芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

芳酸類非甾體抗炎藥物的分析1第1頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二目的要求

1、掌握水揚(yáng)酸類、苯甲酸類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)、鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法。

2、熟悉芳酸類藥物雜質(zhì)結(jié)構(gòu)、危害、檢查方法與含量限度。

3、了解本類藥物的體內(nèi)分析方法。返回2第2頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)二、鑒別試驗(yàn)三、特殊雜質(zhì)檢查四、含量測(cè)定內(nèi)容提要3第3頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二共性：既有苯環(huán)，又有羧基，或另有取代基分類：羧基直接與苯環(huán)相連

------苯甲酸類和水楊酸類羧基為磺酸基或通過烴氧基與苯環(huán)相連

------其他芳酸及其酯類

本類藥物多為固體，有一定熔點(diǎn)，難溶于水，易溶于乙醇、乙醚等有機(jī)溶劑，但其鈉鹽易溶于水,含游離羧基的藥物可溶于NaOH。4第4頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二第一節(jié)分類水楊酸類苯甲酸類其他芳酸類氯貝丁酯布洛芬苯甲酸（鈉）丙磺舒甲芬那酸羥苯乙酯阿司匹林水楊酸對(duì)氨基水楊酸鈉雙水楊酯貝諾酯5第5頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二一、苯甲酸類藥物苯甲酸及其鹽丙磺舒羥苯乙酯甲芬那酸（一）典型藥物6第6頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二（二）主要性質(zhì)酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游離的羧基，可用NaOH直接滴定測(cè)定其含量。具有苯環(huán)和特征官能團(tuán),有UV和IR特征吸收。化學(xué)性質(zhì)：苯甲酸（鈉）的中性溶液與FeCl3反應(yīng)可生成赭色沉淀；丙磺舒受熱可分解為Na2SO3或SO2。7第7頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二二、水楊酸類藥物乙酰水楊酸對(duì)氨基水楊酸鈉水楊酸鈉雙水楊酯貝諾酯（一）典型藥物8第8頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二二氟尼柳diflunisal水楊酸類藥物9第9頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二酸性：基本結(jié)構(gòu)為鄰羥基苯甲酸，具有酸性。水楊酸＞阿司匹林＞苯甲酸?？捎盟釅A滴定法測(cè)定含量。芳伯氨基特性酚羥基特性：與FeCl3生成紫色配合物水解特性：ASA、貝諾酯、雙水楊酯及其制劑應(yīng)檢查水楊酸；水楊酸、對(duì)氨基水楊酸鈉和貝諾酯分別檢查苯酚、間氨基酚和對(duì)氨基酚（二）主要性質(zhì)10第10頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二三、其他芳酸類藥物氯貝丁酯布洛芬（一）典型藥物11第11頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二（二）主要性質(zhì)氯貝丁酯：油狀液體，遇光不穩(wěn)定；具有酯結(jié)構(gòu)，易水解。布洛芬：酸性較弱；可用中性乙醇溶解，用NaOH滴定。都有苯環(huán)和特征基團(tuán),具有UV和IR特征吸收光譜12第12頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二酸性：pKa3～6無機(jī)強(qiáng)酸﹥芳酸﹥碳酸﹥酚溶解度：游離酸不溶于水，溶于有機(jī)溶劑堿金屬鹽溶于水，不溶于有機(jī)溶劑本類藥物的性質(zhì)小結(jié)酸+堿鹽酸+醇酯pKa6.3pKa1013第13頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二—X、—NO2、—OH等吸電子取代基存在使酸性增強(qiáng)

—CH3、—NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱

鄰位取代>間位、對(duì)位取代，尤其是鄰位取代了酚羥基，由于形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)。14第14頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二芳酸堿金屬鹽易溶于水，水解，溶液呈堿性，但堿性太弱，所以其含量測(cè)定方法為雙相滴定法或非水堿量法。

芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別；利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法測(cè)定含量；芳酸酯類藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)。15第15頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質(zhì)進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定。如具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應(yīng)鑒別；具芳伯氨基的藥物可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。UV色譜法—制劑分析

