醫(yī)學微生物學第五章消毒、滅菌和生物安全

第五章

消毒、滅菌和生物安全

生長繁殖微生物

變異

死亡

環(huán)境改變環(huán)境適宜

環(huán)境劇變概述2

基本概念

消毒(disinfection)：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物、并不一定殺死細菌芽胞或非病原微生物的方法。

滅菌(sterilization)：殺死物體上所有微生物的方法，包括芽孢。

抑菌(bacteriostasis)：抑制體內(nèi)或體外細菌生長

繁殖的方法。。3

基本概念防腐(antisepsis)：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。無菌(asepsis)：不存在活菌的意思。

無菌操作：防止微生物進入人體或其他物品的操作技術(shù)。

4例：外科手術(shù)無菌操作內(nèi)服抗生素抑菌接種環(huán)火焰燒灼無菌火化滅菌局部皮膚75%酒精擦拭消毒

5一、消毒滅菌的方法常用的消毒和滅菌方法物理消毒滅菌法化學消毒滅菌法6

（一）物理消毒滅菌法

1、熱力滅菌法

原理：破壞菌體蛋白質(zhì)與核酸，蛋白質(zhì)變性

凝固，核酸解鏈崩解，導致細菌死亡。7

常用熱力滅菌法種類方法效果用途干熱焚燒點燃或焚燒爐

滅菌廢棄污物、尸體燒灼火焰燒灼

滅菌接種環(huán)，試管口干烤紅外線

干烤箱，熱空氣

160-170oC2h

電磁波熱效應(yīng)

滅菌

滅菌玻璃器皿等耐高溫的物品醫(yī)療器械濕熱煮沸法100oC，5-10min，沸水

消毒飲水.食具.注射器高壓蒸氣滅菌法

高壓蒸氣滅菌器1.05kg/cm2、

121.3oC×15-20min

滅菌耐高溫、耐濕物品如：NS.培養(yǎng)基.

手術(shù)衣8

常用熱力滅菌法種類方法

效果

用途濕熱巴氏消毒法61.1-62.8℃×30min，72℃×15sec（常用）

消毒（殺死病原菌，不破壞營養(yǎng)成分）流通蒸氣滅菌法80-100℃蒸氣

×15~30min牛奶，酒類消毒（殺死繁殖體，不殺死芽胞）不耐高溫、高壓物品間歇滅菌法反復多次流動蒸氣滅菌不耐高溫的含糖、牛奶的培養(yǎng)基9濕熱效力大于干熱原因（1）濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固變性 （2）濕熱的穿透力比干熱大 （3）濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)10高壓蒸汽滅菌器112、輻射及聲波殺菌法

（1）紫外線（ultravioletray,UV)

:265nm-266nm（最佳殺菌波長）

殺菌原理：使DNA上相鄰的T堿基通過共價鍵結(jié)合成二聚體，干擾DNA復制與轉(zhuǎn)錄，導致細菌死亡

特點：穿透力弱

適用范圍：適于空氣和物體表面消毒。12

（2）電離輻射如：高速電子，X-ray，-ray

機理：自由基及自由基離子破壞微生物蛋白質(zhì)、核酸、酶死亡適用物品：不耐熱的物品（藥品及醫(yī)療用品）

（3）微波（microwave)

機理：熱效應(yīng)

適用物品：非金屬物品、食品133、其他除菌或抑菌法(1)濾過除菌法(filtration)

機理：用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去,以達到無菌目的

器具：濾菌器（filter）

適用物品：不耐高溫物品（血清、

毒素、抗生素）以及空氣

等的除菌。14(2)干燥與低溫抑菌法在低溫狀態(tài)下真空抽去水分冷凍真空干燥法：用途：保存菌種干燥法：抑菌，用于：保存食物15

（二）化學消毒滅菌法消毒劑殺菌機理：

1.使菌體蛋白變性和凝固酚、醇、酸鹼、醛類重金屬鹽類(高濃度)2.干擾細菌的酶系統(tǒng)及代謝(破壞-SH，酶失活)

