微生物病毒專題知識講座

微生物病毒專題知識講座微生物病毒專題知識講座第1頁1.病毒概念2.病毒大小和形態(tài)3.病毒化學組成4.病毒粒子不一樣結構回顧病毒粒子微生物病毒專題知識講座第2頁5.病毒群體形態(tài)微生物病毒專題知識講座第3頁5.1包含（涵）體

Cowdry-typeinclusionNegribodies一些病毒感染宿主細胞后，在宿主細胞中出現(xiàn)顯微鏡可見小體狂犬病毒在神經(jīng)細胞中引發(fā)嗜酸性包涵體在細胞質(zhì)皰疹病毒在細胞核微生物病毒專題知識講座第4頁5.2噬菌斑噬菌斑(plaque)：噬菌體侵染細菌細胞，造成寄主細胞裂解死亡，因而在瓊脂培養(yǎng)基表面形成肉眼可見透明小圓斑(“負菌落”)微生物病毒專題知識講座第5頁噬菌斑應用作為噬菌體判定指標用于純種分離計數(shù)——噬菌體效價測定

效價表示每毫升試樣中所含有侵染性噬菌體數(shù)量，即噬菌斑形成單位(plaque-formingunit,pfu)微生物病毒專題知識講座第6頁5.3空斑和病斑以單層動物細胞受動物病毒侵染產(chǎn)生透明斑為空斑腫瘤病毒感染單層動物細胞，產(chǎn)生細胞劇增，稱為病斑微生物病毒專題知識講座第7頁5.4枯斑由植物病毒在植物葉片上形成局部壞死斑，稱為枯斑微生物病毒專題知識講座第8頁6.病毒繁殖方式無生長過程，只有基礎成份組合核酸復制+蛋白質(zhì)合成——裝配為病毒粒子微生物病毒專題知識講座第9頁6.1噬菌體繁殖吸附——侵入——增殖——裝配——釋放烈性噬菌體：20-60min完成，引發(fā)宿主細胞裂解（E.coliT4噬菌體）溫和噬菌體：長時間完成，普通不引發(fā)宿主細胞裂解噬菌體（l噬菌體）微生物病毒專題知識講座第10頁T4噬菌體裂解性周期(增殖性周期)吸附侵入增殖裝配釋放微生物病毒專題知識講座第11頁(1)噬菌體繁殖——吸附尾絲與宿主特異結合，宿主表面有多個吸附位點不一樣噬菌體吸附位點不一樣，如脂多糖、脂蛋白、磷酸壁、鞭毛等吸附能夠受外界條件影響，如陽離子、輔助因子、pH、溫度等微生物病毒專題知識講座第12頁每一個敏感細胞所能吸附對應噬菌體數(shù)量稱為感染復數(shù)（m.o.i)m.o.i普通可到達250-360個超大m.o.i可引發(fā)自外裂解微生物病毒專題知識講座第13頁T4噬菌體從吸附到侵入只需15s吸附引發(fā)構象改變，將核酸注入宿主細胞內(nèi)假如兩種以上侵入，只有一個得以增殖蛋白質(zhì)外殼留在細胞外尾絲吸附刺突固著尾鞘收縮尾管穿入DNA注入(2)噬菌體繁殖——侵入微生物病毒專題知識講座第14頁噬菌體遺傳物質(zhì)是DNA微生物病毒專題知識講座第15頁Unattachedvirion.Attachmenttothewallbythelongtailfibersinteractingwithcorepolysaccharide.Contactofcellwallbythetailpins.ContractionofthetailsheathandinjectionoftheDNA.AttachmentandPenetration微生物病毒專題知識講座第16頁(3)

噬菌體繁殖——增殖核酸復制蛋白質(zhì)合成微生物病毒專題知識講座第17頁病毒基因組轉錄微生物病毒專題知識講座第18頁翻譯微生物病毒專題知識講座第19頁病毒基因組復制與表示存在著強烈時序性微生物病毒專題知識講座第20頁(4)

噬菌體繁殖——裝配（成熟）微生物病毒專題知識講座第21頁(5)

