神經(jīng)膠質(zhì)瘤的基因治療

神經(jīng)膠質(zhì)瘤的基因治療2023/4/14第1頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤概況神經(jīng)膠質(zhì)瘤(glioma)，又稱膠質(zhì)細胞瘤，簡稱膠質(zhì)瘤，是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤，故亦稱神經(jīng)外胚層腫瘤或神經(jīng)上皮腫瘤。腫瘤起源于神經(jīng)間質(zhì)細胞，即神經(jīng)膠質(zhì)、室管膜、脈絡(luò)叢上皮和神經(jīng)實質(zhì)細胞，即神經(jīng)元。第2頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一神經(jīng)膠質(zhì)瘤基本概況來源于神經(jīng)上皮的腫瘤顱內(nèi)最常見的腫瘤（約40%——50%）分類:星形細胞瘤、少突膠質(zhì)細胞瘤、室管

膜瘤、髓母細胞瘤、多形性膠質(zhì)細

胞瘤第3頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一第4頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一第5頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一第6頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療策略目前主要治療方案：手術(shù)治療+放療+化療三者相輔相成，缺一不可優(yōu)點：手術(shù)治療能較好的切除腫瘤組織，

特別是顯微外科的發(fā)展提高手術(shù)治

療的質(zhì)量缺點：對腦組織損傷大，且容易復(fù)發(fā)第7頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一新生代治療方案——基因治療第8頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一基因治療的分類自殺基因治療反義基因治療抑癌基因治療免疫基因治療抗腫瘤血管治療第9頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一自殺基因治療與其他基因治療的優(yōu)勢——旁觀者效應(yīng)旁觀者效應(yīng)解決了基因轉(zhuǎn)染率低得問題單純皰疹病毒I型胸苷激酶/丙氧鳥苷(HSV1—TK/GCV)組合、帶狀皰疹病毒胸腺嘧啶激酶/阿糖甲氧基嘌呤(VZV—TK/Ara—M)組合、胞嘧啶脫氨酶/5—氟胞嘧啶(CD/5—FC)組合、硝基還原/CB1954(NTR/CB1954)組合等。第10頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一HSV1—TK/GCV自殺基因HSV1—TKPCR技術(shù)擴增

利用基因技術(shù)

篩選穩(wěn)定表達

TK的細胞神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞C6

磷酸化GCV殺腫瘤細胞GCV—TP第11頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一驗證轉(zhuǎn)基因細胞的殺腫瘤效應(yīng)——陽性對照比較其他兩種原藥BVdU和無氧鳥甘（ACV）第12頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一結(jié)論：穩(wěn)定表達tk的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞C6對ＧＣＶ高度敏感并被特異殺死，且其有效性和特異性高于BVdU和ACV第13頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一三大問題自殺基因是如何作用影響其作用效應(yīng)的因子旁觀者效應(yīng)的機制第14頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一自殺基因作用機制GCV磷酸化為GCV—TPGCV—TP在DNA復(fù)制時與dGTP競爭性胸苷激酶TK提高磷酸化第15頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一影響作用因子IL—2的免疫治療與HSV—TK腫瘤壞死因子A單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)這些作用因子均可增加HSV-tk/GCV系統(tǒng)的毒素效應(yīng)第16頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一旁觀者效應(yīng)概念：導入有自殺基因的腫瘤細胞對鄰近未導入自殺基因的腫瘤細胞也有殺傷作用機制：縫隙連接

和無縫隙連接的細胞對比

和被抑制細胞連接的自身細胞對比第17頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一C6細胞導入Cx43基因，使之表達縫隙連接篩選出中度表達的Cx43—12和Cx43—14和高度表達的Cx43—13轉(zhuǎn)入HSV1—Tk，將基因修飾的和野生型的腫瘤細胞混合，用GCV治療在Cx43—13且TK+組，只要有5%的TK，腫瘤就會很快縮小第18頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一基因治療存在的問題目前基因治療神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤大多停留在動物實驗上，未能廣泛應(yīng)用于臨床。主要問題：1.正確找到基因靶點2.基因轉(zhuǎn)移和表達的問題3.載體的選擇第19頁，共20頁，2023年，2月20日，星期一基因