美國(guó)FDA用無(wú)菌工藝生產(chǎn)滅菌藥品的指引1987年

美國(guó)FDA用無(wú)菌工藝生產(chǎn)滅菌藥品的指南1987年用無(wú)菌工藝消費(fèi)滅菌藥品

的指南1987年TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument".目的 4.導(dǎo)言 4\o"CurrentDocument".廠房和設(shè)備 6\o"CurrentDocument".組分 9\o"CurrentDocument"V,容器/密封件 10\o"CurrentDocument".時(shí)限 11\o"CurrentDocument".消費(fèi)和工藝控制驗(yàn)證 11\o"CurrentDocument"vm.實(shí)驗(yàn)室控制 16\o"CurrentDocument".無(wú)菌檢驗(yàn) 17\o"CurrentDocument".參考資料 20I.目的本指南為有關(guān)人員提供用無(wú)菌工藝消費(fèi)滅菌藥品的一些操作和規(guī)程.這些操作和規(guī)程是由契合現(xiàn)行藥品消費(fèi)質(zhì)量管理規(guī)范有關(guān)局部的合格方法所組成(21CFR210和211局部)。應(yīng)該留意，對(duì)21CFR600-680局部中規(guī)則的生物制品而言,210.2(a)和211.1(b)局部規(guī)則,同時(shí)遵守600-800局部和分篇210與2同的適當(dāng)規(guī)則是不能夠的，關(guān)于這些生物制品將制定特殊的規(guī)則。因此，生物制品的無(wú)菌檢驗(yàn)和用于這樣檢驗(yàn)的培育基必需契合610.12局部的要求。n.導(dǎo)言本指南依據(jù)21CFR10.90而發(fā)布，它所表達(dá)的通用原那么和方法不是法定的,但是為FDA所認(rèn)可。廠家可依據(jù)本指南確保FDA的認(rèn)可，或許遵照其他不同的規(guī)程。廠家采用不同規(guī)程時(shí)，可事前同F(xiàn)DA商榷但并非必需這樣)，以免日后為FDA所否認(rèn)而糜費(fèi)人力和財(cái)力。假設(shè)當(dāng)局以為需求，可以經(jīng)過(guò)它在法規(guī)上的努力和有關(guān)人員提出的意見(jiàn)與建議，不時(shí)地修訂本指南。用無(wú)菌工藝和用最后滅菌方法消費(fèi)滅菌藥品有不同之處。最后滅菌方法通常包括在高質(zhì)量環(huán)境條件下產(chǎn)品容器的灌裝和密封；產(chǎn)品、容器和密封件通常具有高度的微生物學(xué)的質(zhì)量要求，但不是無(wú)菌的。為降低產(chǎn)品的微生物含量并確保隨后的滅菌處置成功，重要的是灌裝和密封在高質(zhì)量的環(huán)境中停止。然后對(duì)在其最終容器中的產(chǎn)品停止滅菌處置--通常用加熱法或輻射法。在無(wú)菌工藝中，產(chǎn)品、容器和密封件都區(qū)分經(jīng)過(guò)滅菌處置，然后放到一起。因產(chǎn)品裝入其最終容器后不再停止滅菌處置，所以為堅(jiān)持產(chǎn)品的無(wú)菌性，在極高質(zhì)量的環(huán)境下停止產(chǎn)品灌裝和容器封鎖至關(guān)重要。此外，無(wú)菌工藝比最終滅菌法通常有更多的變量，這一要素使得確保最終產(chǎn)品無(wú)菌更為困難，例如在無(wú)菌灌裝前，最終產(chǎn)品的不同局部經(jīng)過(guò)不同的滅菌處置----如玻璃器皿的枯燥加熱、膠塞經(jīng)高壓蒸汽處置、液體劑型的過(guò)濾，每一處置都需求完全有效并處于控制之下。每一處置都有出錯(cuò)的能夠性(另一方面，因最終滅菌的藥品通常只要一次滅菌處置，因此出錯(cuò)的能夠性有限),而且已滅菌的藥品、容器、密封件等的操作在直至停止最終包裝之前就有污染的風(fēng)險(xiǎn)，必需慎重控制。這些工藝的不同引出了有關(guān)無(wú)菌工藝的假定干效果，關(guān)系到FDA認(rèn)可的契合現(xiàn)行藥品消費(fèi)質(zhì)量管理規(guī)范規(guī)則中某些局部的方法?，F(xiàn)行藥品消費(fèi)質(zhì)量管理規(guī)范中的這些局部通常大多是討論關(guān)于廠房和設(shè)備、部件、容器/密封件、消費(fèi)時(shí)間限制、驗(yàn)證、實(shí)驗(yàn)室控制和無(wú)菌檢測(cè)，尤其由于這些效果大多觸及到工藝的驗(yàn)證，本指南將詳細(xì)說(shuō)明。本指南預(yù)備回答這些效果并廓清滅菌藥品的無(wú)菌消費(fèi)工藝中的某些技術(shù)方面效果。應(yīng)該留意，本文件沒(méi)有提出無(wú)菌工藝中其他幾個(gè)重要的方面----如人員衛(wèi)生、無(wú)菌任務(wù)服和潔凈室設(shè)計(jì)。如需求，這些效果及其他效果將包括在本指南以后的修訂版本中。雖然本指南的某些局部也可用于最終滅菌藥品的制備，但本指南并不論述最終滅菌藥品效果。本指南，在21CFR2H分篇的某些章節(jié)所規(guī)則的現(xiàn)行藥品消費(fèi)質(zhì)量管理規(guī)范要求之后是FDA以為契合這些要求的操作和規(guī)程的討論。應(yīng)留意，并非用于無(wú)菌工藝處置的滅菌藥品的全部規(guī)則均失掉過(guò)鑒定，只是對(duì)提出了中肯效果的局部作了鑒定。本指南還包括了能夠?qū)ψx者有用的參考資料的目錄。定義關(guān)鍵區(qū)域(Cnticalaieas)：翻開滅過(guò)菌的產(chǎn)品或容器/密封件的區(qū)域。關(guān)鍵外表(Cnticalsuifaces)：與滅過(guò)菌的產(chǎn)品或容器/密封件相接觸的外表。D值(Dvalue)：在指定溫度下，增加微生物數(shù)目90%所需求的時(shí)間。過(guò)度滅菌工藝(OveikiHsterilizationpiocess)：足以使D值小于1分鐘的微生物更少降低12個(gè)對(duì)數(shù)值的工藝。除菌過(guò)濾器(Stenhzmgfiltei)：以龐大假單抱菌為挑試菌種，在每平方厘米過(guò)濾外表的微牛物最小濃度為10-7的條件下能發(fā)生無(wú)菌濾出液的過(guò)濾器。驗(yàn)證(Validation)：樹立高度保證的書面證據(jù)，保證一個(gè)特定的工藝將自始至終消費(fèi)出契合其預(yù)定規(guī)格和質(zhì)量質(zhì)量的產(chǎn)品。最差狀況(Woistcase)：一組消費(fèi)下限和下限及環(huán)境的，包括列入規(guī)范操作規(guī)程內(nèi)的條件與理想條件相比，這組條件具有使工藝進(jìn)程或產(chǎn)品發(fā)作效果的最大時(shí)機(jī)。這些條件并不一定使進(jìn)程失敗或產(chǎn)品不合格。III.廠房和設(shè)備要求211.42節(jié)（設(shè)計(jì)和修建特征）要求，在某種水平上，應(yīng)有隔離的或特定的操作區(qū)域以防污染。