理規(guī)范規(guī)則中某些局部的方法。現(xiàn)行藥品消費質(zhì)量管理規(guī)范中的這些局部通常大多是討論關(guān)于廠房和設(shè)備、部件、容器/密封件、消費時間限制、驗證、實驗室控制和無菌檢測，尤其由于這些效果大多觸及到工藝的驗證，本指南將詳細(xì)說明。本指南預(yù)備回答這些效果并廓清滅菌藥品的無菌消費工藝中的某些技術(shù)方面效果。應(yīng)該留意，本文件沒有提出無菌工藝中其他幾個重要的方面----如人員衛(wèi)生、無菌任務(wù)服和潔凈室設(shè)計。如需求，這些效果及其他效果將包括在本指南以后的修訂版本中。雖然本指南的某些局部也可用于最終滅菌藥品的制備，但本指南并不論述最終滅菌藥品效果。本指南，在21CFR2H分篇的某些章節(jié)所規(guī)則的現(xiàn)行藥品消費質(zhì)量管理規(guī)范要求之后是FDA以為契合這些要求的操作和規(guī)程的討論。應(yīng)留意，并非用于無菌工藝處置的滅菌藥品的全部規(guī)則均失掉過鑒定，只是對提出了中肯效果的局部作了鑒定。本指南還包括了能夠?qū)ψx者有用的參考資料的目錄。定義關(guān)鍵區(qū)域(Cnticalaieas)：翻開滅過菌的產(chǎn)品或容器/密封件的區(qū)域。關(guān)鍵外表(Cnticalsuifaces)：與滅過菌的產(chǎn)品或容器/密封件相接觸的外表。D值(Dvalue)：在指定溫度下，增加微生物數(shù)目90%所需求的時間。過度滅菌工藝(OveikiHsterilizationpiocess)：足以使D值小于1分鐘的微生物更少降低12個對數(shù)值的工藝。除菌過濾器(Stenhzmgfiltei)：以龐大假單抱菌為挑試菌種，在每平方厘米過濾外表的微牛物最小濃度為10-7的條件下能發(fā)生無菌濾出液的過濾器。驗證(Validation)：樹立高度保證的書面證據(jù)，保證一個特定的工藝將自始至終消費出契合其預(yù)定規(guī)格和質(zhì)量質(zhì)量的產(chǎn)品。最差狀況(Woistcase)：一組消費下限和下限及環(huán)境的，包括列入規(guī)范操作規(guī)程內(nèi)的條件與理想條件相比，這組條件具有使工藝進(jìn)程或產(chǎn)品發(fā)作效果的最大時機(jī)。這些條件并不一定使進(jìn)程失敗或產(chǎn)品不合格。III.廠房和設(shè)備要求211.42節(jié)（設(shè)計和修建特征）要求，在某種水平上，應(yīng)有隔離的或特定的操作區(qū)域以防污染。對無菌工藝而言，應(yīng)適時提供正壓下經(jīng)過高效過濾器過濾的空氣以及控制無菌條件的監(jiān)測環(huán)境和維護(hù)設(shè)備的系統(tǒng)。211.46節(jié)（通風(fēng)、空氣過濾、空氣加熱和冷卻）要求，在某種水平上，應(yīng)提供足以控制氣壓、微生物、灰塵、濕度和溫度的設(shè)備以及為消費區(qū)提供空氣所用的過濾系統(tǒng)，包括預(yù)過濾和高效過濾器。指點在無菌工藝中有要求隔離和控制的假定干種操作區(qū)，依各操作區(qū)的性質(zhì)而需求不同級別的空氣。有兩個區(qū)域?qū)λ庂|(zhì)量量至關(guān)重要----關(guān)鍵區(qū)域和控制區(qū)域。關(guān)鍵區(qū)域關(guān)鍵區(qū)域是指滅過菌的產(chǎn)品、容器和密封件暴露于環(huán)境中的區(qū)域。在該區(qū)域的任務(wù)包括滅過菌的物料/產(chǎn)品灌裝/密封前及這些進(jìn)程中的操作。這些操作在通常稱作''無菌中心〃或''無菌工藝〃區(qū)中停止。該區(qū)域至關(guān)重要，由于產(chǎn)品在容器內(nèi)不再停止處置并且產(chǎn)品易于受污染，因此，為保證質(zhì)量，特別是產(chǎn)品無菌，在實踐操作中直接接觸的環(huán)境應(yīng)具有最高的質(zhì)量。環(huán)境質(zhì)量的一個方面是空氣中微粒含量。微粒十分重要，從物理學(xué)方面而言,微?？梢赃M(jìn)入產(chǎn)品中使產(chǎn)品污染；或從生物學(xué)方面而言，微?？沙蔀槲⑸锏妮d體。因此，增加空氣中微粒含量和有效地去除存在的微粒很重要。已滅菌容器/密封件和灌裝/密封操作直接接觸的空氣的可以接受的微粒質(zhì)量是：在離任務(wù)臺不超出1ft處和灌裝/密封操作時氣流的下流處測量，每立方英尺空氣中含0.5mn或大于0.5um的微粒數(shù)量不得超越100個（100級）。有些粉末灌裝操作可以發(fā)生少量的粉末微粒，但從其性質(zhì)而言沒有形成污染的風(fēng)險。在這些狀況下，在1ft距離內(nèi)測定空氣質(zhì)量不可行，并且更不能區(qū)分影響產(chǎn)質(zhì)量量的空氣污染物和粉塵微粒的''背景噪音〃水平。