上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座

試驗設(shè)計

藥理祁紅上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第1頁設(shè)計意義無處不在設(shè)計經(jīng)濟－節(jié)約人力,物力,時間高效－考查多原因,多指標準確－樣本總體可靠－控制誤差,排除干擾上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第2頁醫(yī)學研究存在問題試驗標準掌握不妥試驗設(shè)計方面缺點統(tǒng)計數(shù)據(jù)處理時存在問題上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第3頁設(shè)計關(guān)鍵內(nèi)容四標準：隨機，對照，重復(fù)，均衡三要素：試驗原因,試驗對象,試驗效應(yīng)設(shè)計類型：上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第4頁研究設(shè)計基本要素

（一）處理原因(treatmentfactor)（二）受試對象(subject)（三）試驗效應(yīng)(experimentaleffect)降壓藥高血壓病人血壓值處理原因受試對象試驗效應(yīng)其它原因其它效應(yīng)上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第5頁原因試驗原因（處理原因）區(qū)組原因（非處理原因）原因(factor)；水平(level)-劑量（幾個？）試驗點（原因間每一水平組合）設(shè)計上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第6頁抓住試驗主要原因（藥劑、手術(shù)方法、毒物），明確處理原因和非處理原因（病人心理狀態(tài)、生產(chǎn)、生活條件及社會心理原因）處理原因須標準化處理原因在整個試驗過程中保持不變（不一樣時期藥品批號，手術(shù)操作者熟練程度，給藥時間，給藥路徑，給藥量（口服為100%，靜脈為20%-25%。新藥試用劑量，靜脈注入量為LD501/15-1/5），麻醉，儀器校正）試驗方法（幾個）；整體，離體，細胞劑量遞增，劑量換算（一）處理原因上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第7頁劑量換算D2＝D1(R2/R1)例：某藥在200g大鼠劑量為18mg,求在1.6kg家兔劑量。D2=18×28.78÷7.04=73.58mice161820220.8610.9311.0001.066rat1601802002206.6076.5627.0407.502rabbit1.41.61.82.026.3328.7831.1333.39上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第8頁（二）受試對象受試對象選入標準（eligibilitycriteria）：納入標準（inclusioncriteria）、排除標準（exclusioncriteria）受試對象控制（1）受試對象一致性（動物——種系、年紀、性別、體重）（2）受試對象影響原因控制季節(jié)、溫度、濕度、生活環(huán)境、癖好、試驗輔助辦法等。注意標本采集及儲存。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第9頁家兔對體溫改變靈敏,適合用于發(fā)燒、解熱和檢驗熱原等試驗研究豚鼠和大鼠對組織胺反應(yīng)相反,豚鼠對組織胺反應(yīng)十分敏感,適合用于平喘藥和抗組織胺藥試驗研究,大鼠則不宜用家兔胸腔結(jié)構(gòu)與其它不一樣,胸膜中央有一層很薄縱膈膜將胸腔分為左右兩部,互不相動物無需人工呼吸,很適合于開胸和心臟試驗上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第10頁（三）試驗效應(yīng)指標關(guān)聯(lián)性：反應(yīng)本質(zhì)指標客觀化：主觀指標和客觀指標指標靈敏度（單位？指標準確性：精密度準確度上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第11頁（三）試驗效應(yīng)精密度(precision)：可靠性（reliabiliy）或重復(fù)性（repeatability）——重復(fù)觀察時觀察值與其均值靠近程度，受隨機誤差影響。CV準確度(accuracy)真實性(validity)——觀察值與真實值靠近程度，受系統(tǒng)誤差影響。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第12頁準確度與精密度上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第13頁專業(yè)設(shè)計：

