食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定發(fā)布單位:太原市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局報(bào)送時(shí)間:2007年12月19日 瀏覽次數(shù):342附件1范圍

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定

GB/T4789.2-2003本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中菌落總數(shù)的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中菌落總數(shù)的測(cè)定。術(shù)語(yǔ)1mL(g只包括一群在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。引用標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法、培養(yǎng)基和試劑設(shè)備和材料4.1 冰箱：0～4℃。均質(zhì)器或滅菌乳缽。架盤(pán)藥物天平：0g～500g0.5g。菌落計(jì)數(shù)器。4X。滅菌吸管：1mL（0.01mL）10mL（0.1mL）。滅菌錐形瓶：500mL。5mm。90mm。16X16。500mL。電爐。試管架。酒精燈。。滅菌鑷子、滅菌刀或剪子等。培養(yǎng)基和試劑營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按GB/T4789.284.7磷酸鹽緩沖稀釋液：按GB/T4789.283.220.85%滅菌生理鹽水。75%乙醇。檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序如下。檢樣→2～31mL做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液每皿內(nèi)加入適量營(yíng)養(yǎng)瓊脂菌落計(jì)數(shù)36℃±1℃ 48h±2h報(bào)告操作步驟檢樣稀釋及培養(yǎng)25mL25g225mL1均勻稀釋液。8000r/min～10000r/min1min,做成1:10的均勻稀釋液。1mL1∶101mL9mL1mL1011mL2～3101mL4646±1℃水15mL1mL的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照36±148±2h。菌落計(jì)數(shù)方法做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告平板菌落數(shù)的選擇30～3002每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。稀釋度的選擇30～3001)。30～300223)。300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘14)。15)。16)。30～3003003030017)。菌落數(shù)的報(bào)告100100101例次10-1例次10-1稀釋液及菌落數(shù)10-2兩稀釋液10-3之比菌落總數(shù)[cfu/g(mL)]報(bào)告方式[cfu/g(mL)]1多不可計(jì)16420-16400160001.6X1042多不可計(jì)295461.637750380003.8X1043多不可計(jì)271602.227100270002.7X1044多不可計(jì)多不可計(jì)313-3130003100003.1X105527115-2702702.7X1026000-<1X10<107多不可計(jì)30512-30500310003.1X104附件2GB/T4789.3-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中大腸菌群的測(cè)定。術(shù)語(yǔ)大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽胞食品中大腸菌群數(shù)系以100mL(g)檢樣內(nèi)大腸菌群最可能數(shù)(MPN)表示。引用標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法、培養(yǎng)基和試劑設(shè)備和材料4.1 溫箱：36±1℃。4.2 冰箱：0～4℃。4.3 恒溫水?。?4.5±0.5℃。天平。顯微鏡。均質(zhì)器或乳缽。90mm。試管。吸管。500mL。5mm。載玻片。酒精燈。試管架。培養(yǎng)基和試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管：按GB/T4789.284.9伊紅美藍(lán)瓊脂平板：按GB/T4789.284.25乳糖發(fā)酵管：按GB/T4789.284.105.4 ECGB/T4789.284.11磷酸鹽緩沖稀釋液：按GB/T4789.283.22生理鹽水。革蘭氏染色液：按GB4789.282.2檢驗(yàn)程序大腸菌群檢驗(yàn)程序如下：（圖略）稀釋檢樣乳糖膽鹽發(fā)酵管48h±2h產(chǎn)氣大腸菌群陰性伊紅美藍(lán)瓊脂平板48h±2h不產(chǎn)氣報(bào)告革蘭氏染色乳糖發(fā)酵管48h±2h革蘭氏陽(yáng)性革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌產(chǎn)氣不產(chǎn)氣報(bào)告操作步驟檢樣稀釋25mLg225mL1∶108000～10000r/min1min1∶10勻稀釋液。1mL1∶101mL9mL1∶1001mL101mL根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋3陽(yáng)性管數(shù)0.1mL(g)X30.01mL(g)X3陽(yáng)性管數(shù)0.1mL(g)X30.01mL(g)X3MPN100mL(g)95%可信限1mL(g)X3下限上限將待檢接種于乳糖發(fā)酵管內(nèi)，量在1mL者，用雙料膽鹽發(fā)酵管1mL用單料乳糖發(fā)酵管。