在這些場所下，產(chǎn)品接觸的空氣的取樣盡能夠代表外來微粒污染的真實水平，這一點很重要。在關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)，必需有運用高效過濾器過濾的層流空氣供應(yīng)，該空氣具有足夠從灌裝/封鎖區(qū)內(nèi)去除微粒的速度。雖然在操作發(fā)生少量塵?；蛟O(shè)備的結(jié)構(gòu)于擾層流處也需求較高速度，但正常狀況下，90ft/分±20%的速度是足夠的?？諝庖矐?yīng)具有高度的微生物學(xué)質(zhì)量要求。每10ft3不多于一個菌落構(gòu)成單位的發(fā)作率是可以到達(dá)的和理想的。在灌裝/封鎖操作左近，空氣不是需求具有高的微粒和微生物質(zhì)量的唯一氣體。接觸產(chǎn)品、容器/密封件或產(chǎn)品接觸的外表的其他氣體，如N2和CO2（例如沖洗或復(fù)蓋）也應(yīng)經(jīng)過無菌過濾。此外，緊縮空氣應(yīng)無可檢測到的油蒸汽。關(guān)鍵區(qū)域相關(guān)于臨近的潔凈要求較低的區(qū)域，應(yīng)有正壓差?？山邮艿膲翰顬?.05uiH20o控制區(qū)控制區(qū)是預(yù)備未滅菌產(chǎn)品、加工進(jìn)程中的物料和容器/密封件的區(qū)域，是第二類重要的環(huán)境控制區(qū)。它包括組件混合區(qū)和組件、加工進(jìn)程中的物料、藥品和經(jīng)最后沖洗的與藥品接觸的設(shè)備、容器/密封件的外表暴露在工廠環(huán)境中的區(qū)域。為了降低最終產(chǎn)品中微粒污染物的水平和控制隨后停止滅菌的物品及組件的微生物含量（生物負(fù)荷），這一環(huán)境應(yīng)具有高的微生物和微粒質(zhì)量要求。任務(wù)時期在暴露物品的左近測量時，假設(shè)每立方英尺中0.5Hm和大于0.5mn的塵粒數(shù)不高于100000（100000級），該控制區(qū)中空氣的微粒質(zhì)量一般以為是可以接受的。可接受的微生物質(zhì)量為每10ft3中菌落構(gòu)成單位不多于25個。為了堅持控制區(qū)內(nèi)空氣質(zhì)量，取得足夠的空氣流，并相關(guān)于臨近非控制區(qū)堅持正壓差十分重要。在這點上，氣流應(yīng)到達(dá)每小時至少換氣20次，并且壓差一般說來至少為0.05uiH20（一切門均封鎖）。當(dāng)門翻開時，外向氣流應(yīng)足以使污染的侵入減至最低限制。控制區(qū)內(nèi)也可以運用周圍空氣以外的氣體。如通入控制區(qū)內(nèi)，這種氣體應(yīng)具有與周圍空氣相門同的質(zhì)量。緊縮空氣應(yīng)無可檢測到的油蒸汽。除這些消費區(qū)外，對有些設(shè)備也應(yīng)提供高質(zhì)量的過濾空氣。設(shè)備中的空氣與已滅菌的物料，或微生物和微粒含量均低的物料相接觸處尤為重要。例如，除菌過濾器運用于冷凍枯燥器真空間歇和熱空氣滅菌器的通風(fēng)口處，以確保與己滅菌產(chǎn)品接觸的空氣是無菌的。異樣，進(jìn)入盛裝已滅菌液體的常壓容器中的空氣也應(yīng)是經(jīng)過過濾的。用于盛裝具有高度的微生物學(xué)的質(zhì)量要求的物料貯罐內(nèi)的空氣也應(yīng)是經(jīng)過過濾的，并且過濾器應(yīng)是枯燥的，以防止隨后梗塞凝聚，或微生物生長而弄濕(有兩種方法可以到達(dá)這些要求，給過濾器供熱和運用疏水性過濾器)。對這些空氣過濾器活期停止完整性檢測是重要的。堅持空氣質(zhì)量的合格系統(tǒng)包括檢測高效過濾器的完整性。為反省密封墊圈周圍、框架之間或過濾介質(zhì)間的走漏狀況，裝置初次裝置時，應(yīng)先停止完整性檢測。爾后，應(yīng)在距離適事先期停止完整性檢測。通常在關(guān)鍵區(qū)域每年至少停止兩次這樣的測試就足夠了。但是，假設(shè)發(fā)現(xiàn)空氣質(zhì)量低或許作為藥品非無菌性調(diào)查的一局部，就需求停止更多的測試。運用鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)氣霧劑做應(yīng)戰(zhàn)性實驗(challengetest)是檢測高效過濾器完整性的一種可以接受的方法。由于高效過濾器能截住99.97%直徑大于0.3um的微粒，所以確保用做應(yīng)戰(zhàn)性實驗的物質(zhì)有足夠數(shù)量的該大小范圍內(nèi)的粒子是十分重要的。一種可以接受的鄰苯二甲酸二辛酯應(yīng)戰(zhàn)性實驗包括：在過濾器氣流出口參與鄰苯二甲酸二辛酯氣霧劑，濃度為每立升空氣80?100ug,速度為過濾器的設(shè)計的氣流速度，然后在過濾器氣流出口處用適宜的光度計探針掃描，取樣速度至少為每分鐘lft3o探針應(yīng)掃描整個過濾器的外表和框架，探針的位置應(yīng)距過濾器的外表1?2in。