乙型肝炎基因治療

乙型肝炎基因治療28海量模板免費(fèi)下載乙型肝炎的現(xiàn)狀全球約有3.5億乙肝病毒攜帶者,我國約1.3億,其中1/4為慢性乙型肝炎,易開展為肝硬化、肝癌。目前主要依靠干擾素和拉米夫定治療,干擾素有效率低,對(duì)母嬰傳播者更低,而后者對(duì)細(xì)胞內(nèi)無影響,不能去除病毒?；蛑委熓侵笇⑼庠椿蛲ㄟ^某種途徑導(dǎo)入細(xì)胞而發(fā)揮治療作用,是極具潛力的抗乙肝病毒治療策略。2021/1/122RNA干擾技術(shù)反義RNA技術(shù)反義DNA技術(shù)核酶技術(shù)疫苗胞內(nèi)抗體基因治療的基本策略2021/1/123易水寒江雪敬奉RNA干擾技術(shù)()是指有序列特異性且對(duì)特定靶基因有沉默作用的一段。它能通過()用來關(guān)閉特定的基因表達(dá)。技術(shù)：用一定的方法將小干擾()導(dǎo)入細(xì)胞,可特異性地抑制各種外源性和內(nèi)源性的致病基因,從而到達(dá)治療疾病的目的。2021/1/124易水寒江雪敬奉機(jī)制在細(xì)胞中導(dǎo)入,切割酶(由核酸內(nèi)切酶和解旋酶等組成)將剪切為小干擾(2)與酶蛋白結(jié)合形成誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體(-)根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與靶向結(jié)合,在參與下利用酶切作用降解,從而導(dǎo)致目的基因表達(dá)沉默,而則可繼續(xù)參與下一個(gè)作用循環(huán)。2021/1/125易水寒江雪敬奉2021/1/126易水寒江雪敬奉反義核苷酸()是指按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與特定靶序列雜交,從而抑制其基因表達(dá)的一小段(20左右)人工合成的核苷酸片斷,有準(zhǔn)確選擇性與高度特異性并且能顯著抑制病毒復(fù)制。假設(shè)此核苷酸片段為序列，則技術(shù)為反義技術(shù)。反義RNA技術(shù)2021/1/127易水寒江雪敬奉反義DNA技術(shù)按照堿基配對(duì)原則,設(shè)計(jì)合成與病毒和前體結(jié)合的反義寡聚脫氧核糖核苷酸(，反義),通過阻斷翻譯或激活H而發(fā)揮抗病毒作用。人工合成的易被核酸酶降解,其多價(jià)陰離子性難以透過細(xì)胞膜。通過適當(dāng)修飾提可進(jìn)步其透膜性、穩(wěn)定性和生物利用度,從而使其作為藥用成為可能。2021/1/128可以說反義是目前研究最多、應(yīng)用最廣、最有希望開展成為新一代抗病毒劑的基因治療藥物。迄今已證明可抑制或阻斷包括單純皰疹病毒(),羅氏肉瘤病毒(),皰疹口膜炎病毒(),流感病毒(),人免疫缺陷病毒(),登革病毒(),流行性出血熱病毒(),乙型肝炎病毒()和丙型肝炎病毒()等多種病毒的復(fù)制與表達(dá)。2021/1/129易水寒江雪敬奉核酶()是具有酶催化活性的分子,直接參與前體的加工、剪切與成熟。原生生物、細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物中都有天然存在的核酶分子。目前發(fā)現(xiàn)的核酶包括:一類內(nèi)含子、二類內(nèi)含子、P〔核糖核苷酸酶Ｐ〕、錘頭狀、發(fā)夾狀、斧頭狀及丁型肝炎病毒()核酶等,對(duì)其二級(jí)構(gòu)造已有所理解,即可在體外合成,也可經(jīng)表達(dá)載體導(dǎo)入后在胞內(nèi)生成。核酶技術(shù)2021/1/1210易水寒江雪敬奉核酶最早是從四膜蟲(一種纖毛原生物)中的核糖體前體中發(fā)現(xiàn)的。它能催化其他分子轉(zhuǎn)變、降解與聚合,使靶鏈在某些特殊部位斷裂,重新連接起來,而自身卻無消耗,它是一種真正意義上的酶。且核酶在切斷后又可以從雜交鏈上脫落下來,重新結(jié)合并切割其他,故其抑制作用明顯強(qiáng)于反義。2021/1/1211易水寒江雪敬奉國內(nèi)外已用核酶體外定點(diǎn)切割了和等病毒區(qū),設(shè)計(jì)合成抗基因寡核苷酸,在基因轉(zhuǎn)染的G2細(xì)胞上證明有一定的抗病毒作用?；蚪M包括四個(gè)開放讀碼框在復(fù)制過程中首先轉(zhuǎn)錄成前基因組(),然后再以其為模板逆轉(zhuǎn)錄成負(fù)鏈,已有研究針對(duì)各基因組設(shè)計(jì)能切割及的核酶具有抗乙肝病毒的作用。