試驗三微生物血球計數(shù)板直接計數(shù)法

基本原實驗三血球計數(shù)板的使用及酵母菌的直接計數(shù)微生物血球計數(shù)板直接計數(shù)法＞目的要求此法是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接江I基本原實驗三血球計數(shù)板的使用及酵母菌的直接計數(shù)微生物血球計數(shù)板直接計數(shù)法＞目的要求此法是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接江I荔左。白荔系在一定的容積中的微生物的個體數(shù)目，然后推算出含菌數(shù)，包括死活細胞均被計算在內(nèi)，還有微小雜物也被計年在內(nèi)。這樣得出結(jié)果往往偏高。這種方法常用于形態(tài)個體較大的菌體或抱子.■計數(shù)板是一塊特制的厚玻璃片，坡片上有四個槽構(gòu)成三個平臺，中央平臺又由一短槽隔成兩半，其上各刻有一小方格網(wǎng)，每個方格網(wǎng)共分九個大格，中央的一大格作為計數(shù)用，稱為計數(shù)室.■計數(shù)室刻度有2種：一種是25中格X16小格，而另一種為16中格X25小格，它們都是由400個小格組成.每個大方格邊長為1mm,則每個大方格面積為lXl=lmm\蓋上蓋玻片后，載玻片與蓋玻片之間高度為0.1mm,所以每個計數(shù)室的體積為0.1X1X1=0.lmm\每個大格有400個小格，所以每個小方格體積為0.1/400=1/4000皿-1/4000,000mL■血球計數(shù)板的分區(qū)與分格*****■*#####例一1例一1大格=16中格二16X25小格二400小格例二1大格=25中格=25X16小格=400小格入材料與儀器:-1、待測樣品：酵母菌懸液-2、顯微鏡，血球計數(shù)板，接種環(huán)，蓋玻片等.四、方法與步驟:1.取潔凈的血球計數(shù)板，在計數(shù)室上面蓋上蓋玻片，2.取稀釋到一定程度（5—10個酵母/小格）酵母液，從蓋片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不能有氣泡。先在低倍錢下找到小方格網(wǎng)后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計數(shù),四、方法與步驟：3、如用16X25計數(shù)板，只計四個角上中方格的菌數(shù)。若是25X16的計數(shù)板，除計數(shù)四個角上的中格菌數(shù)外，還要計算中央中格的菌數(shù)。每個樣品重復(fù)計數(shù)2一3次.計數(shù)時應(yīng)不時調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體.4、位于格線上的酵母菌一般只計此格的上方線及左方線上的菌體.?5,計數(shù)方法.樣品中菌數(shù)/m占每小格平均菌數(shù)x4000,000x稀釋倍數(shù)，本實驗采用25x16規(guī)格，要求數(shù)這些方格中的全部小格即80個小格口設(shè)：每個中方格的菌數(shù)為A,則每小格平均菌數(shù)=(A^Aa+As+A^AgJ/eOAjlAiAjlA□.A稗囊中的菌數(shù)—1 』"4000,000X稀釋80結(jié)果記錄-微生物名稱 總菌數(shù) 個/ml第一個中格第二個中格第三個中格第四個中格第五個中格第一次測定第二次測定平均四、測定注意事項：1s測定時，酵母菌液要搖勻，防止酵母凝聚沉淀02、活酵母有芽殖現(xiàn)象，苦芽體達到母細胞大小的一半時，即可作為兩個菌體計數(shù)，若芽體小于母細胞，半時為1個酵母細胞口3、位于格線上的酵母菌般只計此格的上