第五章免疫佐劑

第五章免疫佐劑第一頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑的產(chǎn)生白喉、破傷風(fēng)疫苗木薯淀粉瓊脂面包屑油化膿性細(xì)菌產(chǎn)生抗血清（抗毒素）1925年，Ramon接種：馬↑第二頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑的產(chǎn)生Glenny發(fā)現(xiàn)：用明礬沉淀的白喉毒素：可誘導(dǎo)較好的免疫效果明礬：KAl(SO4).12H20凈水作用氫氧化鋁：人用佐劑第三頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑研究的必要性1.氫氧化鋁：優(yōu)勢(shì)：無(wú)毒性作用能誘導(dǎo)產(chǎn)生高水平的抗體應(yīng)答不足：不能誘導(dǎo)產(chǎn)生較強(qiáng)的T細(xì)胞免疫。第四頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑研究的必要性2.基因重組疫苗、多肽疫苗和核酸疫苗等優(yōu)勢(shì)：在理論上，比傳統(tǒng)的減毒疫苗和滅活疫苗安全不足：其免疫原性不強(qiáng)，需要佐劑輔助其刺激機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)的免疫應(yīng)答第五頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日一、免疫佐劑的定義和類別

佐劑(adjuvant)攙入疫苗制劑后，能促進(jìn)、延長(zhǎng)或增強(qiáng)對(duì)疫苗抗原特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)。第六頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日應(yīng)用免疫佐劑的潛在優(yōu)點(diǎn)：①能優(yōu)化免疫應(yīng)答;②使疫苗能黏膜接種;③能促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)免疫應(yīng)答;第七頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日應(yīng)用免疫佐劑的潛在優(yōu)點(diǎn)：④能增強(qiáng)較弱免疫原的免疫原性;⑤可減少提供保護(hù)性免疫所需的抗原量或接種次數(shù);⑥能提高疫苗在免疫應(yīng)答減弱者(如新生兒、老年人和免疫缺損者)的疫苗接種效力。第八頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日運(yùn)載體（carrier）與半抗原或免疫原性較弱的抗原相結(jié)合的一類具有免疫原性的物質(zhì)。一種生物或載體(vector)，通過(guò)其攜帶的基因在其表面表達(dá)外源的抗原。通過(guò)刺激機(jī)體的T細(xì)胞反應(yīng)來(lái)加強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫反應(yīng)。第九頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日傳輸工具（vehicle）是對(duì)佐劑、抗原或者抗原-運(yùn)載體復(fù)合物起運(yùn)輸和托襯作用的一類物質(zhì)。不具有免疫原性單獨(dú)傳輸工具：加強(qiáng)抗原的免疫原性，傳輸工具+佐劑：進(jìn)一步加強(qiáng)抗原的免疫原性。第十頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日正在研制和試驗(yàn)的人用疫苗佐劑佐劑類型名稱佐劑類型名稱凝膠型氫氧化鋁或磷酸鋁顆粒型免疫刺激復(fù)合物（ISCOM）磷酸鈣脂質(zhì)體微生物DNACpG基元生物降解微球單磷酸脂質(zhì)A（MLA）皂苷（QS-21）霍亂毒素（CT）合成體非離子型嵌段共聚物大腸桿菌不耐熱腸酵素（LT）胞壁酰肽類似物百日咳毒素（PT）聚磷脂胞壁酰二肽合成的多核苷酸油乳脂或乳化劑弗氏不完全佐劉細(xì)胞因子IFN-γMF59IL-2SAP第十一頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日二、臨床研究中的新型佐劑