一個探針的讀數(shù)相當(dāng)于入口挑試品的0.01%就以為有值得留意的走漏的征兆，應(yīng)加以修繕。不在過濾器出口處參與大小的微粒而用微粒計數(shù)器檢測走漏是有效的。應(yīng)留意，過濾器完整性測試和效率測試有不同之處。完整性測試是查出過濾介質(zhì)、過濾器框架和密封墊能否走漏。挑試品是一種多分散性的氣霧劑，通常由大小為l—3um的微粒組成。測試在固定位置停止并用探針掃描過濾器外表，測量出的出口走漏物作為入口應(yīng)戰(zhàn)性實驗的一個百分比。而另一方面，效率測試是測定過濾器的速度。該測試運用微粒為0.3um大小的單一分散性氣霧劑，它與過濾介質(zhì)有關(guān)并且通常需求特殊設(shè)備。出口處的讀數(shù)代表著整個過濾器外表的平均值，因此效率測試不能用來檢測走漏。由于速度的清楚降低能添加污染的能夠性，并且速度的變化能影響氣流的層流，因此依據(jù)已確定距離時間的工藝，監(jiān)測氣流速度也很重要。應(yīng)測試氣流的類型，湍流會攪擾空氣的吹掃作用。IV.組分要求211.80節(jié)（總的要求）在〃一定水平上要求對組分的貯存、處置及檢測、同意或拒收樹立書面順序。211.84節(jié)（組分、藥品容器/密封件的檢測以及同意或拒收）在一定水平上要求那些易受微生物污染（這些微生物污染就組分的運用而言是不允許的）的組分在運用前必需經(jīng)過微生物檢驗。引言經(jīng)無菌工藝制造的滅菌藥品中運用的組分的最重要的方面之一是微生物質(zhì)量。用無菌工藝消費的成品可以因運用含微生物的一個或多個組分而遭到污染。因此，假設(shè)不對組分用過度殺滅滅菌工藝，按慣例說明每種易受污染組分的微生物含量和依據(jù)這終身物負(fù)荷確定適宜的接受或拒收限制是很重要的。如對組分運用非過度殺滅滅菌工藝，那么這個生物負(fù)荷的狀況在取得高度無菌保證中尤為重要。在無菌工藝中，可以每一組分獨自滅菌或幾種組分兼并成混合物后滅菌。組分滅菌有幾種方法，如經(jīng)過嚴(yán)厲的驗證，每一種方法均可被接受。一種普遍采用的方法是將組分溶解于一種溶劑（如美國藥典注射用水）中構(gòu)成溶液，過濾該溶液。過濾用無菌膜或筒形過濾器。在組分受熱能夠有不利影響的狀況下可以用這種方法。該方法的另一種狀況是使過濾后的溶液停止組分的無菌結(jié)晶和沉淀，成為無菌粉末。但是這種方法比其他方法觸及更多的處置和操作，因此在操作中污染的能夠性更大。假設(shè)一種組分對受熱無不利影響，且該組分是可溶性的，這種組分可以制成溶液并且用獨自的高壓釜或在有蒸汽套的加壓制備容器中停止蒸汽滅菌。關(guān)于受熱動搖且不溶性組分，干熱滅菌是一種適宜的方法。但這種方法的效果是熱穿透深度和散布不夠。例如，由于粉末的隔熱效果，用這種方法處置粉末需求停止適當(dāng)?shù)臒岽┩干疃群蜕⒉嫉难杏?。環(huán)氧乙烷外表滅菌是另一種對組分滅菌的方法，但是作為主要滅菌的方法，其有效性是有效果的，由于這種滅菌劑對粉末晶核的耐久穿透性不夠。在滅菌處置進(jìn)程中，環(huán)氯乙烷可用于預(yù)防能夠的微生物污染的粉末外表滅菌。對要求無熱原的產(chǎn)品而言，對熱原敏感組分的接受或拒絕應(yīng)有書面規(guī)程。被熱原污染的組分應(yīng)當(dāng)拒絕或停止除熱原性質(zhì)的處置，以使處置后的組分契合規(guī)范、規(guī)格和特性。V,容器/密封件要求211.94節(jié)（藥品容器和密封件）在一定水平上要求藥品容器和密封件潔凈，并依據(jù)藥品性質(zhì)，要求無菌和無熱原。規(guī)范測試方法以及潔凈、滅菌和除熱原的處置的方法必需寫出書面規(guī)程并遵照執(zhí)行。引言在用無菌工藝制備滅菌藥品的狀況下，灌裝和密封操作前容器和密封件的預(yù)備不只僅是除去外表碎屑的清潔任務(wù)。對注射劑最終產(chǎn)品的完整性而言，容器和密封件的無菌、無熱原至關(guān)重要。滅菌和除熱原處置的方式主要取決于構(gòu)成容器/密封件的資料的性質(zhì)。任何嚴(yán)厲驗證過的處置方式均可被接受。在運用玻璃容器的狀況下，滅菌前的預(yù)備一般包括一系列的洗濯及沖洗循環(huán)。不但洗濯有效地除去碎屑很重要，而且最終沖洗用水的質(zhì)量也很重要。最終沖洗用水應(yīng)契合美國藥典注射用水的要求。除熱原有各種方法，如先用化學(xué)溶液洗濯，隨后用注射用水沖洗。干熱可用于玻璃容器的滅菌和除熱原。干熱滅菌/除熱原的驗證應(yīng)包括熱穿透性和熱散布的研討以及有代表性的處置周期和負(fù)載結(jié)構(gòu)以模擬實踐消費進(jìn)程。無論運用什么除熱原方法，驗證資料應(yīng)證明該進(jìn)程將使內(nèi)毒素含量降低3個對數(shù)值。除熱原處置能否徹底的一個估價方法是用含量規(guī)范內(nèi)毒素的容器模擬該處置進(jìn)程并測定內(nèi)毒素降低的水平。