細(xì)胞專業(yè)知識講座

緒論一、組織學(xué)與胚胎學(xué)研究內(nèi)容二、組織學(xué)與胚胎學(xué)在醫(yī)學(xué)中地位三、組織學(xué)與胚胎學(xué)研究方法四、組織學(xué)與胚胎學(xué)學(xué)習(xí)方法細(xì)胞專業(yè)知識講座第1頁一、組織學(xué)與胚胎學(xué)研究內(nèi)容組織學(xué)（histology）與胚胎學(xué)（embryology）是醫(yī)學(xué)課程中一門基礎(chǔ)學(xué)科。組織學(xué)：是借助于顯微鏡重點研究人體微細(xì)結(jié)構(gòu)與功效。胚胎學(xué)：是重點研究人體結(jié)構(gòu)發(fā)育分化程序和生長改變規(guī)律性。細(xì)胞專業(yè)知識講座第2頁組織學(xué)（histology）研究內(nèi)容：人體組織是由細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)發(fā)育分化形成，而器官系統(tǒng)則又是由幾個不一樣組織發(fā)育分化而成。所以組織學(xué)研究內(nèi)容包含：細(xì)胞、組織和器官系統(tǒng)三部分。細(xì)胞專業(yè)知識講座第3頁細(xì)胞（cell）定義：是人體形態(tài)結(jié)構(gòu)基本單位，是一切生物體新陳代謝、生長發(fā)育、繁殖分化形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。形態(tài)各異、大小不等：人體含有許多形態(tài)各異、大小不一樣細(xì)胞，參加機體各種機能活動。相互調(diào)整、相互協(xié)同：各種細(xì)胞在機體內(nèi)相互調(diào)整、相互協(xié)同，以維持整體生命活動。細(xì)胞專業(yè)知識講座第4頁組織(tissue)組成：是由一些形態(tài)相同、功效相近細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)所組成。分類：因為細(xì)胞特征不一樣，機體內(nèi)組織也對應(yīng)分為：上皮組織、結(jié)締組織、肌組織、神經(jīng)組織。細(xì)胞專業(yè)知識講座第5頁器官和系統(tǒng)(organandsystem)形成：是在胚胎發(fā)育早期由幾個不一樣組織發(fā)育、分化和相互結(jié)合所形成。組織特征：成體各器官、系統(tǒng)分別含有其微細(xì)結(jié)構(gòu)組織特征，執(zhí)行著特定功效。如：口腔、食道、胃、腸均由不一樣組織發(fā)育、分化和結(jié)合而成，含有不一樣形態(tài)結(jié)構(gòu)特點，但卻執(zhí)行著共同功效－－消化食物、吸收營養(yǎng)、排除糟粕。細(xì)胞專業(yè)知識講座第6頁胚胎學(xué)(embryology)在醫(yī)學(xué)中稱人體胚胎學(xué)(humanembryology)研究內(nèi)容：生殖細(xì)胞、受精與卵裂植入、三胚層形成與分化胎膜與胎盤人體各器官系統(tǒng)生長與分化先天性畸形。細(xì)胞專業(yè)知識講座第7頁二、組織學(xué)與胚胎學(xué)在醫(yī)學(xué)中地位組織學(xué)與胚胎學(xué)在醫(yī)學(xué)課程中是與基礎(chǔ)和臨床各學(xué)科都有一定聯(lián)絡(luò)。在基礎(chǔ)各學(xué)科中，尤其與解剖學(xué)、病理學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)都有親密聯(lián)絡(luò)。在臨床各學(xué)科中，為婦產(chǎn)科學(xué)、男性學(xué)、生殖工程學(xué)、兒科學(xué)等臨床學(xué)科提供了必要基礎(chǔ)知識，也是計劃生育與優(yōu)生學(xué)賴以發(fā)展學(xué)科之一。在近代生物學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)快速發(fā)展，各學(xué)科內(nèi)容相互滲透、相互推進、緊密相關(guān)。細(xì)胞專業(yè)知識講座第8頁三、組織學(xué)與胚胎學(xué)研究方法組織學(xué)與胚胎學(xué)研究主要包括兩方面：即顯微鏡和標(biāo)本。顯微鏡包含：光學(xué)顯微鏡（lightmicroscopy，LM）：又稱光鏡。最高分辨率為0.2m，放大倍數(shù)約為1000倍；電子顯微鏡（electronmicroscopy，EM）：又稱電鏡。最高分辨率為0.2nm，放大倍數(shù)幾萬倍到幾十萬倍。比光鏡高1000倍。所以電鏡能觀察到細(xì)胞更微細(xì)結(jié)構(gòu)。計量單位：光鏡與電鏡下進行觀察，慣用計量單位之間關(guān)系：1m(微米)＝10-3mm(毫米)；1nm(納米)＝10-3m(微米)。