（專業(yè)角度）選題、建立假說、選擇研究對象、確定觀察指標、技術(shù)方法。

統(tǒng)計設(shè)計：（統(tǒng)計學角度）確定試驗設(shè)計方案、抽樣方法、樣本容量、統(tǒng)計分析指標及統(tǒng)計分析方法等。如：研究對象（分組、設(shè)置對照、樣本量）、處理原因、觀察指標、數(shù)據(jù)質(zhì)量控制與管理、統(tǒng)計分析。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第14頁統(tǒng)計研究設(shè)計分類按功效分：調(diào)查設(shè)計(surveydesign)試驗設(shè)計(experimentdesign)臨床試驗設(shè)計(clinicaltrialdesign)按實施設(shè)計方案伎倆分：觀察性研究設(shè)計—未施加干預(yù)試驗性研究設(shè)計—對觀察對象人為地施加了干預(yù)(即處理原因)。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第15頁觀察性研究設(shè)計橫斷面研究設(shè)計（反應(yīng)事物此時此刻狀態(tài)）隊列研究設(shè)計（前瞻性病例對照研究（回顧性混合研究設(shè)計（前瞻性＋回顧性上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第16頁試驗性研究設(shè)計研究者依據(jù)研究目標，經(jīng)過施加干預(yù)，在“有利條件”下取得試驗結(jié)果。從統(tǒng)計學意義上講，“有利條件”就是在科學試驗設(shè)計指導(dǎo)下，在排除其它非干預(yù)辦法原因影響后，推論干預(yù)原因因果效應(yīng)。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第17頁分類按試驗原因：單原因試驗設(shè)計多原因試驗設(shè)計試驗設(shè)計類型：單原因K水平設(shè)計析因設(shè)計含有重復(fù)測量設(shè)計上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第18頁單原因K水平設(shè)計配對：本身配對設(shè)計（self-matching)同源配對設(shè)計(homogenetic-條件相近者配對設(shè)計不配對：成組設(shè)計上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第19頁完全隨機設(shè)計將樣本中全部受試對象隨機地分配到各個處理組(包含對照）中,分別接收不一樣處理;對效應(yīng)進行平行觀察，結(jié)果行成組統(tǒng)計分析。分別從不一樣總體中隨機抽樣進行對比觀察,后者亦稱成組設(shè)計。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第20頁1061年《本草圖經(jīng)》(宋)評價人參效果1747年蘇格蘭醫(yī)生Lind進行了治療壞血病對照試驗1948年在英國醫(yī)學研究會領(lǐng)導(dǎo)下開展了世界上第一個臨床隨機對照試驗(randomizedcontrolledtrial,RCT)必定了鏈霉素治療肺結(jié)核療效。1955年Truelove進行了胃腸病方面首項RCT，證實了腎上腺皮質(zhì)激素治療潰瘍性結(jié)腸炎優(yōu)于撫慰劑1969年Ruffin一項雙盲RCT證實了胃冰凍療法對治療十二指腸潰瘍引發(fā)出血是無效。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第21頁優(yōu)點:最慣用，適應(yīng)面廣，設(shè)計和統(tǒng)計分析比較簡單可行，組間樣本可不一樣，耐受缺失缺點:1）小樣本可造成抽樣誤差2）試驗效率低，只能分析一個原因；樣本量大分組方法：試驗研究中現(xiàn)將試驗動物編號后，按隨機數(shù)字或隨機排列表將它們分為兩組或多組后，施于不一樣處理；臨床試驗中常從不一樣對象中隨機抽樣，觀察比較不一樣治療組反應(yīng)或療效。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第22頁注意事項：盡可能注意各樣本間均衡性，降低抽樣誤差樣本量相同時效率高上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第23頁配對設(shè)計本身前后配對左右配對異體配對上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第24頁本身前后配對選擇符合納入標準若干個個體，并將每一個體在接收處理前、后測得相同指標進行配對為本身對照（處理前為對照）同一標本兩種測量方法也屬本身對照

上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第25頁

例：問以下4名病人藥前與藥后差異是否顯著？

1234藥前10.19.85.73.4藥后10.39.95.753.6上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第26頁按本身配對t算:t=3.667，DF=3