但是，F(xiàn)DA已看法到用內(nèi)毒素挑試品估價某些洗濯工藝的一個潛在效果，效果發(fā)生于將粉狀內(nèi)毒素挑試品宜接用于測試外表而不是先溶解該內(nèi)毒素并在該外表上停止空氣枯燥。粉狀物質(zhì)能夠比用空氣重新枯燥的物質(zhì)更易溶于沖洗水中，并且比正常存在于容器/密封件外表的內(nèi)毒素更易溶于水中。這使人們覺得所研討的工藝在去除內(nèi)毒素方面的效果超越廠實踐狀況。因此，從目的物外表除去內(nèi)毒素挑試品不應(yīng)該比除去原來存在的內(nèi)毒素愈加容易。未經(jīng)控制的裝卸及貯存的塑料容器是熱原的來源，因此必需除熱原。塑料容器可以用環(huán)氧乙烷氣體滅菌，生物指示劑可用于監(jiān)測這樣的順序。同時要監(jiān)測和控制溫度、壓力、濕度和環(huán)氯乙烷濃度，容器外表和容器內(nèi)能夠存在的殘留物（如環(huán)氧乙烷和其降解產(chǎn)物）也要測定。膠塞是微生物和熱原（如產(chǎn)品要求無熱原）污染的另一個能夠的來源。在最終蒸汽滅菌前，膠塞一般經(jīng)過屢次洗濯循環(huán)，最后沖洗用美國藥典注射用水。增加洗濯和滅菌之間的時間距離也很重要，由于膠塞上的水分有助于微生物生長和熱原發(fā)生。因膠塞導(dǎo)熱差，所以膠塞滅菌工藝的適當(dāng)驗證尤為重要。VI.時限要求21LH1節(jié)（消費時間）在一定水平上要求，為確保藥質(zhì)量量，對每終身產(chǎn)階段的完成時間限制都要確定。引言在無菌工藝制備滅菌藥品中，確定時限通常對假定干操作是適宜的。例如，為了防止濾出物因微生物生長或經(jīng)過過濾器時間過長而遭到污染，產(chǎn)品過濾和灌裝操作的全部時間應(yīng)限制在一個限定的最大值內(nèi)。這樣的限制也防止了過濾器出口端微生物數(shù)目的增多，微生物的增多將招致熱原發(fā)生。vn.消費和工藝控制驗證要求211.113節(jié)（微生物污染的控制）在一定水平上要求樹立和遵守為防止微生物污染滅菌藥品而制定的適宜的書面規(guī)程。該規(guī)程必需包括一切無菌工藝的驗證。指點為保證經(jīng)無菌工藝消費的滅菌產(chǎn)品的無菌，兩種操作類型，即滅菌和無菌條件下的灌裝/密封的嚴(yán)厲驗證最為重要。假設(shè)產(chǎn)品的無菌的組件----藥品、容器和密封件在容易招致污染這些組件的條件下放在一同，即使最有效的無菌工藝也難以到達(dá)目的。相反，假設(shè)這些狀況沒有形成任何污染，但產(chǎn)品組件組裝時不是無菌的，那么產(chǎn)品的滅菌也將受影響。就驗證滅菌產(chǎn)品組件的無菌組裝和這些組件滅菌的可以接受的方式而言，已有效果發(fā)生，但是，一些人以為滅菌產(chǎn)品組件的無菌組裝操作最為困難且已發(fā)生較多效果。因此，本指點重點為驗證無菌組裝（即灌裝和密封）操作。無菌組裝操作驗證無菌組裝工藝的一種可以接受的方法，包括用一種微生物生長培育基模擬滅菌產(chǎn)品灌裝操作，這種方式稱作''無菌培育基灌裝〃。運用該營養(yǎng)培育基，使之暴露于操作者、設(shè)備、外表和環(huán)境條件下，以盡能夠模擬產(chǎn)品將閱歷的相反暴露條件。密閉的藥品容器中灌裝了培育基，然后停止培育以反省微生物的生長,并且評價結(jié)果以確定在實踐灌裝和密封操作中一切給定的藥品單位被污染的能夠性。培育基灌裝連同片面環(huán)境監(jiān)測在驗證無菌溶液、懸浮液和粉末的無菌工藝中尤有價值。灌裝液體培育基作為驗證粉末的無菌工藝的一局部，能夠需運用設(shè)備和（或）工藝步驟。而這些設(shè)備及順序步驟不會出如今慣例的粉末順序操作中。但是，這樣一些任務(wù)關(guān)于說明粉末暴露受污染的特性是有價值的，并且是重要的。培育基灌裝方面已出現(xiàn)了假定干效果，觸及到培育基污染設(shè)備、灌裝的周期和次數(shù)、灌裝的規(guī)模、培育基自身、環(huán)境條件和實驗結(jié)果。.受培育基污染：一些藥品消費廠對培育基灌裝操作中營養(yǎng)培育基對設(shè)備和用具能夠形成污染表示關(guān)注。但是，假設(shè)培育基經(jīng)過適當(dāng)處置，并隨后立刻停止設(shè)備的清洗、消毒，必要時停止滅菌，那么培育基灌裝操作對后來運用同一設(shè)備和用具處置的產(chǎn)質(zhì)量量不會有影響。.頻次和實驗次數(shù)：當(dāng)一個工藝最后被驗證時，每一個獨立的培育基灌裝均應(yīng)重復(fù)足夠次數(shù)以保證結(jié)果的分歧和有意義。由于一次單一實驗的結(jié)果可以有誤，屢次實驗失掉的偏向很大的結(jié)果能夠標(biāo)志著該工藝的失控，這是很重要的。FDA以為，在許多狀況下，至少需求停止三次獨立的實驗，這一最少的次數(shù)被以為是工業(yè)中的一個總的驗證原那么。初期驗證后，需添加培育基灌裝的頻次將取決于事故的次數(shù)和能夠影響該無菌工藝除去滅菌產(chǎn)品組件污染的才干的變化。