對(duì)無(wú)菌工藝而言，應(yīng)適時(shí)提供正壓下經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾的空氣以及控制無(wú)菌條件的監(jiān)測(cè)環(huán)境和維護(hù)設(shè)備的系統(tǒng)。211.46節(jié)（通風(fēng)、空氣過(guò)濾、空氣加熱和冷卻）要求，在某種水平上，應(yīng)提供足以控制氣壓、微生物、灰塵、濕度和溫度的設(shè)備以及為消費(fèi)區(qū)提供空氣所用的過(guò)濾系統(tǒng)，包括預(yù)過(guò)濾和高效過(guò)濾器。指點(diǎn)在無(wú)菌工藝中有要求隔離和控制的假定干種操作區(qū)，依各操作區(qū)的性質(zhì)而需求不同級(jí)別的空氣。有兩個(gè)區(qū)域?qū)λ庂|(zhì)量量至關(guān)重要----關(guān)鍵區(qū)域和控制區(qū)域。關(guān)鍵區(qū)域關(guān)鍵區(qū)域是指滅過(guò)菌的產(chǎn)品、容器和密封件暴露于環(huán)境中的區(qū)域。在該區(qū)域的任務(wù)包括滅過(guò)菌的物料/產(chǎn)品灌裝/密封前及這些進(jìn)程中的操作。這些操作在通常稱作''無(wú)菌中心〃或''無(wú)菌工藝〃區(qū)中停止。該區(qū)域至關(guān)重要，由于產(chǎn)品在容器內(nèi)不再停止處置并且產(chǎn)品易于受污染，因此，為保證質(zhì)量，特別是產(chǎn)品無(wú)菌，在實(shí)踐操作中直接接觸的環(huán)境應(yīng)具有最高的質(zhì)量。環(huán)境質(zhì)量的一個(gè)方面是空氣中微粒含量。微粒十分重要，從物理學(xué)方面而言,微?？梢赃M(jìn)入產(chǎn)品中使產(chǎn)品污染；或從生物學(xué)方面而言，微?？沙蔀槲⑸锏妮d體。因此，增加空氣中微粒含量和有效地去除存在的微粒很重要。已滅菌容器/密封件和灌裝/密封操作直接接觸的空氣的可以接受的微粒質(zhì)量是：在離任務(wù)臺(tái)不超出1ft處和灌裝/密封操作時(shí)氣流的下流處測(cè)量，每立方英尺空氣中含0.5mn或大于0.5um的微粒數(shù)量不得超越100個(gè)（100級(jí)）。有些粉末灌裝操作可以發(fā)生少量的粉末微粒，但從其性質(zhì)而言沒(méi)有形成污染的風(fēng)險(xiǎn)。在這些狀況下，在1ft距離內(nèi)測(cè)定空氣質(zhì)量不可行，并且更不能區(qū)分影響產(chǎn)質(zhì)量量的空氣污染物和粉塵微粒的''背景噪音〃水平。在這些場(chǎng)所下，產(chǎn)品接觸的空氣的取樣盡能夠代表外來(lái)微粒污染的真實(shí)水平，這一點(diǎn)很重要。在關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)，必需有運(yùn)用高效過(guò)濾器過(guò)濾的層流空氣供應(yīng)，該空氣具有足夠從灌裝/封鎖區(qū)內(nèi)去除微粒的速度。雖然在操作發(fā)生少量塵?；蛟O(shè)備的結(jié)構(gòu)于擾層流處也需求較高速度，但正常狀況下，90ft/分±20%的速度是足夠的?？諝庖矐?yīng)具有高度的微生物學(xué)質(zhì)量要求。每10ft3不多于一個(gè)菌落構(gòu)成單位的發(fā)作率是可以到達(dá)的和理想的。在灌裝/封鎖操作左近，空氣不是需求具有高的微粒和微生物質(zhì)量的唯一氣體。接觸產(chǎn)品、容器/密封件或產(chǎn)品接觸的外表的其他氣體，如N2和CO2（例如沖洗或復(fù)蓋）也應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾。此外，緊縮空氣應(yīng)無(wú)可檢測(cè)到的油蒸汽。關(guān)鍵區(qū)域相關(guān)于臨近的潔凈要求較低的區(qū)域，應(yīng)有正壓差?？山邮艿膲翰顬?.05uiH20o控制區(qū)控制區(qū)是預(yù)備未滅菌產(chǎn)品、加工進(jìn)程中的物料和容器/密封件的區(qū)域，是第二類重要的環(huán)境控制區(qū)。它包括組件混合區(qū)和組件、加工進(jìn)程中的物料、藥品和經(jīng)最后沖洗的與藥品接觸的設(shè)備、容器/密封件的外表暴露在工廠環(huán)境中的區(qū)域。為了降低最終產(chǎn)品中微粒污染物的水平和控制隨后停止滅菌的物品及組件的微生物含量（生物負(fù)荷），這一環(huán)境應(yīng)具有高的微生物和微粒質(zhì)量要求。任務(wù)時(shí)期在暴露物品的左近測(cè)量時(shí)，假設(shè)每立方英尺中0.5Hm和大于0.5mn的塵粒數(shù)不高于100000（100000級(jí)），該控制區(qū)中空氣的微粒質(zhì)量一般以為是可以接受的?？山邮艿奈⑸镔|(zhì)量為每10ft3中菌落構(gòu)成單位不多于25個(gè)。為了堅(jiān)持控制區(qū)內(nèi)空氣質(zhì)量，取得足夠的空氣流，并相關(guān)于臨近非控制區(qū)堅(jiān)持正壓差十分重要。在這點(diǎn)上，氣流應(yīng)到達(dá)每小時(shí)至少換氣20次，并且壓差一般說(shuō)來(lái)至少為0.05uiH20（一切門均封鎖）。當(dāng)門翻開時(shí)，外向氣流應(yīng)足以使污染的侵入減至最低限制?？刂茀^(qū)內(nèi)也可以運(yùn)用周圍空氣以外的氣體。如通入控制區(qū)內(nèi)，這種氣體應(yīng)具有與周圍空氣相門同的質(zhì)量。緊縮空氣應(yīng)無(wú)可檢測(cè)到的油蒸汽。除這些消費(fèi)區(qū)外，對(duì)有些設(shè)備也應(yīng)提供高質(zhì)量的過(guò)濾空氣。設(shè)備中的空氣與已滅菌的物料，或微生物和微粒含量均低的物料相接觸處尤為重要。例如，除菌過(guò)濾器運(yùn)用于冷凍枯燥器真空間歇和熱空氣滅菌器的通風(fēng)口處，以確保與己滅菌產(chǎn)品接觸的空氣是無(wú)菌的。異樣，進(jìn)入盛裝已滅菌液體的常壓容器中的空氣也應(yīng)是經(jīng)過(guò)過(guò)濾的。用于盛裝具有高度的微生物學(xué)的質(zhì)量要求的物料貯罐內(nèi)的空氣也應(yīng)是經(jīng)過(guò)過(guò)濾的，并且過(guò)濾器應(yīng)是枯燥的，以防止隨后梗塞凝聚，或微生物生長(zhǎng)而弄濕(有兩種方法可以到達(dá)這些要求，給過(guò)濾器供熱和運(yùn)用疏水性過(guò)濾器)。對(duì)這些空氣過(guò)濾器活期停止完整性檢測(cè)是重要的。堅(jiān)持空氣質(zhì)量的合格系統(tǒng)包括檢測(cè)高效過(guò)濾器的完整性。為反省密封墊圈周圍、框架之間或過(guò)濾介質(zhì)間的走漏狀況，裝置初次裝置時(shí)，應(yīng)先停止完整性檢測(cè)。爾后，應(yīng)在距離適事先期停止完整性檢測(cè)。