實驗一實驗動物的抓取與固定及性別鑒定

實驗一實驗動物的抓取與固定及性別鑒定第1頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四一、實驗目的和要求通過本實驗學習和掌握實驗動物的抓取固定方法和性別年齡判定方法。二、實驗材料和用具

實驗動物（小鼠）、鑷子、酒精棉球、電子天平等第2頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四三、實驗內(nèi)容（一）實驗動物的抓取與固定方法實驗人員在進行動物實驗時，必須正確抓取動物，以免被動物抓咬傷，或造成動物的傷亡和應激反應。抓取固定動物必須對各種動物的一般習性有所了解，抓取動物應大膽、準確、迅速、熟練、不可恐嚇動物。第3頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四1小鼠的抓取與固定（1）抓取方法小鼠性情較溫順，一般不會主動咬人，但抓取不當也易被其咬傷。習慣用右手者，首先用右手從籠盒內(nèi)將小鼠尾中部或基部抓?。ú豢勺ノ布猓?，并提起或放在左手上。第4頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第5頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）固定方法徒手固定：右手抓取小鼠尾，將小鼠放在籠蓋（或表面粗糙的物體）上，輕輕向后拉鼠尾；然后在小鼠向前掙脫時，用左手拇指和食指抓住兩耳和頸部皮膚，無名指、小指和手掌心夾住背部皮膚和尾部，并調(diào)整好動物在手中的姿勢。此法常用于灌胃以及肌肉、腹腔和皮下注射等實驗。第6頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第7頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

固定板固定：小鼠麻醉后置小鼠固定板上，取仰臥位，用膠布纏粘四肢，再用針透過膠布扎在板上，從而將小鼠固定在小鼠固定板上。此法常用作心臟采血、解剖、外科手術等實驗。第8頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第9頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

固定架固定：讓小鼠直接鉆入固定架里，封好固定架的封口，露出尾巴。此裝置特別適用于小鼠尾靜脈注射等。第10頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四小鼠固定盒固定第11頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

簡易固定：進行尾靜脈注射或抽血時，如果沒有這些固定裝置，也可采用一種簡易的方法。即倒放一個燒杯或其它容器，把小鼠扣在里面，只露出尾巴，然后用酒精擦拭，暴露血管，注射或采樣。這種燒杯或容器的大小和重量是適當，既能壓住尾巴不讓其活動，同時起到壓迫血管的作用。第12頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四2大鼠的抓取與固定（1）抓取方法大鼠不像小鼠那樣性情溫順，大鼠牙齒很尖銳，在抓取時要小心被咬，操作者最好戴上防護手套。張開左手虎口，迅速將拇、食指插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身體中段，并將其保持仰臥位，然后調(diào)整左手拇指位置，緊抵在下頜骨上（不可過緊，否則造成窒息），即可進行實驗操作。第13頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

另一種方法：由助手用左手將動物按住抓起，將食指放在頸背部，拇指及其余三指放在肋部，食指和中指夾住左前肢，分開兩前肢舉起來，右手按住后肢。

注意：抓取大鼠時，不能捉其尾尖，因為尾尖皮膚易于拉脫，也不能讓大鼠懸在空中時間過長，否則會激怒大鼠翻轉(zhuǎn)咬人。第14頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）固定方法

徒手固定：用拇指、食指捏住大鼠耳朵頸部皮膚，余下三指緊捏住背部皮膚，置于掌心，調(diào)整好大鼠在手中的姿勢即可。此種固定方法常用做體重小的大鼠灌胃、腹腔注射、肌肉注射和皮下注射的實驗操作。第15頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

固定板固定：用于手術的大鼠用固定板固定的方法與小鼠相同，但應選擇更大些的固定板。為防治大鼠蘇醒時咬傷人或便于頸、胸部等實驗操作，應用棉線牽引大鼠兩上門齒，固定頭部；也可用不同長短的圓柱形玻璃管將大鼠套住，用擰彎的回形針鉤在門齒上以固定。此法多用于心臟采血、解剖、外科手術等實驗。第16頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

固定架固定：將大鼠固定在固定架內(nèi)。此裝置特別適用于大鼠尾靜脈注射等。第17頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四3豚鼠的抓取與固定法

（1）抓取方法

豚鼠性情溫和、膽小，一般不傷人，抓取時不能用大力抓其腰腹，容易造成肝破裂而引起死亡。第18頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四依據(jù)不同的生理階段選擇抓取方法抓取幼年的豚鼠時，可用兩手捧起來。

抓取較大的豚鼠時，先用手掌迅速扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，以拇指、食指捏住頸部，其余手指握持住軀干，即可輕輕提起。

對懷孕或體重較大的豚鼠，應以左手托其臀部。第19頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四豚鼠的抓取方法第20頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）固定方法

徒手固定：由助手用左手的食指和中指放在豚鼠頸背部兩側(cè)，拇指和無名指放在肋部，分別用手指挾住左右前肢，抓起來；然后反轉(zhuǎn)左手，用右手的拇指和食指挾住右后肢，用中指和無名指挾住左后肢，使鼠體伸成一直線；也可坐下來用大腿夾住豚鼠的后肢，右手進行實驗操作。第21頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