細(xì)胞專業(yè)知識講座第9頁光學(xué)顯微鏡激光共聚焦掃描顯微鏡電子顯微鏡其它技術(shù)細(xì)胞專業(yè)知識講座第10頁(一)光學(xué)顯微鏡技術(shù)應(yīng)用普通光學(xué)顯微鏡觀察組織標(biāo)本(切片)是最慣用方法。細(xì)胞專業(yè)知識講座第11頁光學(xué)顯微鏡細(xì)胞專業(yè)知識講座第12頁標(biāo)本制作：組織學(xué)標(biāo)本制作比較復(fù)雜，基本包含以下幾個步驟：取材、固定、脫水、包埋、切片、染色等。取材、固定：為使所獲材料形態(tài)結(jié)構(gòu)靠近活體狀態(tài)，故取材要快速，得到材料應(yīng)及時用固定液（fixative）固定（fixation）。慣用固定液為甲醛、乙醇等，它們能夠使蛋白質(zhì)快速凝固，預(yù)防其分解和變性。脫水、包埋、切片：為使組織與包埋劑相融合，所獲材料需經(jīng)乙醇或丙酮脫水；為便于將材料切成薄片，需將其包埋在石蠟或火棉膠內(nèi)，然后再用切片機將其切成厚約5～10m薄片。細(xì)胞專業(yè)知識講座第13頁染色：切片需經(jīng)染色后方可在顯微鏡下觀察。蘇木精（hematoxylin）、伊紅（eosin）染色（簡稱HE）：蘇木精：是藍(lán)色堿性染料，可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)一些物質(zhì)染成藍(lán)紫色；伊紅：是紅色酸性染料，可將細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色?；靖拍睿簩A性染料親和力強稱為嗜堿性(basophilia)；對酸性染料親和力強稱為嗜酸性(acidophilia)；對兩種染料親和力都不強稱中性(neutrophilia)。細(xì)胞專業(yè)知識講座第14頁（二）共聚焦激光掃描顯微鏡共聚焦激光掃描顯微鏡（confocallaserscanningmicroscope，CLSM）是20世紀(jì)80年代初研制成功一個高光敏度、高分辨率新型生物學(xué)儀器。結(jié)構(gòu)組成：激光光源共聚焦成像掃描系統(tǒng)電子光學(xué)系統(tǒng)微機圖像分析系統(tǒng)外接探測器彩色顯示器攝影裝置細(xì)胞專業(yè)知識講座第15頁（三）電子顯微鏡技術(shù)依據(jù)分辨率、放大倍數(shù)以及功效等不一樣可分為兩種：透射電子顯微鏡，又稱透射電鏡或電鏡；掃描電子顯微鏡，又稱掃描電鏡。細(xì)胞專業(yè)知識講座第16頁透射電子顯微鏡（transmissionelectronmicroscope）透射電鏡觀察組織須用戍二醛或鋨酸固定，樹脂包埋，切厚50～80nm超薄切片，經(jīng)鉛鹽等重金屬鹽染色后鏡下觀察。電鏡下所見結(jié)構(gòu)稱超微結(jié)構(gòu)（ultrastructure）。超微結(jié)構(gòu)被金屬所染部位，在熒光屏上顯得暗，圖象較黑，稱為電子密度高；反之則稱為電子密度低。被檢結(jié)構(gòu)與重金屬鹽相結(jié)合稱正染色；被檢結(jié)構(gòu)本身不與重金屬鹽結(jié)合，而其周圍著重金屬鹽稱負(fù)染色。普通染色都是正染色。細(xì)胞專業(yè)知識講座第17頁掃描電子顯微鏡技術(shù)（scanningelectronmicroscope）掃描電子顯微鏡技術(shù)要觀察組織不需制成切片。固定后標(biāo)本，在其表面噴鍍金，在熒光屏上即可顯示細(xì)胞或組織表面立體結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞表面突起、微絨毛、纖毛等。細(xì)胞專業(yè)知識講座第18頁（四）其它技術(shù)冷凍切片技術(shù)冷凍蝕刻復(fù)型術(shù)組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)技術(shù)原位雜交技術(shù)體外培養(yǎng)技術(shù)其它標(biāo)本制作技術(shù)細(xì)胞專業(yè)知識講座第19頁冷凍切片技術(shù)為防止細(xì)胞、組織內(nèi)一些物質(zhì)不被固定液所破壞，又要使組織變硬，便于將其切成薄片，同時又要快速得到切片，可將獲取新鮮組織馬上投入液氮(-196℃)內(nèi)快速凍結(jié)，然后用恒冷箱切片機（cryostat）制成冷凍切片（frozensection）。冷凍切片技術(shù)（frozensectionmethod）制片快速，細(xì)胞內(nèi)酶活性保留很好，慣用于酶組織化學(xué)染色。細(xì)胞專業(yè)知識講座第20頁冷凍蝕刻復(fù)型術(shù)該技術(shù)包含冷凍、斷裂、鍍鉑、分離復(fù)制面等主要步驟。冷凍蝕刻術(shù)既能夠看到細(xì)胞膜外表面，又可見細(xì)胞膜內(nèi)表面，也可探測細(xì)胞膜斷面結(jié)構(gòu)。