第四章抗體工程修改后演示文稿

第四章抗體工程修改后演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一優(yōu)選第四章抗體工程修改后現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一第三節(jié)基因工程抗體制備一、人源化抗體二、小分子抗體三、抗體融合蛋白四、雙特異性抗體五、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)第四節(jié)單克隆抗體的應(yīng)用一、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑二、蛋白質(zhì)的提純?nèi)?、小分子抗體的應(yīng)用四、抗體融合蛋白的應(yīng)用五、雙特異抗體的應(yīng)用六、抗體庫(kù)技術(shù)的應(yīng)用和前景思考題小結(jié)現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

第一節(jié)雜交瘤技術(shù)的基本原理雜交瘤技術(shù)原理：聚乙二醇（PEG）：細(xì)胞融合劑，使免疫的小鼠脾細(xì)

胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合HAT培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)：反復(fù)的免疫學(xué)檢測(cè)篩選克隆化增殖的雜交瘤

細(xì)胞系單克隆抗體生成：接種雜交瘤

細(xì)胞于小鼠腹腔，腹水中即可得到高效價(jià)的單克隆抗體現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一抗體種類(lèi)：第一代抗體多克隆抗體（polyclonalantibody)第二代抗體單克隆抗體（monoclonalantibody)第三代抗體基因工程抗體（geneticengineeringantibody)現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一B淋巴細(xì)胞:壽命短,分泌特異系性抗體骨髓瘤細(xì)胞：壽命長(zhǎng)雜交瘤細(xì)胞：壽命長(zhǎng)，單克隆抗體現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一流程一、雜交瘤技術(shù)現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一不產(chǎn)生Ig的重鏈和輕鏈HGPRT-;TK-與提供淋巴細(xì)胞的動(dòng)物品系相同（一）小鼠骨髓瘤細(xì)胞現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

動(dòng)物：BALB/c小鼠7～12周齡20g～25g體重（二）免疫脾細(xì)胞現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一細(xì)胞性抗原：（1~2）×107/只，不加佐劑，2~3周重復(fù)一次可溶性抗原：首次，完全福氏佐劑+100微克抗原，3~6周100~200微克抗原，融合前3天，加強(qiáng)免疫免疫小鼠現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一。淋巴細(xì)胞現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一。淋巴細(xì)胞發(fā)育現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一。漿細(xì)胞現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一。抗原接種現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一培養(yǎng)液：RPM1640培養(yǎng)液DMEM培養(yǎng)液（三）細(xì)胞融合現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一細(xì)胞融合劑：PEG:分子量4000的PEG是最常用的細(xì)胞融合劑作用機(jī)理：誘導(dǎo)細(xì)胞膜上脂類(lèi)物質(zhì)結(jié)構(gòu)重排，使細(xì)胞膜易打開(kāi)而有助于細(xì)胞融合作用特點(diǎn)：隨機(jī)發(fā)生的，不同廠(chǎng)商、批號(hào)、分子量的PEG，其純度與毒性有所不同現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞：選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)：渾圓、透亮、均一、排列整齊避免細(xì)胞返祖：定期用8-AG處理細(xì)胞注意事項(xiàng)：切忌過(guò)多傳代培養(yǎng)，可將細(xì)胞分裝凍存于-80℃或液氮及干冰中免疫脾細(xì)胞的制備：1×108的淋巴細(xì)胞無(wú)菌手術(shù)現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一飼養(yǎng)細(xì)胞：細(xì)胞密度過(guò)低不利于細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖常用小鼠腹腔細(xì)胞作飼養(yǎng)細(xì)胞其中MQ還有清除死亡細(xì)胞的作用飼養(yǎng)存活一般不超過(guò)2周，不影響雜交瘤細(xì)胞的純化現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一。飼養(yǎng)細(xì)胞現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一骨髓瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞(1:3)50%PEG1min內(nèi)加完;2min內(nèi)加10ml培養(yǎng)液融合方法現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一SP2/0細(xì)胞與脾細(xì)胞的比例為1：2～51ml50%的PEG（無(wú)菌，預(yù)溫37℃）在1分鐘內(nèi)滴完,靜置90秒,時(shí)間一到,將事先準(zhǔn)備的培養(yǎng)液一滴一滴加入,停止PEG作用根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入HAT培養(yǎng)基，使之分加到96孔板中時(shí)每孔細(xì)胞數(shù)為（0.5～1.5）×105個(gè)。融合后7天，換用HT培養(yǎng)液細(xì)胞融合現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一10～20天出現(xiàn)克隆HAT篩選挑克隆融合細(xì)胞的早期培養(yǎng)現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一HGPRT酶與TK酶：次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶胸腺嘧啶核苷激酶（四）雜交瘤細(xì)胞的選擇性培養(yǎng)應(yīng)用液：8-雜氮鳥(niǎo)嘌呤聚乙二醇現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一HAT培養(yǎng)基：H（Hypoxanthine）:次黃嘌呤A（Aminopterin）：氨基喋呤；葉酸拮抗物，阻斷DNA合成主要途徑T(Thymidine)：胸腺嘧啶核苷；“核苷酸前體”，供細(xì)胞通過(guò)替代途徑合成DNA現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一HAT選擇作用：淋巴細(xì)胞：不能生長(zhǎng)，5~7天死亡；DNA合成的主要途徑被A阻斷骨髓瘤細(xì)胞：不能生長(zhǎng)，5~7天死亡；HGPRT缺乏，DNA合成的替代途徑受阻現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一SP2/O:HGPRT-，TK-;長(zhǎng)命脾細(xì)胞:HGPRT+，TK+;短命(7天)雜交瘤細(xì)胞:HGPRT+，TK+;長(zhǎng)命骨髓瘤細(xì)胞、脾細(xì)胞與雜交瘤細(xì)胞現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一雜交瘤細(xì)胞：長(zhǎng)期生長(zhǎng)繁殖利用淋巴細(xì)胞的HGPRT，將H合成為嘌呤堿并最終與T一起合成DNA從淋巴細(xì)胞獲得產(chǎn)生某種抗體的遺傳信息從骨髓瘤細(xì)胞獲得不斷繁殖的能力現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一有限稀釋法(limitingdilution)

