揮發(fā)性脂肪酸的測(cè)定-5種方法

揮發(fā)性脂肪酸的測(cè)定一般來說，碳原子數(shù)在10以下的脂肪酸大局部具有揮發(fā)性，并且易溶于水。在它們中間，隨著碳原子數(shù)的增加，揮發(fā)性漸漸下降。典型的揮發(fā)酸見5。7955795名稱分子式沸點(diǎn)/℃名稱分子式沸點(diǎn)/℃甲酸HCOOH100.8丁酸CHCOOH3162.3乙酸CHCOOH3117.5戊酸CHCOOH4185.5丙酸CHCOOH2140.0已酸CH COOH5 11205.0揮發(fā)性脂肪酸易被微生物利用。在有機(jī)物的厭氧分解中，揮發(fā)性脂肪酸是作為生物代謝的中間或最終產(chǎn)物而存在。在厭氧發(fā)酵的液化產(chǎn)酸階段，這一類低級(jí)脂肪酸是這一階段的主要產(chǎn)物，其中以乙酸為主。在某種條件下，乙酸可以到達(dá)該類酸總量的80%。在CH4形成過程中，甲酸和乙酸是形成甲烷的重要前體物。據(jù)爭(zhēng)論，自然界有機(jī)物產(chǎn)生的CH4中大約有70%上由乙酸中的甲基原子團(tuán)形成的。丙酸、丁酸可以轉(zhuǎn)化成甲酸。有機(jī)酸過多往往反映動(dòng)身酵池的病態(tài)。因此可以認(rèn)為，在微生物厭氧發(fā)酵過程中，揮發(fā)性脂肪酸不僅是一種不行缺少的養(yǎng)分成分，更重要的意義在于這類有機(jī)酸已是沼氣發(fā)酵爭(zhēng)論有機(jī)物降解工藝條件優(yōu)劣的重要參數(shù)，在甲烷形成的爭(zhēng)論和生產(chǎn)中，它們的含量也是重要的參數(shù)。的。C2～C5揮發(fā)性脂肪酸的氣相色譜測(cè)定法測(cè)定原理使用色譜儀上的氫火焰檢測(cè)器測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸含量，其根本原理是：—?dú)錃庀嗷旌?，并以空氣助燃?xì)膺M(jìn)展燃燒，以此為能源，將組分電離成離子數(shù)目相等的正離子和負(fù)離子〔電子〕。在離子室內(nèi)裝有收集極和底電極，因此離子在電場(chǎng)內(nèi)作定向流淌，形成離子流。該離子流被收集極收集后，經(jīng)過微電流放大器放大輸送給記錄儀得到信號(hào)，此信號(hào)的大小代表單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器火焰的組分含量。測(cè)定條件⑴試劑設(shè)備①乙酸、丙酸、丁酸、戊酸混合標(biāo)準(zhǔn)液的配制。分別吸取乙酸〔A.R.，相對(duì)密度1.04599%〕、丙酸〔A.R.0.998799.5%〕、丁酸〔A.R.，相對(duì)密度0.8097，含量99%〕、戊酸〔A.R.，相對(duì)密度0.934，100%〕25μL50mL2.5mL甲酸〔A.R.，相對(duì)密1.2288%〕，最終用蒸餾水定容。其中乙酸、丁酸、戊酸的濃度分517μL/L、497μL/L、401μL/L、467μL/L。6mol/L167mL〔1.84833mL蒸餾水中。1.2288%。4000～16000r/min。⑤氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測(cè)器。7mL26mol/LH2SO4pH值降3.5左右〔用pH試紙粗測(cè)〕，離心20～30min3mL，參加0.15mLpH2.0左右〔3.0以下〕。⑶主要試驗(yàn)參數(shù)GD103+3PO2%(6～80目2m；柱溫：180～200℃；氣化室溫度：240℃；檢測(cè)溫度：210℃；進(jìn)樣量：2μL；min；衰減：×1/8。GDX-401擔(dān)體，90mL/min；空氣流率：500mL/min；氫氣流率：50mL/min；氣化室溫度：240℃；檢測(cè)溫度：210℃。2mm2磷酸飽和的60～80目GDX-103240℃；檢測(cè)溫度：210℃；進(jìn)樣量：2μL；載氣流量：N2，50mL/min；氫氣流量：50mL/min；空氣流量：600～700mL/min；2m×φ2mm，玻璃柱，內(nèi)裝有10%的商品固定液Supelcoport擔(dān)體，100～200目；柱溫：130℃；氣化室溫度：220℃；檢測(cè)溫度：210℃；載氣流量：N2，40mL/min。⑷定性與定量時(shí)間進(jìn)展定性?！才c樣品組分全都〕，進(jìn)展色譜試驗(yàn)，測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣各組分的峰高〔或峰面積〕，當(dāng)樣品組分濃度變化不大時(shí)，可承受單位校正法。當(dāng)樣品組分濃度變化很大時(shí)，則需預(yù)先用校準(zhǔn)樣作出濃度和峰高或峰面積的標(biāo)準(zhǔn)曲線，觀看其標(biāo)準(zhǔn)曲線是不是通過原點(diǎn)的直線，即是否呈線性。