水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料實(shí)驗(yàn)

水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料實(shí)驗(yàn)課件第1頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：

模塊三飼料微量成分分析模塊二飼料營養(yǎng)價(jià)值評定

模塊一飼料配制及加工工藝第2頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)：水產(chǎn)飼料配方設(shè)計(jì)與制作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、掌握魚蝦飼料的設(shè)計(jì)方法；2、掌握魚蝦飼料配方設(shè)計(jì)的原理；3、能夠獨(dú)立設(shè)計(jì)飼料配方。第3頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)：水產(chǎn)飼料配方設(shè)計(jì)與制作二、原理：

由于設(shè)計(jì)商品用配合飼料，需采用多種飼料原料，同時(shí)要考慮每種飼料原料的多項(xiàng)營養(yǎng)成分，根據(jù)養(yǎng)殖對象的營養(yǎng)指標(biāo)，設(shè)計(jì)出營養(yǎng)成分合理、價(jià)格最低的配合飼料配方。第4頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六三、實(shí)驗(yàn)原則：1、能量與蛋白質(zhì)的平衡2、蛋白質(zhì)與氨基酸的平衡3、鈣磷需要量及比例4、微量元素與維生素5、粗纖維含量以及限度6、動(dòng)物性飼料與植物性飼料的平衡7、日糧中其他營養(yǎng)物質(zhì)實(shí)驗(yàn)：水產(chǎn)飼料配方設(shè)計(jì)與制作第5頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六四、基本方法1)交叉法（crossmethod）又稱四角法、方形法、對角線法或圖解法。在飼料種類不多及營養(yǎng)指標(biāo)少的情況下，采用此法。2)代數(shù)法3)軟件法4)EXCEL法實(shí)驗(yàn)：水產(chǎn)飼料配方設(shè)計(jì)與制作第6頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)：水產(chǎn)飼料配方設(shè)計(jì)與制作五、涉及步驟1、查找動(dòng)物的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)及營養(yǎng)需要；2、根據(jù)就地取材，原料廣泛、易得的原則，選擇飼料原料，實(shí)測或從中國飼料數(shù)據(jù)庫查出所選飼料原料的成分及營養(yǎng)價(jià)值。3、設(shè)計(jì)基本的飼料配方4、檢查飼料配方的合理性、經(jīng)濟(jì)性、推廣性。第7頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)：水產(chǎn)飼料配方設(shè)計(jì)與制作幾種魚的營養(yǎng)需要魚粗蛋白粗脂肪粗纖維粗灰分含硫氨基酸賴氨酸總磷總能MJ/kg草魚（魚種）≥304-7≤8≤13≥0.9≥1.5≥1.015.6草魚（成魚）≥254-7≤12≤12≥0.7≥1.25≥0.915.2羅非魚≥308.8-10.7.≤8≤8≥3.22≥5.12≥0.916.6鯉魚（成魚）≥3512≤11≤8≥0.9≥1.5≥0.915.6第8頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六草魚魚種飼料配方草魚成魚飼料配方原料組成（%）用量魚粉7豆粕24菜籽粕20棉籽粕8次粉20麥麩18豆油0.5魚油0.5磷酸氫鈣1礦物質(zhì)飼料0.25維生素飼料0.25氯化膽堿0.5總計(jì)100原料組成（%）用量魚粉5豆粕26菜籽粕20棉籽粕8次粉20麥麩18豆油0.5魚油0.5磷酸氫鈣1礦物質(zhì)飼料0.25維生素飼料0.25氯化膽堿0.5總計(jì)100第9頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六羅非魚飼料配方鯉魚魚種飼料配方原料組成（%）用量魚粉10豆粕22菜籽粕20棉籽粕7次粉20麥麩18豆油0.5魚油0.5磷酸氫鈣1礦物質(zhì)飼料0.25維生素飼料0.25氯化膽堿0.5總計(jì)100原料組成（%）用量魚粉9豆粕22菜籽粕20棉籽粕8次粉20麥麩18豆油0.5魚油0.5磷酸氫鈣1礦物質(zhì)飼料0.25維生素飼料0.25氯化膽堿0.5總計(jì)100第10頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)：飼料原料的混合1、掌握飼料原料主體成分的計(jì)量；2、掌握飼料添加劑的預(yù)混合方法3、掌握主體飼料原料與預(yù)混料的混合方法

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模旱?1頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)：飼料原料的混合二、實(shí)驗(yàn)原理：