IR16第16頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二第二節(jié)鑒別試驗(yàn)與鐵鹽的反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)水解反應(yīng)分解產(chǎn)物的反應(yīng)紫外吸收光譜紅外吸收光譜17第17頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二一、FeCl3反應(yīng)

具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物18第18頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二三氯化鐵反應(yīng)（水楊酸類）：R-OH+FeCl3→紫色絡(luò)合物R-OCOCH3+H+→R-OH+FeCl3→紫色pH4-619第19頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二鍺色↓苯甲酸（鈉）

米黃色↓丙磺舒三氯化鐵反應(yīng)（苯甲酸類）：R-COOH+FeCl3

有色沉淀中性20第20頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

直接：水楊酸、對(duì)氨基水楊酸鈉、雙水楊酯、水楊酸二乙胺、酚磺乙胺、對(duì)乙酰氨基酚水楊酸ChP（2000）[鑒別]（1）取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。

間接：阿司匹林、貝諾酯

阿司匹林ChP（2000）[鑒別]（1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。21第21頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二與羥胺、鐵鹽反應(yīng)（其他芳酸類）：氯貝丁酯（布洛芬）異羥肟酸鐵（紫色）氯貝丁酯22第22頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二二、重氮化-偶合反應(yīng)：具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基藥物的反應(yīng)-萘酚橙紅色↓貝諾酯有該反應(yīng)嗎？如何進(jìn)行？對(duì)氨基水楊酸鈉23第23頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

直接：對(duì)氨基水楊酸鈉、鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺間接：對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）、醋氨苯砜、貝諾酯24第24頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二甲芬那酸對(duì)-硝基苯重氮鹽橙紅色25第25頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

+K2Cr2O7

深藍(lán)色

棕綠色甲芬那酸+H2SO4

黃色

綠色熒光△三、氧化反應(yīng)26第26頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二四、水解反應(yīng)（酯結(jié)構(gòu)可被水解）阿司匹林醋酸臭氣↑27第27頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二28第28頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二五、分解產(chǎn)物的反應(yīng)苯甲酸鹽＋H2SO4苯甲酸（白色升華物）丙磺舒＋

NaOHNa2SO3

＋HNO3→

硫酸鹽顯硫酸鹽反應(yīng)(含硫)29第29頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二六、紫外吸收光譜法藥物溶劑max/minE值A(chǔ)值A(chǔ)1/A2貝諾酯無水乙醇240730-760氯貝丁酯甲醇(0.001%)(0.01%)226;280,288460;44,31羥苯乙酯乙醇(5g/ml)2590.48丙磺舒鹽酸-乙醇(20g/ml)225,2490.67布洛芬0.4%NaOH265,273;245,271甲芬那酸鹽酸-乙醇279,3500.69-0.74,0.59-0.601.15-1.30對(duì)氨基水楊酸鈉磷酸鹽緩沖液265,2991.50-1.56第30頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二七、紅外吸收光譜法峰位（cm-1）峰強(qiáng)度歸屬基團(tuán)或化學(xué)鍵3750～3000強(qiáng)O-H、N-H(胺基,羥基)3000～2700弱～強(qiáng)C-H（烷基）、-CHO3300～3000弱～中等≡CH、=CH、Ar-H2400～2100弱～中等C≡N1900～1650強(qiáng)C=O(醛,酮,羧酸及衍生物)1670～1500中等～強(qiáng)C=C、C=N、N-H1300～1000強(qiáng)C-O（醇,酚,醚,酯,羧酸）1000～650中等～強(qiáng)不同取代形式雙鍵、苯環(huán)典型化學(xué)鍵的紅外特征吸收峰

31第31頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二水楊酸的紅外吸收?qǐng)D譜3300~2300cm-1O-H1660cm-1C=O1610,15701480,1440C=C775cm-1Ar-H32第32頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二3700~2900cm-1N-H、O-H1640cm-1N-H1580cm-11500cm-1C=C1300cm-1C-N1188cm-1C-O對(duì)氨基水楊酸鈉的紅外吸收?qǐng)D譜33第33頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二八、TLC法