第十二頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日1.乳化佐劑（1）MF59用Span85和吐溫80穩(wěn)定的水包鯊烯乳劑獲得批準(zhǔn)的新型人用佐劑Span85：山梨醇酐三油酸酯吐溫80：聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯鯊烯：3碳6烯第十三頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日1.乳化佐劑（1）MF59臨床試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)組：接種含MF59的流感疫苗n=6000對(duì)照組：接種不含MF59的流感疫苗n=6000結(jié)果：該疫苗佐劑是安全的，且機(jī)體耐受性較好能提高接種者對(duì)病毒的抗體應(yīng)答能力，尤其是慢性病患者和免疫前低抗體滴度者。以MF59為佐劑的流感疫苗(FLUAD)已在意大利獲準(zhǔn)使用第十四頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日1.乳化佐劑（2）SBAS2佐劑是含有單磷酸脂質(zhì)(monophosphoryllipid，MPL)和QS21的水包油型乳劑副反應(yīng)較大，主要用于治療性疫苗第十五頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日1.乳化佐劑（2）SBAS2佐劑惡性瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白(CSP)+SBAS2佐劑對(duì)蚊傳瘧原蟲攻擊，良好的保護(hù)作用還用于慢性HBV感染和宮頸癌病人的治療性疫苗試驗(yàn)。第十六頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日2.皂苷和免疫刺激復(fù)合物(ISCOM)QS21從皂的富含的皂苷抽提物中純化的一種復(fù)合糖脂。不是乳劑，易于配制能誘導(dǎo)Th1、Th2和細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)應(yīng)答可通過(guò)腸道外或黏膜途徑免疫。已在29項(xiàng)臨床試驗(yàn)中與不同疫苗一起應(yīng)用第十七頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日QS21瘧原蟲sp￡66肽疫苗試驗(yàn)(哥倫比亞)抗體:>第3針接種后：兩名受試者出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)(過(guò)敏性休克)尚不清楚這些反應(yīng)是不是佐劑依賴性？2.皂苷和免疫刺激復(fù)合物(ISCOM)疫苗+QS21+（鋁鹽）疫苗+鋁鹽第十八頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日2.皂苷和免疫刺激復(fù)合物(ISCOM)ISCOM臨床前研究：（小鼠、羊、靈長(zhǎng)類動(dòng)物）強(qiáng)佐劑：誘導(dǎo)Th1、Th2和CTL應(yīng)答持久的抗體滴度和保護(hù)性應(yīng)答小鼠：鼻內(nèi)接種流感病毒——良好的應(yīng)答第十九頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日3.MPL衍生物單磷酸脂質(zhì)（monophosphoryllipid，MPL）人體試驗(yàn)：（經(jīng)胃腸外給予MPL）癌癥、過(guò)敏及傳染病迄今，尚未進(jìn)行過(guò)黏膜給藥的臨床試驗(yàn)。SBAS4（MPL+鋁鹽聯(lián)合）+乙型肝炎疫苗臨床試驗(yàn)：很好耐受老年人(免疫應(yīng)答不佳者)：獲得了對(duì)HBcAg的良好應(yīng)答，加強(qiáng)免疫后的應(yīng)答尤其顯著。第二十頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日3.MPL衍生物OM-174：與脂質(zhì)A相關(guān)的新型葡糖胺二糖佐劑化學(xué)結(jié)構(gòu)清楚、穩(wěn)定，造價(jià)低廉臨床前毒理學(xué)試驗(yàn)：結(jié)果良好作為流感疫苗佐劑，在小鼠中誘導(dǎo)的保護(hù)性免疫力優(yōu)于鋁佐劑?？烧T導(dǎo)體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答目前，正在健康志愿者中進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)。第二十一頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日4.細(xì)胞因子和其他免疫調(diào)節(jié)劑IL-12：最有希望進(jìn)入臨床試驗(yàn)的細(xì)胞因子佐劑之一;在各種免疫佐劑的免疫調(diào)節(jié)活性中起關(guān)鍵作用;IL-12+鋁佐劑吸附的HIV-1gp120疫苗：能在小鼠中誘生Th1型細(xì)胞因子及IgG2和IgG3抗體應(yīng)答;鋁佐劑吸附的HIV-1gp120疫苗：則誘生Th2型細(xì)胞因子和IgG1抗體應(yīng)答。第二十二頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日4.細(xì)胞因子和其他免疫調(diào)節(jié)劑IL-12：某些小鼠病毒感染(鼠肝炎、偽狂犬病、淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎、水泡性口炎)——無(wú)效臨床試驗(yàn):重組人IL-12+甲型肝炎/乙型肝炎疫苗IL-12是安全的，且有很好耐受性。僅在加強(qiáng)免疫后：才誘導(dǎo)抗體滴度的輕微增加。正作為腫瘤抗原佐劑在癌癥病人中進(jìn)行試驗(yàn)。第二十三頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日5.CpG-ODN具有很好的耐受性，穩(wěn)定且生產(chǎn)成本低廉，并可用于黏膜途徑。能激活巨噬細(xì)胞，誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖，誘生較強(qiáng)的Th1應(yīng)答。其效果能達(dá)到弗氏完全佐劑的水平，可用于治療性疫苗并能與其他佐劑(如鋁鹽)協(xié)同作用。第二十四頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日三、免疫佐劑對(duì)免疫系統(tǒng)的影響

1.