通常在關(guān)鍵區(qū)域每年至少停止兩次這樣的測(cè)試就足夠了。但是，假設(shè)發(fā)現(xiàn)空氣質(zhì)量低或許作為藥品非無(wú)菌性調(diào)查的一局部，就需求停止更多的測(cè)試。運(yùn)用鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)氣霧劑做應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)(challengetest)是檢測(cè)高效過(guò)濾器完整性的一種可以接受的方法。由于高效過(guò)濾器能截住99.97%直徑大于0.3um的微粒，所以確保用做應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)的物質(zhì)有足夠數(shù)量的該大小范圍內(nèi)的粒子是十分重要的。一種可以接受的鄰苯二甲酸二辛酯應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)包括：在過(guò)濾器氣流出口參與鄰苯二甲酸二辛酯氣霧劑，濃度為每立升空氣80?100ug,速度為過(guò)濾器的設(shè)計(jì)的氣流速度，然后在過(guò)濾器氣流出口處用適宜的光度計(jì)探針掃描，取樣速度至少為每分鐘lft3o探針應(yīng)掃描整個(gè)過(guò)濾器的外表和框架，探針的位置應(yīng)距過(guò)濾器的外表1?2in。一個(gè)探針的讀數(shù)相當(dāng)于入口挑試品的0.01%就以為有值得留意的走漏的征兆，應(yīng)加以修繕。不在過(guò)濾器出口處參與大小的微粒而用微粒計(jì)數(shù)器檢測(cè)走漏是有效的。應(yīng)留意，過(guò)濾器完整性測(cè)試和效率測(cè)試有不同之處。完整性測(cè)試是查出過(guò)濾介質(zhì)、過(guò)濾器框架和密封墊能否走漏。挑試品是一種多分散性的氣霧劑，通常由大小為l—3um的微粒組成。測(cè)試在固定位置停止并用探針掃描過(guò)濾器外表，測(cè)量出的出口走漏物作為入口應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)的一個(gè)百分比。而另一方面，效率測(cè)試是測(cè)定過(guò)濾器的速度。該測(cè)試運(yùn)用微粒為0.3um大小的單一分散性氣霧劑，它與過(guò)濾介質(zhì)有關(guān)并且通常需求特殊設(shè)備。出口處的讀數(shù)代表著整個(gè)過(guò)濾器外表的平均值，因此效率測(cè)試不能用來(lái)檢測(cè)走漏。由于速度的清楚降低能添加污染的能夠性，并且速度的變化能影響氣流的層流，因此依據(jù)已確定距離時(shí)間的工藝，監(jiān)測(cè)氣流速度也很重要。應(yīng)測(cè)試氣流的類型，湍流會(huì)攪擾空氣的吹掃作用。IV.組分要求211.80節(jié)（總的要求）在〃一定水平上要求對(duì)組分的貯存、處置及檢測(cè)、同意或拒收樹立書面順序。211.84節(jié)（組分、藥品容器/密封件的檢測(cè)以及同意或拒收）在一定水平上要求那些易受微生物污染（這些微生物污染就組分的運(yùn)用而言是不允許的）的組分在運(yùn)用前必需經(jīng)過(guò)微生物檢驗(yàn)。引言經(jīng)無(wú)菌工藝制造的滅菌藥品中運(yùn)用的組分的最重要的方面之一是微生物質(zhì)量。用無(wú)菌工藝消費(fèi)的成品可以因運(yùn)用含微生物的一個(gè)或多個(gè)組分而遭到污染。因此，假設(shè)不對(duì)組分用過(guò)度殺滅滅菌工藝，按慣例說(shuō)明每種易受污染組分的微生物含量和依據(jù)這終身物負(fù)荷確定適宜的接受或拒收限制是很重要的。如對(duì)組分運(yùn)用非過(guò)度殺滅滅菌工藝，那么這個(gè)生物負(fù)荷的狀況在取得高度無(wú)菌保證中尤為重要。在無(wú)菌工藝中，可以每一組分獨(dú)自滅菌或幾種組分兼并成混合物后滅菌。組分滅菌有幾種方法，如經(jīng)過(guò)嚴(yán)厲的驗(yàn)證，每一種方法均可被接受。一種普遍采用的方法是將組分溶解于一種溶劑（如美國(guó)藥典注射用水）中構(gòu)成溶液，過(guò)濾該溶液。過(guò)濾用無(wú)菌膜或筒形過(guò)濾器。在組分受熱能夠有不利影響的狀況下可以用這種方法。該方法的另一種狀況是使過(guò)濾后的溶液停止組分的無(wú)菌結(jié)晶和沉淀，成為無(wú)菌粉末。但是這種方法比其他方法觸及更多的處置和操作，因此在操作中污染的能夠性更大。假設(shè)一種組分對(duì)受熱無(wú)不利影響，且該組分是可溶性的，這種組分可以制成溶液并且用獨(dú)自的高壓釜或在有蒸汽套的加壓制備容器中停止蒸汽滅菌。關(guān)于受熱動(dòng)搖且不溶性組分，干熱滅菌是一種適宜的方法。但這種方法的效果是熱穿透深度和散布不夠。例如，由于粉末的隔熱效果，用這種方法處置粉末需求停止適當(dāng)?shù)臒岽┩干疃群蜕⒉嫉难杏憽－h(huán)氧乙烷外表滅菌是另一種對(duì)組分滅菌的方法，但是作為主要滅菌的方法，其有效性是有效果的，由于這種滅菌劑對(duì)粉末晶核的耐久穿透性不夠。在滅菌處置進(jìn)程中，環(huán)氯乙烷可用于預(yù)防能夠的微生物污染的粉末外表滅菌。對(duì)要求無(wú)熱原的產(chǎn)品而言，對(duì)熱原敏感組分的接受或拒絕應(yīng)有書面規(guī)程。被熱原污染的組分應(yīng)當(dāng)拒絕或停止除熱原性質(zhì)的處置，以使處置后的組分契合規(guī)范、規(guī)格和特性。V,容器/密封件要求211.94節(jié)（藥品容器和密封件）在一定水平上要求藥品容器和密封件潔凈，并依據(jù)藥品性質(zhì)，要求無(wú)菌和無(wú)熱原。規(guī)范測(cè)試方法以及潔凈、滅菌和除熱原的處置的方法必需寫出書面規(guī)程并遵照?qǐng)?zhí)行。引言在用無(wú)菌工藝制備滅菌藥品的狀況下，灌裝和密封操作前容器和密封件的預(yù)備不只僅是除去外表碎屑的清潔任務(wù)。對(duì)注射劑最終產(chǎn)品的完整性而言，容器和密封件的無(wú)菌、無(wú)熱原至關(guān)重要。滅菌和除熱原處置的方式主要取決于構(gòu)成容器/密封件的資料的性質(zhì)。任何嚴(yán)厲驗(yàn)證過(guò)的處置方式均可被接受。在運(yùn)用玻璃容器的狀況下，滅菌前的預(yù)備一般包括一系列的洗濯及沖洗循環(huán)。不但洗濯有效地除去碎屑很重要，而且最終沖洗用水的質(zhì)量也很重要。最終沖洗用水應(yīng)契合美國(guó)藥典注射用水的要求。除熱原有各種方法，如先用化學(xué)溶液洗濯，隨后用注射用水沖洗。干熱可用于玻璃容器的滅菌和除熱原。干熱滅菌/除熱原的驗(yàn)證應(yīng)包括熱穿透性和熱散布的研討以及有代表性的處置周期和負(fù)載結(jié)構(gòu)以模擬實(shí)踐消費(fèi)進(jìn)程。