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超敏反應(yīng)性疾病檢驗(yàn)免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)教學(xué)培訓(xùn)課件—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)激發(fā)試驗(yàn)概念/類型概念:是模擬自然發(fā)病條件,用少量超敏原引起一次較輕的超敏反應(yīng)發(fā)作,達(dá)到確定超敏原的一種體內(nèi)試驗(yàn)。類型:(1)皮內(nèi)試驗(yàn)(2)點(diǎn)刺試驗(yàn)(挑刺或刺痕試驗(yàn))(3)斑貼試驗(yàn)—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)將試驗(yàn)抗原與對(duì)照液各0.01~0.03mL用皮試針頭分別注入皮內(nèi),使局部產(chǎn)生一個(gè)圓形小丘。皮內(nèi)試驗(yàn)是最常用的皮膚試驗(yàn)。視頻:皮試—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果觀察(20-30min):1)-:無風(fēng)團(tuán)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照;2)+:風(fēng)團(tuán)3mm~5mm、紅暈<20mm;3)++:風(fēng)團(tuán)6mm~9mm、伴紅暈;4)+++:風(fēng)團(tuán)10mm~15mm、伴紅暈;5)++++:風(fēng)團(tuán)>15mm,伴紅暈且有偽足?!?—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)將試驗(yàn)抗原與對(duì)照液分別滴于試驗(yàn)部位的皮膚上→用針尖透過液滴輕挑一下,以刺破皮膚而不出血為度→1min后拭(吸)去試驗(yàn)抗原液—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)結(jié)果觀察(20-30min):(1)-:無風(fēng)團(tuán)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照;(2)+:無風(fēng)團(tuán),陰性對(duì)照<紅暈≤20mm;(3)++:無風(fēng)團(tuán),紅暈>20mm;(4)+++:風(fēng)團(tuán)伴紅暈;(5)++++:風(fēng)團(tuán)伴紅暈和偽足。—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)斑貼試驗(yàn)將試驗(yàn)抗原直接貼敷于皮膚表面的方法尋找接觸性過敏原??乖瓭舛纫圆淮碳てつw為原則,涂敷范圍以0.5~1cm為宜?!?—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)斑貼試驗(yàn)結(jié)果觀察時(shí)間:(1)第一次讀:48小時(shí)打開斑試器,間隔30min待斑試器壓痕消失后判定結(jié)果。(2)第二次讀:第3天或第4天。(3)如懷疑光過敏,在斑貼試驗(yàn)的基礎(chǔ)上給予紫外線照射,操作過程相似?!?—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)斑貼試驗(yàn)結(jié)果觀察:(1)-:無反應(yīng)或小于陰性對(duì)照;(2)+:輕度紅腫、搔癢;(3)++:明顯紅腫、時(shí)有紅斑;(4)+++:紅腫伴皮疹、水皰;(5)++++:紅腫、水皰伴潰瘍。—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)血清IgE檢測(cè)IgE為Ⅰ型超敏反應(yīng)的重要物質(zhì),檢測(cè)其含量有助于Ⅰ型超敏反應(yīng)的診斷。類型:(1)血清總IgE(tIgE)(2)特異性IgE(sIgE)—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)血清總IgE檢測(cè)臨床意義:血清tIgE水平一般用國際單位(IU)或ng表示;正常人群血清tIgE水平存在一定差異;一般認(rèn)為大于333IU/ml(800ng/ml)時(shí)為異常升高;過敏患者tIgE水平可高于正常人數(shù)千倍;需注意有些過敏患者血清tIgE水平不高,而tIgE水平高的并非都是過敏患者。方法:(1)酶聯(lián)免疫測(cè)定法(2)化學(xué)發(fā)光法—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)特異性IgE檢測(cè)臨床意義:根據(jù)sIgE含量可確定患者變應(yīng)原種類,評(píng)價(jià)患者過敏狀態(tài)、脫敏治療的療效,對(duì)過敏性疾病的診斷和鑒別診斷有重要幫助。方法:(1)放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(3)免疫印跡技術(shù)—*—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫復(fù)合物檢測(cè)免疫復(fù)合物(immunecomplex,IC):指由抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合而成的復(fù)合物。局部免疫復(fù)合物:沉積在機(jī)體的某一局部的復(fù)合物。循環(huán)IC(circulatingIC,CIC):血液中存在的IC。CIC分類:抗原特異性CIC和抗原非特異性CIC?!?—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)抗原非特異性CIC檢測(cè)免疫復(fù)合物(immunecomplex,IC):指由抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合而成的復(fù)合物。局部免疫復(fù)合物:沉積在機(jī)體的某一局部。循環(huán)IC(circulatingIC,CIC):血液中存在的IC。CIC分類:抗原特異性CIC和抗原非特異性CIC?!?—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)特異性CIC檢測(cè)總思路方法設(shè)計(jì)思路:免疫復(fù)合物的相對(duì)分子量一般在600kD以上,沉降系數(shù)>19S,與其相應(yīng)的游離抗原和抗體相比,分子量、分子構(gòu)型、溶解度、電荷和表面特性均發(fā)生變化?!?—超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)特異性CIC檢測(cè)方法(1)PEG比濁法1)原理:PEG是一種不帶電荷的直鏈大分子結(jié)構(gòu)的多糖,有強(qiáng)脫水作用,利用2%~4%濃度的PEG可以選擇沉淀大分子免疫復(fù)合物。2)影響因素:2%PEG只能沉淀較大分子循環(huán)免疫復(fù)合物,4%PEG能沉淀較小分子循環(huán)免疫復(fù)合物,超過5%PEG選擇性沉淀循環(huán)免疫復(fù)合物特性消失?!?—超敏反應(yīng)
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