∵t0.05(3)=3.18,P<0.05Pp=0.0377按分組t算:x1=7.250SD1=3.258

x2=7.388SD2=3.257(CV>30%)ts=0.0596t0.05(6)=2.46

P>0.05Ps=0.9093

上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第27頁本身配對設(shè)計（本身對照）處理前以后自同一對象，抽樣誤差小要求被試原因施加前后保持一致。普通用于急性或短期試驗，以免隨時間延長混入干擾原因（氣候，心理）對于病情穩(wěn)定慢性病，僅觀察短期對癥治療效果也可用。（潰瘍，失眠）上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第28頁注意事項：控制試驗條件，確保前后條件可比性離體試驗生物反應(yīng)改變大，可安排異體配對個體差異大時，可用改變率表示上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第29頁抗精神病藥品治療急性期體脂分布特征及其與血脂代謝相關(guān)性研究

國家自然科學基金資助項目(課題號:30170344)

目標探討抗精神病藥品治療急性期體脂分布特征及其與血脂代謝關(guān)系。方法對46例入選患者采取本身配對設(shè)計,給予單一抗精神病藥品(APS)治療10周,檢測患者治療前后體重、體重指數(shù)(BMI)和血脂……上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第30頁左右配對左右器官或組織反應(yīng)靠近為同一個體，為本身對照，可比性強（局麻藥）限于淺表部位適于局部作用原因（擴瞳），經(jīng)過反射或血液循環(huán)，不宜用上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第31頁異體配對將樣本中受試對象按一些特征或條件配成對子,再將每對中兩個受試對象隨機分配到兩個不一樣處理組中。平行進行，可排除時間，氣候干擾可用于慢性試驗但異體配對較難實施（同窩，同種上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第32頁配對設(shè)計優(yōu)點：降低個體差異節(jié)約樣本量較少倫理學問題上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第33頁例1：研究某降壓藥，擬采取A、B兩劑量,已知此藥連續(xù)時間小于6h,6h后血壓又會恢復(fù)到原先水平。每一組最少要用5只貓。問:怎樣設(shè)計類型?上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第34頁方案一10只貓完全隨機均分成2組,1組給A劑量,另1組給B劑量,即采取“成組設(shè)計”完全隨機化好不好？－取決于樣本量樣本小，非試驗原因不齊，分層隨機很好方案二按性別、體重、年紀、健康情況、基礎(chǔ)血壓值等靠近每兩只貓配成1對,用隨機方法決定其中1只貓接收A劑量,另1只接收B劑量,即采取“條件相近者配對設(shè)計”。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第35頁方案三每一窩中取出2只“性別相同、健康情況和基礎(chǔ)血壓值等各方面都相同或靠近”貓配成1對,用“同源配對設(shè)計”方案四先用A劑量,后用B劑量,間隔為8h,每次用藥前后都測血壓值,用其差值作為觀察指標,即采取“本身配對設(shè)計”。（次序誤差）上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第36頁方案五將10只貓完全隨機地均分成2組,用隨機方法決定第1組5只貓使用該藥兩種劑量次序,如先A后B,則第2組中5只貓使用該藥劑量次序恰好相反。每只貓兩次用藥時間間隔為8h,每次用藥前后都測血壓值,用其差值作為觀察指標,即采取“成組交叉設(shè)計”上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第37頁特殊本身對照－交叉設(shè)計（cross-overdesign)同一試驗單位在不一樣試驗階段先后接收不一樣處理,不一樣組別試驗單位接收處理次序不一樣。優(yōu)點：將本身對照與組間比較結(jié)合，兼有異體與本身配對，節(jié)約樣本量上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第38頁22交叉二周期交叉對照試驗(Two-periodcross-overtrial,TPCOT)研究A、B兩種藥品療效是否不一樣？設(shè)兩種次序,即AB和BA,并將2n名試驗對象隨機分配到兩組中,AB組先接收A藥,而BA組先接收B藥,經(jīng)過一段“效應(yīng)去除時間”(washouttime)(5t1/2)后,AB組病人改用B藥,BA組病人改用A藥。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第39頁交叉設(shè)計數(shù)據(jù)變異起源處理效應(yīng)－研究主要原因階段效應(yīng)次序效應(yīng)－在慣用統(tǒng)計分析中被忽略個體變異冗余效應(yīng)(nuisanceeffects):次序效應(yīng),個體變異優(yōu)點：較準確判斷被試原因有效性。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第40頁歷史五十年代,交叉設(shè)計應(yīng)用在農(nóng)業(yè)試驗研究近二十年應(yīng)用臨床試驗,是用得廣而誤用最多設(shè)計,還稱為“Grizzle”設(shè)計或“Hills-Armitage”設(shè)計FDA在1992年頒布了一個指南,包括到2×2交叉設(shè)計適用病情穩(wěn)定慢性病對癥治療（高血壓，類風濕）臨床新藥試驗及生物等效性試驗中比較兩種處理辦法A和B效果慣用方法上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第41頁次序效應(yīng)(sequenceeffect)反應(yīng)了殘留效應(yīng)(carry-overeffect)大小,即上一階段處理因為效應(yīng)去除時間(washouttime)不足或其它原因干擾了下一階段處理效果。分為正殘留效應(yīng)（多見）和負殘留效應(yīng)兩種。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第42頁殘留效應(yīng),第一階段用藥造成耐藥性而產(chǎn)生撤退效應(yīng)(withdrawaleffect)；心理效應(yīng)(psychologicalcarry—overeffect)；患者身體情況因用藥而改變所造成遺留效應(yīng)(nonuniformcarry-effect)上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第43頁與平行對照試驗相比：隨機分組防止組間差異防止人為選擇性偏倚采取本身對照，使病人間比較改為病人內(nèi)比較，消除個體差異降低樣本量符合醫(yī)學倫理上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第44頁缺點：冗余效應(yīng)與處理效應(yīng)混迭(aliasing),尤其是殘留效應(yīng)與處理效應(yīng)混迭。需足夠洗脫期。（阿司匹林即使半衰期為0.5h，但其對血小板影響最少1周。）