顯微操作法(micromanipulation)FACS法（fluorescenceactivatedcellsorter）軟瓊脂平板法(softagarmethod)

二、陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)與凍存現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一特點(diǎn)：不需任何特殊設(shè)備克隆出現(xiàn)效率高實(shí)驗(yàn)室常用方法方法：細(xì)胞懸液通過(guò)系列稀釋每個(gè)培養(yǎng)孔含0.5～1個(gè)細(xì)胞有限稀釋法現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一效率最高價(jià)格昂貴FACS現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一配制方案：雜交瘤細(xì)胞（（1～5）x106/ml)+細(xì)胞凍存液(30%～40%牛血清，50%～60%RPMI-1640培養(yǎng)液，10%DMSO)“慢凍”：分步冷凍，30℃→-70℃→液氮

“快融”：取出立即浸入37℃～40℃水浴中，使其迅速融化、復(fù)蘇雜交瘤細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一防止污染避免染色體丟失防止非分泌細(xì)胞的過(guò)度生長(zhǎng)防止細(xì)胞密度過(guò)高而死亡細(xì)胞冷凍的意義現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

第二節(jié)單克隆抗體的制備

經(jīng)過(guò)反復(fù)克隆化獲得的抗體陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株應(yīng)立即擴(kuò)大培養(yǎng)（除及時(shí)凍存的細(xì)胞外）。因多次傳代易引起染色體逐漸丟失而使細(xì)胞產(chǎn)生抗體能力逐漸減弱甚至消失，還應(yīng)盡早使用獲得的抗體陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株制備單克隆抗體?，F(xiàn)在是33頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一一、單克隆抗體的產(chǎn)生動(dòng)物體內(nèi)誘生方法：每次用BALB/c或F1代小鼠，（5～10）×105/只體外培養(yǎng)法：中空纖維培養(yǎng)系統(tǒng)

單抗含量不高，牛血清Ab難以去除現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一腹腔注射法現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一前5天進(jìn)行,預(yù)先腹腔注射pristane（1～5）×106細(xì)胞1～3w形成腹水高滴度腹水現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一可溶性抗原：ELISA抗體捕獲法細(xì)胞、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)上的抗原：免疫熒光法（用丙酮和甲醇按1:1比例固定細(xì)胞）二、 單克隆抗體的純化現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一ELISA現(xiàn)在是38頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一ELISA現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一多頭加樣槍現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一。免疫熒光法現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一鹽析沉淀親和層析離子交換層析McAb的純化現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一Ig類(lèi)型、亞類(lèi)測(cè)定：雙擴(kuò)法或ELISA法特異性測(cè)定：抗原類(lèi)似物的交叉反應(yīng)效價(jià)測(cè)定：用腹水或培養(yǎng)液的稀釋度表示

表位測(cè)定：幾株單抗是否為不同表位特異的,用競(jìng)