噬菌體繁殖——釋放（裂解）微生物病毒專題知識講座第22頁大量噬菌體吸附于同一宿主細胞表面并釋放眾多溶菌酶，最終因外在原因而造成細胞裂解現(xiàn)象稱之為自外裂解單純?nèi)芫F(xiàn)象不可能造成大量子代噬菌體產(chǎn)生自外裂解vs裂解微生物病毒專題知識講座第23頁T4噬菌體裂解性周期(增殖性周期)吸附侵入增殖裝配釋放平均每一個宿主細胞裂解后所產(chǎn)生子代噬菌體數(shù)稱作裂解量（T4約100）微生物病毒專題知識講座第24頁6.2噬菌體繁殖表征噬菌體效價測定一步生長曲線噬菌斑微生物病毒專題知識講座第25頁噬菌體效價測定——噬菌斑法效價：表示每毫升試樣中所含有具侵染性噬菌體粒子數(shù)，又稱噬菌斑形成單位數(shù)（plaque-formingunit，pfu）或感染中心數(shù)微生物病毒專題知識講座第26頁較常見且較準確測定效價方法稱為雙層平板法噬菌體效價測定方法微生物病毒專題知識講座第27頁噬菌體效價測定——雙層平板法微生物病毒專題知識講座第28頁微生物病毒專題知識講座第29頁6.2噬菌體繁殖表征噬菌體效價測定有感染力噬菌體粒子數(shù)一步生長曲線定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律試驗曲線微生物病毒專題知識講座第30頁少許病毒與敏感細胞接觸，病毒吸附后，高倍稀釋，繼續(xù)培養(yǎng)，定時取樣測定培養(yǎng)物中病毒效價以感染時間為橫坐標，病毒效價為縱坐標，繪制出病毒特征性繁殖曲線，即一步生長曲線一步生長曲線微生物病毒專題知識講座第31頁裂解量：每個受感染細胞所釋放產(chǎn)生子代病毒數(shù)目裂解量=平穩(wěn)期平均噬菌斑數(shù)/潛伏期平均噬菌斑數(shù)潛伏期裂解期平穩(wěn)期一步生長曲線微生物病毒專題知識講座第32頁溫和噬菌體感染細胞后，將其核酸整合到宿主核DNA上，而且能夠隨宿主DNA復制而進行同時復制，在普通情況下，不引發(fā)宿主細胞裂解噬菌體。6.3溫和噬菌體和溶源菌微生物病毒專題知識講座第33頁整合到宿主基因組噬菌體—前噬菌體或原噬菌體含前噬菌體宿主——溶源菌溶源菌所特有性質(zhì)——溶源性6.3溫和噬菌體和溶源菌微生物病毒專題知識講座第34頁溶源性周期vs裂解性周期微生物病毒專題知識講座第35頁微生物病毒專題知識講座第36頁產(chǎn)生烈性噬菌體潛在能力：10-2—10-5溶源菌在外界理化因子誘導下，可發(fā)生高頻率裂解宿主細胞有時能產(chǎn)生新生理特征，如溶源性白喉桿菌產(chǎn)生白喉毒素溶源性表現(xiàn)微生物病毒專題知識講座第37頁游離態(tài)成熟后被釋放并有侵染性游離噬菌體粒子整合態(tài)已整合在宿主基因組上前噬菌體狀態(tài)營養(yǎng)態(tài)指前噬菌體經(jīng)外界理化因子誘導后，脫離宿主核基因組而處于主動復制、合成和裝配狀態(tài)溫和噬菌體三種存在形式微生物病毒專題知識講座第38頁游離態(tài)整合態(tài)營養(yǎng)態(tài)微生物病毒專題知識講座第39頁大腸桿菌l噬菌體E.coliK12(l)大腸桿菌Mu-1噬菌體大腸桿菌P1、P2噬菌體常見溫和性噬菌體微生物病毒專題知識講座第40頁進入宿主后線狀基因組依靠粘性末端環(huán)化溫和性噬菌體代表l噬菌體頭部呈20面體，尾部彎曲、中空、非收縮性，頭尾間有頸部連接關鍵為線狀dsDNA，末端有一由12個堿基組成粘性末端微生物病毒專題知識講座第41頁Video微生物病毒專題知識講座第42頁溶源菌判定少許溶源菌與大量敏感性指示菌(遇溶源菌裂解后所釋放溫和噬菌體會發(fā)生裂解循環(huán))相混合，與瓊脂培養(yǎng)基混勻后倒一個平板，經(jīng)培養(yǎng)后顯示出特殊噬菌斑。微生物病毒專題知識講座第43頁6.4植物病毒繁殖植物病毒引發(fā)病害在數(shù)量上占植物病害第二位由植物病毒引發(fā)植物病害植物有：禾本科、茄科、豆科、十字花科和葫蘆科等。茄科和十字花科植物有50%病害為病毒病植物病毒也有可利用價值，尤其在開發(fā)基因工程載體、轉基因植物研究等方面，發(fā)揮了很大作用植物病毒共分為9個科(或亞科)，47個屬，729個種或可能種（以ssRNA病毒為主）植物病毒對寄主專一性較差微生物病毒專題知識講座第44頁繁殖無吸附階段，借植物天然創(chuàng)口侵入借帶病汁液與植物傷口相接觸而侵入借人工嫁接時傷口而侵入借昆蟲刺吸式口器損傷植物而侵入6.4植物病毒繁殖微生物病毒專題知識講座第45頁植物病毒借植物細胞間連絲擴散胞間聯(lián)絲是植物細胞間物質(zhì)運輸通道（20-30nm），植物病毒產(chǎn)生運動蛋白可修飾胞間聯(lián)絲，使其孔徑擴充幾倍甚至幾十倍，方便侵染性病毒結構經(jīng)過。6.4植物病毒繁殖微生物病毒專題知識講座第46頁6.5動物病毒繁殖人類傳染病70-80%由病毒引發(fā)SARS，H1N1，禽流感，艾滋病……人類惡性腫瘤15%由病毒引發(fā)微生物病毒專題知識講座第47頁皮膚和頸部癌癥乳頭狀瘤病毒乙肝病毒肝癌微生物病毒專題知識講座第48頁內(nèi)吞動物病毒繁殖過程與噬菌體有一些差異，如侵入過程微生物病毒專題知識講座第49頁第三章病毒和亞病毒第二節(jié)亞病毒微生物病毒專題知識講座第50頁只含有核酸或蛋白質(zhì)一個成份分子病原體或者是由缺點病毒組成功效不能完整病原體為亞病毒類病毒：只含含有獨立侵染性RNA組分擬病毒：只含不具獨立侵染性RNA組分朊病毒：只含單一蛋白質(zhì)組分亞病毒概念和分類微生物病毒專題知識講座第51頁類病毒只含RNA，專性寄生活細胞當前只在植物中發(fā)覺類病毒發(fā)覺：最早由在美國工作瑞士學者迪納于1971年在馬鈴薯紡錘塊病中發(fā)覺微生物病毒專題知識講座第52頁擬病毒（類類病毒）包裹在真病毒顆粒內(nèi)有缺點類病毒普通僅由裸露RNA組成，不具侵染活性與擬病毒“共生”真病毒又稱