冷凍蝕刻復(fù)型術(shù)(freezeetchreplica)：細(xì)胞專業(yè)知識講座第21頁組織化學(xué)技術(shù)組織化學(xué)（histochemistry）方法：是利用化學(xué)試劑與組織細(xì)胞內(nèi)一些物質(zhì)展現(xiàn)化學(xué)反應(yīng)，在局部形成有色沉淀物，經(jīng)過顯微鏡觀察而對組織細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成份進行定位、定性和定量研究。如過碘酸希夫反應(yīng)，簡稱PAS(periodacidSchiffreaction)。該方法是顯示細(xì)胞內(nèi)糖原或多糖一個方法，其化學(xué)反應(yīng)基本過程是經(jīng)過過碘酸氧化作用，使多糖釋放出醛基，醛基與無色鹼性品紅結(jié)合反應(yīng)，于多糖存在部位形成紫紅色沉淀物，從而證實細(xì)胞內(nèi)含有糖原或粘多糖成份。細(xì)胞專業(yè)知識講座第22頁免疫組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry）是利用抗原、抗體特異性結(jié)合，檢測組織中多肽、蛋白質(zhì)等物質(zhì)。該方法先將蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，注入動物體內(nèi)，使其產(chǎn)生對應(yīng)抗體。從血清中提取該抗體，并用熒光染料、鐵蛋白或辣根過氧化物酶等標(biāo)識。用標(biāo)識抗體處理切片；標(biāo)識抗體與切片上對應(yīng)抗原特異性結(jié)合。切片中有標(biāo)識物展現(xiàn)部位，即顯示該物質(zhì)在組織中分布。細(xì)胞專業(yè)知識講座第23頁其它組織制片技術(shù)涂片（smear）：血細(xì)胞、分離細(xì)胞或脫落細(xì)胞可直接涂在玻片上；鋪片：機體內(nèi)疏松結(jié)締組織可撕成薄片鋪在玻片上；磨片：牙和骨等堅硬組織可磨成薄片；以上標(biāo)本再經(jīng)固定染色后顯微鏡下觀察。細(xì)胞專業(yè)知識講座第24頁四、組織學(xué)與胚胎學(xué)學(xué)習(xí)方法理論和試驗親密聯(lián)絡(luò)形態(tài)與機能結(jié)合斷面和立體關(guān)系動態(tài)改變概念細(xì)胞專業(yè)知識講座第25頁理論和試驗親密聯(lián)絡(luò)組織學(xué)與胚胎學(xué)是一門以形態(tài)結(jié)構(gòu)為主學(xué)科，許多結(jié)構(gòu)不要死記硬背，而是在實習(xí)課中經(jīng)過觀察、分析、比較，然后再記憶。這種聯(lián)絡(luò)既不會感到枯燥而又能認(rèn)識深刻。所以學(xué)習(xí)時要重視實習(xí)課這個主要步驟。細(xì)胞專業(yè)知識講座第26頁形態(tài)與機能結(jié)合形態(tài)結(jié)構(gòu)總是與一定機能親密相關(guān)。神經(jīng)細(xì)胞有細(xì)長突起結(jié)構(gòu)特點，以傳遞神經(jīng)沖動；紅細(xì)胞含豐富血紅蛋白，則含有結(jié)合和攜帶氧功效；腺細(xì)胞含有豐富內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)高爾基復(fù)合體，能合成份泌物?？傊Y(jié)構(gòu)與功效有著親密聯(lián)絡(luò)。細(xì)胞專業(yè)知識講座第27頁斷面和立體關(guān)系在顯微鏡下觀察組織切片，所觀察到形態(tài)都是結(jié)構(gòu)斷面形態(tài)。一個細(xì)胞因為所切部位不一樣，在有斷面可見細(xì)胞核，在有斷面沒有細(xì)胞核。又如身體內(nèi)許多管狀器官，因為所切方位不一樣，往往呈完全不一樣形態(tài)，所以在觀察切片上形態(tài)結(jié)構(gòu)時，要考慮斷面和立體關(guān)系細(xì)胞專業(yè)知識講座第28頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第29頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第30頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第31頁動態(tài)改變概念從受精卵到胎兒娩出，胚胎經(jīng)過一系列改變，這種改變是個連續(xù)過程。在學(xué)習(xí)人體胚胎課時一定要把握住每一過程改變，包含時間、地點、相互關(guān)系，從而建立起動態(tài)概念。細(xì)胞專業(yè)知識講座第32頁細(xì)胞（復(fù)習(xí)）細(xì)胞專業(yè)知識講座第33頁細(xì)胞是人體形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功效和生長發(fā)育基本單位。

