園林物離體快速繁殖

園林物離體快速繁殖第1頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.1污染污染：是指在組培過(guò)程中，由于真菌、細(xì)菌等微生物的污染，在培養(yǎng)容器內(nèi)孳生大量的菌斑，使培養(yǎng)材料不能正常生長(zhǎng)和發(fā)育的現(xiàn)象。污染的原因與控制：原因:(1)培養(yǎng)基及各種使用器具消毒不徹底;(2)外植體滅菌時(shí)不徹底，有菌殘存在細(xì)胞組織中；（3）操作時(shí)人為因素帶入；（4）環(huán)境不清潔；（5）超凈工作區(qū)域污染?？刂疲浩骶邷缇煌庵搀w；接種操作；環(huán)境條件；超凈工作臺(tái)。第2頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.2材料死亡材料死亡的原因:外植體滅菌過(guò)度；污染；培養(yǎng)基不適宜或配置有問(wèn)題；培養(yǎng)條件惡化。在生產(chǎn)過(guò)程中如何減輕或者避免植物材料的死亡？（1）選用比較溫和的滅菌劑，降低藥劑濃度，縮短消毒時(shí)間，選用其他部位，最好在生長(zhǎng)季節(jié)取芽。（2）注意環(huán)境和個(gè)人衛(wèi)生，嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行操作。（3）認(rèn)真配制各種激素、母液、培養(yǎng)基，選用鹽含量較低的培養(yǎng)基，也可試用1/2或1/4培養(yǎng)基，并調(diào)整各種激素額配比和用量，在培養(yǎng)基中適當(dāng)添加抗生素、活性炭及必需的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)。（4）改善培養(yǎng)環(huán)境，及時(shí)轉(zhuǎn)移和分瓶。（5）加強(qiáng)組培苗的過(guò)渡管理。第3頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.3玻璃化玻璃化現(xiàn)象：玻璃化是試管苗的一種生理失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn)行離體繁殖時(shí)，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會(huì)出現(xiàn)半透明狀和水漬狀。第4頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五玻璃化的影響是瓶?jī)?nèi)的小苗過(guò)度生長(zhǎng)，但有用的苗很少。各種不同的花卉品種，玻璃化發(fā)生頻率各不相同。在情人草中較少見(jiàn)；香石竹中則較普遍。據(jù)報(bào)道，已經(jīng)從溫度、光照、激素種類和濃度、瓊脂用量、酸堿度、糖濃度、碳氮比、青霉素、乙烯等方面，對(duì)香石竹玻璃化苗的發(fā)生進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：玻璃化苗是在芽分化啟動(dòng)后的生長(zhǎng)過(guò)程中，由碳水化合物、氮代謝、和水分狀態(tài)等發(fā)生生理性異常所引起，它由多種因素影響和控制‘產(chǎn)生玻璃化的主要原因是：激素濃度；溫度；濕度；培養(yǎng)基的硬度；光照時(shí)間；培養(yǎng)基成分。減少玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生：可以通過(guò)降低培養(yǎng)基的水位；減少培養(yǎng)基中的含氮化合物的用量；增加光照強(qiáng)度；調(diào)整培養(yǎng)溫度；降低培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素的用量；提高培養(yǎng)基的硬度等措施。第5頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.4褐化褐化：褐化是指在組培過(guò)程中，由培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。第6頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五褐化的發(fā)生是由外植體中的酚類化合物與多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌類化合物，醌類化合物在絡(luò)氨酸酶的作用下，與外植體組織中的蛋白質(zhì)發(fā)生聚合，進(jìn)一步引起其他酶系統(tǒng)失活，導(dǎo)致組織代謝紊亂，生長(zhǎng)受阻，最終逐漸死亡。引起褐變的原因包括外植體本身、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件等方面的影響。（1）種類品種（2）材料的年齡和大小（3）光照（4）取材時(shí)間和部位（5）溫度此外，培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)方式等對(duì)褐化的發(fā)生也有一定影響。針對(duì)以上褐化的原因，在生產(chǎn)上我們?cè)撊绾蝸?lái)減輕褐化現(xiàn)象？第7頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五

