啤酒廠化驗室設計

廣西工業(yè)職業(yè)技術學院設計說明書課題名稱：啤酒廠微生物實驗室設計姓名：廖國旭專業(yè)：食品藥品監(jiān)督管理班級：藥監(jiān)1031班起止日期：指導教師：韋麗前言設計化驗室目的在于對啤酒原輔料及成品進行檢驗，確保啤酒的質量與安全，全面控制和管理生產，保證和監(jiān)督啤酒質量和衛(wèi)生指標，提高質量安全和達到食品可接受水平，保證飲品質量，維護消費者權利，為企業(yè)提供有力銷售保障，使企業(yè)強有力的立足于世界市場?；炇一救蝿帐菍ζ【圃o料、半成品及成品進行檢驗，確保啤酒的質量與安全，全面控制和管理生產，保證和監(jiān)督啤酒質量和衛(wèi)生指標，提高質量安全和達到食品可接受水平，保證飲品質量?；炇夜δ苁菫槠【频馁|量提供有效的保障，讓啤酒達到消費者可接受水平，保證啤酒質量，通過工作人員運用精密的檢測儀器設備對啤酒進行檢驗與驗證，以合格的身份進入銷售市場，讓消費者買的放心喝得開心?；炇抑饕衫砘瘜嶒炇摇⑽⑸锸摇⒅蛋嗍摇⑥k公室、儀器室、天平室、更衣室、洗涮室、緩沖間、無菌室、準備室。摘要對于啤酒生產來說，質量檢驗的重要性是不言而寓的。化驗室應該擺脫僅僅進行化驗的狹隘定義，而要為啤酒生產的各個工序提供指導，對啤酒質量進行有效的控制。為保證分析結果的準確性，就要從多個方面對化驗室進行建造，建立合理完善的管理制度。

本分析化驗室主要擔任本廠所有原料、半成品及成品的檢測,起到控制和管理生產,保證和監(jiān)督本廠生產的味精的質量和衛(wèi)生指標的作用,也為開發(fā)新產品、制定合理的工藝參數(shù)提供數(shù)據(jù)依據(jù).本分析化驗室主要包括:辦公室、儀器室、試劑室、理化實驗室、準備室、微生物檢驗室.

啤酒廠分析化驗室的主要任務是對原材料分析、半成品化驗分析、成品化驗分析起到控制和管理生產，保證和監(jiān)督食品質量和衛(wèi)生指標作用。在成品成廠時，必須對出廠的各規(guī)格啤酒，經過檢驗，各理化指標、技術質量均要符合衛(wèi)生標準，以保證人民健康和商品信譽。本分析化驗室的整體目標是完成對原料、輔料、半成品及成品的檢測和質量控制，保證產品的質量。并對新產品、新工藝的開發(fā)。目錄1.啤酒原料、半成品及成品的檢測項目及標準······················41.2原料的檢測項目及標準······································41.3半成品檢測項目及標準······································41.4成品檢測項目及標準········································52.啤酒原料、半成品及成品的檢測方法····························62.1啤酒原料的檢測方法········································62.2啤酒半成品的檢測方法···································72.3啤酒成品的檢測方法······································7-233.試劑和儀器清單·············································243.1試劑清單·················································253.2玻璃儀器清單············································263.3設備清單················································273.4化驗室的月試劑消耗量······································274.化驗室的平面布置圖及設計說明································284.1化驗室設置···············································294.2化驗室的平面布置圖·······································304.3設計說明（包括水、電、平面布置說1明）······················315.化驗室人員配制和組織管理····································326.化驗室的崗位責任制··········································347.參考文獻····················································368.謝辭···················································361.啤酒原料、半成品及成品的檢測項目及標準1.1啤酒半成品檢測項目及標準序號微生物檢驗檢測標準1致病菌、厭氧菌不得檢出2乳酸菌數(shù)≥1×106cfu/mL1.2啤酒成品檢測項目及標準序號微生物檢測項目檢測標準1菌落總數(shù)≤502大腸菌群≤33致病菌不得檢出2.啤酒半成品及成品的檢測方法2.1半成品2.1.1酵母死活細胞（死亡率）的測定活的菌體，由于新陳代謝不停的進行著，細胞內氧化還原值（rH）較小，而還原力強。這時如有像美藍那樣的無毒染料進入活的細胞內，即被還原脫色：而死的細胞代謝停止，無還原力，即被染成藍色。美藍無毒，且能為活細胞還原成無色故多用于區(qū)別細胞的死活。但美藍濃度、作用時間等都用影響，因此以制片后五分鐘內計算的死細胞數(shù)為據(jù)。檢查方法：取0.1%美藍一滴，置載玻片中央，然后去酒母液少許和入美藍液中，攪拌均勻，加蓋玻片，在顯微鏡下檢查數(shù)已變藍的細胞及未變藍的細胞（可數(shù)5~6個視野的細胞數(shù)），計算死細胞占總細胞數(shù)的百分率。死亡率的計算：酵母死亡率一般用百分數(shù)表示，即死亡細胞占總細胞數(shù)的百分數(shù)，在顯微鏡下數(shù)一定的細胞數(shù)，并記錄死活細胞數(shù)，按下式計算死亡率死亡率=b/a%2.2成品2.2.1志賀氏菌檢驗范圍本標準規(guī)定了食品中志賀氏菌(Shigella)的檢驗方法。本標準適用于食品中志賀氏菌的檢驗。設備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設備外，其他設備和材料如下：a恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃；b冰箱：2℃～5℃；c膜過濾系統(tǒng)；d厭氧培養(yǎng)裝置：41.5℃±1℃；e電子天平：感量0.1g；f顯微鏡：10×～100×；g均質器；h振蕩器；i無菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭；j無菌均質杯或無菌均質袋：容量500mL；k無菌培養(yǎng)皿：直徑90mm；lpH計或pH比色管或精密pH試紙；m全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。培養(yǎng)基和試劑a志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素。b麥康凱（MAC）瓊脂。c木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽（XLD）瓊脂。d志賀氏菌顯色培養(yǎng)基。e三糖鐵（TSI）瓊脂。f營養(yǎng)瓊脂斜面。g半固體瓊脂。h葡萄糖銨培養(yǎng)基。i尿素瓊脂。jβ-半乳糖苷酶培養(yǎng)基。k氨基酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基。l糖發(fā)酵管。m西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基。n粘液酸鹽培養(yǎng)基。o蛋白胨水、靛基質試劑。p志賀氏菌屬診斷血清。q生化鑒定試劑盒。