細(xì)胞大小不一樣，形態(tài)多樣：圓形、橢圓形、長圓柱形、星形、立方形、不規(guī)則形等等，有細(xì)胞還伸出長長突起。細(xì)胞專業(yè)知識講座第34頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第35頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第36頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第37頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第38頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第39頁即使細(xì)胞體積不一樣，形態(tài)不一樣，但它們基本結(jié)構(gòu)都是一樣，除了成熟紅細(xì)胞以外，都由細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核三大部分組成。細(xì)胞專業(yè)知識講座第40頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第41頁

細(xì)胞膜cellmembrane

7～10nm厚（光鏡分辨率0.2μm）電鏡下，細(xì)胞膜能夠分為三層：中間一層電子密度低，比較亮，內(nèi)外兩層電子密度高，比較暗，把這三層膜合稱為單位膜。細(xì)胞專業(yè)知識講座第42頁細(xì)胞膜細(xì)胞專業(yè)知識講座第43頁脂質(zhì)雙分子層親水極

疏水極

細(xì)胞專業(yè)知識講座第44頁液態(tài)鑲嵌模型細(xì)胞專業(yè)知識講座第45頁

生理功效：Cellmembrane含有保護功效；物質(zhì)交換經(jīng)過細(xì)胞膜，單純擴散、易化擴散、泵是小分子物質(zhì)經(jīng)過細(xì)胞膜方式；而大分子物質(zhì)則經(jīng)過胞吞、胞吐方式進出細(xì)胞。在物質(zhì)交換過程中，起主要作用是膜上蛋白質(zhì)。膜上蛋白質(zhì)有是酶，有含有受體性質(zhì)，有有抗原性，都有主要功效意義。

細(xì)胞專業(yè)知識講座第46頁

細(xì)胞質(zhì)cytoplasm

細(xì)胞器organelles：是細(xì)胞質(zhì)主要成份。有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)，執(zhí)行一定功效，是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)比較固定成份。包含有：線粒體、核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、溶酶體、微絲、微管、中心體等。細(xì)胞專業(yè)知識講座第47頁

包含物：是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)另外一類有形成份，它數(shù)量不定，隨細(xì)胞生理狀態(tài)不一樣而改變，它們有是營養(yǎng)物質(zhì)，有是代謝產(chǎn)物，如糖原、脂滴、色素等?；|(zhì)：無定形物質(zhì)。細(xì)胞專業(yè)知識講座第48頁細(xì)胞專業(yè)知識講座第49頁板狀嵴線粒體Mitochondria內(nèi)有很多酶系，參加細(xì)胞內(nèi)氧化，功效是產(chǎn)生能量–“能源工廠”。功效活躍、耗能多細(xì)胞，線粒體就很豐富。HE:嗜酸性細(xì)胞專業(yè)知識講座第50頁小腸上皮細(xì)胞-線粒體鐵蘇木素染色細(xì)胞專業(yè)知識講座第51頁由大、小兩個亞單位組成?；瘜W(xué)成份是核糖核酸和蛋白質(zhì)。功效是合成蛋白質(zhì)。HE:嗜堿性核糖體ribosome

細(xì)胞專業(yè)知識講座第52頁多為板層囊狀，它表面附著有核糖體，所以叫RER。它功效是合成和運輸?shù)鞍踪|(zhì)。HE:較強嗜堿性。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Roughendoplasmicreticulum,RER細(xì)胞專業(yè)知識講座第53頁