固定板固定：用固定板固定豚鼠，和大鼠、小鼠基本相同，用木制或泡沫固定板和線繩固定。第22頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四4家兔的抓取與固定法（1）抓取方法抓取時，輕輕打開兔籠門，不要使兔受驚，然后用右手伸入籠內(nèi)，從兔頭前部把兩耳輕輕壓于手掌內(nèi)，兔便臥伏不動，此時將頸背部被毛和皮膚一起抓住提起，并用左手托住兔腹部，使其體重主要落在這只手上。第23頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第24頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

兔一般不咬人，但其爪銳利，掙扎時極易抓傷操作人員，因此，必須防備其四肢的活動。特別注意不能只提兔雙耳或雙后腿，也不能僅抓腰或提背部皮毛，以避免造成耳、腎、腰椎的損傷或皮下出血。第25頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）固定方法

徒手固定：由助手用一只手抓住兔頸背部皮膚，另一只手抓住兔的兩后肢，牢牢地固定在實驗臺上。此法適用于腹腔、肌肉等注射。另一種方法是由助手坐在椅子上用一只手抓住兔頸背部皮膚，同時捏住兩個耳朵，不讓其頭部活動，大腿夾住兔的下半身，用另一只手抓住兩前肢將兔固定，此法適用經(jīng)口給藥。第26頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

盒式固定：未麻醉的兔可采用盒式固定。這種固定方法常用作采血、注射、觀察兔耳血管變化、兔腦內(nèi)接種等實驗操作。第27頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

臺式固定：將家兔麻醉后置于固定臺上，四肢用粗棉繩活結綁住，拉直四肢，將繩綁在兔固定臺四周的固定木塊上，頭以固定夾固定或用一根粗棉繩牽引兔門齒系在固定臺鐵柱上。此法常用于兔靜脈采血、注射、測量血壓、呼吸等手術操作。第28頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第29頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四5犬的抓取與固定法（1）抓取方法犬的抓取方法較多。對未經(jīng)馴服和調(diào)教的圈養(yǎng)犬抓取時，用特制的長柄犬鉗夾住犬的頸部，或用長柄鐵勾勾住犬頸部項圈，由助手將其嘴縛住。第30頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

對經(jīng)馴服的犬，可從側(cè)面靠近，輕輕撫摸其頸背部皮毛，用手將其抱住，由另一人用布帶縛其嘴；或用皮革、金屬絲或棉麻制成的口網(wǎng)，套在犬口部，并將其附帶結于而后頸部，防治脫落。第31頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

扎犬嘴的方法用長1m左右的繃帶兜住犬的下頜，繞到上頜打一個結，再繞回下頜打第二個結，然后將布帶引至頭后頸項部打第三個結，并多系一個活結。第32頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）固定方法

慢性試驗中犬的固定方法：將已馴服的犬拉上固定架上，將犬頭和四肢綁住，再用粗棉帶吊起犬的胸部和下腹部，固定在架的橫梁上，即可進行體檢、灌胃、取血、注射等試驗操作。第33頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

急性試驗中犬的固定方法：將已麻醉的犬嘴上的繃帶解繃，把犬放在實驗臺上，先固定頭部后固定四肢。第34頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

頭部固定：用特制的犬頭固定器。犬頭固定器為一圓鐵圈，圈的中央橫有兩根鐵條，上面的一根略彎曲，與棒螺絲相連，下面一根平直。固定時先將犬舌拉出，將犬嘴伸入鐵圈，再將平直鐵條橫貫在上、下頜間，然后向下旋轉(zhuǎn)棒螺絲，使彎形鐵條壓在犬的鼻梁上，將鐵柄固定在試驗臺的鐵柱上。第35頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第36頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

四肢固定：先用粗棉帶的一端縛扎于腕關節(jié)以上部位，如采用仰臥，可將兩后肢左右分開，分別固定于手術臺兩側(cè)的木鉤上。將左右前肢的兩條棉帶從犬背后交叉經(jīng)過，分別固定于兩側(cè)木鉤上?？`扎四肢的結扣方法是在活扣外再打一個活結，便于實驗結束后的松解。固定的姿勢一般采用仰臥位和腹臥位，仰臥位常用于頸、胸、腹、股等部位的實驗，腹臥位常用于背、腦脊髓的實驗。第37頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四6猴的抓取與固定

（1）抓取方法從籠內(nèi)抓取猴時，飼養(yǎng)人員應以右手持短柄網(wǎng)罩，左臂緊靠門側(cè)，以防籠門敞開時猴逃出籠外。右手將網(wǎng)罩塞入籠內(nèi)，由上而下罩捕。在猴被罩到后，應立即將網(wǎng)罩翻轉(zhuǎn)取出籠外，罩猴在地，由罩外抓住猴的頸部，輕掀網(wǎng)罩，再提取猴的手臂反背握住，此時猴便無法脫逃。第38頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）固定方法

徒手固定：將猴兩前肢反背在其背后，操作者用一只手握著，用另一只手將猴兩后肢捉住，即可將猴子固定。第39頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

