細(xì)胞工程動(dòng)物

2.2動(dòng)物細(xì)胞工程選修3現(xiàn)代生物科技專題專題2細(xì)胞工程安徽省遠(yuǎn)程教育優(yōu)秀作品教學(xué)目標(biāo)重點(diǎn)難點(diǎn)問題探討教學(xué)過程知識(shí)結(jié)構(gòu)教學(xué)反饋課后習(xí)題教學(xué)參考2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)目標(biāo)了解動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、過程和意義。理解單克隆抗體制備的過程和應(yīng)用重點(diǎn)難點(diǎn)1.教學(xué)重點(diǎn)：?jiǎn)慰寺】贵w的制備和應(yīng)用2.教學(xué)難點(diǎn)：?jiǎn)慰寺】贵w的制備過程如果將奶牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶嗎？動(dòng)物細(xì)胞也能融合嗎？教學(xué)過程一.動(dòng)物細(xì)胞融合1.動(dòng)物融合的過程請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物融合動(dòng)物細(xì)胞融合過程示意圖不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞

滅活的病毒有絲分裂兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞思考題1.植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁？酶解法，如纖維素酶或果膠酶2.動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？無需，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁3.植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法4.動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？能還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)5.植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？不能7.你推測(cè)一下動(dòng)物細(xì)胞融合有哪些方面的應(yīng)用嗎？思考題利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細(xì)胞8.在生產(chǎn)實(shí)際中雜交瘤細(xì)胞有怎樣的應(yīng)用？生產(chǎn)單克隆抗體6.你能歸納出什么叫做動(dòng)物細(xì)胞融合嗎？主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株主要用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性細(xì)胞融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較提問？1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）。2.一個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？每一個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。3.一種抗原侵入機(jī)體之后，引起機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？動(dòng)物在免疫反應(yīng)過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上。4.簡(jiǎn)述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？抗原動(dòng)物體抗體抗原不純抗體不純二、單克隆抗體刺激漿細(xì)胞6.如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？

體外培養(yǎng)單個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞，提取分泌的抗體7.體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能無限增殖嗎?怎樣解決這個(gè)問題？5.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？產(chǎn)量低，純度低，特異性差1.設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞－－能夠無限增殖雜種細(xì)胞二、單克隆抗體2.制備過程：3.單克隆抗體的應(yīng)用：

①在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義

②在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，具有

③生物導(dǎo)彈二、單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)越性。用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，靈敏度很高，在妊娠第8天就可以做出診斷，比原來的診斷方法提前了10天左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對(duì)胎兒造成不利影響。該方法檢測(cè)的準(zhǔn)確率在90％以上。教學(xué)反饋1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是（）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新物種D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞B2.單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的 （）

A.B淋巴細(xì)胞B.T淋巴細(xì)胞C.骨髓瘤細(xì)胞D.雜交瘤細(xì)胞

D3.（多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細(xì)胞中與單克隆抗體的制備有關(guān)的是 （）

A.效應(yīng)B細(xì)胞B．T淋巴細(xì)胞

C.骨髓瘤細(xì)胞D．雜交瘤細(xì)胞

ABCDB體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

4.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案制備單克隆抗體不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞。(1).該實(shí)驗(yàn)方案的目的是：________________(2).該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？(3).A是從小鼠的脾臟中取得__________該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______。(4).圖中B為________________過程，常用_________________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。(5).C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括________培養(yǎng)和__________培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中_____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。B淋巴細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活的病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無限增殖原代傳代50課后習(xí)題1.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③

C2.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)融合決定于()

A.細(xì)胞膜的流動(dòng)性B．細(xì)胞膜的選擇透過性

C.細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)性D．細(xì)胞質(zhì)酶的活性A一.選擇題三.思考與探究1.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同？2.制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？提示：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后再融合；動(dòng)物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直接融合。

提示：哺乳動(dòng)物感染抗原后，其體內(nèi)會(huì)形成相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞能分泌相應(yīng)的抗體凝聚或殺死這些抗原。動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過程中，每一種B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能分泌該單一抗體的B淋巴細(xì)胞大量增殖。B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外增殖；骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，它能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。因此，把一種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性──在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。

教學(xué)參考1.已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例還有哪些？生物種類細(xì)胞來源成功年代酵母菌—雞原生質(zhì)體—血紅細(xì)胞