操作步驟增菌以無菌操作取檢樣25g（mL），加入裝有滅菌225mL志賀氏菌增菌肉湯的均質杯，用旋轉刀片式均質器以8000r/min～10000r/min均質；或加入裝有225mL志賀氏菌增菌肉湯的均質袋中，用拍擊式均質器連續(xù)均質1min～2min，液體樣品振蕩混勻即可。于41.5℃±１℃，厭氧培養(yǎng)16h～20h。分離取增菌后的志賀氏增菌液分別劃線接種于XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏菌顯色培養(yǎng)基平板上，于36℃1℃培養(yǎng)20h～24h，觀察各個平板上生長的菌落形態(tài)。宋內氏志賀氏菌的單個菌落直徑大于其他志賀氏菌。若出現(xiàn)的菌落不典型或菌落較小不易觀察，則繼續(xù)培養(yǎng)至48h再進行觀察。志賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征見表1。表1志賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征選擇性瓊脂平板志賀氏菌的菌落特征MAC瓊脂無色至淺粉紅色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊XLD瓊脂粉紅色至無色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊志賀氏菌顯色培養(yǎng)基按照顯色培養(yǎng)基的說明進行判定初步生化試驗自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個以上典型或可疑菌落，分別接種TSI、半固體和營養(yǎng)瓊脂斜面各一管，置36℃1℃培養(yǎng)20h～24h，分別觀察結果。凡是三糖鐵瓊脂中斜面產堿、底層產酸（發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵乳糖，蔗糖）、不產氣（福氏志賀氏菌6型可產生少量氣體）、不產硫化氫、半固體管中無動力的菌株，挑取其中已培養(yǎng)的營養(yǎng)瓊脂斜面上生長的菌苔，進行生化試驗和血清學分型。0生化試驗及附加生化試驗1生化試驗用中已培養(yǎng)的營養(yǎng)瓊脂斜面上生長的菌苔，進行生化試驗，即β-半乳糖苷酶、尿素、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶以及水楊苷和七葉苷的分解試驗。除宋內氏志賀氏菌、鮑氏志賀氏菌13型的鳥氨酸陽性;宋內氏菌和痢疾志賀氏菌1型，鮑氏志賀氏菌13型的β-半乳糖苷酶為陽性以外，其余生化試驗志賀氏菌屬的培養(yǎng)物均為陰性結果。另外由于福氏志賀氏菌6型的生化特性和痢疾志賀氏菌或鮑氏志賀氏菌相似，必要時還需加做靛基質、甘露醇、棉子糖、甘油試驗，也可做革蘭氏染色檢查和氧化酶試驗，應為氧化酶陰性的革蘭氏陰性桿菌。生化反應不符合的菌株，即使能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集，仍不得判定為志賀氏菌屬。志賀氏菌屬生化特性見表2。表2志賀氏菌屬四個群的生化特征生化反應A群：痢疾志賀氏菌B群：福氏志賀氏菌C群：鮑氏志賀氏菌D群：宋內氏志賀氏菌?-半乳糖苷酶－a-－a+尿素－－－－賴氨酸脫羧酶－－－－鳥氨酸脫羧酶－－－b+水楊苷－－－－七葉苷－－－－靛基質－/＋(＋)－/＋－甘露醇－＋c＋+棉子糖－＋－＋甘油(＋)－(＋)d注：+表示陽性；-表示陰性；-/+表示多數(shù)陰性；+/-表示多數(shù)陽性；（+）表示遲緩陽性；d表示有不同生化型。a痢疾志賀1型和鮑氏13型為陽性。b鮑氏13型為鳥氨酸陽性。c福氏4型和6型常見甘露醇陰性變種。2附加生化實驗由于某些不活潑的大腸埃希氏菌（anaerogenicE.coli）、A-D（Alkalescens-Disparbiotypes堿性-異型）菌的部分生化特征與志賀氏菌相似，并能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集；因此前面生化實驗符合志賀氏菌屬生化特性的培養(yǎng)物還需另加葡萄糖胺、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗(36℃培養(yǎng)24h～48h)。志賀氏菌屬和不活潑大腸埃希氏菌、A-D菌的生化特性區(qū)別見表3。表3志賀氏菌屬和不活潑大腸埃希氏菌、A-D菌的生化特性區(qū)別生化反應A群：痢疾志賀氏菌B群：福氏志賀氏菌C群：鮑氏志賀氏菌D群：宋內氏志賀氏菌大腸埃希氏菌A-D菌葡萄糖銨－－－－＋＋西蒙氏檸檬酸鹽－－－－dd粘液酸鹽－－－d＋d注1：+表示陽性；-表示陰性；d表示有不同生化型。注2：在葡萄糖銨、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗三項反應中志賀氏菌一般為陰性，而不活潑的大腸埃希氏菌、A-D（堿性-異型）菌至少有一項反應為陽性。3如選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)，可根據(jù)表3的初步判斷結果，用4.3.1中已培養(yǎng)的營養(yǎng)瓊脂斜面上生長的菌苔，使用生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)進行鑒定。4結果報告綜合以上生化試驗的結果，報告25g（mL）樣品中檢出或未檢出志賀氏菌。2.2.3沙門氏菌檢驗范圍本標準規(guī)定了食品中沙門氏菌（Salmonella）的檢驗方法。本標準適用于食品中沙門氏菌的檢驗。設備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設備外，其他設備和材料如下：1）冰箱：2℃～5℃。2）恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃，42℃±1℃。3）均質器。4）振蕩器。5）電子天平：感量0.1g。6）無菌錐形瓶:容量500mL，250mL。7）無菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭。8）無菌培養(yǎng)皿：直徑90mm。9）無菌試管：3mm×50mm、10mm×75mm。10）無菌毛細管。11）pH計或pH比色管或精密pH試紙。12）全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。培養(yǎng)基和試劑1）緩沖蛋白胨水（BPW）。2）四硫磺酸鈉煌綠（TTB）增菌液。3）亞硒酸鹽胱氨酸（SC）增菌液。4）亞硫酸鉍（BS）瓊脂。5）HE瓊脂。6）木糖賴氨酸脫氧膽鹽（XLD）瓊脂。7）沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基。8）三糖鐵（TSI）瓊脂。9）蛋白胨水、靛基質試劑。10）尿素瓊脂（pH7.2）。11）氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基。12）賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基。13）糖發(fā)酵管。14）鄰硝基酚β-D半乳糖苷（ONΜG）培養(yǎng)基。15）半固體瓊脂。16）丙二酸鈉培養(yǎng)基。17）沙門氏菌O和H診斷血清。18）生化鑒定試劑盒。操作步驟.1前增菌稱取25g（mL）樣品放入盛有225mLBPW的無菌均質杯中，以8000r/min～10000r/min均質1min～2min，或置于盛有225mLBPW的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min～2min。若樣品為液態(tài)，不需要均質，振蕩混勻。如需測定pH值，用1mol/mL無菌NaOH或HCl調pH至6.8±0.2。無菌操作將樣品轉至500mL錐形瓶中，如使用均質袋，可直接進行培養(yǎng)，于36℃±1℃培養(yǎng)8h～18h。如為冷凍產品,應在45℃以下不超過15min,或2℃～5℃不超過18h解凍。.2增菌輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物，移取1mL，轉種于10mLTTB內，于42℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。