唾液酸的性質(zhì)

唾液酸的性質(zhì)第1頁/共17頁唾液酸

sialicacid

第2頁/共17頁唾液酸(sialicacid)學(xué)名：N-乙酰基神經(jīng)氨酸定義：一類九碳單糖，所有神經(jīng)氨酸或酮基-脫氧壬酮糖酸(KDN)的N-或O-衍生物的總稱。主要食物來源：母乳，也存在于牛奶、雞蛋和奶酪中。第3頁/共17頁唾液酸的研究背景1936年Blix等人首次從牛下頜骨粘液中分離得到了一種唾液酸1956年Gottschalk小組在檢驗(yàn)粘蛋白中流感病毒的作用時(shí)，分離得到了唾液酸類化合物中最具代表性的N-乙?；窠?jīng)氨酸1967年才完全確定了唾液酸的立體構(gòu)型，包括唾液酸中的酮苷鍵在游離狀態(tài)時(shí)為β-型，在天然綴合物中為α-型。第4頁/共17頁唾液酸的結(jié)構(gòu)N-乙酰神經(jīng)氨酸(NeuAc、Neu5Ac或NANA)，N-羥乙酰神經(jīng)氨酸(NeuGc,NANGNeu5Gc)，去氨基神經(jīng)氨酸(KDN)和神經(jīng)氨酸(Neu),第5頁/共17頁唾液酸的存在形式唾液酸的存在形式主要包括游離態(tài)的唾液酸、聚唾液酸、唾液酸的衍生物和唾液酸的同系物。聚唾液酸(Polysialicacid)是唾液酸單體以α-2,8和/或α-2,9酮苷鍵連接的線性同聚物。唾液酸同系物主要是通過甲基、乳?；?、硫酸和磷酸基團(tuán)取代四種主要唾液酸C-4,7,8,9位上的羥基基團(tuán)而實(shí)現(xiàn)。第6頁/共17頁唾液酸的性質(zhì)純的唾液酸是無色的，易溶于水，在水溶液中不發(fā)生變旋作用，4℃時(shí)貯藏?cái)?shù)月不發(fā)生變化。純的聚唾液酸是白色不定型高聚合物，水溶性較好，粘度低，生物相容性好，在酸的作用下容易降解成單體的唾液酸，具有生物可降解性。第7頁/共17頁唾液酸在不同生物體內(nèi)的分布廣泛存在于各種生物的組織中，是構(gòu)成細(xì)胞表面的復(fù)合糖質(zhì)的組成成分，通常在糖蛋白和糖脂的末端以糖苷的形式存在；原生動(dòng)物極少或不存在，脊椎動(dòng)物和哺乳動(dòng)物體內(nèi)普遍存在；在腦脊液和粘液中存在最多，血清、體液和尿液中也能發(fā)現(xiàn)游離的唾液酸。第8頁/共17頁唾液酸的生物學(xué)功能使唾液粘蛋白具有潤滑作用；唾液酸對細(xì)胞的凝聚具有一定的調(diào)控作用；唾液酸具有抗識(shí)別作用；作為腫瘤標(biāo)志物。抗病毒作用第9頁/共17頁唾液酸合成研究進(jìn)展生物合成以N-乙酰基氨基葡萄糖為原料，通過異構(gòu)化酶和唾液酸醛縮酶兩步酶催化反應(yīng)，在酶膜反應(yīng)器中合成了唾液酸第10頁/共17頁N-乙?；事短前泛捅嶂gC—C鍵的形成,由此合成得到了唾液酸。在酶反應(yīng)器中加入丙酮酸酯脫羰基酶將反應(yīng)體系中過量的丙酮酸降解為乙醛和二氧化碳硫胺素焦磷酸鹽第11頁/共17頁化學(xué)合成從手性的三醇出發(fā)，通過順式烯烴的苯硒基氨化反應(yīng)以及反式烯丙醇的雙羥基化反應(yīng)構(gòu)建了全部的手性中心，利用膦葉立德的臭氧化斷裂得到末端的D-羰基酸部分，其中經(jīng)過了多次的保護(hù)基轉(zhuǎn)換，最后經(jīng)近20步反應(yīng)完成了唾液酸的合成。第12頁/共17頁天然產(chǎn)物提取法

以天然產(chǎn)物為原料，如乳清、酪蛋白、豬血、雞蛋黃等，經(jīng)水解、脂肪提取、層析、結(jié)晶等步驟合成。第13頁/共17頁唾液酸的檢測分光光度法硫代巴比妥酸法游離唾液酸被過碘酸氧化生成β-甲酰丙酮酸，后者與2-硫代巴比妥酸反應(yīng)生成有色物質(zhì)，在549nm處有最大吸收峰。間苯二酚-過碘酸/鹽酸法由于過碘酸氧化以酮苷形式結(jié)合的唾液酸生成結(jié)合的醛，后者可與間苯二酚生成很強(qiáng)的顏色，其最大吸收峰在630nm。NeuNAc及NeuNG的克分子消光系數(shù)各為27900及27000，比單獨(dú)用間苯二酚的靈敏度要高三倍，而且由酮苷結(jié)合的唾液酸生成的醛37℃經(jīng)過碘酸進(jìn)一步氧化時(shí)是穩(wěn)定的，由游離唾液酸生成的醛則被破壞，而后者在0℃是穩(wěn)定的，根據(jù)上述特性可以測定結(jié)合、游離及總唾液酸量。第14頁/共17頁HPLC(高性能液體色譜)法通過聚丙烯酰胺凝膠將游離狀態(tài)和低聚糖結(jié)合狀態(tài)的唾液酸與糖類分離開來。將得到的唾液酸在Cu2+和Cr3+協(xié)同催化下與間苯二酚發(fā)生反應(yīng)，生成的有色物質(zhì)用乙酸丁酯-正丁醇萃取，并在615/610nm處測定吸光度。薄層層析法展開劑:正丙醇∶飽和氨水∶水=6∶1∶2·5;顯色劑:間苯二酚-鹽酸試劑(與唾液酸分析試劑相同)。將點(diǎn)好樣品的層析板置于盛有展開劑的層析缸，密閉式展開，溶劑前沿距層析板上端1cm時(shí)取出，在室溫下?lián)]發(fā)干，用噴霧器噴灑顯色劑，再在110℃烘箱顯色，待層析板呈現(xiàn)藍(lán)紫色斑點(diǎn)取出。第15頁/共17頁唾液酸的應(yīng)用SA也是一種天然的大腦營養(yǎng)素，它能促進(jìn)嬰兒的記憶和智力發(fā)育。在奶粉中添加唾液酸可能促進(jìn)突觸的形成，幫助寶寶的記憶