制劑輔料有干擾，采用色譜法分離后鑒別。如：二氟尼柳膠囊。九、HPLC法34第34頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查一、阿司匹林中特殊雜質(zhì)檢查合成工藝35第35頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二檢查——酚、苯酯類雜質(zhì)。原理——根據(jù)這些雜質(zhì)與阿司匹林的酸性強(qiáng)弱，利用它們?cè)谔妓徕c溶液中的溶解度差異，規(guī)定一定量樣品在碳酸鈉溶液中應(yīng)澄清。酚水楊酸苯酯乙酸苯酯乙酰水楊酸苯酯溶液的澄清度36第36頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二——為反應(yīng)中間體和水解產(chǎn)物

乙?；煌耆?chǔ)藏過程中水解原理——水楊酸有游離酚羥基，可與高鐵離子反應(yīng)，產(chǎn)生紫堇色，而阿司匹林不含游離酚羥基，無此反應(yīng)。方法——取一定量樣品和水楊酸對(duì)照品與硫酸鐵銨反應(yīng)，比較紫色深淺，規(guī)定樣品液顏色不得較對(duì)照品顏色深。方法靈敏，可檢出1μg水楊酸應(yīng)用范圍——原料，片劑水楊酸37第37頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林腸溶片：1.5%；阿司匹林栓、腸溶膠囊、泡騰片：3.0%（HPLC法）38第38頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二合成工藝與降解反應(yīng)二、對(duì)氨基水楊酸鈉中特殊雜質(zhì)的檢查合成降解氧化成聯(lián)苯醌紅棕色39第39頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二——為反應(yīng)中間體和降解產(chǎn)物方法1——雙相滴定法ChP(2010)原理——利用雜質(zhì)易溶于乙醚，用乙醚提取，使兩者分離，再用鹽酸滴定，以甲基橙為指示劑。間氨基酚乙醚相水相40第40頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二雙相滴定法〔ChP（2010年版）〕

取本品，研細(xì)，稱取3.0g，置50ml燒杯中加入用熔融氯化鈣脫水的乙醚25ml，用玻璃棒攪拌1分鐘，注意將乙醚溶液濾入分液漏斗中，不溶物再用脫水的乙醚提取2次，每次25ml，乙醚溶液濾入同一分液漏斗中，加水10ml與甲基橙指示液1滴，振搖后，用鹽酸滴定液（0.02mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正，消耗鹽酸滴定液（0.02mol/L）不得超過0.3ml。41第41頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二方法2——離子對(duì)HPLC法USP(29)色譜條件：分析柱——C18；流動(dòng)相——磷酸鹽緩沖液-甲醇-氫氧化四丁基銨流速——1.5ml/min檢測(cè)波長——254nm內(nèi)標(biāo)溶液——磺胺溶液（5g/ml）雜質(zhì)對(duì)照液——間氨基酚溶液（12g/ml）供試品溶液——對(duì)氨基水楊酸鈉樣品液（6.9mg/ml）42第42頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：雜質(zhì)對(duì)照液10ml+內(nèi)標(biāo)溶液10ml100ml（1）供試品溶液10ml+內(nèi)標(biāo)溶液10ml100ml（2）

R——取溶液（1）重復(fù)進(jìn)樣6次，間氨基酚與內(nèi)標(biāo)磺胺峰的分離度應(yīng)大于2.5；

RSD——小于7%（按A雜/A內(nèi)比值計(jì)算）；測(cè)定方法：取溶液（1）和（2）分別進(jìn)樣，記錄色譜圖計(jì)算tR內(nèi)/tR雜，應(yīng)為0.66

間氨基酚的含量%=10（C對(duì)/C樣）（R樣/R對(duì)）限量0.25%43第43頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二44第44頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二為何采用ion-pairHPLC法？