固定架固定：一般是采用“猴限制椅”或者稱“猴固定架”進行固定。第40頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（二）實驗動物性別的鑒定第41頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四1哺乳類一般情況下，哺乳類動物性別依據(jù)動物的肛門與外生殖器（陰莖或陰道）之間的距離加以區(qū)分。雄性要比雌性的距離更長。第42頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（1）嚙齒目觀察生殖器與肛門之間的距離，雌性較雄性近具溝；觀察生殖突起，雄性較大、較圓，雌性較小具裂縫；仰臥觀察乳頭，雄性不明顯，雌性明顯。第43頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）兔形目初生仔兔及開眼仔兔，觀察陰部孔洞形狀和距離肛門遠近孔洞扁形、大小與肛門相同，距肛門近者為雌性；孔洞圓形而略小于肛門，距肛門遠者為雄性。

第44頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

對幼兔可用右手抓住兔的頸背部皮膚，左手以食、中指夾住尾巴，大拇指輕輕向上推開生殖器，局部呈“O”形，下為圓柱體者是公兔；局部成“V”形，下端裂縫延至肛門者為母兔。對成年兔可看有無陰囊進行區(qū)分公母。第45頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（3）食肉目新生食肉目動物可用肛門一生殖器距離加以區(qū)分。成年公犬睪丸下降于陰囊中，懸于會陰部下方，陰莖由恥骨下緣朝腹部方向延伸，至后腹壁開口。母犬的尿生殖道開口于肛門下方，較易觀察識別。第46頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（4）靈長目區(qū)分靈長類動物雌雄較為困難。首先應檢查其尿道開口，許多雌性動物有較大的陰蒂，其腹側(cè)形成溝狀通向尿道口，而雄性動物的尿道開口在陰莖頭上。觸摸陰囊內(nèi)是否有睪丸是確定其雌雄的最可靠方法。第47頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四2鳥類禽鳥類在第二性征（肉冠、羽毛、發(fā)聲）出現(xiàn)前，區(qū)分性別極為困難，但可通過孵出時24小時內(nèi)進行外翻泄殖腔鑒別。雄性中可觀察到微小而能勃起的孔突上有輸精管開口，但此法不僅要有豐富的經(jīng)驗，而且準確性常難以保證。對于有羽色伴性遺傳的家禽可通過其孵出時的羽色加以區(qū)分。第48頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四3爬行動物（1）龜類排泄孔位置及形狀可分辨出雌雄：公龜?shù)奈恢媒咏捕?，孔形長形。母龜?shù)奈恢媒咏辜?，孔形圓形。尾部的粗細大小，公龜尾較粗大，母龜較細短。腹甲是否凹陷，公龜有明顯的凹陷，母龜平坦。第49頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第50頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）蜥蜴類色斑、股孔、半陰莖第51頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第52頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（3）蛇公蛇的尾巴較細長，母蛇較粗短。

輕壓尾巴基部，公蛇的半生殖器會跑出來。第53頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四4兩棲動物

婚墊雄蟾雄蟾雌蟾第54頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四第55頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四5魚類許多魚從外形上不易區(qū)分其雌雄，但可通過繁殖期的顏色不同及第二性征加以區(qū)分。如麥穗魚平時體側(cè)呈灰黃色，到了生殖期雄性變成暗黑。雄性馬口魚一到生殖季節(jié)，體色變?yōu)榧t藍條子相間。第56頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

魚類的第二性征是珠星（又稱追星），是一種灰白色結節(jié)狀的皮膚衍生物，用手撫摸感覺粗糙。一般在繁殖季節(jié)出現(xiàn)，雌性機體上出現(xiàn)較多且粗壯，雄魚少而小。珠星大多分布在頭部吻端或胸鰭上。四大家魚（草魚、青魚、鰱魚、鳙魚）的珠星分布在胸鰭上。第57頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（三）年齡的大致判斷

1小鼠（1）根據(jù)形態(tài)鑒定日齡小鼠初生后不同日齡的外觀形態(tài)特征不一樣。第58頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四（2）根據(jù)體重鑒定日齡根據(jù)體重鑒定日齡的規(guī)律為一般的發(fā)育情況。發(fā)育的程度是固定的，但時間的長短往往與體格、營養(yǎng)而異，各個品種、品系之間也有一定的差異。KM小鼠為例日齡/d初生51015202530體重/g1.84.06.011.015.021.021.0第59頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四2大鼠

18日齡以前大鼠的形態(tài)特征與小鼠基本一致，可根據(jù)形態(tài)特征來判斷年齡。在無可靠記錄資料的情況下，可根據(jù)體重來判斷大致日齡。普通級SD大鼠不同數(shù)日齡體重見下表第60頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四

需要指出的是，同一品系大鼠的生長發(fā)育受窩產(chǎn)仔、雌鼠哺乳能力、飼料營養(yǎng)水平、管理水平以及個體差異等多種因素的制約，年齡與體重的關系不是絕對的。第61頁，共67頁，2023年，2月20日，星期四3豚鼠一般老年豚鼠牙齒和趾爪長，被毛稀疏無光澤，眼神呆滯，行動遲緩。