同時，另取1mL，轉種于10mLSC內，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。.2分離分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個BS瓊脂平板和一個XLD瓊脂平板（或HE瓊脂平板或沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）。于36℃±1℃分別培養(yǎng)18h～24h（XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）或40h～48h（BS瓊脂平板），觀察各個平板上生長的菌落,各個平板上的菌落特征見表1。表1沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征選擇性瓊脂平板沙門氏菌BS瓊脂菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不變。HE瓊脂藍綠色或藍色，多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色；有些菌株為黃色，中心黑色或幾乎全黑色。XLD瓊脂菌落呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心，或呈現(xiàn)全部黑色的菌落；有些菌株為黃色菌落，帶或不帶黑色中心。沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基按照顯色培養(yǎng)基的說明進行判定。.3生化試驗自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個以上典型或可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂，先在斜面劃線，再于底層穿刺；接種針不要滅菌,直接接種賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h，必要時可延長至48h。在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基內，沙門氏菌屬的反應結果見表2。表2沙門氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基內的反應結果三糖鐵瓊脂賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基初步判斷斜面底層產氣硫化氫KA＋（－）＋（－）＋可疑沙門氏菌屬KA＋（－）＋（－）－可疑沙門氏菌屬AA＋（－）＋（－）＋可疑沙門氏菌屬AA＋/－＋/－－非沙門氏菌KK＋/－＋/－＋/－非沙門氏菌注：K：產堿，A：產酸；＋：陽性，－：陰性；＋（－）：多數(shù)陽性，少數(shù)陰性；＋/－：陽性或陰性。接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基的同時,可直接接種蛋白胨水（供做靛基質試驗）、尿素瓊脂（pH7.2）、氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基，也可在初步判斷結果后從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種。于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h，必要時可延長至48h，按表3判定結果。將已挑菌落的平板儲存于2℃～5℃或室溫至少保留24h，以備必要時復查。表3沙門氏菌屬生化反應初步鑒別表反應序號硫化氫（H2S）靛基質pH7.2尿素氰化鉀（KCN）賴氨酸脫羧酶A1＋－－－＋A2＋＋－－＋A3－－－－＋/－注：＋陽性；－陰性；＋/－陽性或陰性。反應序號A1：典型反應判定為沙門氏菌屬。如尿素、KCN和賴氨酸脫羧酶3項中有1項異常，按表4可判定為沙門氏菌。如有2項異常為非沙門氏菌。表4沙門氏菌屬生化反應初步鑒別表pH7.2尿素氰化鉀（KCN）賴氨酸脫羧酶判定結果－－－甲型副傷寒沙門氏菌（要求血清學鑒定結果）－＋＋沙門氏菌Ⅳ或Ⅴ（要求符合本群生化特性）＋－＋沙門氏菌個別變體（要求血清學鑒定結果）注：＋表示陽性；＋表示陰性。反應序號A2：補做甘露醇和山梨醇試驗，沙門氏菌靛基質陽性變體兩項試驗結果均為陽性，但需要結合血清學鑒定結果進行判定。反應序號A3：補做ONΜG。ONΜG陰性為沙門氏菌，同時賴氨酸脫羧酶陽性,甲型副傷寒沙門氏菌為賴氨酸脫羧酶陰性。必要時按表5進行沙門氏菌生化群的鑒別。表5沙門氏菌屬各生化群的鑒別項目ⅠⅡⅢⅣⅤⅥ衛(wèi)矛醇＋＋－－＋－山梨醇＋＋＋＋＋－水楊苷－－－＋－－ONΜG－－＋－＋－丙二酸鹽－＋＋－－－KCN－－－＋＋－注：＋表示陽性;－表示陰性。如選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)，可根據(jù)5.4.1的初步判斷結果，從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當?shù)木鷳乙海褂蒙b定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)進行鑒定。結果與報告綜合以上生化試驗的結果，報告25g（mL）樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。2.2.4金黃色葡萄球菌檢驗設備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設備外，其他設備和材料如下：恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃。、冰箱：2℃～5℃、恒溫水浴箱：37℃～65℃、天平：感量0.1g、均質器、振蕩器。無菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭。無菌錐形瓶：容量100mL、500mL。無菌培養(yǎng)皿：直徑90mm。注射器：0.5mL。pH計或pH比色管或精密pH試紙。培養(yǎng)基和試劑10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯。7.5%氯化鈉肉湯。血瓊脂平板。Baird-Parker瓊脂平板腦心浸出液肉湯(BHI)。兔血漿。稀釋液：磷酸鹽緩沖液。營養(yǎng)瓊脂小斜面。革蘭氏染色液。無菌生理鹽水操作步驟.1樣品的處理稱取25g樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌均質杯內，8000r/min～10000r/min均質1min～2min，或放入盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min～2min。若樣品為液態(tài)，吸取25mL樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌錐形瓶(瓶內可預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠)中，振蕩混勻。.2增菌和分離培養(yǎng)將上述樣品勻液于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉肉湯中呈混濁生長，污染嚴重時在10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯內呈混濁生長。將上述培養(yǎng)物，分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板，血平板36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。