對(duì)氨基水楊酸鈉具堿性，在水溶液中易離解；離子型化合物或能解離的化合物用常規(guī)HPLC分離時(shí)，常會(huì)出現(xiàn)色譜峰拖尾和保留值不穩(wěn)定等問題，用離子對(duì)色譜則能解決以上問題。離子對(duì)色譜是將離子對(duì)提取與色譜技術(shù)相結(jié)合，適用于pKa在2-8的弱酸和弱堿性化合物的分離，其機(jī)理尚在研究發(fā)展中。通常使用反相ion-pair色譜，因離子對(duì)試劑在極性流動(dòng)相中易于溶解，并易于調(diào)整控制反離子的濃度和流動(dòng)相的pH值。

45第45頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查合成工藝46第46頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二中國藥典（2010）分別采用正相和反相色譜法自身對(duì)照法檢查有關(guān)物質(zhì)A和B。有關(guān)物質(zhì)A：TLC法（正相）p142有關(guān)物質(zhì)B：HPLC法（反相）47第47頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二四、甲芬那酸中特殊雜質(zhì)的檢查合成工藝鄰-氯苯甲酸2，3-二甲基苯胺甲芬那酸檢查項(xiàng)目：銅鹽、有關(guān)物質(zhì)48第48頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二銅鹽檢查法

1、分光光度法（比色法）

樣品熾灼+H2SO4Cu2+調(diào)節(jié)pH值測(cè)定吸收度A435nm規(guī)定——A值不得大于0.35二乙基二硫代氨基甲酸鈉

2、原子吸收分光光度法(BP)——取1g樣品測(cè)定，以銅標(biāo)準(zhǔn)液為對(duì)照，限量10ppm。49第49頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二有關(guān)物質(zhì)：中國藥典（2010)

TLC法薄層板——硅膠GF254展開劑——異丁醇-濃氨水檢測(cè)——254nm紫外光下檢視樣品液1——25mg/ml樣品液2——50g/ml點(diǎn)樣——各20l規(guī)定——樣1雜質(zhì)斑點(diǎn)強(qiáng)度不得超過樣2主斑點(diǎn)限量——0.2%50第50頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二中國藥典（2010）HPLC法p106有關(guān)物質(zhì)：中國藥典、USPHPLC法51第51頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二五、氯貝丁酯中特殊雜質(zhì)的檢查合成工藝對(duì)氯酚對(duì)氯苯氧異丁酸52第52頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二對(duì)氯酚——GC法ChP(2010)色譜條件：分析柱——5%SE-30（甲基硅橡膠），2m玻璃柱；載氣——氮?dú)猓恢鶞亍?60C；檢測(cè)器——FID雜質(zhì)對(duì)照液——0.0025%對(duì)氯酚的三氯甲烷溶液供試品溶液制備： 樣品10g+NaOH氯仿洗滌（棄取），水層+HCl用氯仿提取加氯仿至10ml進(jìn)樣——取對(duì)照液和樣品液分別進(jìn)樣測(cè)定，規(guī)定——樣品中對(duì)氯酚峰不得大于對(duì)照品峰（0.0025%）對(duì)氯酚的檢查是否也可以用HPLC法？揮發(fā)性雜質(zhì)檢查采用什么方法？如何計(jì)算限量？53第53頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二揮發(fā)性雜質(zhì)檢查采用什么方法？如何計(jì)算限量？中國藥典（2010）GCP10954第54頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二高效液相色譜法JP(14)對(duì)氯酚的檢查是否也可以用HPLC法？55第55頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二第四節(jié)含量測(cè)定酸堿滴定法（以阿司匹林為例）雙相滴定法(以苯甲酸鈉為例)紫外分光光度法(丙磺舒,阿司匹林膠囊)HPLC法(阿司匹林栓劑)溴量法(對(duì)氨基水楊酸鈉)56第56頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二ChP用于阿司匹林原料藥的測(cè)定方法——以中性乙醇為溶劑，酚酞為指示劑，用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定。T=M×b/a×mol/L=180.2×0.1=18.02(mg)直接滴定法原理滴定條件應(yīng)用范圍：水楊酸、二氟尼柳、雙水楊酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬等一、酸堿滴定法57第57頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二討論

①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯鍵水解。“中性”是對(duì)中和法所用的指示劑（酚酞）而言