為了防止外植體的褐變，需要選取酚類化合物含量較低的實(shí)驗(yàn)材料，選擇無(wú)機(jī)鹽含量較低，不加肌醇的培養(yǎng)基，并在較弱的光線或黑暗的條件中進(jìn)行培養(yǎng)。

在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑是防止褐變的有效措施。常用的抗氧化劑有抗壞血酸（VC）、檸檬酸、半胱氨酸、二硫蘇糖醇和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等。可用抗氧化劑溶液預(yù)先處理外植體，或者在抗氧化劑溶液中切割和剝離外植體。必要時(shí)還可以將幾種抗氧化劑結(jié)合使用。也可以將抗氧化劑加入到培養(yǎng)基中。另一種方法是在培養(yǎng)基中加入0.5～1％的活性炭，吸附對(duì)生長(zhǎng)有抑制作用的褐色醌類物質(zhì)。應(yīng)當(dāng)注意的是：活性炭也能吸附培養(yǎng)基中的激素類物質(zhì)，影響莖尖的分化和生長(zhǎng)，因此在使用活性炭的場(chǎng)合，需要適當(dāng)提高培養(yǎng)基中激素的濃度。還有一種辦法是不斷地（每隔1～2d）將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上，以擺脫老培養(yǎng)基中褐色物質(zhì)的不利影響。在使用液體培養(yǎng)基的情況下，這種方法相當(dāng)有效。第8頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.5黃化黃化：是指在組培過(guò)程中由于培養(yǎng)基的成分、環(huán)境、激素、碳水化合物等各種因素引起的幼苗整株失綠，全部或部分葉片黃化、斑駁。這一現(xiàn)象在植物組培中比較常見(jiàn)，特別在部分木本花卉中較為多見(jiàn)。第9頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五引起黃化的原因:是培養(yǎng)基中的Fe的含量不足；各礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不均衡；培養(yǎng)環(huán)境通氣不良，瓶?jī)?nèi)乙烯含量升高；激素配比失當(dāng)；糖用量不足或長(zhǎng)時(shí)間不轉(zhuǎn)移糖已耗盡；pH變化過(guò)大；培養(yǎng)溫度不適；光照不足等。解決方法是，首先在配制母液和培養(yǎng)基的制作過(guò)程中，要檢查儀器設(shè)備是否準(zhǔn)確，還要認(rèn)真細(xì)致地核對(duì)每項(xiàng)稱量的每一環(huán)節(jié)；及時(shí)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物；使用透氣的封口膜以改善瓶?jī)?nèi)通氣狀況；適當(dāng)調(diào)節(jié)pH、激素配比和無(wú)機(jī)鹽濃度；配制培養(yǎng)基時(shí)切記不要忘記加糖；控制培養(yǎng)室的溫度；適當(dāng)增加光照；另外，在培養(yǎng)基在添加抗生素類物質(zhì)如青霉素、鏈霉素、頭孢霉素等，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)幼苗黃化現(xiàn)象，應(yīng)適當(dāng)減少用量或停止使用。第10頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.6變異和畸形變異和畸形：是指在組培過(guò)程中，由于激素、環(huán)境等因素的作用和影響，使組培苗的外部形態(tài)和內(nèi)部生理發(fā)生變化，引起的畸形、矮化、叢生、葉片增厚、莖桿變扁呈掃把狀、甚至中性也發(fā)生變化的現(xiàn)象。第11頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五發(fā)生變異和畸形的原因主要是由激素的種類和濃度決定’其次,溫度過(guò)高也有一定的影響。不同種類和品種發(fā)生變異的頻率和程度各不相同，香石竹在使用BA時(shí)比KT更容易發(fā)生叢生變異，而且在較低濃度下，就會(huì)產(chǎn)生三葉輪生甚至成叢狀的形態(tài)變異’這些變異植株下地后不能正常地生長(zhǎng)和開(kāi)花，是生產(chǎn)上不能使用的無(wú)效苗。一般BA的濃度高于0.5mg/L時(shí)，香石竹的叢苗開(kāi)始明顯增加，BA濃度在0.2mg/L并配合KT0.1-0.3mg/L時(shí)，可使香石竹多數(shù)品種的叢生率控制在3%-5%內(nèi)。在非洲菊、勿忘我中也存在比較普遍的多心叢生現(xiàn)象，下地后表現(xiàn)為分宓多，開(kāi)花難，且花枝細(xì)弱，品質(zhì)差的特點(diǎn)。在非洲菊和勿忘我的黃色品種中比較突出。通過(guò)降低細(xì)胞分裂素的用量，可以稍有好轉(zhuǎn)，但增值系數(shù)明顯降低，是生產(chǎn)成本增加。在愈傷組織誘導(dǎo)中，添加2，4-D會(huì)加劇變異的發(fā)生。在非洲紫羅蘭葉子誘導(dǎo)不定芽產(chǎn)生時(shí)，如果細(xì)胞分裂素濃度過(guò)高，會(huì)出現(xiàn)不定芽只長(zhǎng)葉子，不見(jiàn)成苗的情況，而且在這些葉片的表面及邊緣又會(huì)在生出不定芽。在非洲菊增值中，當(dāng)BA大于5mg/L時(shí)，葉片就會(huì)出現(xiàn)皺縮和黃化。在激素比例不均衡時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)一些畸形苗。因此，可以認(rèn)為細(xì)胞分裂素濃度和種類是引起變異的主要因子。第12頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五