經(jīng)過合理設(shè)計,足夠間隔時間，遵照雙盲法消除。病人依從性上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第45頁交叉設(shè)計條件：病情是穩(wěn)定，慢性病人隨機分配藥品只能改進，不能根治上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第46頁國產(chǎn)硝苯地平控釋片藥動學和

生物等效性研究

ChinJHypertension,;13(5):310采取雙周期本身交叉設(shè)計(TwoperiodCrossoverDesign),將受試者隨機分成A、B兩組,A組首次口服受試制劑,B組首次口服參比制劑。1周后交叉服藥。結(jié)論主要藥動學參數(shù)AUC、Cmax經(jīng)統(tǒng)計學處理(方差分析和雙單側(cè)t檢驗),結(jié)果表明兩制劑具生物等效性。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第47頁“生物等效性”(bioequivalence)評價同一藥品不一樣配方或不一樣藥品產(chǎn)品其效用是否相當,仿制藥與專利藥是否相當。均以試驗品與參考品作比較,二者應(yīng)有相同劑量形式,而且它們在生物體內(nèi)吸收速率和延緩(吸收率和吸收度)沒有顯著差異.上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第48頁上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第49頁上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第50頁配伍組設(shè)計（隨機區(qū)組設(shè)計）分別用A,B,C3種藥品治療30例糖尿病患者,研究用藥后血糖值是否有差異？隨機抽樣；將樣本中30例受試對象按性別相同,年紀、病情相近者配成10組；用隨機排列表將每個配伍組中3個受試對象隨機分配到A,B,C3個處理組中;臨床試驗。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第51頁用于配伍原因通常為影響試驗效應(yīng)主要非處理原因,如將受試對象按年紀、性別、體重等原因進行匹配,其目標是使得各處理組間除欲研究原因外盡可能保持均衡可比,從而提升試驗檢驗效能。區(qū)組內(nèi)非處理原因基本相近區(qū)組間非處理原因可相同或不一樣各區(qū)組次序隨機排列上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第52頁特點：各區(qū)組內(nèi)條件基本相同，抽樣誤差小，效率高可分析兩原因（藥品對腎功效，年紀；藥品對癌細胞，細胞類型）注意事項：原因選擇區(qū)組劃分不耐受缺失上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第53頁氯胺酮、芬太尼、咪唑安定及異丙酚對TNF-α/IL-10平衡影響