②優(yōu)點(diǎn)：簡便、快速缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）

③適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析。pKa3~6

的藥物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa6~9

的藥物要用非水溶液滴定法58第58頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

原理——利用阿司匹林分子中的酯鍵，先加過量定量的NaOH溶液使之水解，然后用H2SO4滴定剩余的NaOH，同時(shí)做空白。水解后剩余滴定法（USP、JP）T=M/2×0.5=45.04(mg)過量定量如果以硫酸標(biāo)準(zhǔn)液計(jì)，T應(yīng)為多少mg？還有哪個(gè)藥物也可用此法測(cè)定含量？59第59頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

反應(yīng)摩爾比為1∶2

優(yōu)點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾

缺點(diǎn)：酸性雜質(zhì)干擾

羥苯乙酯含量測(cè)定亦可用此法

T=166.2mg/ml60第60頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

ChP用于阿司匹林片劑的含量測(cè)定第1步——用NaOH中和所有的游離酸，不計(jì)量兩步滴定法游離酸61第61頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二第2步——水解與測(cè)定，采用剩余滴定法T=M×0.1=18.02(mg)應(yīng)用：阿司匹林腸溶片，氯貝丁酯p11262第62頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二標(biāo)示量=規(guī)格量=處方量（V空白-V樣品）×F×18.02W×100%樣%×平均片重/標(biāo)示量=相當(dāng)于標(biāo)示量%本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾

63第63頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二二、亞硝酸鈉滴定法

對(duì)氨基水楊酸鈉有芳伯氨基,在HCl中與NaNO2發(fā)生重氮化反應(yīng)Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2Cl+NaCl+2H2O注：對(duì)氨基水楊酸鈉的法定方法——重氮化法（詳見芳胺類一章）64第64頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二這是有機(jī)酸堿金屬鹽類的常用測(cè)定方法，在水和與水不相混溶的有機(jī)溶劑（乙醚）中用標(biāo)準(zhǔn)酸進(jìn)行滴定。例：苯甲酸鈉的含量測(cè)定，以甲基橙為指示劑，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定至水層顯橙紅色。p112水楊酸鈉可否用雙相滴定法測(cè)定含量？三、雙相滴定法65第65頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二乙醚的作用是：萃取反應(yīng)生成的苯甲酸，使水相中的中和反應(yīng)進(jìn)行到底滴定中要強(qiáng)力振搖。隨著滴定不斷進(jìn)行，苯甲酸不斷被萃取入有機(jī)溶劑層，使滴定反應(yīng)完全，終點(diǎn)清晰。優(yōu)點(diǎn)：消除了反應(yīng)產(chǎn)物的干擾溶劑：水——乙醚指示劑：甲基橙HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸鈉)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙

橙紅色66第66頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二四、紫外分光光度法

直接紫外分光光度法丙磺舒片劑含量測(cè)定取10片，稱重，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于丙磺舒60mg加乙醇稀釋至200ml，濾過，取續(xù)濾液5ml，稀釋至100ml，于249nm處測(cè)定吸收度，按E=338計(jì)算含量。AE10010020051/W平均片重規(guī)格=相當(dāng)于標(biāo)示量%100%67第67頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二柱分配色譜-紫外分光光度法

——阿司匹林膠囊測(cè)定（USP）水楊酸的限量測(cè)定樣品的氯仿溶液沖洗：氯仿分次洗（阿司匹林）洗脫：冰HAc+乙醚（解吸）洗脫：氯仿（水楊酸）測(cè)定：306nm，A樣A對(duì)限量：以阿司匹林標(biāo)示量計(jì)，允許水楊酸的量為0.75%三氯化鐵作用——與水楊酸形成紫色配位物，使水楊酸保留在柱上。尿素作用——高濃度尿素的存在可使配位物在柱上的移動(dòng)變慢，譜帶較窄。磷酸的作用——若有少量FeCl3被沖洗下來，色帶變黃，影響結(jié)果，磷酸可與Fe3+形成不溶性磷酸鐵而避免干擾。對(duì)照溶液75g10ml/50ml,樣品液100mg/50ml68第68頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二阿司匹林的含量測(cè)定上樣：樣品的氯仿溶液沖洗：氯仿（棄去）洗脫：冰HAc-CHCl3（阿司匹林+水楊酸）測(cè)定：280nm計(jì)算：對(duì)照品比較法（測(cè)得的是總量）碳酸氫鈉的作用：使阿司匹林和水楊酸均成鈉鹽保留在柱上。冰HAc作用：解吸69第69頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二五、HPLC法阿司匹林栓劑采用HPLC法測(cè)定含量(ChP2010)色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）流動(dòng)相：甲醇-二乙胺水溶液-冰醋酸檢測(cè)波長：280nm內(nèi)標(biāo)物：咖啡因系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：n——按阿司匹林應(yīng)不低于2000，R——阿司匹林、水楊酸與內(nèi)標(biāo)物峰的分離度應(yīng)大于1.5.70第70頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二計(jì)算供試液C樣=（R樣/R標(biāo)）×C標(biāo)