無(wú)論運(yùn)用什么除熱原方法，驗(yàn)證資料應(yīng)證明該進(jìn)程將使內(nèi)毒素含量降低3個(gè)對(duì)數(shù)值。除熱原處置能否徹底的一個(gè)估價(jià)方法是用含量規(guī)范內(nèi)毒素的容器模擬該處置進(jìn)程并測(cè)定內(nèi)毒素降低的水平。但是，F(xiàn)DA已看法到用內(nèi)毒素挑試品估價(jià)某些洗濯工藝的一個(gè)潛在效果，效果發(fā)生于將粉狀內(nèi)毒素挑試品宜接用于測(cè)試外表而不是先溶解該內(nèi)毒素并在該外表上停止空氣枯燥。粉狀物質(zhì)能夠比用空氣重新枯燥的物質(zhì)更易溶于沖洗水中，并且比正常存在于容器/密封件外表的內(nèi)毒素更易溶于水中。這使人們覺(jué)得所研討的工藝在去除內(nèi)毒素方面的效果超越廠實(shí)踐狀況。因此，從目的物外表除去內(nèi)毒素挑試品不應(yīng)該比除去原來(lái)存在的內(nèi)毒素愈加容易。未經(jīng)控制的裝卸及貯存的塑料容器是熱原的來(lái)源，因此必需除熱原。塑料容器可以用環(huán)氧乙烷氣體滅菌，生物指示劑可用于監(jiān)測(cè)這樣的順序。同時(shí)要監(jiān)測(cè)和控制溫度、壓力、濕度和環(huán)氯乙烷濃度，容器外表和容器內(nèi)能夠存在的殘留物（如環(huán)氧乙烷和其降解產(chǎn)物）也要測(cè)定。膠塞是微生物和熱原（如產(chǎn)品要求無(wú)熱原）污染的另一個(gè)能夠的來(lái)源。在最終蒸汽滅菌前，膠塞一般經(jīng)過(guò)屢次洗濯循環(huán)，最后沖洗用美國(guó)藥典注射用水。增加洗濯和滅菌之間的時(shí)間距離也很重要，由于膠塞上的水分有助于微生物生長(zhǎng)和熱原發(fā)生。因膠塞導(dǎo)熱差，所以膠塞滅菌工藝的適當(dāng)驗(yàn)證尤為重要。VI.時(shí)限要求21LH1節(jié)（消費(fèi)時(shí)間）在一定水平上要求，為確保藥質(zhì)量量，對(duì)每終身產(chǎn)階段的完成時(shí)間限制都要確定。引言在無(wú)菌工藝制備滅菌藥品中，確定時(shí)限通常對(duì)假定干操作是適宜的。例如，為了防止濾出物因微生物生長(zhǎng)或經(jīng)過(guò)過(guò)濾器時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而遭到污染，產(chǎn)品過(guò)濾和灌裝操作的全部時(shí)間應(yīng)限制在一個(gè)限定的最大值內(nèi)。這樣的限制也防止了過(guò)濾器出口端微生物數(shù)目的增多，微生物的增多將招致熱原發(fā)生。vn.消費(fèi)和工藝控制驗(yàn)證要求211.113節(jié)（微生物污染的控制）在一定水平上要求樹立和遵守為防止微生物污染滅菌藥品而制定的適宜的書面規(guī)程。該規(guī)程必需包括一切無(wú)菌工藝的驗(yàn)證。指點(diǎn)為保證經(jīng)無(wú)菌工藝消費(fèi)的滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌，兩種操作類型，即滅菌和無(wú)菌條件下的灌裝/密封的嚴(yán)厲驗(yàn)證最為重要。假設(shè)產(chǎn)品的無(wú)菌的組件----藥品、容器和密封件在容易招致污染這些組件的條件下放在一同，即使最有效的無(wú)菌工藝也難以到達(dá)目的。相反，假設(shè)這些狀況沒(méi)有形成任何污染，但產(chǎn)品組件組裝時(shí)不是無(wú)菌的，那么產(chǎn)品的滅菌也將受影響。就驗(yàn)證滅菌產(chǎn)品組件的無(wú)菌組裝和這些組件滅菌的可以接受的方式而言，已有效果發(fā)生，但是，一些人以為滅菌產(chǎn)品組件的無(wú)菌組裝操作最為困難且已發(fā)生較多效果。因此，本指點(diǎn)重點(diǎn)為驗(yàn)證無(wú)菌組裝（即灌裝和密封）操作。無(wú)菌組裝操作驗(yàn)證無(wú)菌組裝工藝的一種可以接受的方法，包括用一種微生物生長(zhǎng)培育基模擬滅菌產(chǎn)品灌裝操作，這種方式稱作''無(wú)菌培育基灌裝〃。運(yùn)用該營(yíng)養(yǎng)培育基，使之暴露于操作者、設(shè)備、外表和環(huán)境條件下，以盡能夠模擬產(chǎn)品將閱歷的相反暴露條件。密閉的藥品容器中灌裝了培育基，然后停止培育以反省微生物的生長(zhǎng),并且評(píng)價(jià)結(jié)果以確定在實(shí)踐灌裝和密封操作中一切給定的藥品單位被污染的能夠性。培育基灌裝連同片面環(huán)境監(jiān)測(cè)在驗(yàn)證無(wú)菌溶液、懸浮液和粉末的無(wú)菌工藝中尤有價(jià)值。灌裝液體培育基作為驗(yàn)證粉末的無(wú)菌工藝的一局部，能夠需運(yùn)用設(shè)備和（或）工藝步驟。而這些設(shè)備及順序步驟不會(huì)出如今慣例的粉末順序操作中。但是，這樣一些任務(wù)關(guān)于說(shuō)明粉末暴露受污染的特性是有價(jià)值的，并且是重要的。培育基灌裝方面已出現(xiàn)了假定干效果，觸及到培育基污染設(shè)備、灌裝的周期和次數(shù)、灌裝的規(guī)模、培育基自身、環(huán)境條件和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。.受培育基污染：一些藥品消費(fèi)廠對(duì)培育基灌裝操作中營(yíng)養(yǎng)培育基對(duì)設(shè)備和用具能夠形成污染表示關(guān)注。但是，假設(shè)培育基經(jīng)過(guò)適當(dāng)處置，并隨后立刻停止設(shè)備的清洗、消毒，必要時(shí)停止滅菌，那么培育基灌裝操作對(duì)后來(lái)運(yùn)用同一設(shè)備和用具處置的產(chǎn)質(zhì)量量不會(huì)有影響。.頻次和實(shí)驗(yàn)次數(shù)：當(dāng)一個(gè)工藝最后被驗(yàn)證時(shí)，每一個(gè)獨(dú)立的培育基灌裝均應(yīng)重復(fù)足夠次數(shù)以保證結(jié)果的分歧和有意義。由于一次單一實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以有誤，屢次實(shí)驗(yàn)失掉的偏向很大的結(jié)果能夠標(biāo)志著該工藝的失控，這是很重要的。FDA以為，在許多狀況下，至少需求停止三次獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)，這一最少的次數(shù)被以為是工業(yè)中的一個(gè)總的驗(yàn)證原那么。初期驗(yàn)證后，需添加培育基灌裝的頻次將取決于事故的次數(shù)和能夠影響該無(wú)菌工藝除去滅菌產(chǎn)品組件污染的才干的變化。例如設(shè)備和用具的改良、人員的嚴(yán)重變卦、環(huán)境測(cè)試結(jié)果的失常和最終產(chǎn)品無(wú)菌檢驗(yàn)顯示產(chǎn)品遭到污染等都需重新驗(yàn)證該系統(tǒng)。