成年健康雄性新西蘭大白兔(由廣西醫(yī)科大學試驗動物中心提供)30只,以體重作為劃分區(qū)組原因以消除體重對麻醉藥品影響,按配伍組設(shè)計分為5組,處理原因分別為氯胺酮、芬太尼、咪唑安定、異丙酚和生理鹽水。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第54頁ABCDCBADBCDABADCCDAB拉丁方隨機化ADCBDABC

DCBA標準方上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第55頁拉丁方設(shè)計假如一個方陣是用r個拉丁字母排成r行r列,方陣每行每列中,每個拉丁字母只出現(xiàn)一次,那么這個方陣就叫r階拉丁方,或r×r拉丁方上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第56頁受試對象：ⅠⅡⅢⅣ四個藥品：ABCD處理原因,用字母表示,另外兩個是需要加以控制原因,分別用行和列表示。觀察4種藥品對不一樣起源動物及不一樣用藥部位影響上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第57頁給藥受試對象號部位ⅠⅡⅢⅣ1AAAA2BBBB3CCCC4DDDD

F給藥部位=1.5335,P>0.05;F受試對象間=0.6193,P>0.05;F藥品=7.1811,0.01<P<0.05。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第58頁多原因試驗設(shè)計多原因試驗設(shè)計與多原因方差分析多原因試驗設(shè)計析因設(shè)計(factorialdesign)正交設(shè)計(orthogonaldesign)嵌套設(shè)計(nesteddesign)裂區(qū)設(shè)計(split-plotdesign)上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第59頁多原因試驗設(shè)計－析因設(shè)計將兩個或兩個以上原因及其各種水平進行排列組合,交叉分組試驗設(shè)計。

優(yōu)點：全方面、均衡、效率高，信息多每個原因各水平之間是否有差異;原因間交互作用;最正確組合。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第60頁2×2析因設(shè)計兩個原因A和B,每個原因有兩個水平:A1、A2,B1、B2。兩原因交互作用稱為一階交互作用。3×2×4:A原因3水平,B2水平,C4水平上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第61頁復(fù)方黃黛片中藥血清藥理學研究方法建立

第四軍醫(yī)大學學報;26(17)

目標:建立復(fù)方黃黛片(CRNIT)中藥血清藥理學研究方法.方法:以兔為含藥血清供體,以NB4,K562等人白血病細胞株為研究對象,采取析因設(shè)計,觀察給藥是否、血清滅活是否、血清濃度及培養(yǎng)時間各原因（2×2×5×2）對白血病細胞株抑制率影響及四原因間交互作用.上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第62頁中藥血清藥理學

動物經(jīng)口服給藥后一定時間采血分離血清,用此含藥血清進行體外藥理試驗一個試驗方法。中藥粗提物并不能代表體內(nèi)環(huán)境真正發(fā)揮作用有效成份中藥本身理化性質(zhì)(如電解質(zhì)、酸堿度等)及雜質(zhì)成份等,都會對細胞生長產(chǎn)生一定影響,從而干擾試驗結(jié)果,影響試驗結(jié)論真實性和可靠性。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第63頁特點克服中藥本身理化性質(zhì)等原因?qū)υ囼灲Y(jié)果干擾不但反應(yīng)藥品中可吸收部分直接作用,也可反應(yīng)藥品在機體作用下形成代謝物和藥品誘生機體內(nèi)源性物質(zhì)間接結(jié)果,真實地反應(yīng)藥品在體內(nèi)實際作用。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第64頁整體動物選擇和給藥劑量羅煥敏等以服用當歸芍藥散改良方老年癡呆鼠血清研究了其對體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元形態(tài)改變影響。給藥劑量應(yīng)以整體模型動物有效劑量(即臨床成人劑量8～18倍量)為妥。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第65頁給藥方案及采血時間血清滅活與保留血清添加量和對照組設(shè)置血清中含有各種酶、抗體、補體及其生物活性物質(zhì),它們對體外培養(yǎng)細胞、病毒、病原菌以及直接用于體外試驗組織器官等會產(chǎn)生影響而干擾。血清經(jīng)滅活后可否排除這些干擾原因？同時對藥效產(chǎn)生怎樣影響?含藥血清是否能夠長久保留?上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第66頁上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第67頁上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第68頁析因設(shè)計是各原因不一樣水平全方面組合。當原因較多時(>4)，因為組合產(chǎn)生處理數(shù)急劇增加而難以實現(xiàn)。如試驗包括7個試驗原因，每個原因需考查3個水平，則全部組合數(shù)為37=2187上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第69頁