為保證水產(chǎn)動(dòng)物每餐都能采食到包含有各種營養(yǎng)成分的飼糧。就必須保證各組分物料在整批飼料中均勻分布，尤其是一些添加量極少而對動(dòng)物生長又影響很大的“活性成分”，如維生素、微量元素、藥劑及其他微量成分等，更要求分布均勻。因此將各種飼料原料經(jīng)計(jì)量配料后，在外力作用下各種物料組分互相摻合，使其均勻分布。第12頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六三、實(shí)驗(yàn)材料與儀器：臺(tái)秤，托盤天平，鐵鍬，塑料大盆，花塑料布。實(shí)驗(yàn)：飼料原料的混合第13頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六四、實(shí)驗(yàn)步驟：1、用計(jì)量稱將主體飼料按飼料配方比例稱重2、將預(yù)混料按逐級(jí)擴(kuò)大的方法混合，如需特殊處理的添加劑，先做預(yù)處理。3、先將主體飼料的80%稱好，加入預(yù)混料，之后把剩下20%的主體飼料加到最上面進(jìn)行混合，用鐵鍬翻倒混合7-8次。實(shí)驗(yàn)：飼料原料的混合第14頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六配合飼料混合后的變異系數(shù)≤10%預(yù)混合飼料混合后的變異系數(shù)≤5%五、注意：實(shí)驗(yàn)：飼料原料的混合第15頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六水產(chǎn)動(dòng)物飼料制粒實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)飼料制粒機(jī)械的使用方法2、掌握飼料制粒加工工藝第16頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六二、實(shí)驗(yàn)原理：水產(chǎn)動(dòng)物飼料制粒實(shí)驗(yàn)

通過機(jī)械作用將單一原料或配合混合料壓實(shí)并擠壓出?？仔纬傻念w粒狀飼料稱為制粒。制粒的目的是將細(xì)碎的、易揚(yáng)塵的、適口性差的和難于裝運(yùn)的飼料，利用制粒加工過程中的熱、水分和壓力的作用制成顆粒料。第17頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六三、實(shí)驗(yàn)材料

環(huán)模飼料顆粒機(jī)（附帶混合機(jī)）食用大豆油水

水產(chǎn)動(dòng)物飼料制粒實(shí)驗(yàn)第18頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

四、制粒步驟

1.將混合好的飼料加入混合機(jī)中，加入自來水進(jìn)行調(diào)制，使物料的水分達(dá)到15%～19%，溫度80～90℃。

2.調(diào)整制粒機(jī)環(huán)模和壓輥的間隙（0.05-0.3mm）,目測壓模與壓輥正好接觸。

3.調(diào)整切刀，切成長度適宜的顆粒。

4.調(diào)整制粒機(jī)加料量，使其正好。水產(chǎn)動(dòng)物飼料制粒實(shí)驗(yàn)第19頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料水分的測定（GB/T6435---2006）

重點(diǎn)及難點(diǎn):對恒重的理解第20頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

本標(biāo)準(zhǔn)適用于測定配合飼料和單一飼料中水分含量一、適用范圍飼料水分的測定第21頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六二、原理

飼料樣品在105℃±2℃烘箱內(nèi)在大氣壓下烘干，直至恒重，逸失的重量為水分。飼料水分的測定第22頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六三、儀器設(shè)備粉碎機(jī)、分析天平、烘箱、稱樣器、干燥器。飼料水分的測定第23頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六四、測定步驟潔凈稱樣皿，在105℃±2℃烘箱中烘1h（以溫度到105℃開始計(jì)時(shí)），取出，蓋好稱樣皿蓋，在干燥器中冷卻30min稱重。再同樣烘干1h，冷卻稱重，直至兩次稱重之重量差小于0.002g。飼料水分的測定第24頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

稱取2克飼料，在105℃±2℃烘箱中烘2h取出，蓋好稱樣皿蓋，在干燥器中冷卻30min稱重。再同樣烘干1h，冷卻稱重，直至兩次稱重之重量差小于0.002g。飼料水分的測定第25頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六m1——105℃烘干前試樣及稱樣皿質(zhì)量m2——105℃烘干后試樣及稱樣皿質(zhì)量m0——已衡重的稱樣皿質(zhì)量水分（％）＝=飼料水分的測定第26頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定重點(diǎn)及難點(diǎn):1、試樣的消煮2、NH3的蒸餾3、滴定（GB/T6432---2006）第27頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定