溶液配制：內(nèi)標(biāo)溶液：4mg/ml對(duì)照品溶液：阿司匹林0.15g，精密加內(nèi)標(biāo)液5ml，稀釋至50ml，精密量取2ml，稀釋至50ml。供試品溶液：取5粒，精密稱定，在40-50C水浴上熔融，精密量取適量（相當(dāng)于阿司匹林0.15g），精密加內(nèi)標(biāo)液5ml，加乙醇至50ml，精密量取2ml，稀釋至50ml。C樣×稀釋倍數(shù)×平均粒重稱樣量×標(biāo)示量×100%相當(dāng)于標(biāo)示量%=71第71頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二為什么阿司匹林栓劑采用HPLC法測(cè)定含量?其他制劑是否也可以用HPLC法測(cè)定含量?72第72頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二

《中國藥典》（2010年版）阿司匹林腸溶膠囊、栓劑，布洛芬緩釋膠囊、口服溶液、滴劑、糖漿劑。

USP(29)阿司匹林片、緩釋片、延時(shí)釋放片泡騰片、膠囊、緩釋膠囊、丸劑及多種復(fù)方制劑、丙璜舒、甲芬那酸及其膠囊、二氟尼柳及其片、對(duì)氨基水楊酸鈉及其片、雙水楊酯及其片和膠囊、布洛芬及其片、口服液、布洛芬為麻黃堿片等。73第73頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二利用對(duì)氨基水楊酸鈉分子結(jié)構(gòu)中酚羥基鄰對(duì)位的氫較活潑，易被鹵化，在酸性條件下與過量溴定量反應(yīng)，剩余的溴用碘量法測(cè)定。六、溴量法74第74頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二原理75第75頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二方法本品0.2g→100.0mL取20.0mL+Br（0.1mol/L）25.0mL+KBr溶液+HCl-冰HAc→密塞，放置10min+KI→密塞，放置5min→用Na2S2O3

（0.1mol/L）滴定，近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，滴定至藍(lán)色消褪，將結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mLBr（0.1mol/L）相當(dāng)于2.9187mg對(duì)氨基水楊酸鈉。：×100%W（V0－V）×F×T含量%=76第76頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二第五節(jié)體內(nèi)藥物分析一、血清中阿司匹林和水楊酸濃度的高效液相色譜測(cè)定法二、尿中丙璜舒的固相萃取凈化-高效液相色譜分析法三、HPLC法測(cè)定人血漿中布洛芬含量四、血漿中二氟尼柳的固相萃取-反相液相色譜測(cè)定法77第77頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二98：80．鑒別水楊酸及其鹽類，最常用的試液是A.碘化鉀B.碘化汞鉀C.三氯化鐵D.硫酸亞鐵E.亞鐵氰化鉀

（C）78第78頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二95：129.乙酰水楊酸片劑可采用的測(cè)定方法為A.非水滴定法B.水解后剩余滴定法C.兩步滴定法D.柱色譜法E.雙相滴定法

（CD）79第79頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二98：134．測(cè)定阿司匹林片和栓中藥物的含量可采用的方法是A.重量法B.酸堿滴定法C.高效液相色譜法D.絡(luò)合滴定法E.高錳酸鉀法