爭(zhēng)抑制法，相加指數(shù)法及微機(jī)集群分析親和性測(cè)定：測(cè)定親和常數(shù)K雜交瘤細(xì)胞染色體：秋水仙素裂解法，小鼠B細(xì)胞染色體40條，SP2/0細(xì)胞68條，雜交瘤細(xì)胞一般100多條McAb靶抗原分子量：常用westernblot三、 單克隆抗體的性質(zhì)鑒定現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一四、單克隆抗體的特性高度特異性高度的均一性和可重復(fù)性弱凝集反應(yīng)和不呈現(xiàn)沉淀反應(yīng)對(duì)環(huán)境敏感性（一）單克隆抗體的特性現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一優(yōu)點(diǎn)：在體外“永久”地存活并傳代用相對(duì)不純的抗原，獲得大量高度特異的、均一的抗體。適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療（二）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)與局限性局限性：固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應(yīng)用范圍反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體制備技術(shù)復(fù)雜、費(fèi)時(shí)費(fèi)工、價(jià)格較高現(xiàn)在是45頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

McAb

PcAb

抗原要求可以不純純度高得量高低特異性高低

穩(wěn)定低高沉淀反應(yīng)無(wú)有成本高低McAb與PcAb的比較現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一McAbandPcAb現(xiàn)在是47頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一第三節(jié)基因工程抗體制備基因工程抗體(Geneticengineeringantibody)

根據(jù)研究者的意圖，采用基因工程方法，在基因水平，對(duì)免疫球蛋白基因進(jìn)行切割、拼接或修飾后導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)，產(chǎn)生新型抗體。主要包括嵌合抗體、單鏈抗體、人源化抗體、雙價(jià)抗體和雙特異性抗體?，F(xiàn)在是48頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是49頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一AntibodyIgGstructure現(xiàn)在是50頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一CLVLVHCH1VLCLVHCH1CH2CH2CH3CH3現(xiàn)在是51頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一VHVLCLCH1CH2CH3Hinge(Fab’)2FabFc現(xiàn)在是52頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一VHVLCLCH1CH2CH3現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一VHVLCLCH1CH2CH3Fv現(xiàn)在是54頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一FvVHVLscFvVHVLSingleChainFragmentvariable現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

將小鼠Ig基因敲除，轉(zhuǎn)染人Ig基因，在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生人Ab，再經(jīng)雜交瘤技術(shù)，產(chǎn)生大量完全人源化抗體一、人源化抗體現(xiàn)在是56頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一方法：從雜交瘤細(xì)胞分離出功能性可變區(qū)基因，與人Ig恒定區(qū)基因連接，插入適當(dāng)表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，表達(dá)人-鼠嵌合抗體特點(diǎn)：減少了鼠源性抗體的免疫原性保留了親本抗體特異性結(jié)合抗原的能力（一）嵌合抗體現(xiàn)在是57頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一嵌合抗體現(xiàn)在是58頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是59頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一定義：指利用基因工程技術(shù)，將人抗體可變區(qū)（V）中互補(bǔ)決定簇（CDR）序列改換成鼠源單抗CDR序列。重構(gòu)成既具有鼠源性單抗的特異性又保持抗體親和力的人源化抗體。RAb亦叫“重構(gòu)型抗體”，因其主要涉及CDR的“移植”，又可稱(chēng)為“CDR移植抗體意義：多種特異的鼠源單抗有可能應(yīng)用于臨床治療（二）改型抗體現(xiàn)在是60頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是61頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一Fab：抗原結(jié)合片斷Fv：可變區(qū)片段ScFv：?jiǎn)捂溈勺儏^(qū)片段SdAb：?jiǎn)螀^(qū)抗體

二、小分子抗體現(xiàn)在是62頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一小分子抗體現(xiàn)在是63頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是64頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一其它生物活性蛋白融合三、抗體融合蛋白現(xiàn)在是65頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一許多抗原抗體反應(yīng)要求雙價(jià)的抗原結(jié)合位點(diǎn)，使抗原分子上的兩個(gè)表位交聯(lián)或使兩個(gè)抗原分子連接。將識(shí)別腫瘤抗原的抗體和識(shí)別細(xì)胞毒性免疫效應(yīng)細(xì)胞表面分子的抗體連結(jié)在一起，可使效應(yīng)細(xì)胞更容易與腫瘤細(xì)胞結(jié)合識(shí)別，取得殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。四、雙特異性抗體現(xiàn)在是66頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

分別分離純化兩種不同的McAb，使各抗體解離為單價(jià)抗體，再使兩種不同抗原特異性的單價(jià)抗體通過(guò)化學(xué)試劑交聯(lián)起來(lái)，然后分離出目的組分。此法缺點(diǎn)是容易導(dǎo)致抗體失去活性，產(chǎn)物均一性不佳。化學(xué)交聯(lián)BsAb現(xiàn)在是67頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

將兩種分泌不同特異性單抗的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行再次融合，產(chǎn)生四源雜交瘤(quadroma)。但二次雜交瘤細(xì)胞株分泌的是兩套重鏈，輕鏈的隨機(jī)組合物。BsAb在其中的比例可為10%～50%不等。多倍雜交瘤細(xì)胞的穩(wěn)定性差，BsAb的產(chǎn)量少且活性低，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，臨床應(yīng)用時(shí)存在人抗鼠抗體免疫反應(yīng)(HAMA)，因此不適用于臨床。細(xì)胞工程BsAb現(xiàn)在是68頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一

