鑒別試驗課件

第二章鑒別試驗Contents概述鑒別試驗項目鑒別方法鑒別試驗條件概述藥物的鑒別試驗（identificationtest）目的——判斷藥物的真?zhèn)?，是藥品質(zhì)量檢驗的首項任務藥典收載的鑒別試驗——均為用來證實貯藏的藥物是否為其所標示的藥物這些方法有一定的專屬性，但不能賴以鑒別未知物對于原料藥，還應結(jié)合性狀項下的外觀和物理常數(shù)進行綜合判斷晶型藥物的多晶型現(xiàn)象極為普遍，晶型不同，它們的物理性質(zhì)如密度、熔點、硬度、外觀、溶解度和溶出速度等方面均有顯著性差異，從而影響藥物穩(wěn)定性、生物利用度、毒副反應等P39鑒別晶型主要是依據(jù)不同晶型具有不同的理化特性及光譜學特性，采用熔點法、熱分析法、紅外分光光度法及X-射線衍射法等進行鑒別熔點定義固體——液體的溫度（1.0～1.5℃/min）熔融同時分解的溫度（2.5～3.0℃/min）初熔至全熔的一段溫度ChP收載的方法第一法：測定易粉碎的固體藥品第二法：測定不易粉碎的固體藥品第三法：測定凡士林或其他類似物要求報告初熔和終熔比旋度

[α]tD是手性藥物特性及其純度的主要指標在一定波長（589.3nm）與溫度（20℃）下，偏振光透過長1dm，含旋光性物質(zhì)1g/1mL的溶液時測得的旋光度α，稱為比旋度。注意：溶劑，pH，濃度等對比旋度的影響吸收系數(shù)在給定波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度（C）、單位液層厚度（L）時的吸光度，稱為吸收系數(shù)（E1%1cm）E1%1cm：中國藥典收載的方法是指在一定波長下，溶液濃度為1%（W/V），厚度為1cm是的吸光度陰、陽離子的特殊反應例：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽的焰色反應取鉑絲，鹽酸濕潤，蘸取供試品，無色火焰中燃燒，火焰顯各離子的特征色鈉離子鉀離子鈣離子典型官能團反應丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機氟化物類、水楊酸鹽、枸櫞酸鹽、乳酸鹽等鑒別反應

例：有機氟化物鑒別

專屬鑒別試驗根據(jù)每一種藥物化學結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學特性不同，選用某些特有的靈敏的定性反應，來鑒別藥物的真?zhèn)巍Ｊ亲C實某一種藥物的依據(jù)例：巴比妥類藥物甾體激素類藥物三、鑒別方法常用的方法有：化學法，光譜法，色譜法要求：專屬，再現(xiàn)，靈敏，操作簡便，快速

1.化學鑒別法——呈色，沉淀，熒光，氣體三氯化鐵——酚羥基（紫色）重氮化-偶合——芳伯胺基（橙紅）茜素氟藍法——有機氟化物（藍紫色）雙縮脲——氨基醇結(jié)構(gòu)（藍紫色）Vitali反應——托烷生物堿類（深紫色）四氮唑——腎上腺皮質(zhì)激素類（紅色或藍色）茚三酮——類似氨基酸結(jié)構(gòu)（藍紫色）沉淀、熒光反應

硝酸銀——丙二酰脲類、氯化物、微C銀鏡反應——異煙肼氧化亞銅——葡萄糖銅鹽——磺胺類三氯化鐵——苯甲酸鹽重金屬離子——利多卡因生物堿沉淀劑——氮雜環(huán)類在硫酸性溶液中本身有熒光——硫酸奎寧于適當試劑反應產(chǎn)生熒光——維B1的硫色素反應光譜鑒別法

1、紫外光譜法（UV）（1）測定最大吸收波長，或同時測定最小吸收波長（2）測定一定濃度的供試液在最大吸收波長處的吸光度（3）規(guī)定吸收波長和吸光度比值法（4）經(jīng)化學處理后，測定其反應產(chǎn)物的吸收光譜特性應用舉例地蒽酚的鑒別試驗：取含量測定項下的溶液掃描240～400nm范圍，在257、289與356nm的波長處有最大吸收。規(guī)定：A257/A289應為1.06～1.10A356/A289應為0.90～0.94對于一個藥物多個吸收峰的峰值相差較大時，采用單一濃度不易觀察到全部吸收峰，可采用兩種濃度的供試液分別測定其最大吸收波長。紅外光譜法（IR）

IR是一種專屬性強、應用廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，特別適合用于其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺類、甾體激素類和半合成抗生素類藥品測定方法：標準圖譜對照法（ChP）對照品比較法（USP）注意問題（1）規(guī)定樣品前處理方法（2）當未規(guī)定藥用晶型時，可采用對照品，并用適當溶劑進行重結(jié)晶（3）已規(guī)定藥用晶型的，則應采用相應藥用晶型的對照品依法比對制劑的紅外鑒別

（1）品種正文中規(guī)定預處理方法（2）輔料無干擾，與原料藥的標準圖比對（3）如輔料干擾不能完全消除，在指紋區(qū)可規(guī)定3～5個待測成份的特征吸收峰（cm-1），其誤差應小于0.5%一些新的鑒別方法近紅外光譜法（12800～4000cm-1）核磁共振法（NMR）亞硝酸戊酯的NMR法鑒別（USP法）亞硝酸戊酯（AmylNitrite）是3-甲基-1-丁醇和2-甲基-1-丁醇亞硝酸酯的混合物X射線粉末衍射法例如：氨芐西林四種固體的粉末X-射線衍射圖譜P33色譜（TLC,HPLC,GC）鑒別法利用物質(zhì)各自的特征色譜行為（Rf值或tR值）進行鑒別試驗采用與對照品在相同條件下進行色譜分離，根據(jù)兩者保留行為和檢測結(jié)果是否一致來驗證藥品的真?zhèn)舞b別試驗的專屬性要求空白試驗（陰性對照）在與供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外（或以等量溶劑代替