Baird-Parker平板36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h或45h～48h。金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上，菌落直徑為2mm～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落有似奶油至樹膠樣的硬度，偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落；但無混濁帶及透明圈。長期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產生的黑色較淡些，外觀可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落較大，圓形、光滑凸起、濕潤、金黃色（有時為白色），菌落周圍可見完全透明溶血圈。挑取上述菌落進行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗。.3鑒定染色鏡檢：金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列呈葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，直徑約為0.5μm～1μm。血漿凝固酶試驗：挑取、Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1個或以上，分別接種到5mLBHI和營養(yǎng)瓊脂小斜面，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。取新鮮配置兔血漿0.5mL，放入小試管中，再加入BHI培養(yǎng)物0.2mL～0.3mL，振蕩搖勻，置36℃±1℃溫箱或水浴箱內，每半小時觀察一次，觀察6h，如呈現(xiàn)凝固（即將試管傾斜或倒置時，呈現(xiàn)凝塊）或凝固體積大于原體積的一半，被判定為陽性結果。同時以血漿凝固酶試驗陽性和陰性葡萄球菌菌株的肉湯培養(yǎng)物作為對照。也可用商品化的試劑，按說明書操作，進行血漿凝固酶試驗。結果如可疑，挑取營養(yǎng)瓊脂小斜面的菌落到5mLBHI，36℃±1℃培養(yǎng)18h～48h，重復試驗。葡萄球菌腸毒素的檢驗：未檢出金黃色可疑食物中毒樣品或產生葡萄球菌腸毒素的金黃色葡萄球菌菌株的鑒定，應按附錄B檢測葡萄球菌腸毒素。.4結果與報告結果判定：符合5.2.3、5.3，可判定為金黃色葡萄球菌。結果報告：在25g（mL）樣品中檢出或葡萄球菌。2.2.4菌落總數(shù)樣品的稀釋固體和半固體樣品：稱取25g樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質杯內，8000r/min～10000r/min均質1min～2min，或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min～2min，制成1:10的樣品勻液。液體樣品：以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質10倍系列稀釋選擇2個～3個適宜稀釋度的樣品勻液，各取1mL分別加入無菌培養(yǎng)皿內培養(yǎng)計數(shù)各平板菌落數(shù)計算菌落總數(shù)每皿中加入15mL～20mL平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻報告用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支無菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。按上述操作程序，制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1mL無菌吸管或吸頭。根據(jù)對樣品污染狀況的估計，選擇2個～3個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進行10倍遞增稀釋時，吸取1mL樣品勻液于無菌平皿內，每個稀釋度做兩個平皿。同時，分別吸取1mL空白稀釋液加入兩個無菌平皿內作空白對照。培養(yǎng)瓊脂凝固后，將平板翻轉，36±1℃℃培養(yǎng)48h±2h。水產品30±1℃培養(yǎng)72h±3h。如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約4mL），凝固后翻轉平板，按6.2.1條件進行培養(yǎng)。菌落計數(shù)可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位（colony-formingunits，CFU）表示。選取菌落數(shù)在30CFU～300CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300CFU的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應采用兩個平板的平均數(shù)。其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數(shù)。當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。結果與報告若只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內，計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應稀釋倍數(shù)，作為每g（mL）樣品中菌落總數(shù)結果。計算：…………………（1）式中：N——樣品中菌落數(shù)；∑C——平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和；n1——第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板個數(shù)；n2——第二稀釋度（高稀釋倍數(shù)）平板個數(shù)；d——稀釋因子（第一稀釋度）。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU，則對稀釋度最高的平板進行計數(shù)，其他平板可記錄為多不可計，結果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU，則應按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU～300CFU之間，其中一部分小于30CFU或大于300CFU時，則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。菌落總數(shù)的報告菌落數(shù)小于100CFU時，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。7.2.2菌落數(shù)大于或等于100CFU時，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2位數(shù)字，后面用0代替位數(shù)；也可用10的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù)，則報告菌落蔓延。若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結果無效。稱重取樣以CFU/g為單位報告，體積取樣以CFU/mL為單位報告。2.2.5大腸菌群測定范圍木標準規(guī)定了食品中大腸菌群的測定方法。本標準適用于各類食品中大腸菌群的測定。儀器和試劑冰箱:0℃-4℃。恒溫培養(yǎng)箱:36℃士1℃。恒溫水浴鍋:46℃士1℃.顯微鏡:10X~100X。均質器或滅菌乳缽。架盤藥物天平:0g-500g,精確至0.5g.滅菌吸管1mL(具0.01mL刻度),10mL(具0.1mL刻度)。