假設(shè)呈線性，就可用單點(diǎn)校正法，按下面的公式計(jì)算：總CC HV總si H i Vs 樣μL/L；H——待測(cè)樣品峰高，mm；iC——標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，μL/L；sH——標(biāo)準(zhǔn)樣品峰高，mm；sV ——待測(cè)樣品體積+甲酸體積，mL；總V ——待測(cè)樣品體積，mL。樣方法的精度和留意事項(xiàng)GDX101、PEGS、Porapak.N等作為固定相其保存時(shí)間短，且峰形對(duì)稱。乙酸計(jì)〕。起酸峰拖尾和鬼峰的消滅。因此，取有機(jī)酸直接進(jìn)樣測(cè)定時(shí)，為了抑制酸的吸附，可實(shí)行以下措施。①在樣品中參加肯定量的濃甲酸〔1.2288，使其甲酸參加量〔體積〕5：100。甲酸是一種一元羧酸，離解常C2～C5酸被擔(dān)體的吸附。此外，甲酸在FID上響應(yīng)很低，故對(duì)其他組分的應(yīng)答影響不大。②酸的吸附還發(fā)生在接近進(jìn)樣口的地方，由于進(jìn)樣口常積存有碳質(zhì)沉積物，通常承受蒸餾水清洗進(jìn)樣口，并用1.5%磷酸-丙酮液來浸泡進(jìn)樣口，然后1504～8h。磷酸-丙酮液來浸泡柱口玻璃毛。吸附的酸。15%的甲酸液來沖3～4次。則必需更換柱。以上高濃度的酸樣，如何抑制吸附問題還值得更進(jìn)一步爭(zhēng)論。⑹當(dāng)檢測(cè)器的靈敏度顯著降低或更換柱之后，重做校正曲線。揮發(fā)性脂肪酸總量的比色測(cè)定法測(cè)定原理——揮發(fā)性脂肪酸的含量成正比，故可用比色法測(cè)定。測(cè)定方法⑴試劑①配制。1L。5.0mL10%的硫酸羥胺相混合。⑥酸性氯化鐵試劑：將20.0gFeCl3·6H2O500mL水中，準(zhǔn)確mL1L。⑵測(cè)定程序〔分析純，相對(duì)密度1.045，含量100mL10mg/mL。10mg/mL1.0mL、5.0mL、10.0mL、15.0mL、100.0mL容量瓶?jī)?nèi)，以蒸餾水定容至刻500μL/L1000μL/L1500μL/L2023μL/L2500μL/L、3000μL/L的乙酸標(biāo)準(zhǔn)系列液。②標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。取相對(duì)密度1.045的乙酸〔分析純〕試劑，制成50mL/L100mL/L500mL/L1000mL/L1500mL/L2500mL/L3000mL/L0.5mL分置于試管中〔12.5cm×1.5cm〕，每瓶中準(zhǔn)確3min2.5mL羥胺試721型分光光度計(jì)表示光密度值。③樣品的測(cè)定。以4000～10000r/min的離心條件，制取沼氣發(fā)酵樣品澄取0.5mL樣液置于試管中〔12.5cm×1.5cm〕，準(zhǔn)確參加1.7mL酸性乙二醇試劑，充分混合，于沸水浴中加熱3min，應(yīng)避開試管與加熱器壁直接接觸。然后馬上將試管置于冷水中冷卻。參加2.5mL羥胺試劑，并混勻，放置1min，然后全部倒進(jìn)盛有10mL酸性氯化鐵試劑的25mL容量瓶中，用蒸同樣操作做空白試驗(yàn)1份。 計(jì)算

CV110V

3 mg/L式中 C——樣液光密度值相應(yīng)于標(biāo)準(zhǔn)曲線上揮發(fā)酸的含量，mg；V——測(cè)定樣液體積，mL；V1——測(cè)定時(shí)液樣的稀釋倍數(shù)。留意事項(xiàng)150mg/L以下的低濃度范圍外，其測(cè)定值相對(duì)誤差與氣相色譜法測(cè)定總值的相對(duì)誤差相近。pH1.6±0.1。pH2.0時(shí)，色度加劇，pH1.0時(shí)，顏色難以穩(wěn)定，易消逝。1.5mL0.2mL1.7mL0.5mL2.0mL4.5mol/L2.5mL羥胺試劑。④假設(shè)所做的空白測(cè)定含量酸量超過200mg/L時(shí)必需用氫氧化鈉蒸餾提純己二醇。⑤酸性氯化鐵配制好后，應(yīng)靜置過夜，棄去沉淀。⑥必需嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，顯色反響必需充分搖動(dòng)?！蔡貏e是污水污泥體系〕的準(zhǔn)確度較高，適合于沼氣發(fā)酵的常規(guī)分析。揮發(fā)性脂肪酸〔VFA〕的測(cè)定---------碳酸氫鹽堿度和VFA分析的聯(lián)合滴定法揮發(fā)性脂肪酸〔VFA〕是厭氧消化過程的重要中間產(chǎn)物，甲烷菌主要VFACO2H2CO2H2的生不開VFA的形成，但是VFA在厭氧反響器中的積存能反映出甲烷菌的不活潑VFA〔例如乙酸〕濃度對(duì)甲烷菌有抑VFA用作重要的掌握指標(biāo)。mmol/L或換算為按乙mg/LVFA中各種低級(jí)脂肪酸〔乙酸、丙酸〕的分別定量分析也是重要的，有時(shí)常需要知道以CODVFA的量〔即VFA以VFA中各種有機(jī)酸的含量，因此它COD的換算系數(shù)是不同的。VFA包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸以及它們的異構(gòu)體。