但是，沒(méi)有上述變化或事故時(shí)，普通可以接受的頻次是每個(gè)灌裝/密封消費(fèi)線，每一班每年至少做兩次。全體人員每年必需參與至少一次的培育基灌裝。由于運(yùn)用培育基灌裝再驗(yàn)證該工藝，每次再驗(yàn)證中培育基灌裝獨(dú)自實(shí)驗(yàn)的次數(shù)不用象初期驗(yàn)證時(shí)那樣多，例如假設(shè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與初期驗(yàn)證的一致，并且環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)證明灌裝環(huán)境質(zhì)量在規(guī)則的限制內(nèi)，那么做一次實(shí)驗(yàn)就可以了。但是，當(dāng)數(shù)據(jù)相反或數(shù)聽(tīng)說(shuō)明該工藝失控時(shí)，應(yīng)確保添加起確定作用的培育基灌裝實(shí)驗(yàn)。.實(shí)驗(yàn)的規(guī)模：培育基灌裝單位的數(shù)目應(yīng)對(duì)檢測(cè)低污染發(fā)作率的概率高得多。曾有報(bào)道，要到達(dá)95%的牢靠率（信任率），污染率為1/1000,至少需檢測(cè)3000單位。決議實(shí)驗(yàn)規(guī)模時(shí)，無(wú)菌工藝操作繼續(xù)的時(shí)間也是首先要思索的。班次繼續(xù)的時(shí)間尤其要足以掩蓋實(shí)踐正常消費(fèi)的全部操作。實(shí)驗(yàn)單位的數(shù)目必需反映出在灌裝速度下暴露時(shí)間的''最差狀況〃，這一灌裝速度相當(dāng)于或低于實(shí)踐灌裝速度。為使培育基接觸容器內(nèi)外表（例如，旋轉(zhuǎn)裝有培育基的容器），并易于目檢微生物的生長(zhǎng)狀況，每一容器應(yīng)灌裝足夠的培育基，這一點(diǎn)也很重要。.培育基：培育基最重要的方面是它們促進(jìn)微生物生長(zhǎng)的才干。選擇用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的培育基前，應(yīng)證明其可以支持微生物生長(zhǎng)。在這點(diǎn)上，與培育基灌裝實(shí)驗(yàn)一道培育陽(yáng)性控制單位是有價(jià)值的。普通說(shuō)來(lái)，支持廣譜需氧微生物生長(zhǎng)的培育基（如胰酶酪陳大豆培育基）是可以接受的。美國(guó)藥典/國(guó)度處方集（USPXXI/NFXI1）所列的用于無(wú)菌實(shí)驗(yàn)生長(zhǎng)促進(jìn)檢測(cè)的微生物可用于此目的。在選擇適宜的培育基時(shí)，也應(yīng)思索它們能否有才干使經(jīng)過(guò)環(huán)境監(jiān)測(cè)和陽(yáng)性無(wú)菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果確證的哪些種類微生物生長(zhǎng)。用足夠的時(shí)間（周期不少于14天）和溫度培育培育基單元用以檢測(cè)由于環(huán)境條件和取樣方法能夠形成的影響致使在其他培育條件下不能生長(zhǎng)的微生物生長(zhǎng)，這一點(diǎn)也很重要。.環(huán)境條件:培育基灌裝應(yīng)在模擬實(shí)踐和作用為消費(fèi)質(zhì)量限制所確定的''最差狀況〃的環(huán)境條件下停止。在規(guī)范操作規(guī)程內(nèi)，這樣強(qiáng)調(diào)條件在一定水平上是允許的，重要的是用來(lái)評(píng)定這些規(guī)程所包括的順序的某些培育基灌裝進(jìn)程中存在這些條件。在空氣微粒和微生物質(zhì)量超出正常的狀況下和在特別留意的狀況下，停止培育基灌裝會(huì)得出不正確的評(píng)定（形成該工藝比實(shí)踐狀況似乎更潔凈）。與其那樣，不如在確定的人員數(shù)目和活動(dòng)、溫度及濕度的限制下對(duì)該系統(tǒng)做應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)。.實(shí)驗(yàn)結(jié)果：具有高度牢靠性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明產(chǎn)品單位在無(wú)菌工藝中被污染的能夠性極小。普通說(shuō)來(lái)，1/1000的污染概率是可以接受的。FDA可以接受的這一污染概率并不意味著在1000個(gè)單位以無(wú)菌工藝消費(fèi)出的滅菌藥品中能夠有1個(gè)是非無(wú)菌的。消費(fèi)廠對(duì)一切非無(wú)菌產(chǎn)品的發(fā)貨負(fù)有全部法律責(zé)任。FDA僅供認(rèn)關(guān)于如何正確并準(zhǔn)確地驗(yàn)證一個(gè)控制體系掃除污染的特性方面有迷信和技術(shù)的限制。滅菌操作過(guò)濾過(guò)濾是消毒藥品溶液常用的方法，過(guò)濾后將藥品溶液在無(wú)菌條件下參與到滅過(guò)菌的容器中。滅菌過(guò)濾器是指用最低濃度為107龐大假單胞菌/cm2過(guò)濾器外表做應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)，能濾出無(wú)菌濾液的過(guò)濾器。這種過(guò)濾器的孔隙直徑為0.22um或更小些。在某些狀況下，產(chǎn)品粘度高或有膠體性質(zhì)，不能經(jīng)過(guò)0.22um的孔隙,可以延續(xù)運(yùn)用0.45um的過(guò)濾器除去微生物。但是，最好選用比過(guò)濾更能保證較高的無(wú)菌水平，而對(duì)產(chǎn)質(zhì)量量無(wú)不利影響的其他滅菌方法。無(wú)論運(yùn)用什么過(guò)濾器或組合過(guò)濾器，驗(yàn)證均應(yīng)包括微生物應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)以模擬''最差狀況〃消費(fèi)條件，尤其要思索待過(guò)濾物料中微生物的大小。微生物應(yīng)足夠小，不但能挑試過(guò)濾器的孔隙，而且能模擬消費(fèi)中存在的最小微生物。就這一點(diǎn)而言，龐大假單抱菌是可以接受的微生物，由于它是最小的細(xì)菌之一（直徑0.3um）o假設(shè)適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)、采集和運(yùn)用，它可以經(jīng)過(guò)孔隙大于0.22um等級(jí)的過(guò)濾器。應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)中微生物的數(shù)目很重要，由于一個(gè)過(guò)濾器能夠有假定干個(gè)大于標(biāo)示等級(jí)的孔隙，這些孔隙可以使微生物經(jīng)過(guò)〃卜這樣經(jīng)過(guò)的能夠性隨著待濾物料中微生物數(shù)目的添加而添加?？