氧化劑、重金屬鹽類(低濃度)3.損傷菌細胞膜酚類(低濃度)、表面活性劑4.損傷核酸烷化劑、染料等16按殺菌能力可將消毒劑可分消毒劑類型種類殺菌機理范圍高效消毒劑含氯消毒劑次氯酸鈉等酶失活和氧化飲用水、地面等過氧化物類過氧化氫等酶活性喪失物品表面和皮膚醛類甲醛、戊二醛蛋白、核酸變性器械環(huán)氧乙烷環(huán)氧乙烷蛋白、核酸變性醫(yī)療器械中效消毒劑含碘消毒劑碘酊、碘伏氧化、沉淀蛋白皮膚、體溫計等醇類乙醇或異丙醇蛋白變性皮膚、體溫計等低效消毒劑季銨鹽類新潔爾滅表面活性劑地面、皮膚等氯己定氯己定表面活性劑皮膚黏膜等高錳酸鉀高錳酸鉀氧化餐具、水果等17類別 作用機制 常用種類酚類 蛋白變性，細胞膜損傷 石炭酸醇類 蛋白變性 乙醇（70%-75%）氧化劑氧化、蛋白沉淀 高錳酸鉀、過氧乙酸碘酒重金屬鹽氧化、蛋白酶變性 紅汞、硫柳汞表面活性劑 改變細胞壁、膜通透性 新潔爾滅染料 干擾氧化、抑制繁殖 龍膽紫烷化劑菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化甲醛、環(huán)氧乙烷常用消毒劑的種類（按化學成分）18常用消毒劑的應(yīng)用種類使用濃度用途石炭酸3%~5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇70%~75%皮膚、體溫計消毒高錳酸鉀0.1%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞2%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞0.1%皮膚消毒、手術(shù)部位消毒過氧乙酸0.2%~0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2.0%~2.5%皮膚消毒新潔爾滅0.4~1.6%手術(shù)洗手、浸泡手術(shù)器械龍膽紫2%~4%淺表創(chuàng)傷消毒19消毒劑微生物

環(huán)境性質(zhì)濃度作用時間種類數(shù)量有機物溫度酸堿度二、影響消毒滅菌效果的因素20

（三）生物安全

生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。

狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。

廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對社會、經(jīng)濟、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風險。21

病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會所面臨的最現(xiàn)實的生物安全問題。

病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。

關(guān)于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任等。

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一、病原微生物的分類

根據(jù)傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類：

第一類：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。如天花、埃博拉病毒等。

第二類：能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。如乙腦、狂犬病病毒、HIV、脊灰、結(jié)核、霍亂等。

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一、病原微生物的分類

第三類：能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。如肝炎、風疹、皰疹、流感、破傷風病毒等。

第四類：在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。24二、病原微生物實驗室的分級級別處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴重危害，具有有效的預防和治療措施。三級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施。四級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預防治療措施。25

一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。

從事高致病性病原微生物相關(guān)實驗活動應(yīng)當有２名以上的工作人員共同進行。在同一個實驗室的同一個獨立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實驗活動。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度。

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實驗室工作人員應(yīng)掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護知識和實際操作技能。應(yīng)有符合要求的防護用品，應(yīng)建立健康檔案；進行預防接種。

實驗室應(yīng)有科學、嚴格的管理制度，定期對實驗室設(shè)施設(shè)備、材料等進行檢查、維護和更新，應(yīng)對廢水、廢氣以及其他廢物進行合理處置，防止環(huán)境污染。

27生物安全282930三、實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任

實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。

實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，預防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；②開展流行病學調(diào)查；③對病人進行隔離治療，對相關(guān)人員進行醫(yī)學檢查；④對密切接觸者進行醫(yī)學觀察；⑤進行現(xiàn)場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。31

監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實驗室執(zhí)行國家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國家標準和要求的記錄、檔案及報告的情況。

法律責任的核心是承擔造成傳染病傳播、流行或者其他嚴重后果的法律責任。32思考題

消毒、滅菌、防腐、無菌（操作）的概念濕熱滅菌有哪些方法?各有何用途?（溫度、時間、物品）筒述紫外線殺菌的作用機制和注意事項331.殺滅芽胞最常用和最有效的方法是：____________。a.紫外線照射b.煮沸5minc.巴氏消毒法d.流通蒸氣滅菌法e.高壓蒸氣滅菌法2.滅菌方法錯誤的是____________。a.手術(shù)室空氣-紫外線b.排泄物-漂白粉c.飲水-氯氣d.含血清培養(yǎng)基-高壓蒸氣滅菌e.溫度計-75%酒精3.下述不可能殺滅細菌芽胞的方法是：____________。a.煮沸法b.巴氏消毒法c.間歇滅菌法d.干熱滅菌法e.高壓蒸氣滅菌法344.關(guān)于紫外線，說法錯誤的是____________。a.其殺菌作用與波長有關(guān)b.可損壞細菌的DNA構(gòu)型c.265-266nm殺菌作用最強