例如設(shè)備和用具的改良、人員的嚴(yán)重變卦、環(huán)境測試結(jié)果的失常和最終產(chǎn)品無菌檢驗顯示產(chǎn)品遭到污染等都需重新驗證該系統(tǒng)。但是，沒有上述變化或事故時，普通可以接受的頻次是每個灌裝/密封消費線，每一班每年至少做兩次。全體人員每年必需參與至少一次的培育基灌裝。由于運用培育基灌裝再驗證該工藝，每次再驗證中培育基灌裝獨自實驗的次數(shù)不用象初期驗證時那樣多，例如假設(shè)實驗結(jié)果與初期驗證的一致，并且環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)證明灌裝環(huán)境質(zhì)量在規(guī)則的限制內(nèi)，那么做一次實驗就可以了。但是，當(dāng)數(shù)據(jù)相反或數(shù)聽說明該工藝失控時，應(yīng)確保添加起確定作用的培育基灌裝實驗。.實驗的規(guī)模：培育基灌裝單位的數(shù)目應(yīng)對檢測低污染發(fā)作率的概率高得多。曾有報道，要到達(dá)95%的牢靠率（信任率），污染率為1/1000,至少需檢測3000單位。決議實驗規(guī)模時，無菌工藝操作繼續(xù)的時間也是首先要思索的。班次繼續(xù)的時間尤其要足以掩蓋實踐正常消費的全部操作。實驗單位的數(shù)目必需反映出在灌裝速度下暴露時間的''最差狀況〃，這一灌裝速度相當(dāng)于或低于實踐灌裝速度。為使培育基接觸容器內(nèi)外表（例如，旋轉(zhuǎn)裝有培育基的容器），并易于目檢微生物的生長狀況，每一容器應(yīng)灌裝足夠的培育基，這一點也很重要。.培育基：培育基最重要的方面是它們促進(jìn)微生物生長的才干。選擇用于驗證實驗的培育基前，應(yīng)證明其可以支持微生物生長。在這點上，與培育基灌裝實驗一道培育陽性控制單位是有價值的。普通說來，支持廣譜需氧微生物生長的培育基（如胰酶酪陳大豆培育基）是可以接受的。美國藥典/國度處方集（USPXXI/NFXI1）所列的用于無菌實驗生長促進(jìn)檢測的微生物可用于此目的。在選擇適宜的培育基時，也應(yīng)思索它們能否有才干使經(jīng)過環(huán)境監(jiān)測和陽性無菌實驗結(jié)果確證的哪些種類微生物生長。用足夠的時間（周期不少于14天）和溫度培育培育基單元用以檢測由于環(huán)境條件和取樣方法能夠形成的影響致使在其他培育條件下不能生長的微生物生長，這一點也很重要。.環(huán)境條件:培育基灌裝應(yīng)在模擬實踐和作用為消費質(zhì)量限制所確定的''最差狀況〃的環(huán)境條件下停止。在規(guī)范操作規(guī)程內(nèi)，這樣強(qiáng)調(diào)條件在一定水平上是允許的，重要的是用來評定這些規(guī)程所包括的順序的某些培育基灌裝進(jìn)程中存在這些條件。在空氣微粒和微生物質(zhì)量超出正常的狀況下和在特別留意的狀況下，停止培育基灌裝會得出不正確的評定（形成該工藝比實踐狀況似乎更潔凈）。與其那樣，不如在確定的人員數(shù)目和活動、溫度及濕度的限制下對該系統(tǒng)做應(yīng)戰(zhàn)性實驗。.實驗結(jié)果：具有高度牢靠性的實驗結(jié)果說明產(chǎn)品單位在無菌工藝中被污染的能夠性極小。普通說來，1/1000的污染概率是可以接受的。FDA可以接受的這一污染概率并不意味著在1000個單位以無菌工藝消費出的滅菌藥品中能夠有1個是非無菌的。消費廠對一切非無菌產(chǎn)品的發(fā)貨負(fù)有全部法律責(zé)任。FDA僅供認(rèn)關(guān)于如何正確并準(zhǔn)確地驗證一個控制體系掃除污染的特性方面有迷信和技術(shù)的限制。滅菌操作過濾過濾是消毒藥品溶液常用的方法，過濾后將藥品溶液在無菌條件下參與到滅過菌的容器中。滅菌過濾器是指用最低濃度為107龐大假單胞菌/cm2過濾器外表做應(yīng)戰(zhàn)性實驗，能濾出無菌濾液的過濾器。這種過濾器的孔隙直徑為0.22um或更小些。在某些狀況下，產(chǎn)品粘度高或有膠體性質(zhì)，不能經(jīng)過0.22um的孔隙,可以延續(xù)運用0.45um的過濾器除去微生物。但是，最好選用比過濾更能保證較高的無菌水平，而對產(chǎn)質(zhì)量量無不利影響的其他滅菌方法。無論運用什么過濾器或組合過濾器，驗證均應(yīng)包括微生物應(yīng)戰(zhàn)性實驗以模擬''最差狀況〃消費條件，尤其要思索待過濾物料中微生物的大小。微生物應(yīng)足夠小，不但能挑試過濾器的孔隙，而且能模擬消費中存在的最小微生物。就這一點而言，龐大假單抱菌是可以接受的微生物，由于它是最小的細(xì)菌之一（直徑0.3um）o假設(shè)適當(dāng)?shù)纳L、采集和運用，它可以經(jīng)過孔隙大于0.22um等級的過濾器。