梢越邮艿凝嫶蠹賳伪Ь粼嚌舛葹槊科椒嚼迕走^(guò)濾器外表上不少于107,確保實(shí)踐流入溶液的生物負(fù)荷不包括一定大小和（或）濃度的微生物，它們會(huì)降低濾液的無(wú)菌水平，這一點(diǎn)很重要。有內(nèi)在殺菌力的藥品溶液和油質(zhì)藥品溶液，不可用龐大假單胞菌做過(guò)濾器的應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)。在上述狀況下，要運(yùn)用粘度和其他物理性質(zhì)十分接近實(shí)踐產(chǎn)品，對(duì)微生物應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)無(wú)相反作用的挑試液。過(guò)濾器驗(yàn)證的應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)模擬消費(fèi)的其他方面以及流入液的生物負(fù)荷，例如，待過(guò)濾物料的pH和粘度、流速、壓力、溫度、物料與過(guò)濾器自身的順應(yīng)性和水力沖擊作用都是消費(fèi)的諸多方面，它們能影響過(guò)濾器的任務(wù)，在驗(yàn)證過(guò)濾順序中應(yīng)模擬這些要素。這些要素中許多與它們對(duì)過(guò)濾器截獲微生物方法的作用有關(guān)，即篩子截留和（或）吸附。過(guò)濾器驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，包括微生物應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)不用在實(shí)踐消費(fèi)場(chǎng)地停止。但是，重要的是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按上述討論模擬實(shí)踐消費(fèi)條件。一些較復(fù)雜的過(guò)濾器驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)超出了某些過(guò)濾器用戶的才干。在上述狀況下，由外部實(shí)驗(yàn)室或過(guò)濾器制造者停止實(shí)驗(yàn)是可以的。FDA以為取得有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是過(guò)濾器用戶的責(zé)任。這些數(shù)據(jù)必需適用于用戶的產(chǎn)品和運(yùn)用條件，由于對(duì)各種不同條件和產(chǎn)品，過(guò)濾器功用清楚不同。一類產(chǎn)品的性質(zhì)和影響過(guò)濾器效能的順序條件相似時(shí)，不用對(duì)該類產(chǎn)品逐一停止驗(yàn)證研討。更確切地說(shuō)，可將延伸法用于該類產(chǎn)品最具應(yīng)戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)特性的有關(guān)產(chǎn)品、產(chǎn)品性質(zhì)的驗(yàn)證數(shù)據(jù)和工藝條件。這種延伸法的正確性應(yīng)有書面證明。對(duì)一個(gè)特定的產(chǎn)品、工藝和過(guò)濾停止適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾工藝驗(yàn)證后，重要的是確保消費(fèi)中運(yùn)用的相反過(guò)濾器配件（膜或?yàn)V筒）以相反的方式運(yùn)轉(zhuǎn)。到達(dá)這一目的的一種方法是將過(guò)濾器操作數(shù)據(jù)與過(guò)濾器完整性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)聯(lián)絡(luò)起來(lái)。正常狀況下，過(guò)濾器完整性實(shí)驗(yàn)是在過(guò)濾器裝配終了并且用前滅菌之后停止。但是更重要的是，這樣的實(shí)驗(yàn)應(yīng)在過(guò)濾器運(yùn)用事先停止，這種運(yùn)用的目的是檢測(cè)過(guò)濾進(jìn)程中會(huì)發(fā)作的一切過(guò)濾器滲漏或穿孔。''向前活動(dòng)〃''泡點(diǎn)〃和''堅(jiān)持壓力〃實(shí)驗(yàn)都是可以接受的完整性實(shí)驗(yàn)方法。設(shè)備與滅菌藥品或無(wú)菌容器/密封件外表相接觸的設(shè)備外表當(dāng)然也必需是無(wú)菌的。在無(wú)菌工藝中嚴(yán)厲驗(yàn)證用于設(shè)備外表的滅菌工藝和驗(yàn)證藥品和容器/密封件的滅菌工藝同等重要。設(shè)備（如灌裝設(shè)備、銜接收線和過(guò)濾器固定物）用高壓釜蒸汽滅菌時(shí)，思索高壓釜中確定的裝載方式是很重要的，由于不同的結(jié)構(gòu)方式會(huì)影響熱量散布和滅菌效能（確保驗(yàn)證條件的重復(fù)性的一種方法是遵照已樹立的裝載結(jié)構(gòu)圖，該圖是無(wú)菌工藝記載的一局部）。諸如大罐和固定管線等設(shè)備采用通加壓蒸汽的方法在現(xiàn)場(chǎng)滅菌，驗(yàn)證時(shí)要思索各個(gè)不同位置的溫度和壓力以便找出沒(méi)有足夠熱量到達(dá)滅菌目的的潛在''死角〃。例如，在管線系統(tǒng)中，一些在線過(guò)濾器致使一端發(fā)生清楚的壓差，從而招致過(guò)濾器出口端溫度清楚下降。確定這樣的溫度下降能否對(duì)滅菌規(guī)程發(fā)生不利影響的方法有在適宜的出口處放置生物指示劑。驗(yàn)證也應(yīng)包括測(cè)定各個(gè)不同點(diǎn)的溫度和壓力。W.實(shí)驗(yàn)室控制要求211.160節(jié)（總的要求）在一定水平上要求樹立正確的和適宜的規(guī)格規(guī)范、規(guī)范、取樣方案以及為保證組件、藥品容器、密封件、消費(fèi)進(jìn)程中的物料和藥品契合適宜的質(zhì)量規(guī)范而設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)規(guī)程。引言在無(wú)菌工藝中，最重要的實(shí)驗(yàn)室控制之一就是樹立環(huán)境監(jiān)測(cè)順序。樣品應(yīng)從組件和產(chǎn)品暴露于環(huán)境的區(qū)域（諸如混料室和組件預(yù)備區(qū)）搜集。監(jiān)測(cè)無(wú)菌工藝區(qū)的微生物質(zhì)量以確定灌裝/密封任務(wù)時(shí)能否堅(jiān)持了無(wú)菌條件，這一點(diǎn)尤為重要。監(jiān)測(cè)工藝應(yīng)含環(huán)境（包括房間空氣、空中、墻壁和設(shè)備外表）的慣例取樣和實(shí)驗(yàn)。這樣的工藝能證明設(shè)備以及產(chǎn)品接觸外表潔凈和衛(wèi)生的有效性，并可以確定潛在的污染物能否能被控制到適當(dāng)水平。