滅菌錐形瓶:500mL.滅苗玻璃珠:直徑約5mm.滅菌培養(yǎng)皿:直徑90mm.滅苗試管:16mm×160mm.滅菌刀.剪子、攝子等。培養(yǎng)基和試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管。伊紅美藍瓊脂平板。乳糖發(fā)酵管。EC肉湯。磷酸鹽緩沖液.0.85%滅菌生理鹽水.革蘭氏染色液。操作步驟.1檢樣稀釋以無菌操作將檢樣25g（mL)放于含有225ml，滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅茵玻璃瓶內(瓶內預置適當數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內，經充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質器，以8000r/min~10000r/min的速度處理1min，做成1：10的均勻稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注人含有9ML滅菌內，振搖試管混勻，做成1：100的稀釋液。另取1mL滅菌吸管，按上條操作依次做10倍遞增稀釋液，每遞一次，換用1支1ml滅菌吸管。根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或對檢樣污染情漢的估計，選擇三個稀釋度，每個稀釋度，接種三管。.2乳糖發(fā)酵試驗將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內，接種量在1mL以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管，1mL以及1mL以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種三管，置36℃士1℃溫箱內，培養(yǎng)24h士2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產氣，則可報告為人腸菌群陰性，如有產氣省，則按下列程序進行。.3分離培養(yǎng)將產氣的發(fā)酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃士1℃溫箱內，培養(yǎng)18h-24h，然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實試驗。.4證實試驗在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1個~2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，置36℃士1℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24h士2h，觀察產氣情況。凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。.5報告根據(jù)證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN檢索表，報告每100mL(g)大腸菌群的MPN值..6糞大腸菌群(Faecalcoliform)用接種環(huán)將所有產氣的乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)物(見4.2)轉種于EC肉湯管內，置44.5℃士0.2℃水浴箱內(水浴箱內的水面應高于EC肉湯液面)，培養(yǎng)24h士2h，經培養(yǎng)后，如所有EC肉湯管均不產氣，則可報告為陰性；如有產氣者，則將所有產氣的EC肉湯管分別轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，置培養(yǎng)18h-24h，凡平板上有典型菌落者，則證實為糞大腸菌群陽性。結果報告根據(jù)證實為糞大腸菌群的陽性管數(shù)，查MPN檢索表，報告每100mL（g）糞大腸菌群的MPN值（見表1）。表1大腸菌群最可能數(shù)（MPN）檢索表陽性管數(shù)MPN100mL（g）95%可信限1mL（g）×30.1mL（g）×30.01mL（g）×3下限上限000000000123<30306090<590000011110123306090120<51300000222201236090120160000033330123901301601901111000001234070110150<51020021011111111012370110150190103023036011112222012311015020024030360111133330123160200240190222200000123901402002601030360370222222220123210280350420401004701500222233330123290360440530333300000123230390640950407015012001300380033332222012343075012001600701403002100230038003333222201239301500210029001503003503800440047003333333301232400460011000≥240003607101500130002400048000注1：本表采用3個稀釋度[1mL(g)、0.1mL(g)和0.01mL(g)]，每稀釋度三管。注2：表內所列檢樣量如改用10mL(g)、1mL(g)和0.1mL(g)時，表內數(shù)字應相應降低10倍；如改用0.1mL、0.01mL（g）和0.001mL(g)時，其余可類推。3.試劑和儀器清單3.1試劑清單試劑名稱規(guī)格數(shù)量蔗糖500g2葡萄糖500g2D—果糖25g2乳糖500g2淀粉酶250g2胰蛋白酶250g2瓊脂粉100g2牛肉膏500ml2酵母膏500ml2大豆蛋白胨500ml2蛋白胨500ml2胰蛋白胨500ml2胰酪胨500g2植物蛋白胨500g2多胨500g2氫氧化鈉500g2品紅25g4異戊醇500ml2乙醇500ml2石蕊25g3乙醚500ml2濃硫酸500ml2甲基紅25g4硫酸銅、500g4硫酸鉀500g4硼酸250ml4溴甲酚綠25ml2酚酞25ml3鹽酸500ml3磷酸500ml23.2玻璃儀器清單儀器名稱規(guī)格（ml）需要量（個）燒杯100104004錐形瓶250105005漏斗2分液漏斗2鑷子4吸管110210510105205255玻璃棒5滅菌刀或剪子5橡膠管5試管18*18010燒瓶5003酸、堿式滴定管50各3量筒102502100525055002溫度計100℃5酒精燈5表面皿中號5平皿90cm100容量瓶10450510010250550023.3設備清單儀器名稱型號數(shù)量雙數(shù)顯振蕩培養(yǎng)箱BS-1E型3烘箱SX2-2.5-10型5高壓蒸汽滅菌鍋MLS-3750型3干熱滅菌器MOV-112S90L/AT型5自動菌落計數(shù)儀迅數(shù)AS1型5微生物采樣器JWL-I型5臥式超低溫保存箱MDF-293型5冰箱西門子KG23E6710°C-4°C生化培養(yǎng)箱SPX-250B型205L4014±1°C，25°C～60°C生物顯微鏡XS2-3G40~1600X2004140143干燥消毒箱GRX202PH計33.4化驗室的月試劑消耗量例：以金黃色葡萄球菌檢驗中的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量計算，每次實驗所消耗的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量為225ml,每周做一次檢測項目的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量為225ml,則每月使用的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量為量為900ml，規(guī)格為1000ml瓶，折合得使用10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯為0.9瓶.4.