種子萌發(fā)前后淀粉酶活的變化生化實(shí)驗(yàn)報(bào)告

種子萌發(fā)前后淀粉酶活力的變化分析操作人：XXX時(shí)間：XXXX地點(diǎn)：XXXXX溫度：16℃試驗(yàn)?zāi)康模鹤兓c植物存在何種關(guān)系，進(jìn)而更深一層了解種子萌發(fā)的過(guò)程。2、把握淀粉酶活力的測(cè)定方法。3、把握分光光度計(jì)的原理及使用方法。4、理解標(biāo)準(zhǔn)曲線的意義及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法。試驗(yàn)原理：其反響生成紅色的3-氨基-5硝基水楊酸；〔2〕在肯定范圍內(nèi)，其顏色深淺與淀粉酶水解產(chǎn)物的濃度成正比，可用麥芽糖其反響生成紅色的3-氨基-5硝基水楊酸；〔2〕在肯定范圍內(nèi)，其顏色深淺與淀粉酶水解產(chǎn)物的濃度成正比，可用麥芽糖的濃度表示，用比色法測(cè)定淀粉生成的復(fù)原糖的量，以單位重量樣品在肯定時(shí)的濃度表示，用比色法測(cè)定淀粉生成的復(fù)原糖的量，以單位重量樣品在肯定時(shí)間內(nèi)生成的麥芽糖的量表示酶活力。間內(nèi)生成的麥芽糖的量表示酶活力。試驗(yàn)方法與過(guò)程：1、配制具濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液：按下表在試管中參加相應(yīng)體積的試驗(yàn)編號(hào)試劑標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液〔ml〕檸檬酸緩沖液〔ml〕試驗(yàn)編號(hào)試劑標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液〔ml〕檸檬酸緩沖液〔ml〕011”22”33”44”55”/0.30.30.60.60.90.91.21.21.51.53.02.72.72.42.42.12.11.81.21.51.52、酶液的制備：① 44長(zhǎng)并記錄。②對(duì)休眠的種子和萌發(fā)的種子分別進(jìn)展以下操作：將種子放入研缽中，參加少量石英砂、1%NaCl溶液1ml研磨成勻漿。勻漿轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶并用檸檬酸緩沖液定容，搖勻，取10ml再次定容至100ml，分別取1.5ml上清液于兩支離心管中離心。31ml121、休眠2，依據(jù)下表參加對(duì)應(yīng)的溶液，在40℃準(zhǔn)確計(jì)時(shí)15分鐘〔實(shí)際反響15min10s〕，221ml0.5mol/mlNaOH1212〔ml〕11110.5mol/mlNaOH溶液10102%淀粉溶液222241ml53、測(cè)OD值：將15只試管中的溶液倒入比色皿，分別測(cè)定540nm波長(zhǎng)下的OD4、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：用Excel繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并求得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程及R2值。OD原始數(shù)據(jù)：1、小麥萌發(fā)三天的芽長(zhǎng)：小麥種子編號(hào)1234〔cm〕0.450.450.500.502OD度〔mg/ml)00010.20.1091’0.20.08320.40.3412’0.40.34230.60.5493’0.60.57040.80.8134’0.80.82751.01.0415’1.01.052OD值ODOD值試管編號(hào)OD10.14520.62210.06821.003結(jié)果處理與分析：用Excel繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程和R2.。標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為：y=0.003596x+0.03475,且R2>0.99，所以所得標(biāo)準(zhǔn)曲線有效。除了用Excel，還可以用生物統(tǒng)計(jì)學(xué)來(lái)計(jì)算線性回歸方程，過(guò)程如下：下面進(jìn)展線性回歸的假設(shè)檢驗(yàn)計(jì)算兩組樣本溶液各自的平均數(shù)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程，可得到對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)溶液的濃度。計(jì)算公式：首先自定義酶活力單位〔U〕：30℃，pH5.6的狀況下，，1min內(nèi)1mg1U?？偯富盍挝粸?〔C-C〕*V/TC試驗(yàn)和C比照分別是試驗(yàn)組和比照組產(chǎn)生的麥芽糖濃度。VT40℃酶催化反響的時(shí)間經(jīng)計(jì)算，休眠種子的淀粉酶催化產(chǎn)生的麥芽糖濃度為0.5007mg/ml，萌發(fā)三天0.9204mg/ml。經(jīng)計(jì)算，休眠期的酶活力為0.09903，發(fā)芽三天的小麥種子的酶活力為0.1821所以，小麥種子萌發(fā)后的淀粉酶活力上升。爭(zhēng)論：實(shí)際的。和萌發(fā)后的淀粉酶活力變化趨勢(shì)。1、留意事項(xiàng)① 準(zhǔn)時(shí)做好標(biāo)記。② 在提取酶液時(shí)要保持低溫順盡快進(jìn)展，防止酶液分解。③ NaOH④ 在參加水楊酸后震蕩的次數(shù)和力度要全都。⑤ 研磨時(shí)要選擇長(zhǎng)勢(shì)差不多的四顆小麥且去除芽和根。⑥ 2/32、閱歷、心得本次試驗(yàn)在操作上和上次的進(jìn)步在于本次試驗(yàn)在參加水楊酸是和隊(duì)友協(xié)作果相差很小。3、課后思考題① 20② PH繪制麥