本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料，濃縮飼料和單一飼料。一、適用范圍第28頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定粗蛋白:在測定結(jié)果中蛋白質(zhì)外,還有氨基酸、酰胺、銨鹽和部分硝酸鹽、亞硝酸鹽等故叫做粗蛋白質(zhì).第29頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定

凱氏法測定試樣中的含N量，即在催化劑作用下，用H2SO4破壞有機(jī)物，使含N物轉(zhuǎn)化成（NH4）2SO4，加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定，測出N含量，將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25，計(jì)算出CP含量。

二原理第30頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定其主要化學(xué)反應(yīng)如下：1、2NH2(CH2)2COOH+H2SO4→(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H22、(NH4)2SO4+2NaOH→2NH3+3H2O+2Na2SO43、NH3+4H3BO3→NH4HB4O7+5H2O4、NH4HB4O7+HCL+5H2O→NH4CL+4H3BO3第31頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定1、H2SO4

2、混合催化劑(CuSO4和K2SO4)3、NaOH(40%)4、硼酸吸收液(2%)

5、混合指示劑甲基紅—溴甲酚綠6、HCl標(biāo)準(zhǔn)液(0.05mol/L)7、蔗糖三、試劑第32頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六1、粉碎機(jī)2、分樣篩(孔徑0.45mm，40目)3、分析天平（感量0.0001g）4、消煮爐5、酸式滴定管25ml6、半微量凱式定氮儀7、錐形瓶8、容量瓶(100ml)9、消煮管飼料中粗蛋白的測定四、儀器設(shè)備第33頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定五、測定步驟1、試樣的消煮稱取0.3g試樣準(zhǔn)確至0.0002g，無損的放入消煮管中，加入硫酸銅和無水硫酸鉀3g，與試樣混合均勻，再加硫酸20ml，在消煮爐上小心加熱，待樣品焦化，泡沫消失，再加強(qiáng)火力（360-410℃）直至溶液澄清后，再加熱消化15min。第34頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六濃H2SO420ml

樣本0.3g混合催化劑2-3g飼料中粗蛋白的測定第35頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定2、定容將消煮管中的試樣消煮液冷卻，加蒸餾水20ml轉(zhuǎn)入100ml容量瓶，冷卻后用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液.100ml容量瓶第36頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)飼料中粗蛋白的測定3、NH3的蒸餾(半微量水蒸氣蒸餾法)

第37頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定第38頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)二飼料中粗蛋白的測定第39頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中粗蛋白的測定4、滴定

用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/l的HCL標(biāo)準(zhǔn)液滴定，仍以混合指示劑為指示劑。溶液呈磚紅色為滴定終點(diǎn).第40頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

每ml的1mol/lHCL標(biāo)準(zhǔn)液相當(dāng)于0.0140g的N。因此，粗蛋白質(zhì)（%）=（v2-v1）×c×0.014×6.25×v×100mv/

試樣：v2——試樣滴定時(shí)所需酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）

v1——空白滴定時(shí)所需酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）

c——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度mol/lm——試樣的質(zhì)量（g）

v——試樣分解液總體積（ml）

v/——試樣分解液蒸餾用體積（ml）

0.014——每ml鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于N的g數(shù)

6.25——氮換算成蛋白質(zhì)的平均系數(shù)五、結(jié)果計(jì)算第41頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料粗脂肪的測定重點(diǎn)及難點(diǎn):1、濾紙包的包法2、抽提完全的判斷（GB/T6433---2006)

第42頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六一、原理

索氏脂肪提取器中用乙醚提取試樣，稱提取物的重量，除脂肪外還有有機(jī)酸，磷脂、脂溶性Vit，葉綠素等，因而測定結(jié)果稱粗脂肪或乙醚提取物。飼料粗脂肪的測定第43頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六無水乙醚二、試劑飼料粗脂肪的測定第44頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六三、儀器設(shè)備1、粉碎機(jī)2、分樣篩3、分析天平4、電熱恒溫水浴鍋5、恒溫烘箱6、索氏脂肪提取器7、索氏脂肪提取儀8、濾紙9、干燥器實(shí)驗(yàn)三飼料粗脂肪的測定第45頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)驗(yàn)三飼料粗脂肪的測定第46頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六1、抽提瓶的恒重在105℃±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷卻30min，稱重再烘干30min，同樣冷卻稱重兩次重量之差小于0.0008g為恒重。實(shí)驗(yàn)三飼料粗脂肪的測定四、分析步驟第47頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六(1)制做濾紙包(2)試樣預(yù)處理(3)試樣脂肪的提取2、試樣的測定飼料粗脂肪的測定第48頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六3、脂肪和抽提瓶的恒重飼料粗脂肪的測定第49頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六五、結(jié)果計(jì)算1、計(jì)算粗脂肪（%）=式中：m——風(fēng)干試樣重量

