革蘭氏陰性球菌.課件

第七章革蘭陰性球菌奈瑟菌屬Neisseria醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系

腦膜炎奈瑟菌N.meningitismeningococcus奈瑟菌屬（Neisseria）奈瑟氏菌屬是一群革蘭陰性球菌，常成雙排列，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞，有菌毛人類(lèi)為奈瑟氏菌屬的自然宿主，對(duì)人致病的只有腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，兩種細(xì)菌DNA序列有70％的同源性主要區(qū)別點(diǎn)為，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系統(tǒng)疾??；而腦膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。腦膜炎奈瑟菌有多糖成分腦膜炎雙球菌培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)培養(yǎng)特性專(zhuān)性需氧。營(yíng)養(yǎng)要求高。最常用的培養(yǎng)基是巧克力色培養(yǎng)基生化反應(yīng)可產(chǎn)生自溶酶，人工培養(yǎng)時(shí)若不及時(shí)移種，數(shù)日后菌體自溶抗原構(gòu)造、抵抗力致病性與免疫性致病物質(zhì)莢膜菌毛內(nèi)毒素所致疾病流行性腦膜炎（簡(jiǎn)稱(chēng)流腦）人類(lèi)是唯一的易感宿主免疫性6月～2歲年齡組嬰兒免疫力最低，是易感人群腦膜炎奈瑟菌鼻咽腔繁殖繁殖入血菌/敗血癥中樞神經(jīng)系統(tǒng)主要侵犯蛛網(wǎng)膜暴發(fā)型腦膜炎微循環(huán)衰竭、內(nèi)毒素休克、DIC兒童和成人的腦膜炎癥狀微生物學(xué)檢查法標(biāo)本直接涂片鏡檢如鏡下見(jiàn)到中性粒細(xì)胞內(nèi)、外有革蘭陰性雙球菌，即可作出初步診斷分離培養(yǎng)與鑒定巧克力色血瓊脂平板快速診斷法對(duì)流免疫電泳SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)?zāi)X膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)生物學(xué)性狀生化反應(yīng)：氧化酶及觸酶（+），分解葡萄糖和麥芽糖抗原和分類(lèi)：根據(jù)莢膜多糖群特異性抗原的不同可分為13個(gè)血清群，根據(jù)膜蛋白不同，各血清群又可分為若干血清型抵抗力：很弱，對(duì)熱、冷、干燥和消毒劑極度敏感腦膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)氧化酶試驗(yàn)

陽(yáng)性：紫紅色

陰性：無(wú)色生化鑒定（光滑露珠樣菌落）

腦膜炎奈瑟菌的鑒定氧化酶：+DNA酶：-營(yíng)養(yǎng)瓊脂生長(zhǎng)：-葡萄糖：+麥芽糖：+淋病奈瑟菌，淋球菌Gonococcus腦膜炎奈瑟菌

淋病奈瑟菌相似點(diǎn)：生物學(xué)性狀差異：莢膜：有莢膜（腦），分離初期有莢膜（淋）質(zhì)粒：很少有質(zhì)粒（腦），有質(zhì)粒（淋）；所致疾?。阂鹉X膜炎（腦），引起泌尿生殖系統(tǒng)疾?。埽８腥静课徊煌?，標(biāo)本取材部位不同兩者關(guān)系形態(tài)與染色革蘭染色陰性，0.6-0.8μm腎形、成雙排列有菌毛，無(wú)芽胞和鞭毛，新分離株有莢膜男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片（革蘭染色）女性急性淋病患者陰道分泌物涂片（革蘭染色）與腦膜炎奈瑟菌相似，營(yíng)養(yǎng)要求更高，只能在巧克力平板及專(zhuān)用培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，形成灰白色細(xì)小S型呈滴露樣菌落主要菌體表面抗原構(gòu)造菌毛與粘附有關(guān)，免疫原性不強(qiáng)脂多糖抗原經(jīng)常變異，相應(yīng)抗體不能防止再感染外膜蛋白PI：主要外膜蛋白，將淋病奈瑟菌分為18個(gè)血清型PII：吸附易感細(xì)菌的蛋白微生物學(xué)檢查法標(biāo)本保暖（運(yùn)送時(shí)35oC保溫）、保濕、立即送檢直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定巧克力色培養(yǎng)基快速診斷法ELISA法、核酸雜交、PCR技術(shù)

生物學(xué)特性形態(tài)染色：與腦膜炎奈瑟菌相似，G—，雙球菌，咖啡豆?fàn)睿星v膜和菌毛，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛

膿汁標(biāo)本中急性病人：細(xì)菌位于中性粒細(xì)胞內(nèi)慢性病人：細(xì)菌位于細(xì)胞外培養(yǎng)特性：與腦膜炎奈瑟菌相似，營(yíng)養(yǎng)要求更高，只能在巧克力平板及專(zhuān)用培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，形成灰白色細(xì)小S型菌落生化反應(yīng)：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麥芽糖（腦膜炎奈瑟菌分解麥芽糖）等其它糖類(lèi)抗原及分類(lèi)：以外膜蛋白抗原分16個(gè)血清型抵抗力：極弱（與腦膜炎奈瑟菌相似）淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌鑒定依據(jù)：

1.涂片染色為革蘭陰性雙球菌；2.巧克力平板上為半透明、灰白色、凸起滴露狀菌落；3.氧化酶及觸酶均陽(yáng)性；4.只分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；5.血清學(xué)試驗(yàn)陽(yáng)性。防治原則預(yù)防淋病應(yīng)取締娼妓、防止不正當(dāng)?shù)膬尚躁P(guān)系新生兒1%硝酸銀滴眼，或紅霉素、四環(huán)素眼藥膏藥物首選青霉素，但多有耐藥性，應(yīng)用新型青霉素族抗生素腦膜炎奈瑟菌與淋病奈瑟菌比較

小結(jié)化膿性球菌革蘭陽(yáng)性菌：葡萄球菌，鏈球菌，肺炎鏈球菌革蘭陰性菌：腦膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌N.gonorrhoeaeN.meningitidisS.pneumoniaestaphylococcusStreptococcus膿汁或喉拭子

涂片、革蘭染色、鏡檢血瓊脂平板觀察菌落特征及溶血情況生化反應(yīng)、致病力試驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)病原性球菌的鑒別由腦脊液標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)外有G-雙球菌，可初步診斷為腦膜炎球菌由泌尿、生殖系統(tǒng)來(lái)源的標(biāo)本中分離出的G-雙球菌，可初步診斷為淋球菌

37℃24h葡萄球菌鑒別

金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌

色素金黃色白色α-溶血素+-血漿凝固酶試驗(yàn)+-耐熱DNA酶試驗(yàn)+-甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)+-致病力強(qiáng)弱或無(wú)膿汁標(biāo)本找出兩種菌落Gram染色甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)菌落小、半透明、表面光滑、邊緣整齊G+、鏈狀完全溶血乙型鏈球菌不溶血丙型鏈球菌草綠色不完全溶血環(huán)甲型鏈球菌肺炎鏈球菌菊糖發(fā)酵試驗(yàn)-（紫色）

+（黃色）膽汁溶菌試驗(yàn)-（混濁）+（澄清）喉拭子標(biāo)本找出兩種菌落Gram染色痰培養(yǎng)肺炎鏈球菌檢驗(yàn)全程報(bào)道姚軍微生物檢驗(yàn)1.痰涂片（肺炎鏈球菌鏡下）:1.痰涂片（肺炎鏈球菌鏡下）:2.原始培養(yǎng)物18h后菌落（肺炎鏈球菌菌落）:2.原始培養(yǎng)物18h后菌落（肺炎鏈球菌菌落）:3.傳代后的純培養(yǎng)物:3.傳代后的純培養(yǎng)物:傳代后的菌落直徑較首代有些縮小了,菌落濕潤(rùn)程度也有些降低,但仍然很濕潤(rùn).4.Optochin抑制試驗(yàn):抑菌環(huán)中也微弱的生長(zhǎng)了些菌落,但經(jīng)過(guò)涂片發(fā)現(xiàn)是口腔球菌.可能是做該試驗(yàn)的同事挑菌落的時(shí)候,沒(méi)把握好.把雜菌帶進(jìn)去了.盡管如此,抑菌環(huán)還是非常明顯而寬大(22mm).5.生化反應(yīng):用的就是普通微量管,在接種前滴加小牛血清1滴.5%CO2,35℃培養(yǎng)18~24h后讀取并記錄結(jié)果.6.肺炎鏈球菌乳膠凝集試驗(yàn)：左邊是測(cè)試，右邊是陰性對(duì)照：

7.藥敏試驗(yàn)（K-B法）：

7.藥敏試驗(yàn)（K-B法）：

思考題

一、填空題：

一、填空題：二、是非題：三、選擇題：三、選擇題：三、選擇題：三、選擇題：四、名詞解釋?zhuān)?、血漿凝固酶2、葡萄球菌A蛋白問(wèn)答題1、如何從膿汁標(biāo)本中檢出金黃色葡萄球菌，請(qǐng)寫(xiě)出檢驗(yàn)程序，鑒定依據(jù)？