每3置36±1℃內(nèi)，培養(yǎng)24±2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為大腸菌群陰性，如有者，則按下列程序進(jìn)行。分離培養(yǎng)36±1然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)。證實(shí)試驗(yàn)1～236±1桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。報(bào)告根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數(shù)MPN100mL(g)大腸菌群的1)。000<30<59000130002600039001030<5130011600129001312002060021900221200231600309003113003216003319010040<520010170102101021101031501107010230111110303601121501131902009010360201140303702022002032603002304012003013907013003026401503800303950注1:本表采用3個(gè)稀釋度[1mL(g)、0.1mL(g)、0.01mL(g)]，每稀釋度三管2：2：10mL(g)、1mL(g)0.1mL(g)100.1mL(g)、0.01mL(g)、0.001mL(g)10倍。其余可類推。表GB/T4789.15-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中大腸菌群的測(cè)定。引用標(biāo)準(zhǔn)GB4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法、培養(yǎng)基和試劑設(shè)備和材料3.1 冰箱：0～4℃。3.2 恒溫培養(yǎng)箱：25～28℃。3.3 恒溫振蕩器。3.4 顯微鏡：10X～100X。架盤(pán)藥物天平：0～500g0.5g。滅菌具玻塞錐形瓶：300。滅菌廣口瓶：500mL。。滅菌吸管：1mL（0.01mL）10mL（0.1mL）。滅菌平皿。滅菌試管：16mmX160mm。載玻片、蓋玻片。滅菌牛皮紙袋、塑料袋。滅菌金屬勺、刀。培養(yǎng)基和試劑馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，附加抗菌素按GB/T4789.284.78孟加拉紅培養(yǎng)基：按GB/T4789.284.25滅菌蒸餾水。檢驗(yàn)程序檢樣糧食塊狀食品粉狀食品液狀食品糊狀食品25g+225ml25ml+225ml做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液選擇三個(gè)適宜稀釋度，各取1mL加入滅菌平皿內(nèi)每皿加入適量培養(yǎng)基（可先用馬鈴薯-葡萄糖瓊脂附加抗菌素、高鹽察氏培養(yǎng)基或孟培養(yǎng)基）菌落計(jì)數(shù)25℃～28℃ 5d報(bào) 告操作步驟以無(wú)菌操作將檢樣25mL(或g)放于含有225mL滅菌生理鹽水的具塞錐形瓶中30min，即為1∶10稀釋液。1mL1∶1010mL，注入滅菌試管中，另用1mL501mL1∶109mL1mL1：100101mL101液于滅菌平皿中，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿，然后將晾至45℃左右的培養(yǎng)基注入平皿25～28℃溫箱中，3d5d。計(jì)算方法：10～150（或毫升）考GB/T4789.2。報(bào)告：每克（或毫升）食品所含霉菌和酵母數(shù)以cfu/g(mL)。食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定發(fā)布單位:太原市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局報(bào)送時(shí)間:2007年12月19日 瀏覽次數(shù):342附件1范圍

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定

GB/T4789.2-2003本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中菌落總數(shù)的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中菌落總數(shù)的測(cè)定。術(shù)語(yǔ)1mL(g只包括一群在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。引用標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法、培養(yǎng)基和試劑設(shè)備和材料4.1 冰箱：0～4℃。均質(zhì)器或滅菌乳缽。架盤(pán)藥物天平：0g～500g0.5g。菌落計(jì)數(shù)器。4X。滅菌吸管：1mL（0.01mL）10mL（0.1mL）。滅菌錐形瓶：500mL。5mm。90mm。16X16。500mL。電爐。試管架。酒精燈。。滅菌鑷子、滅菌刀或剪子等。培養(yǎng)基和試劑營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按GB/T4789.284.7磷酸鹽緩沖稀釋液：按GB/T4789.283.220.85%滅菌生理鹽水。75%乙醇。檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序如下。