m1——已衡重的抽提瓶重量

m2——已衡重的盛有脂肪的抽提瓶重量飼料粗脂肪的測定第50頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六2、重復(fù)性每試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定粗脂肪含量在10%以上時(shí)，允許相對偏差為3%。粗脂肪含量在10%以下時(shí)，允許相對偏差為5%。飼料粗脂肪的測定第51頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料粗灰分的測定一、適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料，濃縮飼料及各種單一飼料中粗灰分測定。第52頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料粗灰分的測定二、原理試樣在550℃灼燒后所得殘?jiān)?，用質(zhì)量百分率來表示，殘?jiān)兄饕锹然铩o機(jī)鹽類等礦物質(zhì)也包括混入飼料中的砂石、土等、故稱粗灰分。

第53頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料粗灰分的測定三、儀器與設(shè)備1、分析天平(感量0.00001)2、茂福爐(馬福爐)3、坩鍋4、干燥器第54頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六四、測定步驟1.坩鍋的恒重

將干凈坩鍋放入高溫爐，在550±20℃下灼燒30min取出，在空氣中冷卻約1min，放入干燥器中冷卻30min稱重，再重復(fù)灼熱，冷卻、稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。飼料粗灰分的測定第55頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

2.試樣炭化

在已恒重的坩鍋中稱取2g試樣，準(zhǔn)確至0.0002g，在電爐上小心炭化，在炭化過程中，應(yīng)將飼料在較低溫狀態(tài)加熱灼燒至無煙。

飼料粗灰分的測定第56頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

3.試樣的灰化

放入高溫爐于550±20℃灼燒3h，取出在空氣中冷卻約1min，放入干燥器中冷卻至30min，稱重，再同樣灼燒1h，冷卻稱重,直至兩次質(zhì)量之差小于0.001g為恒重。飼料粗灰分的測定第57頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六六、結(jié)果計(jì)算

式中：m0

——已衡重坩堝質(zhì)量（g）

m1

——

坩堝加試樣質(zhì)量（g）

m2——

灰化后坩堝加灰分質(zhì)量（g）1、計(jì)算飼料粗灰分的測定第58頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六每試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定灰分質(zhì)量在5%以上時(shí)，允許相對偏差為1%；粗灰分量在5%以下時(shí)，允許相對偏差為5%2.重復(fù)性飼料粗灰分的測定第59頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中Ca的測定方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料，單一飼料和濃縮飼料。飼料中Ca含量的測定一、主題內(nèi)容與適用范圍第60頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六二、原理

將試樣中有機(jī)物破壞，Ca變成溶于水的離子，用草酸銨定量沉淀，用高錳酸鉀法間接測定Ca含量。

飼料中Ca含量的測定第61頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六1、HCl1:36、KMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05mol/L)2、硫酸1:37、甲基紅指示劑3、濃硝酸8、氨水1:504、氨水1:15、草酸銨水溶液4.2%三、試劑

飼料中Ca含量的測定第62頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六四、儀器和設(shè)備1、分析天平6、玻璃漏斗2、高溫爐7、定量濾紙3、坩鍋8、移液管4、容量瓶9、燒杯5、滴定管

飼料中Ca含量的測定第63頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六1、試樣的分解2、試樣的測定3、用濾紙過濾五、測定步驟

飼料中Ca含量的測定第64頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六干法：稱取試樣2g于坩堝中，在電爐上小心炭化，再放入高溫爐于550℃下灼燒3小時(shí)。在盛灰坩堝中加入鹽酸溶液10ml和濃硝酸數(shù)滴，小心煮沸。將此溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶，冷卻至室溫，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻?yàn)樵嚇臃纸庖骸?、試樣的分解