2021/1/1212易水寒江雪敬奉疫苗基因疫苗()又稱核酸疫苗或疫苗指把攜帶編碼外源抗原基因的(通常是質(zhì)粒)直接導(dǎo)入體內(nèi),通過抗原基因表達(dá)產(chǎn)物刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反響以到達(dá)預(yù)防和治療的目的核酸疫苗的種類包括疫苗和疫苗，目前研究最多的是疫苗疫苗主要優(yōu)點(diǎn)在于能誘導(dǎo)特異性的細(xì)胞免疫應(yīng)答2021/1/1213易水寒江雪敬奉DNA疫苗疫苗是20世紀(jì)90年代開發(fā)出來的新型疫苗。它可以通過特定的基因表達(dá)產(chǎn)物使機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫。這種在宿主體內(nèi)表達(dá)的抗原的免疫過程與自然免疫相似,可以提呈天然構(gòu)象的,無抗原表位的改變;并且具有長(zhǎng)期記憶免疫反響,不但能用于預(yù)防,且可用于治療。2021/1/1214易水寒江雪敬奉DNA疫苗疫苗是將編碼外源蛋白的基因表達(dá)載體導(dǎo)入機(jī)體,以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,在許多方面比常規(guī)疫苗更具優(yōu)勢(shì)。如今大規(guī)模消費(fèi)高純度基因治療用質(zhì)粒的技術(shù)已初步成熟,通常疫苗含有一個(gè)真核啟動(dòng)子推動(dòng)外源蛋白質(zhì)基因在體內(nèi)表達(dá),一個(gè)原核復(fù)制子使質(zhì)粒能在大腸桿菌內(nèi)擴(kuò)增,積累高拷貝數(shù)質(zhì)粒的大腸桿菌被裂解、純化,以獲取高純度質(zhì)粒。2021/1/1215易水寒江雪敬奉作用機(jī)制基因疫苗接種機(jī)體后，目的基因的表達(dá)產(chǎn)物系內(nèi)源性抗原,激發(fā)體液、細(xì)胞免疫機(jī)制而到達(dá)防治乙型肝炎的目的。疫苗(質(zhì)粒)在注射部位被細(xì)胞攝取后通過轉(zhuǎn)錄翻譯生成蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)通過胞內(nèi)處理后,把信息遞呈給Ⅰ類限制性8T細(xì)胞,表達(dá)Ⅰ類分子或共刺激分子。2021/1/1216易水寒江雪敬奉攝取質(zhì)粒的細(xì)胞能分泌釋放抗原,刺激B細(xì)胞生成抗體。同時(shí)抗原被細(xì)胞(抗原遞呈細(xì)胞)攝取,通過Ⅱ類分子,遞呈給4T細(xì)胞和B細(xì)胞,識(shí)別病毒感染的細(xì)胞。(細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞)介導(dǎo)細(xì)胞免疫對(duì)病毒感染預(yù)防起著重要的作用。能識(shí)別細(xì)胞外表的病毒蛋白,通過感染細(xì)胞的細(xì)胞溶解機(jī)制和通過細(xì)胞因子非細(xì)胞溶解機(jī)制來完成。2021/1/1217易水寒江雪敬奉乙型肝炎的病原體乙型肝炎病毒()屬于雙鏈(有部分單鏈區(qū))病毒乙型肝炎病毒編碼三種抗原:、、,其中在誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性的免疫應(yīng)答中起重要作用，因此成為乙肝病毒疫苗研究首選的靶抗原2021/1/1218易水寒江雪敬奉乙肝疫苗的現(xiàn)狀早期乙肝疫苗是用含的人血漿制備而成，其本錢較高，現(xiàn)采用重組基因乙肝疫苗替代?；蛞呙鐚?duì)兒童的免疫效果經(jīng)過多家研究單位的血清學(xué)檢測(cè)其效果已被肯定，其保護(hù)率85%，對(duì)兒童時(shí)期阻斷乙肝病毒的傳播起到積極作用。目前國內(nèi)成人10μg重組乙肝疫苗可能劑量偏低，接種后抗體程度并不高，需要進(jìn)步。2021/1/1219易水寒江雪敬奉胞內(nèi)抗體是指將所需抗體的編碼基因?qū)爰?xì)胞，在靶細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出抗體并與相應(yīng)抗原結(jié)合，抑制病毒的包裝和出胞過程，以到達(dá)治療的目的。應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)，可不經(jīng)人體免疫而得到人源化基因抗體。胞內(nèi)抗體2021/1/1220利用這種人源化抗體進(jìn)展乙肝基因治療，可將本來不在胞內(nèi)