檢樣→2～31mL做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液每皿內(nèi)加入適量營(yíng)養(yǎng)瓊脂菌落計(jì)數(shù)36℃±1℃ 48h±2h報(bào)告操作步驟檢樣稀釋及培養(yǎng)25mL25g225mL1均勻稀釋液。8000r/min～10000r/min1min,做成1:10的均勻稀釋液。1mL1∶101mL9mL1mL1011mL2～3101mL4646±1℃水15mL1mL的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照36±148±2h。菌落計(jì)數(shù)方法做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告平板菌落數(shù)的選擇30～3002每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。稀釋度的選擇30～3001)。30～300223)。30014)。15)。16)。30～3003003030017)。菌落數(shù)的報(bào)告100100101例次10-1例次10-1稀釋液及菌落數(shù)10-2兩稀釋液10-3之比菌落總數(shù)[cfu/g(mL)]報(bào)告方式[cfu/g(mL)]1多不可計(jì)16420-16400160001.6X1042多不可計(jì)295461.637750380003.8X1043多不可計(jì)271602.227100270002.7X1044多不可計(jì)多不可計(jì)313-3130003100003.1X105527115-2702702.7X1026000-<1X10<107多不可計(jì)30512-30500310003.1X104附件2GB/T4789.3-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中大腸菌群的測(cè)定。術(shù)語(yǔ)大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽胞食品中大腸菌群數(shù)系以100mL(g)檢樣內(nèi)大腸菌群最可能數(shù)(MPN)表示。引用標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法、培養(yǎng)基和試劑設(shè)備和材料4.1 溫箱：36±1℃。4.2 冰箱：0～4℃。4.3 恒溫水浴：44.5±0.5℃。天平。顯微鏡。均質(zhì)器或乳缽。90mm。試管。吸管。500mL。5mm。載玻片。酒精燈。試管架。培養(yǎng)基和試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管：按GB/T4789.284.9伊紅美藍(lán)瓊脂平板：按GB/T4789.284.25乳糖發(fā)酵管：按GB/T4789.284.105.4 ECGB/T4789.284.11磷酸鹽緩沖稀釋液：按GB/T4789.283.22生理鹽水。革蘭氏染色液：按GB4789.282.2檢驗(yàn)程序大腸菌群檢驗(yàn)程序如下：（圖略）稀釋檢樣乳糖膽鹽發(fā)酵管48h±2h產(chǎn)氣大腸菌群陰性伊紅美藍(lán)瓊脂平板48h±2h不產(chǎn)氣報(bào)告革蘭氏染色乳糖發(fā)酵管48h±2h革蘭氏陽(yáng)性革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌產(chǎn)氣不產(chǎn)氣報(bào)告報(bào)告報(bào)告操作步驟檢樣稀釋25mLg225mL1∶108000～10000r/min1min1∶10陽(yáng)性管數(shù)MPN陽(yáng)性管數(shù)MPN95%可信限用滅菌吸管1∶10滅菌生水或其他稀的試管內(nèi)，試管混勻，做成1∶100的稀釋液。1mL101mL根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋3乳糖發(fā)酵試驗(yàn)1mL1mL336±1℃溫箱內(nèi)養(yǎng)24±2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者按下列程序進(jìn)行。分離培養(yǎng)36±1然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)。證實(shí)試驗(yàn)1～236±1桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。報(bào)告根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數(shù)MPN100mL(g)大腸菌群的1)。1mL(g)X30.1mL(g)X30.01mL(g)X3100mL(g)下限上限000<30<59000130002600039001030<5130011600129001312002060021900221200231600309003113003216003319010040<520010170102101021101031501107010230111110303601121501131902009010360201140303702022002032603002304012003013907013003026401503800303950注1:本表采用3個(gè)稀釋度[1mL(g)、0.1mL(g)、0.01mL(g)]，每稀釋度三管2：10mL(g)、1mL(g)0.1mL(g)100.1mL(g)、0.01mL(g)、0.001mL(g)10倍。其余可類推。倍。其余可類推。1大腸菌群最可能數(shù)33GB/T4789.15-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中大腸菌群的測(cè)定。引用標(biāo)準(zhǔn)GB4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法、培養(yǎng)基和試劑設(shè)備和材料3.1