確保消毒劑堅(jiān)持對(duì)正常微生物群的效能很重要。書面的監(jiān)測(cè)順序應(yīng)有迷信的取樣時(shí)間表，包括取樣地點(diǎn)和頻次。此外，最高微生物限制和發(fā)現(xiàn)樣品超越這一限制時(shí)采取舉動(dòng)的明白進(jìn)程均應(yīng)確定。監(jiān)測(cè)環(huán)境的微生物質(zhì)量有幾種可以接受的方法。一種是運(yùn)用主動(dòng)空氣取樣器，如落盤法---裝有暴露于環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)瓊脂的陪替氏培育皿。這些用具在定量監(jiān)測(cè)中的價(jià)值有限，由于它們不能檢測(cè)未落到瓊脂外表的微生物。但是，假設(shè)在產(chǎn)品污染風(fēng)險(xiǎn)最大的關(guān)鍵區(qū)把落盤作為定性指示劑放在適當(dāng)?shù)奈恢?，并且它們可以有效地俘獲微生物，那么落盤是有價(jià)值的。當(dāng)與其他型式的空氣取樣器的數(shù)據(jù)聯(lián)絡(luò)起來(lái)時(shí)，上述取樣器的數(shù)據(jù)是有用的。評(píng)價(jià)空氣微生物質(zhì)量的另一可接受的方法是運(yùn)用更,'自動(dòng)〃的用具，諸如縫隙瓊脂取樣器、離心取樣器和那些運(yùn)用液體沖擊和膜過(guò)濾的用具。雖然允許用一切這些用具經(jīng)過(guò)檢測(cè)單位體積空氣取樣的無(wú)機(jī)體數(shù)目來(lái)停止定量測(cè)試，但每一種用具都有它不利的方面。在無(wú)菌區(qū)運(yùn)用這種用具是必要的，在消費(fèi)中至少每天都要用。在多班消費(fèi)的狀況下，每班每日都要監(jiān)測(cè)。環(huán)境監(jiān)測(cè)應(yīng)包括關(guān)鍵外表微生物質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)。停止這類實(shí)驗(yàn)通常用接觸盤、棉花桿和凸盤?？刂茀^(qū)的其他外表也要活期測(cè)試以說(shuō)明潔凈和衛(wèi)生規(guī)程的適當(dāng)水平以及檢測(cè)人員招致的污染。環(huán)境監(jiān)測(cè)順序應(yīng)包括對(duì)獲取微生物的慣例鑒別。為了對(duì)環(huán)境微生物質(zhì)量停止合理評(píng)價(jià)，鑒定應(yīng)足以區(qū)分''正常菌〃和偶然污染物。雖然不用鑒別每個(gè)分別物的菌屬和類別，但這些特征足以樹立一個(gè)有效的數(shù)據(jù)庫(kù)并足以證明潔凈和衛(wèi)生繼續(xù)有效，這一點(diǎn)是重要的。確定分別物的特征足以確定無(wú)菌培育基灌裝和產(chǎn)品無(wú)菌實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的無(wú)機(jī)體的一種潛在的關(guān)系，這也很重要。在研討滅菌失敗的緣由時(shí)，這種關(guān)系有很高的價(jià)值。用于環(huán)境監(jiān)測(cè)的微生物培育基不但要能檢測(cè)細(xì)菌，而且要能檢測(cè)霉菌和酵母菌，并應(yīng)在適宜的時(shí)間和溫度條件下培育。除監(jiān)測(cè)空氣的微生物質(zhì)量外，還應(yīng)監(jiān)測(cè)微粒質(zhì)量。關(guān)鍵區(qū)域在正常運(yùn)用時(shí)期,至少每天做一次微粒監(jiān)測(cè)，微粒檢測(cè)裝置應(yīng)在接進(jìn)任務(wù)區(qū)的空氣中取樣。應(yīng)停止活期監(jiān)測(cè)以反省微粒數(shù)目背叛正常水平的一切清楚變化，由固定地點(diǎn)測(cè)得的顆粒數(shù)目超量較多預(yù)示著出現(xiàn)了不正常狀況，應(yīng)停止調(diào)查并迅速矯正。IX.無(wú)菌檢驗(yàn)要求211.167節(jié)（特殊檢驗(yàn)要求）在一定水平上要求，每批滅菌藥品均應(yīng)有適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，以確定其無(wú)菌。引言無(wú)菌檢驗(yàn)的某些方面尤為重要。這些方面包括控制實(shí)驗(yàn)環(huán)境、明確實(shí)驗(yàn)限制以及陽(yáng)性結(jié)果的解釋和復(fù)試。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境檢驗(yàn)與灌裝/密割操作所運(yùn)用的設(shè)備和控制應(yīng)相似。無(wú)菌檢驗(yàn)設(shè)備或控制較差或缺乏會(huì)使無(wú)菌檢驗(yàn)失敗的比例增高。假設(shè)消費(fèi)設(shè)備和控制清楚好于無(wú)菌檢驗(yàn)中所運(yùn)用的，那么假設(shè)被檢驗(yàn)產(chǎn)品實(shí)踐上并非無(wú)菌，也會(huì)有把陽(yáng)性無(wú)菌檢驗(yàn)的結(jié)果歸咎于不完善的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的風(fēng)險(xiǎn)，因此，無(wú)菌順序中的一些效果就不能發(fā)現(xiàn)。普通說(shuō)來(lái)，無(wú)菌檢驗(yàn)的效能僅限檢測(cè)低水平污染。例如，美國(guó)藥典XXI和國(guó)度處方集刈表達(dá)的無(wú)菌檢驗(yàn)規(guī)程的取樣要求是：''一批產(chǎn)品假定有10%被污染,10次中就有9次能經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)〃。這一有限的靈敏度使得有必要確保檢驗(yàn)適宜數(shù)量的產(chǎn)品并且這些被檢產(chǎn)品能均一地代表這一批產(chǎn)品以使一批產(chǎn)品經(jīng)過(guò)。此外，思索到檢驗(yàn)有限的靈敏度，一切陽(yáng)性結(jié)果（在檢驗(yàn)容器中觀察到微生物生長(zhǎng)）應(yīng)做十分準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。對(duì)滅菌檢驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的評(píng)價(jià)應(yīng)包括調(diào)查研討，以在能夠的范圍內(nèi)確定微生物的生長(zhǎng)來(lái)自于產(chǎn)品污染還是實(shí)驗(yàn)室錯(cuò)誤。雖然這種確定不相對(duì)牢靠，但取得這樣或那樣有壓服力的證據(jù)通常是能夠的。當(dāng)有壓服力的證聽(tīng)說(shuō)明無(wú)實(shí)驗(yàn)室過(guò)失或失掉的數(shù)據(jù)無(wú)壓服力時(shí)，公司能夠在平安方面犯了錯(cuò)誤，并且這些批產(chǎn)品應(yīng)因不契合無(wú)菌要求而被拒收。