析因設(shè)計缺點:需要試驗次數(shù)較多可選取正交設(shè)計析因設(shè)計：全方面試驗正交設(shè)計：非全方面試驗,依據(jù)專業(yè)知識，分析主效應(yīng)和部分主要原因一階交互作用。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第70頁正交設(shè)計

利用規(guī)格化正交表-Ln(Km)安排多原因試驗（原因間可能存在交互作用）。

L:正交表,n

:正交表行數(shù),

K

:各列水平數(shù),m

:列數(shù)。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第71頁原因水平12A(性別)男女B(臨床類型)）經(jīng)典非經(jīng)典C(療法)中西結(jié)合西藥上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第72頁正交表L4（23）TestNABC治愈天數(shù)11(水平)11212232124221上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第73頁優(yōu)點：正交表所確定“試驗點”具:在空間含有“均勻分散性”、在統(tǒng)計分析時含有“整齊可比性”。大大降低試驗次數(shù),是一個高效、快速多原因試驗方法。用于藥品配方、工藝優(yōu)化、生物體培養(yǎng)條件篩選上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第74頁多原因重復(fù)測量設(shè)計重復(fù)測量數(shù)據(jù)（repeatedmeasurementdata)是指每一試驗單位最少接收兩次以上不一樣處理，或接收相同處理后，最少在兩個以上不一樣時間點進行測量并取得對應(yīng)次數(shù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第75頁與配對設(shè)計區(qū)分：觀察出發(fā)點不一樣因為為同一對象不一樣時間點，不具獨立性。相鄰兩個數(shù)據(jù)之間關(guān)系十分親密,相隔越遠兩個數(shù)據(jù)之間相關(guān)程度越低。（相關(guān)程度不等現(xiàn)象）上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第76頁例：將15只家兔隨機均分成3組(處理原因A),即A1、A2、A3。讓全部家兔處于缺氧狀態(tài),對接收各種處理每組家兔中每1只,分別在缺氧前后不一樣時間點(時間原因T,h)上觀察血漿K+含量即T1(缺氧前)、T2(缺氧0.5h)、T3(缺氧1h)及T4(缺氧2h)。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第77頁上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第78頁上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第79頁常見誤用情況重復(fù)進行各時間點t檢驗（增加假陽性錯誤）忽略個體改變上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第80頁臨床研究平行組對照設(shè)計(parallelgroupdesign)交叉設(shè)計(cross-overdesign)成組序貫設(shè)計（groupsequentialdesign)析因設(shè)計(factorial

design)上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第81頁平行組設(shè)計

隨機對照試驗（Randomizedcontrolledtrial，RCT），隨機分配到兩個或多個組中一組,施以不一樣處理（藥品一個或多個劑量,一個或多個對照,如撫慰劑或/和陽性對照）優(yōu)點：防止時間偏倚，常見簡單缺點：工作量大，效率低。上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第82頁觀察期間出現(xiàn)了不良事件(不良反應(yīng))。該試驗是繼續(xù)下去或者馬上停頓?交叉設(shè)計和平行設(shè)計難回答.上海交通大學醫(yī)學院醫(yī)學實驗設(shè)計與分析課程試驗設(shè)計專家講座第83頁傳統(tǒng)標準序貫方法不要求樣本量，配對隨機分配到兩個處理組(或同一受試者先后接收兩種處理);每得到一對試驗結(jié)果就進行一次統(tǒng)計分析,直至以一定顯著性水平得出拒絕或接收零假設(shè)結(jié)論,即可結(jié)束試驗。優(yōu)點：降低樣本量,縮短試驗周期