多采用抗體分子片段,如Fab，F(xiàn)v或ScFv,經(jīng)基因操作修飾后,或體外組裝為BsAb,或直接表達(dá)分泌型的BsAb。基因工程BsAb現(xiàn)在是69頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一定義：將體外克隆的抗體基因片段插入噬菌體載體，轉(zhuǎn)染工程細(xì)菌進(jìn)行表達(dá)，然后用抗原篩選即可獲得特異的單克隆噬菌體抗體。利用這一技術(shù)可以得到完全人源性的抗體，在HIV等病毒感染和腫瘤的診斷與治療方面有其獨(dú)特的優(yōu)越性

五、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)現(xiàn)在是70頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一用PCR擴(kuò)增人抗體重鏈可變區(qū)(VH)和輕鏈可變區(qū)(VL)基因克隆到噬菌體載體并以融合蛋白的形式表達(dá)在其外殼表面用抗原抗體反應(yīng)篩選出表達(dá)所需要抗體的克隆并擴(kuò)增。使抗體基因以分泌的方式表達(dá)，獲得可溶性的抗體片段?？贵w庫(kù)：組合抗體文庫(kù)：在建庫(kù)過(guò)程中如果將VH和VL隨機(jī)組合人天然抗體庫(kù)：抗體mRNA來(lái)源于未經(jīng)免疫的正常人（一）基本原理和程序現(xiàn)在是71頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一噬菌體抗體庫(kù)現(xiàn)在是72頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一從外周血或脾、淋巴結(jié)等組織中分離B淋巴細(xì)胞，提取mRNA并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA；應(yīng)用抗體輕鏈和重鏈引物，根據(jù)建庫(kù)的需要通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增不同的Ig基因片段；構(gòu)建噬菌體載體。噬菌體抗體庫(kù)載體有λ噬菌體、絲狀噬菌體和噬菌粒三種，其中后二者是目前構(gòu)建表面表達(dá)的噬菌體抗體庫(kù)(surfacedisplayantibodylibrary)常用載體；表達(dá)載體轉(zhuǎn)化細(xì)菌，構(gòu)建全套抗體庫(kù)。通過(guò)多輪的抗原親合吸附-洗脫-擴(kuò)增，最終篩選出抗原特異的抗體克隆。構(gòu)建噬菌體抗體庫(kù)現(xiàn)在是73頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一模擬天然全套抗體庫(kù)抗體文庫(kù)可以達(dá)到或超過(guò)1011庫(kù)容,能包含B細(xì)胞全部克隆建庫(kù)的外源基因來(lái)自人體多克隆細(xì)胞的總mRNA通用引物具有人的種屬普遍性抗體的VH和VL基因的隨機(jī)重組也增加了抗體的多樣性（二）噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的特點(diǎn)現(xiàn)在是74頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一避開(kāi)了人工免疫和雜交瘤技術(shù)抗體庫(kù)的大容量抗體庫(kù)極高的篩選效率可獲得高親和力的人源化抗體VH和VL基因的隨機(jī)重組模擬了體內(nèi)抗體親和力成熟的過(guò)程所用的抗體基因又來(lái)自人體現(xiàn)在是75頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一第四節(jié)單克隆抗體的應(yīng)用檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑蛋白質(zhì)的提純小分子抗體的應(yīng)用抗體融合蛋白的應(yīng)用雙特異抗體的應(yīng)用抗體庫(kù)技術(shù)的應(yīng)用和前景現(xiàn)在是76頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一病原微生物抗原、抗體的檢測(cè)腫瘤抗原的檢測(cè)免疫細(xì)胞及其亞群的的檢測(cè)激素測(cè)定細(xì)胞因子的測(cè)定一、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑現(xiàn)在是77頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一病原體測(cè)定：肝炎病毒－HAV,HBV,HCV,HDV,HEVTORCH－弓形蟲(chóng),風(fēng)疹病毒,巨細(xì)胞病毒，單純皰疹病毒細(xì)胞表面CD測(cè)定：CD4/CD8:Th/Tc白血病的分型現(xiàn)在是78頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一激素的測(cè)定：

內(nèi)分泌疾病的診斷藥物測(cè)定(TDM)：抗排斥藥物抗腫瘤藥物地高辛研究工作中的探針：越來(lái)越多未知功能cDNA的克隆對(duì)復(fù)雜的基因功能和多肽蛋白功能的研究需求增加現(xiàn)在是79頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一免疫沉淀現(xiàn)在是80頁(yè)\一共有87頁(yè)\編輯于星期一二、蛋白質(zhì)的提純

單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個(gè)惰性的固