動物生理學(xué)實驗六 激素對魚類排卵和產(chǎn)卵的影響

實驗二十三激素對魚類排卵和產(chǎn)卵的影響實驗五激素對魚類須E卵和產(chǎn)卵的影響［實驗類型】：瀏合型了解激素控制［實驗原理】:實驗?zāi)康摹繝?wèi)0學(xué)時和產(chǎn)啊晌如類人唯了解激素控制［實驗原理】魚類排卵和產(chǎn)卵的機(jī)理；掌握魚類人工催產(chǎn)的基本方法。隹類性腺的最后成熟和排卵受下丘腦-腦垂體-性腺軸分泌的激素所控制。下丘腦分泌的兩種因子，促性腺激素釋放激素（GnRH）和促性腺激素釋放抑制因子（GRIF,即多巴胺）共同控制腦垂體促性腺激索（GtH）的釋放；GtH又作用于性腺，引起類固醇激素的釋放，從而誘導(dǎo)卵母細(xì)胞成熟和排卵。本實驗使用哺乳類促性腺激素釋放激素的類似物（LHRH-A）,多巴胺受體拮抗物domperidone（以消除GRIF對GH分泌的抑制作用），鯉角腦垂體提取液和人體絨毛膜促性腺激素（HCG）對魚類進(jìn)行催產(chǎn)，苴機(jī)理可簡單表示為：GnRH(LHRH-A)GR1F（多巴胺）GnRH(LHRH-A)GR1F（多巴胺）GtH-十"性類固醇激素一排卵（腦垂體提取液.HCG）Domperidone+刺激作用-抑制作用排卵后，在雄魚、魚巢等因素的刺激下，可發(fā)生產(chǎn)卵行為?！緦嶒灢牧?、試劑和器材】金魚、LHRH-A2、HCG、魚用生理鹽水、一次性注射器（1ml）、水族箱、加熱棒2

LHRH-A(即促排卵素2號)。雌魚的注射劑量為0.05pig/g,用魚用生理鹽水配成10pig/mL的溶液。Domperidone(DOM)o雌創(chuàng)注射劑量為1pLg/g,用角用生理鹽水配成1mg/mL的溶液.人體絨毛膜促性腺激素(HCG)。雌魚注射劑量為10IU/g,用魚用生理鹽水配成1000IU/mL的溶液。鯉魚腦垂體提取液。雌魚注射劑臺為鯉魚腦垂體1個/尾；每個用0.2niL魚用生理鹽水磨成勻漿。以上四種藥物在雄魚的劑量減半?！緦嶒灧椒?、步驟】1、 選取大小相似的性成熟金魚雌、雄各8尾，分成4組，并稱重；2、 根據(jù)下表分組，分別注射各類激素和藥物，注射劑量為5ul/g體重，注射方式是背鰭基部肌肉注射。注射后按雌雄魚1：1的比例分別放入4個水族箱中，水溫控制在22?26°C，加些水草作為魚巢。注射藥物宅理鹽水HCC腦垂體LHRH-A-A+DOM3、注射8h左右，注意觀察魚的發(fā)情和產(chǎn)卵行為::雌雄相互追逐，之后,雌魚排卵、雄魚排精。。次也可從泄殖孔處挖卵鏡檢屛觀察卵母細(xì)胞在最后成熟和排卵過程的變化(如下圖比.階段1：核位于卵細(xì)胞正中階段2：核移到卵細(xì)胞的一側(cè)階段階段1：核位于卵細(xì)胞正中階段2：核移到卵細(xì)胞的一側(cè)階段3：核貼近卵細(xì)胞的細(xì)胞膜階段4：核融化消失圖23-1卵母細(xì)胞在最后成熟和排卵過程的變化示意圖4、記錄4組魚催產(chǎn)到產(chǎn)卵的效應(yīng)時間、、產(chǎn)卵雌魚的數(shù)量，并進(jìn)行分(4)如條件許可，還可在注射8h和24h后從尾部血管抽取血樣，測定各組色類血液的促性腺激素(GtH)含量。(測定方法見本書實驗十七“魚類促性腺激素的放射免疫測定”)析討論，篩選出催產(chǎn)效果最好的催產(chǎn)劑。備注:也可選用不同魚作為實驗動物，采用不同劑量的