實驗六消化道運動及小腸平滑肌特性精

實驗六消化道運動及小腸平滑肌特性精第1頁/共10頁實驗六、消化道運動及小腸平滑肌特性

第2頁/共10頁【目的要求】1、觀察胃腸道的各種形式的運動。2、通過觀察各種因素對離體小腸平滑肌運動的影響,加深對平滑肌生理特性的了解。3、學(xué)習(xí)動物離體組織器官灌流的實驗方法。第3頁/共10頁【基本原理】消化道平滑肌具有自動節(jié)律性，可以形成多種形式的運動，主要有：緊張性收縮、蠕動、分節(jié)運動及擺動。在整體情況下，消化道平滑肌的運動受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。兔的胃腸運動活躍且運動形式典型，是觀察胃腸運動的好材料。在一定時間內(nèi)，離體小腸平滑肌在適宜的環(huán)境中仍可保持其生理活性。本實驗將離體小腸置于模擬內(nèi)環(huán)境（離子成分、晶體滲透壓、酸堿度、溫度、氧分壓等方面類似于內(nèi)環(huán)境）中，觀察當(dāng)模擬內(nèi)環(huán)境因素發(fā)生變化時，離體小腸平滑肌運動的變化。該實驗方法不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性，而且還可用來測定微量化學(xué)物質(zhì)或藥物的生物學(xué)特性。第4頁/共10頁【動物、器材與試劑】（以下是每組所需的種類和數(shù)量）兔、臺氏液、1:10000腎上腺素、1:10000乙酰膽堿、1%CaCl2溶液、1mol/LHCl、1mol/LNaOH、恒溫平滑肌浴槽、二道生理記錄儀、張力換能器、哺乳動物手術(shù)器械一套、注射器、紗布、棉線、絲線、萬能支架、螺旋夾、雙凹夾、溫度計、細(xì)塑料管(或L形通氣管)、長滴管、增氧泵。第5頁/共10頁【方法與步驟】1、恒溫平滑肌槽裝置的準(zhǔn)備。向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入臺氏液至浴槽高度的2/3處。外部容器為水浴鍋加自來水。啟開電源，恒溫工作點定在38℃。將浴槽通氣管與增氧泵相連接，調(diào)節(jié)橡皮管上的螺旋夾，使氣泡一個接一個地通過中心管，為臺氏液供氧。2、正常情況下胃腸運動形式的觀察。向耳緣靜脈注射空氣(或用木棒猛擊兔的后腦部)使其致死，將兔背位固定于手術(shù)臺上，腹部剪毛后，沿正中線切開皮膚和腹壁，觀察相對正常情況下胃腸運動的形式，注意胃腸的蠕動、逆蠕動和緊張性收縮，以及小腸的分節(jié)運動等。在幽門與十二指腸的接合部可觀察到小腸的擺動。第6頁/共10頁3、標(biāo)本制備。找到胃，以胃幽門與十二指腸交界處為起點，快速沿腸緣剪去腸系膜，然后再剪取20～30cm長的十二指腸，置于4℃左右的溫臺氏液中輕輕漂洗，可用注射器向腸腔內(nèi)注入臺氏液沖洗腸腔內(nèi)壁，并置于低溫(4～6℃)臺氏液中備用。實驗時將腸管剪成2～3cm的腸段，用棉線結(jié)扎腸段兩端，將一端結(jié)扎線連于浴槽內(nèi)的標(biāo)本固定鉤上，另一端連于張力換能器，適當(dāng)調(diào)節(jié)換能器的高度，使其與標(biāo)本之間松緊度合適。此相連的線必需垂直，并且不能與浴槽壁接觸，避免摩擦。第7頁/共10頁4、儀器連接與調(diào)試。（圖12）5、實驗項目（圖13）(1)觀察、記錄38℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。(2)觀察、記錄25℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。(3)待中央標(biāo)本槽內(nèi)的臺氏液的溫度穩(wěn)定在38℃后，加1:10000腎上腺素1～2滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變。在觀察到明顯的作用后，用預(yù)先準(zhǔn)備好的新鮮38℃臺氏液沖洗三次。(4)待腸段活動恢復(fù)正常后，再加1:10000乙酰膽堿1～2滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變。作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。(5)向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1mol/LNaOH溶液1～2滴，觀察腸段收縮曲線的改變。作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。(6)向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1mol/LHCl溶液1～2滴，觀察腸段收縮曲線的改變。待作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。(7)向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1%CaCl2溶液2～3滴，觀察腸段收縮曲線的改變。第8頁/共10頁【注意事項】1、胃腸在空氣中暴露時間過長時，會導(dǎo)致腹腔溫度下降。為了避免胃腸表面干燥，應(yīng)隨時用溫臺氏液或溫生理鹽水濕潤胃腸，防止降溫和干燥。2、實驗動物先禁食24h，于實驗前1-2h喂食，然后處死,取出標(biāo)本，腸運動效果更好。3、標(biāo)本安裝好后，應(yīng)在新鮮38℃臺氏液中穩(wěn)定5～10min，有收縮活動時即可開始實驗。4、注意控制溫度。加藥前，要先準(zhǔn)備好更換用的新鮮38℃臺氏液，每個實驗項目結(jié)束后，應(yīng)立即用38℃臺氏液沖洗，待腸段活動恢復(fù)正常后，再進(jìn)行下一個實驗項目。5、實驗項目中所列舉的藥物劑量為參考劑量，若效