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免疫濁度測(cè)定及其臨床應(yīng)用免疫測(cè)定IMMUNOASSAYIA免疫測(cè)定原理利用抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)標(biāo)本中微量物質(zhì)抗原+抗體
抗原抗體復(fù)合物
Ag+AbAg*Ab免疫測(cè)定分類(lèi)免疫濁度測(cè)定g~ng標(biāo)記免疫測(cè)定ng~pg免疫濁度測(cè)定免疫沉淀反應(yīng)海德堡曲線Heidelberg’sCurve免疫濁度測(cè)定分類(lèi)透射濁度法散射濁度法透射濁度法和散射濁度法的光路檢測(cè)器A(透射濁度法)檢測(cè)器B(散射濁度法)I0I渾濁樣品光源散射濁度法321TimeScatterScatterSignalVersusTime
Nephelometry1.Bufferaddition2.SampleAddition3.AntibodyadditionFluidinthecellhascauseslittlescatterAddingsampleincreasesscatterslightlyAddingantibodycausesalargeincreaseinlightscattering免疫濁度測(cè)定分類(lèi)2終點(diǎn)法速率法終點(diǎn)法固定時(shí)間法速率峰的測(cè)定速率峰的測(cè)定321TimeScatterMeasuretheRATEAfterAntibodyAddition
RateNephelometry1.Bufferaddition2.SampleAddition3.AntibodyadditionFirstderivative:rateofchangeofscatterovertime;
thisistheSLOPEofthecurveRateCONCENTRATIONRATE在速率峰基礎(chǔ)上完成的標(biāo)準(zhǔn)曲線抗原過(guò)剩的測(cè)定Analyte-antibodycomplexingAnalyteAntibody
AntigenExcessRATEofSCATTER抗體過(guò)量時(shí)的反應(yīng)抗原過(guò)量時(shí)的反應(yīng)60850反應(yīng)時(shí)間(秒)ARRAY抗原過(guò)量自動(dòng)檢測(cè)加入校正液藥物濃度測(cè)定免疫濁度抑制測(cè)定(小分子物質(zhì))抗體試劑的要求1特異性2親和力3反應(yīng)時(shí)保持抗體過(guò)剩測(cè)定范圍應(yīng)包括高于及低于正常值的50%5測(cè)定的精密度應(yīng)在5%左右校正曲線:聚乙二醇的增強(qiáng)作用抗原濃度C1C2C3吸光度4%聚乙二醇不加聚乙二醇試劑組成配方舉例試劑1100mmolTris或磷酸緩沖液pH7.2~8.24%聚乙二醇(分子量6000或10000)1%非離子型表面活性劑150mmol氯化鈉或硫酸鈉0.1g/l疊氮鈉試劑2100mmolTris或磷酸緩沖液pH7.2~8.220%多克隆羊抗血清150mmol氯化鈉0.1g/l疊氮鈉抗原濃度測(cè)定范圍抗體過(guò)??乖^(guò)剩Ag*Ab技術(shù)特性并行的檢測(cè)系統(tǒng):RateNIPIARateNephelometryNIPIA:近紅外顆粒速率法免疫分析BenefitsAbilitytoexpandthemenuintohighsensitivityassaysincluding:Ferritin,Digoxin,andIgE.NIReliminatestheinterferenceofbiologicalsubstancessuchasbiliribinandhemoglobin.NIPIA:近紅外顆粒速率法免疫分析優(yōu)點(diǎn)擴(kuò)展檢測(cè)菜單,增加高敏項(xiàng)目分析:如鐵蛋白,地高辛,IgE,超敏CRP等近紅外波長(zhǎng)分析消除生物物質(zhì)如膽紅素和血色素的干擾NIR:940nm波長(zhǎng)近0oC檢測(cè)角檢測(cè)顆粒大小:200~500nm直徑速率法測(cè)定NIPIA:940nm
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