在環(huán)境條件惡化和不適時(shí)，也會(huì)發(fā)生一些比較明顯的形態(tài)變異和畸形。長(zhǎng)時(shí)間的過(guò)低溫度會(huì)使組培苗僵化、節(jié)間矮縮；而溫度過(guò)高時(shí)，苗會(huì)徒長(zhǎng)、細(xì)弱；有時(shí)在激素的共同作用下，還可能出現(xiàn)瓶?jī)?nèi)開(kāi)花的情況。但瓶?jī)?nèi)開(kāi)花除了與環(huán)境和激素有關(guān)外，還與接種外植體的生理年齡相關(guān)。有時(shí)由于激素等因素的作用，根部會(huì)出現(xiàn)只有1-2條根，但特別粗、極易脫落，從形態(tài)生觀察就不正常，過(guò)渡的成活率很低。非洲菊在繁殖階段BA過(guò)高，生根時(shí)NAA濃度也高時(shí)，均會(huì)出現(xiàn)根系不正常的現(xiàn)象。根據(jù)各個(gè)花卉品種的組培生長(zhǎng)習(xí)性，可以通過(guò)降低細(xì)胞分裂素濃度，調(diào)整生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例，改善環(huán)境條件等措施來(lái)減輕變異和畸形的發(fā)生及緩解發(fā)生的程度。

第13頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.7增值率低下或過(guò)剩

增值率的高低，直接影響組培生產(chǎn)的成本和效益，也關(guān)系到一個(gè)有市場(chǎng)前景的優(yōu)良品種能否很快轉(zhuǎn)化為有競(jìng)爭(zhēng)的產(chǎn)品，在生產(chǎn)上要千方百計(jì)的提高增殖率。但也要考慮到通過(guò)調(diào)整細(xì)胞分裂素濃度提高增殖率的同時(shí)，會(huì)出現(xiàn)增殖過(guò)剩，小苗分化過(guò)度，密集叢生，微型化，不能分株，甚至產(chǎn)生各種各樣的形態(tài)變異，有的即使能分株，進(jìn)行生根，但下地后還會(huì)保持旺盛的分生，以至發(fā)蓬過(guò)大不能正常的生產(chǎn)和開(kāi)花。第14頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五增值率低下或旺盛的原因關(guān)聯(lián)性品種特性激素濃度配比第15頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五組培苗瘦弱或徒長(zhǎng)的原因（1）細(xì)胞分裂素濃度過(guò)高（2）溫度過(guò)高（3）光照不足（4）培養(yǎng)基水分過(guò)多（5）通氣不良第16頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.8組培苗瘦弱或徒長(zhǎng)正常的組培苗應(yīng)當(dāng)葉色濃綠，植株粗壯。如果在增殖階段出現(xiàn)芽苗瘦弱，徒長(zhǎng)或節(jié)間過(guò)長(zhǎng)，這種苗應(yīng)當(dāng)轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)時(shí)能夠生根，在環(huán)境條件較好的情況下。也會(huì)稍轉(zhuǎn)粗壯，但總體看來(lái)，苗的株型，葉色，葉片大小等性狀還是差于生產(chǎn)正常的增殖苗；有時(shí)即便是正常或健壯的增殖苗，若生根階段培養(yǎng)基不適宜或培養(yǎng)的環(huán)境條件得不到保障，往往根原基及根還未形成，就很快表現(xiàn)出小苗徒長(zhǎng)，節(jié)間明顯伸長(zhǎng)，葉片變細(xì)，變薄，變嫩并出現(xiàn)黃化。這樣的苗進(jìn)行過(guò)度培養(yǎng)時(shí)，會(huì)出現(xiàn)萎焉和爛根，很容易死亡，過(guò)度成活率極低。第17頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五措施（1）根據(jù)品種特點(diǎn)減少細(xì)胞分裂素用量.加速繼代轉(zhuǎn)瓶的速度，適當(dāng)降低接種密度。（2）利用空調(diào)降低培養(yǎng)室溫度。（3）提高光照強(qiáng)度和延長(zhǎng)光照時(shí)間，充分利用較強(qiáng)的自然光作光源，調(diào)整擺放位置和密度（4）調(diào)整培養(yǎng)基硬度，改用透氣膜作封口，進(jìn)行培養(yǎng)基及環(huán)境因子的綜合調(diào)整，力求獲得最優(yōu)質(zhì)健壯的組培瓶苗。