應(yīng)戰(zhàn)性實驗中微生物的數(shù)目很重要，由于一個過濾器能夠有假定干個大于標(biāo)示等級的孔隙，這些孔隙可以使微生物經(jīng)過〃卜這樣經(jīng)過的能夠性隨著待濾物料中微生物數(shù)目的添加而添加?？梢越邮艿凝嫶蠹賳伪Ь粼嚌舛葹槊科椒嚼迕走^濾器外表上不少于107,確保實踐流入溶液的生物負(fù)荷不包括一定大小和（或）濃度的微生物，它們會降低濾液的無菌水平，這一點很重要。有內(nèi)在殺菌力的藥品溶液和油質(zhì)藥品溶液，不可用龐大假單胞菌做過濾器的應(yīng)戰(zhàn)性實驗。在上述狀況下，要運用粘度和其他物理性質(zhì)十分接近實踐產(chǎn)品，對微生物應(yīng)戰(zhàn)性實驗無相反作用的挑試液。過濾器驗證的應(yīng)戰(zhàn)性實驗條件應(yīng)模擬消費的其他方面以及流入液的生物負(fù)荷，例如，待過濾物料的pH和粘度、流速、壓力、溫度、物料與過濾器自身的順應(yīng)性和水力沖擊作用都是消費的諸多方面，它們能影響過濾器的任務(wù)，在驗證過濾順序中應(yīng)模擬這些要素。這些要素中許多與它們對過濾器截獲微生物方法的作用有關(guān)，即篩子截留和（或）吸附。過濾器驗證實驗，包括微生物應(yīng)戰(zhàn)性實驗不用在實踐消費場地停止。但是，重要的是實驗室應(yīng)按上述討論模擬實踐消費條件。一些較復(fù)雜的過濾器驗證實驗超出了某些過濾器用戶的才干。在上述狀況下，由外部實驗室或過濾器制造者停止實驗是可以的。FDA以為取得有效的實驗數(shù)據(jù)是過濾器用戶的責(zé)任。這些數(shù)據(jù)必需適用于用戶的產(chǎn)品和運用條件，由于對各種不同條件和產(chǎn)品，過濾器功用清楚不同。一類產(chǎn)品的性質(zhì)和影響過濾器效能的順序條件相似時，不用對該類產(chǎn)品逐一停止驗證研討。更確切地說，可將延伸法用于該類產(chǎn)品最具應(yīng)戰(zhàn)性實驗特性的有關(guān)產(chǎn)品、產(chǎn)品性質(zhì)的驗證數(shù)據(jù)和工藝條件。這種延伸法的正確性應(yīng)有書面證明。對一個特定的產(chǎn)品、工藝和過濾停止適當(dāng)?shù)倪^濾工藝驗證后，重要的是確保消費中運用的相反過濾器配件（膜或濾筒）以相反的方式運轉(zhuǎn)。到達(dá)這一目的的一種方法是將過濾器操作數(shù)據(jù)與過濾器完整性實驗數(shù)據(jù)聯(lián)絡(luò)起來。正常狀況下，過濾器完整性實驗是在過濾器裝配終了并且用前滅菌之后停止。但是更重要的是，這樣的實驗應(yīng)在過濾器運用事先停止，這種運用的目的是檢測過濾進(jìn)程中會發(fā)作的一切過濾器滲漏或穿孔。''向前活動〃''泡點〃和''堅持壓力〃實驗都是可以接受的完整性實驗方法。設(shè)備與滅菌藥品或無菌容器/密封件外表相接觸的設(shè)備外表當(dāng)然也必需是無菌的。在無菌工藝中嚴(yán)厲驗證用于設(shè)備外表的滅菌工藝和驗證藥品和容器/密封件的滅菌工藝同等重要。設(shè)備（如灌裝設(shè)備、銜接收線和過濾器固定物）用高壓釜蒸汽滅菌時，思索高壓釜中確定的裝載方式是很重要的，由于不同的結(jié)構(gòu)方式會影響熱量散布和滅菌效能（確保驗證條件的重復(fù)性的一種方法是遵照已樹立的裝載結(jié)構(gòu)圖，該圖是無菌工藝記載的一局部）。諸如大罐和固定管線等設(shè)備采用通加壓蒸汽的方法在現(xiàn)場滅菌，驗證時要思索各個不同位置的溫度和壓力以便找出沒有足夠熱量到達(dá)滅菌目的的潛在''死角〃。例如，在管線系統(tǒng)中，一些在線過濾器致使一端發(fā)生清楚的壓差，從而招致過濾器出口端溫度清楚下降。確定這樣的溫度下降能否對滅菌規(guī)程發(fā)生不利影響的方法有在適宜的出口處放置生物指示劑。驗證也應(yīng)包括測定各個不同點的溫度和壓力。W.實驗室控制要求211.160節(jié)（總的要求）在一定水平上要求樹立正確的和適宜的規(guī)格規(guī)范、規(guī)范、取樣方案以及為保證組件、藥品容器、密封件、消費進(jìn)程中的物料和藥品契合適宜的質(zhì)量規(guī)范而設(shè)計的實驗規(guī)程。引言在無菌工藝中，最重要的實驗室控制之一就是樹立環(huán)境監(jiān)測順序。樣品應(yīng)從組件和產(chǎn)品暴露于環(huán)境的區(qū)域（諸如混料室和組件預(yù)備區(qū)）搜集。監(jiān)測無菌工藝區(qū)的微生物質(zhì)量以確定灌裝/密封任務(wù)時能否堅持了無菌條件，這一點尤為重要。監(jiān)測工藝應(yīng)含環(huán)境（包括房間空氣、空中、墻壁和設(shè)備外表）的慣例取樣和實驗。這樣的工藝能證明設(shè)備以及產(chǎn)品接觸外表潔凈和衛(wèi)生的有效性，并可以確定潛在的污染物能否能被控制到適當(dāng)水平。確保消毒劑堅持對正常微生物群的效能很重要。