在運(yùn)轉(zhuǎn)良好的高速厭氧反響器中，VFA中乙酸可占有很高的比例，但當(dāng)反響器運(yùn)行狀態(tài)不好時(shí)，丙、丁酸濃度會(huì)上升?！?〕分析原理HCO3-pHHCO3-HCO3-引起的堿度稱為碳酸氫鹽堿度。HCO3-產(chǎn)生最大緩沖力量的pH6～7。如前所述，HCO3-可以通過滴定測(cè)定，但測(cè)定過程受到其它一些陰離子的干擾，其中發(fā)酵液中常含有的VFA的陰離子是影響碳酸氫鹽堿度的主要因素。為此，在荷蘭進(jìn)展了碳酸氫鹽堿度和VFA同時(shí)進(jìn)展測(cè)量的方法。其原理如下：0.1000mol/LHClPH=3pH值下，H2CO3，VFA也幾乎完全地轉(zhuǎn)化為其非離子形式。pH3的水樣在如下圖的帶回流冷凝器的燒瓶中煮沸，全部轉(zhuǎn)化為H2CO3的HCO3將分解為CO2和H2CO2VFA0.1000mol/L的NaOHpH6.5pHVFA和其他弱酸將被轉(zhuǎn)化為其離子形式。由使用的HCl和NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的量，即可計(jì)算出碳酸鹽堿度和VFA儀器1．250ml帶磨口燒瓶，250ml燒杯；2．10ml半微量酸式滴定管；3．10ml半微量堿式滴定管；回流冷凝器；自動(dòng)電位滴定計(jì)；試劑無二氧化碳水15min，冷卻至室溫。PH6.02μs/cm。酚酞指示液95%0.1mol氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至消滅淡紅色為止。甲基橙指示劑0.1g100ml蒸餾水中。碳酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液〔1/2Na2CO3=0.0250mol/L〕1.392g2504h的無水碳酸鈉(Na2CO3保存時(shí)間不要超過一周。鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液〔0.0250mol/L〕2.1ml濃鹽酸(ρ=1.19g/ml1000ml,此溶液濃度≈0.0250mol/L。其準(zhǔn)確濃度按下法標(biāo)定：25.00ml250ml錐形瓶中，加無由桔黃色剛變成桔紅色，記錄鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液用量。按下式計(jì)算其準(zhǔn)確度：C=0.0250×25.00/V式中，〔mol/L〕；V--鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液用量〔ml〕。氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液〔0.0250mol/L〕水中，冷卻后移入聚乙烯細(xì)口瓶中，蓋緊4d1.4ml1000ml，此溶。其準(zhǔn)確濃度可用鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定，標(biāo)定方法如下：0.0001g〕，250ml100ml水，稍加熱使之溶解。然后參加4滴酚酞指示劑，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡紅色不褪為止。記錄下氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量〔ml〕，并按下式計(jì)算其濃度：C==G×103/(204.22×V)式中，〔mol/L〕；V--氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶用量〔ml〕；G--鄰苯二甲酸氫鉀重量〔g〕；204.22--苯二甲酸氫鉀(KH4C8H4O4)摩爾質(zhì)量(g/mol)。操作步驟按自動(dòng)電位計(jì)說明書安裝、校正好電位計(jì)，以蒸餾水清洗電極。250ml燒杯中。

250ml燒杯置于滴定臺(tái)1.5cm的磁力攪拌棒，翻開攪拌開關(guān)并調(diào)置肯定攪拌強(qiáng)度，留神將電極放入燒杯的液面下。假設(shè)此樣品水樣的pH高于6.5，則準(zhǔn)確調(diào)整至6.5。。將此水樣轉(zhuǎn)移至磨口錐形瓶中，參加沸石或玻璃珠少許，安裝好回流3min2min，250ml燒杯。pH=6.5NaOHBml。結(jié)果計(jì)算式中，溶液的濃度〔mol/L〕；NaOH溶液的濃度〔mol/L〕。4揮發(fā)性脂肪酸〔VFA〕的測(cè)定 Q/YZJ10-03-02-20231、范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于工業(yè)廢水厭氧消化過程中消化液中的揮發(fā)酸含量的測(cè)定。2、引用標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)探討使用以下標(biāo)準(zhǔn)最版本的可能性。