化驗室的平面布置圖及設計說明4.1化驗室設置設計的化驗室包括：微生物化驗室、辦公室、緩沖間、無菌室、天平室、設備室、更衣室。4.2化驗室平面圖4.3設計說明4.3.1微生物化驗室布局微生物化驗室是按2：1的比例尺來進行設計的。整個微生物化驗室總面積為（長3000cm×寬2000cm），化驗室操作臺坐落在微生物化驗室的西南角，操作臺（長1234cm×寬276cm），操作臺兩邊各設2個水槽，操作臺上配有均質器、水浴鍋、通風櫥（長334cm×寬276cm），有毒或刺激性藥物的取用在通風櫥內操作，操作臺旁電源開關一組，電插座2個。整個化驗室的所有門都是防火防腐蝕的,門統(tǒng)一規(guī)格為141cm,向內推開式，化驗室內各功能室采用隔板做墻隔開，以減小占地面積,隔板也為防火防腐蝕的，采用耐火或不易燃材料建筑；電路電線埋入墻體內，以免遭氧化及腐蝕。操作區(qū).1整潔：微生物操作區(qū)是各種病原菌相對集中的地方,為了減少粉塵流動,防止交叉污染,操作區(qū)應與外界分開。操作區(qū)地面用專用拖把每天拖1次,每周用消毒劑擦洗一次。每天早上工作前,用紫外線照射30min，或每天工作后,用紫外線照射60min，對整個操作區(qū)進行消毒,下午工作結束后用消毒液消毒工作臺面,以保證工作環(huán)境的安全清潔。.2光線：細菌培養(yǎng)的細小菌落及血清試驗凝聚顆粒的觀察,都需要有充足的光線。操作區(qū)除設置常規(guī)照明燈外，還必須安裝操作臺燈,以保證試驗結果的正確判斷。.3溫度和濕度：由于無菌操作的要求,實驗過程中經常使用酒精燈，因此,微生物學實驗室不能安裝吊扇。為了達到實驗所需的適宜溫度,尤其是滿足某些儀器對溫度濕度的要求,實驗室應安裝空調。.4污染物處理：操作區(qū)備有消毒缸,用于處理沾有活菌的玻片等污染物品。檢驗剩余的標本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點安全防止，經消毒滅菌處理后再洗滌或丟棄。無菌室布局無菌室面積為（長782cm×寬925cm），無菌室溫度控制在17℃～25℃；溫度波動小于0.5℃/h；濕度50～75%，無菌室完全封閉，進出無菌室至少要經兩道門,中間隔有緩沖間，無菌室與外間設置一個可開的窗口，用于傳遞器具。第一緩沖間面積為(長782cm×寬545cm)，第二緩沖間面積為（長782cm×寬230cm）,最后才進到無菌操作室,無菌操作室內還設有無菌操作臺（長782cm×寬275cm）,位于室中間，臺面材料為具有耐酸，耐堿以及剛度好的塑料材料，地板為防滑地被磚、潔凈、干燥，室內還應設有空調,滅火器。.1無菌室必須保持整潔，無菌室為10000級（局部100級）清潔區(qū)，采用紫外燈配合臭氧滅菌，工作人員進入無菌室應換專用鞋、專用衣。無菌室使用前必須用紫外線消毒30min，操作結束后清潔臺面，再用紫外線消毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸。4.3.2辦公室布局辦公室面積為（長782cm×寬725cm）,應設有辦公桌(長260cm×寬155cm)、冰箱（長343cm×寬171cm）、空調、滅火器、桌上擺有電腦、打印機以及相關的檢驗書籍和文件等，辦公桌旁設電源開關一組，電插座6個。4.3.3天平室布局天平室面積總為（長741cm×寬750cm），天平室有雙層玻璃和窗簾，室內設有滅火器、空調、天平臺（長423cm×寬316cm）,各天平之間有合理的間距,各不影響,天平臺旁設電源開關一組，電插座1個。4.3.4設備室布局設備室面積為（長741cm×寬675cm），內設有滅菌鍋、冰箱、低溫保存箱、培養(yǎng)箱,還設有電源插座各一個。4.3.5更衣室布局更衣室分為男女更衣室,總面積為（長903cm×寬741cm），男更衣室（長460cm×寬354cm）,女更衣室（長460cm×寬387cm），男女更衣室間,各設有小型衣柜（長460cm×寬130cm），衣桿、水龍頭1個、吹風器1臺以及酒精消毒器1臺，對工作人員進行工作前消毒。4.3.供電化驗室建筑的供電應留有足夠的負荷余量，設施應安全可靠，一般采用雙路供電，不具備雙路供電條件的，應設置自備電源。有特殊要求的，應配備不間斷電源。各個實驗室配置三相(338v)和單相(220v)供電路線、設置電源總開關、總開關上均安裝上漏電保護措施（對電冰箱、等長期運行電器不受總開關控制），穩(wěn)定供電電壓嗎，配置足夠供電電源插座，電線路采用護套暗鋪，且在走廊配置防爆燈等。為保障實驗室的正常工作，電源的質量、安全可靠性及連續(xù)性必需保證。一般用電和實驗用電必須分開，對一些精密、貴重儀器設備要求提供穩(wěn)壓、恒流、穩(wěn)頻、抗干擾的電源，必要時須建立不中斷供電系統(tǒng)，還要配備專用電，如不間斷電源(UPS)等。4.4供水供水要求為自來水和專用水，水壓不夠要設有水箱。排水中若有酸性或堿性物質，要標明濃度和數(shù)量；若有放射性物質要注明有多少種放射性物質和濃度。4.5通風 實驗室經常由于實驗時間長，人員多和實驗過程中產生一些有害氣體，造成空氣污濁，對人體不利。為了防止實驗室工作人員吸入或咽入一些有毒的、可致病的或毒性不明的化學物質和有機氣體，實驗室中應有良好的通風，必要時應設空調。5.化驗室人員配制和組織管理5.1人員配置：化驗室主任、技術負責人、質量負責人、儀器設備管理負責人、試劑管理負責人、檢驗人員（共10人）5.2化驗室人員管理5.2.1所有化驗員需培訓考核合格后持證上崗，熟悉化驗專業(yè)知識。5.2.2掌握采取樣品的性質，熟悉采樣方法，會使用采樣工具。5.2.3掌握分析所用各種標準溶液的配置、儲存、發(fā)放程序。5.2.4掌握動火分析方法、指標、采樣時間、樣品保留等必備知識。5.2.5掌握控制分析、產品分析、原料分析方法以及控制指標、結果判斷。5.2.6掌握包裝物檢查管理規(guī)定、計量檢斤規(guī)程及重量計算方法。5.2.7化驗員需認真填寫原始記錄、檢驗報告，能夠獨立解決工作中的一般技術問題。5.2.8嚴格按程序和實施細則進行取樣，按操作規(guī)程使用儀器設備，對所使用的儀器設備做到按要求定期保養(yǎng)，使用后及時填寫使用情況記錄。5.2.9努力專研業(yè)務，參加各項培訓和學術交流，積極參加對比試驗，不斷提高檢驗水平。5.2.10檢驗工作要做到安全、文明、衛(wèi)生規(guī)格化，做好安全保密工作，遵章守法，積極完成各項檢驗工作。5.3儀器管理要求5.3.1精密儀器的管理精密儀器應按其性質、靈敏度、精密程度，固定放置的房間和位置，不得隨意挪動，放置精密儀器的房間應與化學處理室隔開。以防止腐蝕性氣體及水汽腐蝕儀器。烘箱、高溫爐應放置在不燃的水泥臺或堅固的鐵架上，天平及其它精密儀器應放在防震、防曬、防潮、防腐蝕的房間內，小件儀器用完收藏儀器柜中。精密儀器應設專人保管，建立技術檔案，裝入全部技術資料，如：說明書、調試記錄、檢定記錄、維修記錄等情況，貴重的精密儀器（電子天平）每使用一次要簽名登記一次，對某種儀器沒有使用過的人，最初幾次使用應該有專人指導，不能自己拔弄。精密儀器的購置、拆箱、驗收、安裝、調試都應專人負責。未經批準不得任意拆卸。精密儀器均須標明責任保養(yǎng)人。保養(yǎng)人應按儀器的保養(yǎng)要求及時做好儀器的清潔保養(yǎng)工作。精密儀器使用、維護保養(yǎng)嚴格按相關作業(yè)指導書進行。5.3.2玻璃儀器的管理按玻璃儀器品種、規(guī)格、用途建立玻璃儀器使用臺帳。臺帳中應對玻璃儀器的收發(fā)、庫存、領用、破損實行登記制度，臺帳的管理指定專人負責，并每月進行匯總。對匯總結果異常的應說明原因。玻璃儀器按品種、規(guī)格進行分類存放并標識。標識的內容應包括品種、規(guī)格、數(shù)量、責任人等，玻璃儀器的領用由管轄該玻璃儀器的責任人負責和盤存，并將盤存結果每月報告一次對盤存異常的應說明原因。玻璃儀器為易碎品，使用、洗滌時應輕拿輕放，以防破碎。玻璃儀器的使用、校正、洗滌和干燥按相關作業(yè)指導書進行。5.3.3化學試劑的管理固體試劑和液體試劑應分開存放，固定試劑應按分類編號順序存放和造冊，以便查找。易燃易爆試劑應貯于鐵柜（壁厚1mm以上）中，柜子的頂部都有通風口。嚴禁在化驗室存放大于20L的瓶裝易燃液體。易燃易爆藥品不要放在冰箱內（防爆冰箱除外）。