書面的監(jiān)測順序應(yīng)有迷信的取樣時間表，包括取樣地點和頻次。此外，最高微生物限制和發(fā)現(xiàn)樣品超越這一限制時采取舉動的明白進(jìn)程均應(yīng)確定。監(jiān)測環(huán)境的微生物質(zhì)量有幾種可以接受的方法。一種是運用主動空氣取樣器，如落盤法---裝有暴露于環(huán)境中的營養(yǎng)瓊脂的陪替氏培育皿。這些用具在定量監(jiān)測中的價值有限，由于它們不能檢測未落到瓊脂外表的微生物。但是，假設(shè)在產(chǎn)品污染風(fēng)險最大的關(guān)鍵區(qū)把落盤作為定性指示劑放在適當(dāng)?shù)奈恢茫⑶宜鼈兛梢杂行У胤@微生物，那么落盤是有價值的。當(dāng)與其他型式的空氣取樣器的數(shù)據(jù)聯(lián)絡(luò)起來時，上述取樣器的數(shù)據(jù)是有用的。評價空氣微生物質(zhì)量的另一可接受的方法是運用更,'自動〃的用具，諸如縫隙瓊脂取樣器、離心取樣器和那些運用液體沖擊和膜過濾的用具。雖然允許用一切這些用具經(jīng)過檢測單位體積空氣取樣的無機(jī)體數(shù)目來停止定量測試，但每一種用具都有它不利的方面。在無菌區(qū)運用這種用具是必要的，在消費中至少每天都要用。在多班消費的狀況下，每班每日都要監(jiān)測。環(huán)境監(jiān)測應(yīng)包括關(guān)鍵外表微生物質(zhì)量的實驗。停止這類實驗通常用接觸盤、棉花桿和凸盤?？刂茀^(qū)的其他外表也要活期測試以說明潔凈和衛(wèi)生規(guī)程的適當(dāng)水平以及檢測人員招致的污染。環(huán)境監(jiān)測順序應(yīng)包括對獲取微生物的慣例鑒別。為了對環(huán)境微生物質(zhì)量停止合理評價，鑒定應(yīng)足以區(qū)分''正常菌〃和偶然污染物。雖然不用鑒別每個分別物的菌屬和類別，但這些特征足以樹立一個有效的數(shù)據(jù)庫并足以證明潔凈和衛(wèi)生繼續(xù)有效，這一點是重要的。確定分別物的特征足以確定無菌培育基灌裝和產(chǎn)品無菌實驗中發(fā)現(xiàn)的無機(jī)體的一種潛在的關(guān)系，這也很重要。在研討滅菌失敗的緣由時，這種關(guān)系有很高的價值。用于環(huán)境監(jiān)測的微生物培育基不但要能檢測細(xì)菌，而且要能檢測霉菌和酵母菌，并應(yīng)在適宜的時間和溫度條件下培育。除監(jiān)測空氣的微生物質(zhì)量外，還應(yīng)監(jiān)測微粒質(zhì)量。關(guān)鍵區(qū)域在正常運用時期,至少每天做一次微粒監(jiān)測，微粒檢測裝置應(yīng)在接進(jìn)任務(wù)區(qū)的空氣中取樣。應(yīng)停止活期監(jiān)測以反省微粒數(shù)目背叛正常水平的一切清楚變化，由固定地點測得的顆粒數(shù)目超量較多預(yù)示著出現(xiàn)了不正常狀況，應(yīng)停止調(diào)查并迅速矯正。IX.無菌檢驗要求211.167節(jié)（特殊檢驗要求）在一定水平上要求，每批滅菌藥品均應(yīng)有適當(dāng)?shù)膶嶒炇覚z驗，以確定其無菌。引言無菌檢驗的某些方面尤為重要。這些方面包括控制實驗環(huán)境、明確實驗限制以及陽性結(jié)果的解釋和復(fù)試。實驗室環(huán)境檢驗與灌裝/密割操作所運用的設(shè)備和控制應(yīng)相似。無菌檢驗設(shè)備或控制較差或缺乏會使無菌檢驗失敗的比例增高。假設(shè)消費設(shè)備和控制清楚好于無菌檢驗中所運用的，那么假設(shè)被檢驗產(chǎn)品實踐上并非無菌，也會有把陽性無菌檢驗的結(jié)果歸咎于不完善的實驗室檢驗的風(fēng)險，因此，無菌順序中的一些效果就不能發(fā)現(xiàn)。普通說來，無菌檢驗的效能僅限檢測低水平污染。例如，美國藥典XXI和國度處方集刈表達(dá)的無菌檢驗規(guī)程的取樣要求是：''一批產(chǎn)品假定有10%被污染,10次中就有9次能經(jīng)過檢驗〃。這一有限的靈敏度使得有必要確保檢驗適宜數(shù)量的產(chǎn)品并且這些被檢產(chǎn)品能均一地代表這一批產(chǎn)品以使一批產(chǎn)品經(jīng)過。此外，思索到檢驗有限的靈敏度，一切陽性結(jié)果（在檢驗容器中觀察到微生物生長）應(yīng)做十分準(zhǔn)確的評價。對滅菌檢驗陽性結(jié)果的評價應(yīng)包括調(diào)查研討，以在能夠的范圍內(nèi)確定微生物的生長來自于產(chǎn)品污染還是實驗室錯誤。雖然這種確定不相對牢靠，但取得這樣或那樣有壓服力的證據(jù)通常是能夠的。當(dāng)有壓服力的證聽說明無實驗室過失或失掉的數(shù)據(jù)無壓服力時，公司能夠在平安方面犯了錯誤，并且這些批產(chǎn)品應(yīng)因不契合無菌要求而被拒收。調(diào)查研討應(yīng)思索到關(guān)于產(chǎn)品制造和樣品檢驗的一切有關(guān)要素。