飼料中Ca含量的測定第65頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六2、試樣的沉淀

a準(zhǔn)確取試樣分解液10ml于燒杯中，加蒸餾水100ml，甲基紅指示劑2滴。

b滴家氨水溶液使溶液呈橙色，再加鹽酸溶液使溶液恰變成紅色（pH為2.5-3.0）小心著沸，漫漫滴加熱草酸氨溶液10ml，并不斷攪拌。

C如溶液變橙色，應(yīng)補(bǔ)滴鹽酸溶液至紅色。煮沸數(shù)分鐘，放置過夜使沉淀陳化。飼料中Ca含量的測定第66頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六1：50氨水溶液洗沉淀6-8次，至無草酸根離子（接濾液數(shù)毫升，加硫酸液數(shù)滴，加熱至30℃，再加高錳酸鉀溶液2滴，呈微紅色，30秒不褪色）。將沉淀和濾紙轉(zhuǎn)入原燒杯中，加入硫酸溶液10ml,蒸餾水50ml，加熱至75—85℃，用0.05mol/l高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液呈粉紅色半分鐘不褪色為終點(diǎn)。3.試樣的過濾飼料中Ca含量的測定第67頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六（V-V0）×C×40/2六、結(jié)果計(jì)算

式中：V——0.05mol/l高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定用體積（ml）

V0——

測定空白時(shí)，0.05mol/l高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定用體積（ml）

C——

高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/l）

M——

試樣質(zhì)量（g）

V/——

滴定時(shí)移取試樣分解液體積（ml）

40/2——

鈣的mol數(shù)M×V//100Ca（%）=×100/1000=（V-V0）×C×200M×V/

飼料中Ca含量的測定第68頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

每個(gè)試樣平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。含鈣量在5%以上，允許相對偏差3%；含鈣量5%—1%時(shí)，允許相對偏差5%；含鈣量1%以下時(shí)，允許相對偏差10%。重復(fù)性飼料中Ca含量的測定第69頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六飼料中總磷量的測定

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用鉬黃顯色光度法測定飼料中總P量的方法.

本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料，濃縮飼料，預(yù)混合飼料和單一飼料.一、主題內(nèi)容與適用范圍第70頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

將試樣中的有機(jī)物破壞、使P游離出來，在酸性溶液中，用鉬酸銨處理，生成黃色的(NH4)3PO4NH4VO3·16M0O3,在波長420nm下進(jìn)行比色測定。二、原理飼料中總磷量的測定第71頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六1、HCl1:32HNO3

3、釩鉬酸銨顯色劑三、試劑飼料中總磷量的測定第72頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六四、儀器和設(shè)備1、粉碎機(jī)2、分樣篩3、分析天平4、分光光度計(jì)5、比色管飼料中總磷量的測定第73頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六五、測定1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作在50ml比色管中依次加0、1、2、3、4、5（ml）的標(biāo)準(zhǔn)磷酸液，定容，靜置半小時(shí).

以0號(hào)為空白溶液，在分光光度計(jì)上比色（光波為420nm）測定光密度。在方格紙上，以光密度為橫軸，以濃度為縱軸，做標(biāo)準(zhǔn)曲線。飼料中總磷量的測定第74頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

移取試樣分解液5ml于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，在722分光光度計(jì)比色測定，測得試樣分解液的吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含P量。2、試樣的測定飼料中總磷量的測定第75頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六樣本中磷含量(%)=a/W×v1/v2×100/1000×1/1000六、結(jié)果計(jì)算飼料中總磷量的測定1.計(jì)算第76頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六含磷量在0.5%以上時(shí),允許相對偏差為3%;含磷量在0.5%以下時(shí),允許相對偏差為10%2.重復(fù)性飼料中總磷量的測定第77頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六第78頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物性蛋白飼料胃蛋白酶消化率的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于所有動(dòng)物性蛋白飼料胃蛋白酶消化率的測定，其值同體內(nèi)消化率沒有直接關(guān)系。一范圍第79頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定

（過濾法）GB/T17811---2008

二原理:

已脫過脂的試樣用溫?zé)岬奈傅鞍酌敢海敢簼舛群陀昧颗c酶解試樣質(zhì)量恒定），在恒溫，持續(xù)不斷地振搖或攪拌下消化16h，過濾分離不溶性殘?jiān)礈?、干燥，測定殘?jiān)拇值鞍踪|(zhì)含量，同時(shí)測定脫脂未酶解試樣的蛋白質(zhì)含量。第80頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定