（BC）80第80頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二99：81.兩步滴定法測(cè)定阿司匹林片的含量時(shí)，每1ml氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）相當(dāng)于阿司匹林（分子量=180.16）的量是A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg

（A）81第81頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二反應(yīng)摩爾比為1∶1T——滴定度，每1ml滴定液相當(dāng)于被測(cè)組分的mg數(shù)c——滴定液濃度，mol/LM——被測(cè)物的摩爾質(zhì)量，g/moln——1mol樣品消耗滴定液的摩爾數(shù)，常用反應(yīng)摩爾比體現(xiàn)，即反應(yīng)摩爾比為1∶n82第82頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二96：78．苯甲酸鈉的含量測(cè)定，中國藥典（2005年版）采用雙相滴定法，其所用的溶劑體系為A.水—乙醇B.水—冰醋酸C.水—氯仿D.水—乙醚E.水—丙酮

（D）83第83頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二99：83.雙相滴定法可適用的藥物為A.阿司匹林B.對(duì)乙酰氨基酚C.水楊酸D.苯甲酸E.苯甲酸鈉

（E）84第84頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二99x：[121—125]含量測(cè)定方法（中國藥典2005年版）為A.直接中和滴定法B.兩步滴定法C.兩者均可D.兩者均不可99x：121．阿司匹林片99x：122．阿司匹林原料藥99x：123.對(duì)氨基水楊酸鈉99x：124.阿司匹林栓劑99x：125.阿司匹林腸溶劑（B）（A）（D）（D）（B）85第85頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例[1～5]A．兩步酸堿滴定法B．直接酸堿滴定法C．兩者皆是D．兩者皆不是1.苯甲酸鈉的測(cè)定2.氯貝丁酯的測(cè)定3.鹽酸的測(cè)定4.酸堿滴定法5.阿司匹林片的測(cè)定（D）（A）（B）（C）（A）86第86頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例6.采用直接酸堿滴定法測(cè)定阿司匹林的含量時(shí)，已知阿司匹林的分子量為180.2，所用氫氧化鈉滴定溶液的濃度為0.1mol/L，請(qǐng)問1ml氫氧化鈉滴定溶液相當(dāng)于阿司匹林的量應(yīng)是A.180.2mgB.180.2gC.18.02mgD.1.802mgE.9.01mg

（C）87第87頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例7.阿司匹林加碳酸鈉試液加熱后，再加稀硫酸酸化，此時(shí)產(chǎn)生的白色沉淀應(yīng)是

A.苯酚B.乙酰水楊酸C.水楊酸D.醋酸鈉

E.醋酸苯酯

（C）88第88頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例8.水楊酸與三氯化鐵試液生成紫堇色產(chǎn)物的反應(yīng)，要求溶液的pH值是A.pH10.0B.pH2.0C.pH7～8D.pH4～6E.pH2.0±0.1

（D）89第89頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例9.兩步滴定法測(cè)定阿司匹林片或阿司匹林腸溶片時(shí)，第一步滴定反應(yīng)的作用是A.測(cè)定阿司匹林含量B.消除共存酸性物質(zhì)的干擾C.使阿司匹林反應(yīng)完全D.便于觀測(cè)終點(diǎn)

E.有利于第二步滴定

（B）90第90頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例10．對(duì)氨基水楊酸鈉中的特殊雜質(zhì)是A.水楊酸B.間氨基酚C.氨基酚D.苯酚

E.苯胺

（B）91第91頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例11.能用與FeC13試液反應(yīng)產(chǎn)生現(xiàn)象鑒別的藥物有

A．苯甲酸鈉

B．水楊酸

C．對(duì)乙酰氨基酚

D．氫化可的松

E．丙酸睪酮

（ABC）92第92頁，共102頁，2023年，2月20日，星期二例12.采用雙相滴定法測(cè)定苯甲酸鈉含量時(shí)，加入乙醚的目的是

A.防止反應(yīng)產(chǎn)物的干擾

B.乙醚層在水上面，防止樣品被氧化

C.消除酸堿性雜質(zhì)的干擾

D.防止樣品水解

E.以上都不對(duì)

（A）