第18頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.9不生根或生根率低在進(jìn)行組培生產(chǎn)時(shí)，經(jīng)常會(huì)碰到有的種類長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)生根或生根率很低，有時(shí)又是平時(shí)生根良好的品種突然長(zhǎng)根不良或長(zhǎng)根時(shí)間延長(zhǎng)，無(wú)論是何種原因?qū)е律缓?，這些苗出瓶后，在過(guò)度培養(yǎng)中，都和難再長(zhǎng)出新的根系，多數(shù)情況下，這種苗移栽入基質(zhì)后，不能適應(yīng)外面的環(huán)境條件，有的很快死亡，有的1~2d后就開(kāi)始腐爛。第19頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五原因分析（1）種類和品種間的差異（2）激素種類和濃度（3）環(huán)境條件（4）繁殖苗基部受損第20頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五改善措施（1）對(duì)于難生根的品種，借鑒相關(guān)或相似種類的文獻(xiàn)資料，從激素的種類和水平，環(huán)境條件等方面進(jìn)行綜合調(diào)控。必要時(shí)添加有機(jī)物或減少鹽分含量調(diào)整溫度，光照和通氣狀況，改用濾紙橋進(jìn)行液體培養(yǎng)。（2）掌握各個(gè)種類的操作要領(lǐng)和質(zhì)量要求，切削繁殖苗基部時(shí)，刀要快，用力要均勻，做到平整而無(wú)損傷。（3）用于生根的苗，其基部要盡量不帶愈傷組織，以利于提高生根的質(zhì)量。第21頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.10出瓶過(guò)渡苗死亡率高過(guò)渡是組織生產(chǎn)的最后一關(guān)，也是難度比較大的一個(gè)環(huán)節(jié)。是從室內(nèi)各種條件相對(duì)可控，向自然環(huán)境轉(zhuǎn)變的一個(gè)過(guò)渡時(shí)期，稍不小心，就會(huì)使組織苗全軍覆滅。有很多組培室能夠大量生產(chǎn)組培瓶苗，但由于過(guò)渡技術(shù)掌握不好，在過(guò)渡環(huán)節(jié)中組培苗死亡率高，而使生產(chǎn)無(wú)法正常進(jìn)行。污染控制和提高過(guò)渡成活率是組培生產(chǎn)，特別是大規(guī)模工廠化生產(chǎn)的兩個(gè)最關(guān)鍵技術(shù)，他直接關(guān)系到組培室能否生存和發(fā)展。第22頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五主要原因（1）組培苗質(zhì)量差（2）環(huán)境條件不適（3）過(guò)渡苗的管理不精致第23頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五措施（1）有針對(duì)性地調(diào)整配方，改善培養(yǎng)條件，努力提高組培苗質(zhì)量，培養(yǎng)葉色濃綠，株型矮壯，生根良好，大小適中，群體整齊的小苗（2）及時(shí)出瓶，根據(jù)各個(gè)種類和品種的特性，盡快移栽到適宜的培養(yǎng)基質(zhì)中。清洗和移栽時(shí)要盡量小心，不要損傷小苗的葉片和根系，無(wú)根小苗可采取蘸取根水或生根粉后移栽，促進(jìn)組培苗在栽培基質(zhì)中生根。（3）改善過(guò)渡培養(yǎng)的環(huán)境條件，有條件的單位和企業(yè)可采用自控溫室，并配合噴灌使用，能大大提高過(guò)渡的成活率，但設(shè)備的投入較大。（4）采取配套的管理措施，加強(qiáng)過(guò)渡苗的肥水管理和病蟲(chóng)害防治。（5）加強(qiáng)過(guò)渡苗的肥水管理和病蟲(chóng)害防治。第24頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5.4.11計(jì)劃、生產(chǎn)與銷售環(huán)節(jié)組培苗工廠化生產(chǎn)是一個(gè)系統(tǒng)工程，它包括從品種的選擇→外植體選取→滅菌和消毒→初代培養(yǎng)→擴(kuò)繁和繼代→生根培養(yǎng)→過(guò)渡培養(yǎng)→商品苗→銷售→田間栽培等一系列過(guò)程，只要其中的任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題，都會(huì)影響到整個(gè)生產(chǎn)計(jì)劃和任務(wù)的完成，所以在制定計(jì)劃時(shí)要充分考慮到各種可能發(fā)生的情況，同時(shí)又不能把余地留的太大，以免生產(chǎn)過(guò)多造成浪費(fèi)和增加成本，或者不能按訂單提供相應(yīng)的產(chǎn)品。第25頁(yè)，共28頁(yè)，2023年，2月20日，星期五實(shí)際操作中碰到的問(wèn)題（1）品種不對(duì)路（2）數(shù)量不能滿足市場(chǎng)需求（3）生產(chǎn)過(guò)量（4）不能按預(yù)定時(shí)間提供各種