調(diào)查研討應(yīng)思索到關(guān)于產(chǎn)品制造和樣品檢驗(yàn)的一切有關(guān)要素。就這一點(diǎn)而言，僅僅由于重復(fù)檢驗(yàn)中沒(méi)檢測(cè)到微生物生長(zhǎng)而將最后的陽(yáng)性結(jié)果歸咎于實(shí)驗(yàn)室過(guò)失是不適宜的。更確切地說(shuō)，污染緣由的有壓服力的證據(jù)至少應(yīng)基于以下各點(diǎn)。.無(wú)菌檢驗(yàn)中微生物鑒別（至少鑒別出屬類）。假設(shè)這種微生物在實(shí)驗(yàn)環(huán)境中很少見(jiàn)，那么產(chǎn)品更能夠污染。假設(shè)這種微生物在實(shí)驗(yàn)室和消費(fèi)環(huán)境中都罕見(jiàn),那么不應(yīng)自動(dòng)掃除產(chǎn)品的污染。無(wú)機(jī)體對(duì)滅菌方法的敏理性以及對(duì)產(chǎn)品中一切防腐劑的敏理性也有助于確定污染源。當(dāng)無(wú)機(jī)體能對(duì)立滅菌方法或防腐劑時(shí)，應(yīng)思索是內(nèi)在產(chǎn)品污染。另一方面，當(dāng)缺乏污染來(lái)源的相反證明時(shí)，在無(wú)機(jī)體沒(méi)有對(duì)立力的狀況下，污染源更能夠是來(lái)自于實(shí)驗(yàn)室污染。.實(shí)驗(yàn)室記載的臨時(shí)檢驗(yàn)。仔細(xì)審查實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)的傾向可以有助于掃除或認(rèn)定實(shí)驗(yàn)室為污染源。在FDA的閱歷中，一個(gè)實(shí)驗(yàn)室在全部滅菌檢驗(yàn)中初次陽(yáng)性的無(wú)菌檢驗(yàn)失敗率低于0.5%是正常的。關(guān)于第一次檢驗(yàn)而言，高于0.5%的失敗率可以說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室或消費(fèi)有效果，因此應(yīng)停止調(diào)查研討。假設(shè)初次陽(yáng)性結(jié)果呈上升趨向，就應(yīng)該著手調(diào)查研討。上升趨向與片面調(diào)查研討中的其他要素聯(lián)絡(luò)起來(lái)，可以證明一個(gè)疑心為污染緣由的要素。異樣，假陽(yáng)性結(jié)果上升趨向也應(yīng)停止調(diào)查研討，這種上升可以成為消費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室效果的先兆。為了更正確地監(jiān)測(cè)潛在污染源，依據(jù)影響這些來(lái)源的特性區(qū)分這些傾向是很重要的。例如，可用產(chǎn)品、容器類型、灌裝線和樣品管理水平區(qū)分這些傾向。最后滅菌產(chǎn)品和無(wú)菌工藝產(chǎn)品的樣品管理是相反的，無(wú)菌工藝產(chǎn)品的初次無(wú)菌檢驗(yàn)失敗率較高可視為消費(fèi)效果。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的臨時(shí)微生物監(jiān)測(cè)可以提醒一些傾向，這些傾向可提供信息。實(shí)驗(yàn)室中微生物負(fù)荷上升的傾向應(yīng)停止調(diào)查研討并加以矯正。但是這樣的傾向更預(yù)示著無(wú)菌檢驗(yàn)失敗是實(shí)驗(yàn)室過(guò)失形成的。.消費(fèi)區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)。尤為重要的是在關(guān)鍵區(qū)域能生活的無(wú)機(jī)體的傾向剖析。上升傾向預(yù)示著無(wú)菌檢驗(yàn)失敗的緣由在于產(chǎn)品。思索環(huán)境微生物負(fù)荷不限于與有疑問(wèn)的批產(chǎn)品有關(guān)的批、日或班的消費(fèi)環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果，這一點(diǎn)很重要。低水平的可生活無(wú)機(jī)物的結(jié)果能夠會(huì)形成錯(cuò)覺(jué)，尤其是依據(jù)可以成為一種傾向的局部較高的生物負(fù)荷的數(shù)據(jù)分類時(shí)，因此，重要的是思索環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)范圍要寬。.產(chǎn)品滅菌前的生物負(fù)荷。產(chǎn)品生物負(fù)荷的傾向可以顯示與無(wú)菌檢驗(yàn)失敗有關(guān)的效果。生物負(fù)荷上升傾向與無(wú)菌檢驗(yàn)失敗同時(shí)發(fā)作是產(chǎn)品污染的更有力的說(shuō)明。.消費(fèi)記載審查。應(yīng)審查完整的批和消費(fèi)控制記載以查出與產(chǎn)品無(wú)菌有關(guān)的失敗或不正常的一切跡象，例如灌裝線空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)記載可以顯示出有異常的高微粒計(jì)數(shù)的時(shí)間。.無(wú)菌復(fù)檢。一種可以接受的復(fù)檢包括運(yùn)用供試品數(shù)量至少為原來(lái)瓶數(shù)的兩倍，應(yīng)能代表一批產(chǎn)品的各局部。復(fù)檢未發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)與其他調(diào)查研討相比不顯得那么重要。但是，假設(shè)復(fù)檢中發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)，該批產(chǎn)品應(yīng)被拒收，除非一個(gè)新的徹底的研討任務(wù)結(jié)論性地說(shuō)明污染來(lái)自于取樣或檢驗(yàn)規(guī)程。在這樣狀況下，可停止第二次復(fù)檢。第二次復(fù)檢的樣品量應(yīng)是第一次復(fù)檢的2倍。如第二次復(fù)檢發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)，該批產(chǎn)品應(yīng)被拒收并不允許進(jìn)一步復(fù)檢。生物產(chǎn)品的第一次無(wú)菌復(fù)檢不要?jiǎng)?wù)實(shí)驗(yàn)瓶數(shù)為原來(lái)的2倍(21CFR,610.12節(jié))。關(guān)鍵在于能否允許做第二次復(fù)檢。散裝的生物物料不允許停止第二次復(fù)檢。X.參考資料FederalStandard209B,CleanRoomandWorkStationRequiiements,ControlledEnvironment,Apnl24,1973.TeclmicalOlder00-25-203,ContaminationControlofAe