相互混合或接觸后可以產生激烈反應、燃燒、爆炸、放出有毒氣體的兩種或兩種以上的化合物稱為不相容化合物，不能混放。這種化合物系多為強氧化性物質與還原性物質。

腐蝕性試劑宜放在塑料或搪瓷的盤或桶中，以防因瓶子破裂造成事故。

要注意化學藥品的存放的期限，一些試劑在存放過程中會逐漸變質，甚至形成危害。

藥品柜和試劑溶液均應避免陽光直曬及靠近暖氣等熱源。要求避光的試劑應裝于棕色瓶中或用黑紙或黑布包好存于暗柜中。

發(fā)現(xiàn)試劑瓶上標簽掉落或將要模糊時應立即貼好標簽。無標簽或標簽無法辯認的試劑都要當成危險物品重新鑒別后小心處理，不可隨便亂扔，以免引起嚴重后果。

化學試劑定位放置、用后復位、節(jié)約使用，但多余的化學試劑不準倒回原瓶。5.4化驗室安全管理5.4.1所有藥品、標樣、溶液都應標簽，絕對不能在容器內裝入與標簽不相符的物品。5.4.2禁止使用化驗室器皿盛裝食物，也不能用茶杯、食具盛大裝藥品，更不能用燒杯當茶具使用。5.4.3稀釋硫酸時，必須在硬質耐熱燒杯或錐形瓶中進行，只能將濃硫酸慢慢注入水中，邊倒邊攪拌，溫度較高時，應等其冷卻或降溫后再進行，嚴禁將水倒入硫酸中。5.4.4開啟易揮發(fā)液體試劑之前，先將試劑瓶放在自來水中冷卻幾分鐘，開啟時瓶口不要對人，最好在通風櫥中進行。5.4.5易燃溶劑加熱時，必須在水浴中進行，避免明火。5.4.6裝過強腐蝕性、可燃性、有毒或易爆物品的器具，操作者應親手清洗干凈，以防危及他人安全。5.4.7移動、開啟大瓶液體時，不能直接放在水泥地板上，最好用紙板或其他墊板墊好，嚴禁開瓶時錘砸、敲打，以防破裂。5.4.8取下正在沸騰的溶液時，應用瓶夾類先輕搖動以后取下，以免濺出傷人。5.4.9將玻璃棒、玻璃管、溫度計等插入或拔出膠塞，膠管時均應墊有棉布。且不可強行插入或拔出以免折斷刺傷人。5.4.10開啟高壓氣瓶時應緩慢，并不得將出口對人。配制藥品或試驗中能放出HCN、NO2、H2S、SO3、Br2、NH3及其他有毒和腐蝕性氣體時應通風櫥中進行?；炇抑袘獋溆袪C傷藥品等，消防器材和勞保用品。要建立安全制度和安全登記卡，健全崗位責任制，每天下班前檢查水、電、窗、門等，確保安全。操作壓力設備或其他檢測儀器時，要嚴格按照作業(yè)指導書的要求進行，用電應遵守公司《安全用電規(guī)程》進行。5.5檢驗過程的管理5.5.1對樣品的采集基本要求是采取的樣品應具有代表性和有效性，做好標記。5.5.2檢驗過程中對試劑的添加需謹慎，添加時不能混淆，需做好標記。根據(jù)檢驗方法要求進行準備，檢查儀器設備、環(huán)境條件的樣品狀況。5.5.3檢驗過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象和數(shù)據(jù)要及時做好記錄，因各種原因（如停電、停水、儀器發(fā)生故障、樣品問題等）造成檢驗工作中斷且影響檢驗質量，應做好相應記錄向上級匯報。6.化驗室的崗位責任制6.1化驗室的主要負責人職能6.1.1在技術處的領導下，對化驗室生產、行政管理全面負責。確保及時、準確地提供檢驗數(shù)據(jù)。實驗工作質量應納入主任任期目標責任制。6.1.2貫徹執(zhí)行黨和國家的方針、政策和法規(guī)。對上級主管部門負責，6.1.3主持召開室務會議，組織對實驗室的生產、行政、計劃、安全、生活等有關問題作出決定。6.1.4領導和組織職工認真執(zhí)行各項規(guī)章制度，制定并督促檢查本室各類人員崗位職責的執(zhí)行，并主持制定化驗室的年度計劃，主持制定和修改各項規(guī)章制度。6.1.5根據(jù)公司下達的實驗任務，結合化驗室的具體情況，制訂年度、季度和月份實驗工作計劃，制訂完成計劃措施，組織計劃實施，確保按時完成任務。6.1.6組織制訂儀器、設備申請計劃、監(jiān)督日常儀器維護保養(yǎng)工作、審核材料、試劑藥品的購買、領用計劃。6.1.7抓好經濟管理，搞好經濟核算和生產定額管理，組織職工開展增產節(jié)約和提合理化建議活動。6.1.8領導和組織職工搞好安全文明生產，做好環(huán)境保護工作，努力改善實驗工作條件。6.1.9對化驗室人員的培訓、提拔、晉升、獎懲，向主管領導提出建議。并定期向公司匯報工作。6.1.10對因管理不善，對儀器設備、環(huán)境條件未達到規(guī)定要求而隱瞞不報，繼續(xù)出具檢測報告造成的檢驗過程中的質量事故負責；對不安全的隱患隱瞞不報，繼續(xù)組織生產造成的不利影響負責；對非意外情況（停電、停水等）造成本室沒有按照計劃完成各項生產任務負責。6.2辦公室負責人職責6.2.1在化驗中心負責人領導下，管理辦公室全面工作。6.2.2負責化驗中心文字、數(shù)據(jù)材料的收集匯總，并負責起草工作總結進行匯報。6.2.3監(jiān)督辦公室人員工作，組織辦公室全體人員及時、準確地完成產品檢驗文字、數(shù)據(jù)的整理任務。6.2.4樹立全局觀念、提高服務意識，搞好化驗室辦公室人員之間的協(xié)調配合，及時幫助窗口解決工作中出現(xiàn)的問題。6.3技術負責人職責6.3.1主持本項目的技術、質量管理工作，對檢驗技術、產品質量全面負責。6.3.2在檢驗中嚴格執(zhí)行現(xiàn)行國家食品安全法律、法規(guī)、規(guī)范、強制規(guī)范和標準，嚴格按計劃進行。6.3.3組織人員自審、會審，及時解決檢驗中出現(xiàn)的各種技術問題。6.3.4負責各項技術交底工作，組織技術人員、檢驗人員學習貫徹技術規(guī)程、規(guī)范、質量標準，并隨時檢查執(zhí)行情況。6.3.5負責本檢驗的技術文件及技術資料查閱。6.3.6督促檢查檢驗人員的檢驗技術質量，確保產品質量。6.3.7主持檢驗質量會議，對質量問題提出整改措施并監(jiān)督及時處理。6.3.8對檢驗技術人員的工作進行考核，可根據(jù)技術人員的工作表現(xiàn)提出獎懲意見，對不稱職的可建議退回公司。6.3.9搞好團結、協(xié)作、配合，完成領導交辦的其它任務。6.4質量負責人職責6.4.1認真學習和貫徹有關質量方針、政策、法律和法規(guī)；6.4.2帶頭學習理解質量管理有關標準、知識、質量管理基本原則，對室內工作人員質量管理意識教育；6.4.3負責落實化驗室的質量職能,完成工作任務,對化驗室的工作質量負責；6.4.4主持室內有關質量工作會議；6.4.5負責批準發(fā)布由室內工作人員編制的僅涉及化驗室工作的質量作業(yè)指導文件。6.5檢驗人員職責6.5.1按時、按量、保質完成產品質量安全檢驗任務。6.5.2熟悉檢驗標準，熟練掌握檢驗和儀器設備使用技術。6.5.3了解儀器設備的構造、原理和性能，遵守檢驗操作規(guī)程，防止發(fā)生意外事故。6.5.4檢驗數(shù)據(jù)真實、準確、完整，數(shù)據(jù)記錄清晰、數(shù)據(jù)處理及時，校核、審核準確。6.5.5嚴格遵守保密制度，為保證檢驗數(shù)據(jù)客觀、公正，有權拒絕行政干預。6.5.6做好儀器設備的保管、使用、保養(yǎng)工作參考文獻食品伙伴網、百度資料、圖書館書籍、啤酒百科謝辭