GB/T6682-1992分析試驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法〔ISO3696-1978〕GB12999-1992水質(zhì)采樣樣品保存規(guī)定。3、方法提要樣品中的乙酸、丙酸、丁酸等揮發(fā)性有機(jī)物在酸性條件下被蒸餾出來，SO20.1mol/L的氫氧化鈉溶液滴定，結(jié)果以乙酸計(jì)算。4、試劑和材料GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水。25%硫酸溶液2507001升。酚酞指示劑0.550ml95%100ml。0.1N氫氧化鈉溶液配制及標(biāo)定6050ml水中，轉(zhuǎn)入150ml的聚乙烯瓶中，冷卻后，247.5ml置1000ml容量瓶中，用無二氧化碳水稀釋至標(biāo)線，搖勻。105-1100.5克〔稱至100ml4滴酚酞指示劑，用待標(biāo)定的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淺紅色為終點(diǎn)。同時(shí)用無二氧化碳水做空白滴定，按下式計(jì)算。氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度〔mol/L〕=M×1000/[(V1-V0)204.23]式中：m—稱取苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量〔g〕；V0—滴定空白時(shí)所耗氧氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積〔ml〕；V1—滴定苯二甲酸氫鉀時(shí)所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積〔ml〕；204.23—苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量〔g/mol〕。5、儀器和設(shè)備500毫升蒸餾裝置；500亳升磨口三角瓶；球形冷凝管；25毫升堿式滴定管。6、取樣〔地表水和“廢水”〕局部規(guī)定4℃下保存。7、分析步驟300毫升/V5〔300毫升〕水樣2525%的硫酸溶液，再參加數(shù)粒200毫升蒸餾液。3滴0.1N30秒不褪色為終點(diǎn)。同時(shí)按上述步驟用蒸餾水代替水樣作空白。8、分析結(jié)果計(jì)算揮發(fā)酸〔VFA〕〔mg/l〕(V3-V4)×N×60×103/V5式中：NaOH毫升數(shù)；V5—取樣量〔ml〕；N—NaOH溶液的濃度〔mol/L〕；60—乙酸的分子量。9、留意事項(xiàng)餾。當(dāng)丁、戊酸含量高時(shí)，代表性不強(qiáng)，最好用氣相色譜法。VAF不能代表乙、丙、丁、戊的各種含量。10、報(bào)告10%時(shí)，取算術(shù)平均0.1mg/L。報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：間等；c)分析結(jié)果；e)分析人員的姓名及分析日期等。5VFA的滴定法分析原理本法原理是將廢水以磷酸酸化后，從中蒸發(fā)出揮發(fā)性脂肪酸，再以酚酞為指示劑用NaOH溶液滴定餾出液。廢水中的氨態(tài)氮可能對(duì)測(cè)定形成干擾，因此應(yīng)當(dāng)首先在堿性條件下蒸發(fā)出氨態(tài)氮，假設(shè)要同時(shí)測(cè)定氨態(tài)氮，以硼酸VFA的聯(lián)合測(cè)定。藥品①10%NaOH溶液②NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液，0.1000mol/l70ml1.7mg/cm31L。④酚酞指示劑，1%的乙酸溶液。測(cè)定步驟VFA30mmol。如100ml100ml。放入幾滴酚酞指示劑。NaOH略過量。50—60ml為止。10ml10%的磷酸酸化，10ml蒸餾水并使承受瓶與蒸餾瓶上的冷凝管連接，導(dǎo)入管應(yīng)15—20ml50ml10—20ml液體為止。為了除去二氧化碳、硫化氫、二氧化硫等干擾物，可向餾出液中通入高10NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡粉色不消逝為止。計(jì)算揮發(fā)性脂肪酸含量計(jì)算如下：VFA=V(NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L)V(NaOH)-----NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;c ------NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)確濃度，mol/L;揮發(fā)性脂肪酸(VFA)的測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸是厭氧硝化過程的中間產(chǎn)物，甲