就這一點而言，僅僅由于重復(fù)檢驗中沒檢測到微生物生長而將最后的陽性結(jié)果歸咎于實驗室過失是不適宜的。更確切地說，污染緣由的有壓服力的證據(jù)至少應(yīng)基于以下各點。.無菌檢驗中微生物鑒別（至少鑒別出屬類）。假設(shè)這種微生物在實驗環(huán)境中很少見，那么產(chǎn)品更能夠污染。假設(shè)這種微生物在實驗室和消費環(huán)境中都罕見,那么不應(yīng)自動掃除產(chǎn)品的污染。無機(jī)體對滅菌方法的敏理性以及對產(chǎn)品中一切防腐劑的敏理性也有助于確定污染源。當(dāng)無機(jī)體能對立滅菌方法或防腐劑時，應(yīng)思索是內(nèi)在產(chǎn)品污染。另一方面，當(dāng)缺乏污染來源的相反證明時，在無機(jī)體沒有對立力的狀況下，污染源更能夠是來自于實驗室污染。.實驗室記載的臨時檢驗。仔細(xì)審查實驗室數(shù)據(jù)的傾向可以有助于掃除或認(rèn)定實驗室為污染源。在FDA的閱歷中，一個實驗室在全部滅菌檢驗中初次陽性的無菌檢驗失敗率低于0.5%是正常的。關(guān)于第一次檢驗而言，高于0.5%的失敗率可以說明實驗室或消費有效果，因此應(yīng)停止調(diào)查研討。假設(shè)初次陽性結(jié)果呈上升趨向，就應(yīng)該著手調(diào)查研討。上升趨向與片面調(diào)查研討中的其他要素聯(lián)絡(luò)起來，可以證明一個疑心為污染緣由的要素。異樣，假陽性結(jié)果上升趨向也應(yīng)停止調(diào)查研討，這種上升可以成為消費或?qū)嶒炇倚Ч南日?。為了更正確地監(jiān)測潛在污染源，依據(jù)影響這些來源的特性區(qū)分這些傾向是很重要的。例如，可用產(chǎn)品、容器類型、灌裝線和樣品管理水平區(qū)分這些傾向。最后滅菌產(chǎn)品和無菌工藝產(chǎn)品的樣品管理是相反的，無菌工藝產(chǎn)品的初次無菌檢驗失敗率較高可視為消費效果。實驗室環(huán)境的臨時微生物監(jiān)測可以提醒一些傾向，這些傾向可提供信息。實驗室中微生物負(fù)荷上升的傾向應(yīng)停止調(diào)查研討并加以矯正。但是這樣的傾向更預(yù)示著無菌檢驗失敗是實驗室過失形成的。.消費區(qū)環(huán)境監(jiān)測。尤為重要的是在關(guān)鍵區(qū)域能生活的無機(jī)體的傾向剖析。上升傾向預(yù)示著無菌檢驗失敗的緣由在于產(chǎn)品。思索環(huán)境微生物負(fù)荷不限于與有疑問的批產(chǎn)品有關(guān)的批、日或班的消費環(huán)境監(jiān)測結(jié)果，這一點很重要。低水平的可生活無機(jī)物的結(jié)果能夠會形成錯覺，尤其是依據(jù)可以成為一種傾向的局部較高的生物負(fù)荷的數(shù)據(jù)分類時，因此，重要的是思索環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)范圍要寬。.產(chǎn)品滅菌前的生物負(fù)荷。產(chǎn)品生物負(fù)荷的傾向可以顯示與無菌檢驗失敗有關(guān)的效果。生物負(fù)荷上升傾向與無菌檢驗失敗同時發(fā)作是產(chǎn)品污染的更有力的說明。.消費記載審查。應(yīng)審查完整的批和消費控制記載以查出與產(chǎn)品無菌有關(guān)的失敗或不正常的一切跡象，例如灌裝線空氣質(zhì)量監(jiān)測記載可以顯示出有異常的高微粒計數(shù)的時間。.無菌復(fù)檢。一種可以接受的復(fù)檢包括運用供試品數(shù)量至少為原來瓶數(shù)的兩倍，應(yīng)能代表一批產(chǎn)品的各局部。復(fù)檢未發(fā)現(xiàn)微生物生長與其他調(diào)查研討相比不顯得那么重要。但是，假設(shè)復(fù)檢中發(fā)現(xiàn)微生物生長，該批產(chǎn)品應(yīng)被拒收，除非一個新的徹底的研討任務(wù)結(jié)論性地說明污染來自于取樣或檢驗規(guī)程。在這樣狀況下，可停止第二次復(fù)檢。第二次復(fù)檢的樣品量應(yīng)是第一次復(fù)檢的2倍。如第二次復(fù)檢發(fā)現(xiàn)微生物生長，該批產(chǎn)品應(yīng)被拒收并不允許進(jìn)一步復(fù)檢。生物產(chǎn)品的第一次無菌復(fù)檢不要務(wù)實驗瓶數(shù)為原來的2倍(21CFR,610.12節(jié))。關(guān)鍵在于能否允許做第二次復(fù)檢。散裝的生物物料不允許停止第二次復(fù)檢。X.參考資料FederalStandard209B,CleanRoomandWorkStationRequiiements,ControlledEnvironment,Apnl24,1973.TeclmicalOlder00-25-203,ContaminationControlofAe