附錄資料：不需要的可以自行刪除AK3+570通道施工組織設計編制依據(jù)1、實施性總體施工組織設計。2、《公路工程質量評定標準》（JTGF80/1—2004）。3、《公路橋涵施工技術規(guī)范》（JTG041—2000）。4、現(xiàn)場踏勘。工程概況分項工程名稱：⑴AK3+570通道總體（編號：DWD-2-1-34-001）⑵AK3+570通道基礎及下部構造（編號：DWD-2-1-34-002）⑶AK3+570通道上部構造預制、安裝或澆筑（編號：DWD-2-1-34-003）⑷AK3+570通道鋼筋加工及安裝（編號：DWD-2-1-34-004）⑸AK3+570通道人行通道（編號：DWD-2-1-34-005）⑹AK3+570通道錐坡（編號：DWD-2-1-34-006）⑺AK3+570通道欄桿（編號：DWD-2-1-34-007）⑻AK3+570通道臺背回填（編號：DWD-2-1-34-008）2、AK3+570鋼筋砼通道斷面為9.0m×5.0m,原設計長度為33.20m，作為過人和交通用，頂最大填土高度1.69米.后根據(jù)實際情況,為了和改線順接,變更為斜交正做,斜交角度為10。。3、主要工作內容：挖基土方3611m3，C20混凝土涵身基礎64.9m3，C35混凝土框架涵身825.7m3，C30混凝土涵內路面261.3m3，C30混凝土洞口翼墻46.5m3。4、涵洞所需水取工地附近地下水，砂來源于江東砂料場?；炷敛捎脴I(yè)主指定的商品混凝土。工地用電和照明用電采取了和灌南小學協(xié)商解決。三、施工準備1、熟悉圖紙，仔細對施工圖紙進行復查，領會設計意圖。2、清除雜物，整理場地；3、清查安裝主要的施工機具；4、安裝好施工現(xiàn)場水電供應設施；5、合理組織施工，做到責任明確，分工合理；6、準備足夠的施工所需用的材料。四、施工平面布置在現(xiàn)場搭建臨時倉庫、變電房等臨時設施。平整場地改移縣道，接通施工用電、用水，具體施工場地平面布置見詳附圖1。五、施工方案及方法1、施工放樣。仔細對施工圖紙進行復查，領會設計意圖。根據(jù)圖紙確定的構造物的位置和標高，準確計算結構物中樁坐標和軸線方向，然后根據(jù)計算的具體位置進行施工放樣，為便于開挖后的檢查校核，基礎軸線控制樁應延長至基坑外加以固定。放樣完成后，根據(jù)基礎的結構尺寸放出結構基礎的邊線，申請駐地監(jiān)理工程師復查，得到確認之后，方可進行基坑開挖。2、基坑開挖基坑開挖采用機械人工配合的方法進行施工。開挖時嚴格按照《公路橋涵施工技術規(guī)范》要求施工，根據(jù)施工技術規(guī)范要求，按基礎設計圖，四邊分別放寬1米，按1:1放坡，先用挖掘機開挖，待接近基坑設計標高時預留20cm深度，利用人工清理基坑底部，確保不擾動基底地質層。人工修整完后，對基底軸線、高程、平面尺寸進行自檢，然后報監(jiān)理工程師驗收，并由試驗室對原地基承載力進行動力觸探試驗（設計要求基底容許應力不小于150KPa），若地基承載力不能滿足要求，報監(jiān)理工程師審核變更基底處理方案；若滿足設計要求，平整度達到規(guī)范要求后報請監(jiān)理工程師驗收簽認。然后開始鋪筑砂礫墊層，砂礫墊層為壓實的連續(xù)材料層，粒徑不大于40㎜，厚度為30㎝，砂礫墊層攤鋪后用夯機分層壓實，密實度達到98%以上。所開挖的各種雜土清運到棄土堆存放。開挖過程中根據(jù)開挖深度及土質情況注意觀察坑壁的穩(wěn)定性，及時采取有效措施加強坑壁支擋，以保證施工安全?；娱_挖過程中，在坑底基礎范圍之外設置集水井并沿坑底周圍開挖排水溝，使水流入坑內，然后用潛水泵將水抽出排入附近溝渠中?；娱_挖邊坡頂設置擋水圈。3、砼基礎澆筑：⑴重新恢復測量樁，按施工圖紙尺寸支架側面模板。模板采用竹節(jié)板木支架，此時應注意水溝位置的模板安裝問題。⑵按設計并經監(jiān)理工程師批準的砼配合比使用C20商品砼。砼采用運輸車運至現(xiàn)場，并在現(xiàn)場安排專人控制原材料用量及砼坍落度。⑶砼振搗采用先用插入式振搗器振搗，再用平板式振搗器，振搗時間為15-20s，防止漏振或過振。待其初凝后，立即進行灑水養(yǎng)護。⑷沉降縫要貫穿整個基礎,且要順直.4、主通道底板砼澆筑：⑴施工放樣：待基礎砼達到70%以上強度后，即在墊層面上準確測設出通道底板位置。⑵模板制作與安裝：底板與側墻的施工縫考慮設在距底板頂面45cm處。按施工圖紙支架底板模板，模板采用竹節(jié)板、鋼管支架。模板要求安裝穩(wěn)固，表面平整、緊密。沉降縫先采用全斷面固定聚笨乙烯泡沫板，內側B/2處的沉降縫防水材料待砼具有一定強度后再安裝。⑶底板鋼筋制安：嚴格按施工圖紙尺寸下料，按圖示間距安放、綁扎，主筋下墊4cm砂漿塊以控制砼保護厚度。綁扎時注意在無彎起筋的骨架①中布置角隅加強筋箍筋，以及準確預埋通道側墻鋼筋。底板與側墻施工縫處應焊接定位鋼筋夾固定2mm厚的鍍鋅鋼板以作為施工縫的防水措施。上述工作全部完成后報請監(jiān)理工程師檢查認可后方能澆筑底板砼。⑷底板砼澆筑：砼采用商品混凝土，砼運輸車運輸至現(xiàn)場，砼泵車澆筑。坍落度控制在10-30cm之間，并安排專人對坍落度等進行自檢。砼澆筑時水平分層、斜向分段，每一單層厚度不超過30cm，且砼澆筑必須在前一段（層）砼初凝前完成，避免出現(xiàn)工作縫。砼振搗采用插入式振搗棒結合平板式振搗器，振搗時間為15-20s，防止漏振或過振，尤其是一些邊角部位。當砼澆至頂面時，用水準儀輔以尼龍繩控其高程，用泥鏝等工具把表面收平、壓光，上接側墻的施工縫做成企口式，以利施工縫位置銜接牢固。待砼初凝后立即進行覆蓋灑水養(yǎng)護。⑸底板砼施工完成且具有一定強度，立即組織施工鋪裝人行道預制板。人行道板具體施工工藝同底板。鋪裝完成以后,采用現(xiàn)場焊接的方法制作安裝護欄。5、通道側墻、頂板施工：⑴施工放樣：待底板砼達到70%以上強度后，立即恢復通道側墻位置樁，以指導側墻及頂板模板制作與安裝。⑵側墻、頂板鋼筋制安：根據(jù)圖示尺寸，在預埋鋼筋上綁扎鋼筋骨架。鋼筋骨架沿通道縱向按①②③④①②③④的順序循環(huán)綁扎（每排中心間距為12.5cm），主筋綁扎時墊4cm砂漿墊塊以保證砼保護層的厚度。安裝時仔細檢查尺寸、位置。⑶模板連接安裝：按照圖紙設計結構尺寸進行放樣。模板采用大型組合模板、型鋼支撐。模板安裝根據(jù)結構要求順序進行，澆筑混凝土前對支撐板面進行檢查，清除模板內污物，并在模板內面涂刷脫模劑，不得使用易粘在混凝土上或使混凝土變色的油料。支立模板時為了防止模板移位變形，支側模時在模板外設立支撐固定，涵身的側模設立對拉桿固定，澆筑在混凝土中的拉桿，按拉桿拔出的要求設計，拉桿外套塑料管，模板拆除后拔出重復利用。模板安裝完畢后，為保證位置正確，必須對其平面位置、平整度、垂直度、頂部標高、節(jié)點聯(lián)系及縱橫向穩(wěn)定性進行自檢，合格后方可報監(jiān)理工程師抽檢，監(jiān)理工程師認可后方能澆筑。混凝土澆筑時，發(fā)現(xiàn)模板有超過允許偏差值的可能及時糾正。⑷側墻、頂板砼澆筑及養(yǎng)護：①涵洞混凝土采用商品混凝土，罐車運輸，砼泵車。砼澆注時，必須對運到施工現(xiàn)場的砼進行嚴格的檢查。如砼坍落度、和易性。②澆注前先對支架、模板、預埋件進行檢查，模板內的雜物、積水應清理干凈，模板如有縫隙必須填塞嚴密。③為了防止混凝土自高處向模內傾卸時發(fā)生離析，在澆注時，吊車傾卸高度不超過2米，通過串筒下落。④砼澆筑以設計沉降縫為單元格進行，根據(jù)沉降縫的設計寬度用塑料泡沫板加以隔開。砼澆筑時嚴格按照《公路橋涵施工技術規(guī)范》要求控制澆注層厚度，以一定的順序和方向分層澆筑，并在下層砼初凝前澆筑完成上層砼，做到按計劃、分段分層連續(xù)完成。⑤砼振搗由專業(yè)振搗工用插入式振動器進行。使用時，移動間距不應超過振動器作用半徑的1.5倍；與側模保持50～100mm的距離，并插入下層砼50～100mm；每次振搗完后徐徐提出振動棒。每一振動部位以不再冒出氣泡，表面呈現(xiàn)平坦、泛漿為止。⑥在澆筑過程中按照規(guī)范要求制作砼試件。⑦澆注后24h拆除模板，灑水覆蓋養(yǎng)護不少于7d。⑧混凝土澆筑過程中要按照設計要求摻加防裂纖維和減水劑。4、施工縫的處理：由于基礎、涵身分別澆注，施工縫應認真處理，施工縫的處理采用人工鑿除。在處理層混凝土澆筑完1-2天內，對其表面的水泥砂漿和松弱層進行拉毛，經鑿毛處理的混凝土面用水沖洗干凈，在澆筑次層混凝土前應對水平縫鋪一層厚度為1-20cm的1：2水泥砂漿，對于鋼筋砼、蓋板砼的現(xiàn)場澆注施工應連續(xù)進行，避免施工接縫，當涵身較長時，可沿長度方向分段進行，接縫應設在涵身沉降縫處。5、沉降縫的處理：沉降縫的設置根據(jù)設計圖紙洞身每墻4-6米設一道沉降縫，沉降縫的構造嚴格按施工圖執(zhí)行。沉降縫的設置必須上下貫通成一條垂線，基礎墻身根據(jù)沉降縫的設計長度分段澆筑。澆筑時先在沉降縫位置處用木板作擋塊，等到砼達到一定強度后，拆除木板擋塊，于沉降縫位置處填塞瀝青麻絮。6、出入口砌筑塊石在使用前必須澆水濕潤，表面如有泥土、水銹，應清洗干凈。砌筑第一層砌塊時，由于基底為黃粘土，必須碾壓達到95%的壓實度，形成比較好的整體性時，直接坐漿砌筑。砌體分層砌筑，各砌層的塊石高度應大致一致，外圈定位行