佐劑的作用機(jī)理

（1）儲(chǔ)存作用凝膠型佐劑(如氫氧化鋁)乳化佐劑(如弗氏不完全佐劑)與抗原相連，并促進(jìn)將抗原轉(zhuǎn)運(yùn)至淋巴結(jié)，產(chǎn)生免疫應(yīng)答。第二十五頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日三、免疫佐劑對(duì)免疫系統(tǒng)的影響

1.

佐劑的作用機(jī)理

（2）直接或間接作用于APC，增進(jìn)抗原遞呈作用乳化佐劑MF59：能被DC內(nèi)化某些新型佐劑(如純化的皂苷、ISCOM和脂質(zhì)體)有效地誘導(dǎo)MHC1類分子限制性CD8+CTL應(yīng)答第二十六頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日三、免疫佐劑對(duì)免疫系統(tǒng)的影響

1.

佐劑的作用機(jī)理

（3）刺激APC分泌免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子細(xì)胞因子作用于淋巴細(xì)胞而誘導(dǎo)以Th1或Th2型為主的免疫應(yīng)答通過(guò)誘生IFN-γ和遲發(fā)型超敏反應(yīng)、而增強(qiáng)Th1型免疫應(yīng)答第二十七頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日2.疫苗佐劑的選擇

病原體的生長(zhǎng)繁殖方式：胞外繁殖的細(xì)菌/寄生蟲：機(jī)體通常通過(guò)體液免疫應(yīng)答來(lái)清除病原體;胞內(nèi)增殖的病毒/細(xì)菌/寄生蟲：機(jī)體需誘導(dǎo)細(xì)胞介導(dǎo)免疫應(yīng)答與其抗?fàn)帯５诙隧?yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日四、免疫佐劑的安全性及發(fā)展前景第二十九頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日1.佐劑的安全性佐劑的益處：增強(qiáng)疫苗免疫原性佐劑的危險(xiǎn)性：引起不良反應(yīng)佐劑引起的局部不良反應(yīng)：注射部位的局部炎癥罕見的肉芽腫無(wú)菌性膿腫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：不適、發(fā)熱、佐劑性關(guān)節(jié)炎等權(quán)衡利弊第三十頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑對(duì)機(jī)體的不良影響①由于局部膿腫、結(jié)節(jié)、潰殤的形成而導(dǎo)致的急性或慢性炎癥反應(yīng)。②導(dǎo)致流感樣疾病，伴發(fā)熱、頭痛、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛等。③過(guò)敏反應(yīng)。④對(duì)組織和器官的系統(tǒng)毒性。第三十一頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑對(duì)機(jī)體的不良影⑤誘導(dǎo)宿主組織的超敏反應(yīng)，產(chǎn)生自身免疫性關(guān)節(jié)炎或淀粉樣變。⑥同機(jī)體抗原產(chǎn)生交叉反應(yīng)，引起腎小球腎炎或腦膜腦炎。⑦使機(jī)體對(duì)結(jié)核菌素或其他皮試抗原敏感。⑧免疫抑制。第三十二頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日佐劑對(duì)機(jī)體的不良影⑨致腫瘤作用和致畸作用。⑩導(dǎo)致流產(chǎn)。⑾將活的載體留在體內(nèi)、或傳給環(huán)境的潛在可能性。第三十三頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日2.佐劑研究的發(fā)展前景(1)理想的佐劑的特點(diǎn)：①安全性有保障，且無(wú)短期及長(zhǎng)期的毒副作用；②佐劑與抗原聯(lián)用能刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)免疫反應(yīng)；③在使用較少的免疫劑量的情況下即可產(chǎn)生效力；④佐劑的化學(xué)成分和生物學(xué)性狀清楚，在制備時(shí)批間差異小、且于生產(chǎn)。第三十四頁(yè)，共三十六頁(yè)，2022年，8月28日2.佐劑研究的發(fā)展前景(1)理想的佐劑的特點(diǎn)