（過濾法）GB/T17811---2008三試劑和材料

20IU/ml胃蛋白酶液（臨用前配制）乙醚丙酮定氮試劑第81頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008恒溫式平轉(zhuǎn)搖床：溫控范圍20℃-50℃，水浴式或空氣浴式均可，轉(zhuǎn)速可調(diào)（15r/min-300r/min）.實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)索氏抽提器、脫脂設(shè)備定氮儀器、設(shè)備實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備四儀器與設(shè)備第82頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六五測定步驟

1脫脂稱取3-4克試樣用乙醚脫脂（含脂肪小于1%可不脫脂，含脂肪1%-10%建議脫脂，含脂肪大于10%則應(yīng)脫脂）。脫脂方法可參照GB/T6433中粗脂肪抽提方法進(jìn)行。脫脂后樣品需在室溫風(fēng)干，去掉乙醚。動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第83頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六2胃蛋白酶消化

稱取已脫脂風(fēng)干后的試樣1.000g（精確至±0.0010g）250ml帶蓋磨口瓶中，加150ml新配制的并已預(yù)熱至42℃-45℃的胃蛋白酶夜，應(yīng)確保樣品完全被胃蛋白酶溶液浸濕，蓋緊瓶蓋，將瓶夾于恒溫?fù)u床上，于45℃恒定速度攪動(dòng)16h進(jìn)行保溫酶解消化。動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第84頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

從攪動(dòng)器上取下磨口瓶，呈45度角放置，讓殘?jiān)恋?5min以上，隨后在鋪有快速濾紙的布氏濾紙上抽濾，先用少量水將瓶蓋上的殘?jiān)粗翞V紙，再將磨口瓶保持沉淀時(shí)的角度移至布氏漏斗上，慢慢傾出內(nèi)容物，使之通過濾紙后形成連續(xù)的細(xì)流，避免任何不必要的攪動(dòng)。液體濾過濾紙的速度應(yīng)與傾入的速度相同。3消化殘?jiān)奶幚韯?dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第85頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

當(dāng)上層液體通過濾紙后，于瓶中加入15ml丙酮，用拇指蓋住瓶蓋劇烈振搖，放開。再用拇指堵住瓶口，在濾紙上方將瓶倒置振搖，放開拇指，丙酮和殘?jiān)鞯綖V紙上。再用一份15ml的丙酮進(jìn)行洗滌。照上法振搖和倒出。檢查瓶子，并用丙酮再次洗滌。當(dāng)全部液體通過濾器后，用洗瓶以少量丙酮洗滌漏斗壁上殘?jiān)鼉纱?，并抽干。從布氏漏斗上小心取下載有殘?jiān)臑V紙，無損地移入凱氏燒瓶中，并將凱氏燒瓶置于105℃烘箱內(nèi)烘干。動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第86頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六

4粗蛋白質(zhì)的測定將上述已烘干的殘?jiān)碐B/T6432中方法測定粗蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(w2)，測定殘?jiān)值鞍踪|(zhì)時(shí)應(yīng)從每個(gè)樣品殘?jiān)值鞍踪|(zhì)中減去酶液的空白值。同時(shí)稱取脫脂風(fēng)干樣品若干克（精確至0.0002g）直接按GB/T6432測定脫脂未酶解的樣品中粗蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（w1）。動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第87頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六六分析結(jié)果的表述：1試樣胃蛋白酶消化率X,以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，數(shù)值以%表示，按式（1）計(jì)算：X=

W1W1-W2×100…….(1)動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第88頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六式中：w1------脫脂未酶解的樣品中粗蛋白的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%

W2------脫脂酶解后殘?jiān)械鞍踪|(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾法）GB/T17811---2008第89頁，共98頁，2023年，2月20日，星期六2注意：每個(gè)試樣脫脂風(fēng)干后取兩份試料進(jìn)行酶解，平行測定殘?jiān)值鞍椎馁|(zhì)量分?jǐn)?shù)，以其算術(shù)平均值為測定結(jié)果（保留三位有效數(shù)字），測定結(jié)果相對偏差≤6%。每個(gè)試樣脫脂風(fēng)干后取兩份試料進(jìn)行平行測定粗蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，以其算術(shù)平均值為測定結(jié)果（保留三位有效數(shù)字），測定結(jié)果相對偏差應(yīng)符合GB/T6432中規(guī)定的相對偏差允許范圍。每個(gè)試樣胃蛋白酶消化率測定結(jié)果保留三位有效數(shù)字。動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料-----胃蛋白酶消化率的測定（過濾