中藥、天然藥物注射劑質(zhì)量控制的研究與評(píng)價(jià)

中藥、天然藥物注射劑質(zhì)量控制的研究與評(píng)價(jià)第一頁，共36頁。主要內(nèi)容一、概述二、中藥注射劑質(zhì)量控制研究與評(píng)價(jià)要點(diǎn)及案例分析1、立題研究2、原料3、輔料4、半成品的質(zhì)量控制5、與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制6、定性、定量控制7、含蛋白質(zhì)、多糖注射劑的質(zhì)量控制8、指紋圖譜2第二頁，共36頁。概述

注射劑俗稱針劑，它包括滅菌或無菌溶液、乳濁液、混懸液及臨用前配成液體的無菌粉末、濃溶液等類型。注射劑由藥物和附加劑、溶媒及特制的容器所組成，并需采用避免污染或殺滅細(xì)菌等工藝制備的一種劑型。中藥注射劑系指從藥材中提取的有效物質(zhì)制成的可供人體內(nèi)的滅菌溶液或乳狀液，以及供臨床用前配成溶液的無菌粉末或濃溶液【中國藥典（2000年版一部）】。中藥注射劑的定義3第三頁，共36頁。概述中藥注射劑的特點(diǎn)積極作用：作用迅速，用于急、危重癥、不宜口服的藥物和病人。安全性擔(dān)憂：易發(fā)生不良反應(yīng)，主要是過敏反應(yīng)等。4第四頁，共36頁。概述中藥成分復(fù)雜，制成的注射劑中成分不甚清楚，從原料和工藝過程等均會(huì)帶入不安全的因素。其質(zhì)量控制要求不同于其他劑型，其質(zhì)量控制應(yīng)更加嚴(yán)格。強(qiáng)調(diào)從原藥材、輔料、附加劑及工藝過程的全程質(zhì)量控制，且注射劑必須進(jìn)行特殊的質(zhì)量檢查。質(zhì)量控制的特殊性及必要性5第五頁，共36頁。概述20世紀(jì)30年代就有中藥注射劑應(yīng)用于臨床,但品種很少。70年代中草藥群眾運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過臨床試用有資料報(bào)道的就有700多種。其中77年版藥典收載23種。新藥管理辦法實(shí)施以來，中藥注射劑的質(zhì)量控制研究水平有較大提高。中藥注射劑的研究歷史和現(xiàn)狀

6第六頁，共36頁。概述近年來，注射劑的申報(bào)數(shù)量明顯增多，質(zhì)量也在逐步提高。以藥材制成的單方、復(fù)方注射劑占多數(shù)。以有效成分、有效部位制成的注射劑較少。主要問題：立題依據(jù)不足、工藝中使用有毒溶劑、附加劑依據(jù)不足、安全性檢查項(xiàng)目缺乏、指紋圖譜達(dá)不到控制質(zhì)量的目的等等。中藥注射劑的研究歷史和現(xiàn)狀

7第七頁，共36頁。二、質(zhì)量控制研究與評(píng)價(jià)要點(diǎn)及案例分析8第八頁，共36頁。立題研究原料輔料半成品的質(zhì)量控制與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制定性、定量控制含蛋白質(zhì)、多糖注射劑的質(zhì)量控制指紋圖譜9第九頁，共36頁。以臨床急、重癥為適應(yīng)癥應(yīng)比其他給藥途徑有明顯的療效優(yōu)勢(shì)處方成分應(yīng)基本清楚綜合考慮其安全性、有效性及質(zhì)量可控性，慎重選擇注射劑。立題研究10第十頁，共36頁。注射劑的原料主要包括藥材（包括凈藥材和飲片）、有效成分和有效部位。以凈藥材投料的注射劑應(yīng)關(guān)注原藥材的質(zhì)量穩(wěn)定。一般注射劑用藥材要固定產(chǎn)地、固定品種，制定中藥材的指紋圖譜，建立藥材的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。以有效部位、有效成分投料的注射劑，也要關(guān)注其質(zhì)量的穩(wěn)定性，有效成分、有效部位的含量和組成應(yīng)基本穩(wěn)定。原料11第十一頁，共36頁。注射劑的附加劑的選擇應(yīng)審慎，如確需加入附加劑的，應(yīng)有充分的試驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)結(jié)合制劑穩(wěn)定性安全性等綜合考慮，通過試驗(yàn)研究確定。注射劑使用的輔料、附加劑質(zhì)量要求與其它劑型不同，必須符合藥用標(biāo)準(zhǔn)。輔料和附加劑12第十二頁，共36頁。輔料：氯化鈉、葡萄糖、甘露醇等。附加劑：滲透壓調(diào)節(jié)劑、增溶劑（如吐溫－80、PVP、聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯－35等）、抗氧劑（亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、半光胺酸等）、金屬螯合劑（依地酸二鈉、依地酸鈉鈣）等。靜脈注射用注射劑不得添加抑菌劑。輔料和附加劑13第十三頁，共36頁。常見問題：附加劑的使用依據(jù)不足，未提供附加劑選擇的試驗(yàn)研究資料。如：依地酸二鈉的使用、聚氧乙烯蓖麻油的使用、PVP的使用等。由于依地酸二鈉可與鈣離子結(jié)合成可溶的絡(luò)合物引起鈣的減少，靜脈制劑中使用依地酸二鈉會(huì)導(dǎo)致血鈣下降，因此，需密切關(guān)注和嚴(yán)格控制靜脈給藥制劑中依地酸二鈉的用量。輔料和附加劑14第十四頁，共36頁。根據(jù)不同的處方組成、工藝路線，建立多個(gè)關(guān)鍵工序的工藝參數(shù)及相關(guān)的檢測(cè)數(shù)據(jù)，注意建立中間體的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括定性和定量指標(biāo)，注意轉(zhuǎn)移率，確保最終產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。常見問題：申報(bào)資料中往往忽視建立中間體質(zhì)量控制方法，導(dǎo)致終產(chǎn)品的質(zhì)量不穩(wěn)定。

半成品的質(zhì)量控制

15第十五頁，共36頁。注射劑的常規(guī)檢查特殊檢查：色澤、pH值、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、熾灼殘?jiān)?、重金屬、砷鹽、草酸鹽、樹脂、鉀離子、澄明度、熱原、不溶性微粒、溶血與凝聚、刺激性、異常毒性、過敏反應(yīng)、有機(jī)溶劑殘留量等檢查。與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制16第十六頁，共36頁。鞣質(zhì)的檢查：產(chǎn)生沉淀和疼痛，必須除盡鞣質(zhì)。檢查方法：一般采用1%雞蛋清法或明膠氯化鈉溶液法，不得出現(xiàn)渾濁或沉淀。注意：含有聚山梨脂、聚乙二醇及含聚氧乙烯基物質(zhì)的注射液，雖有鞣質(zhì)也不產(chǎn)生沉淀，對(duì)這類注射液應(yīng)取未加輔料前的半成品進(jìn)行檢查。如含有吐溫－80的鞣質(zhì)檢查會(huì)出現(xiàn)假陰性。含丹酚酸鞣質(zhì)的檢查會(huì)出現(xiàn)假陽性。與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制17第十七頁，共36頁。重金屬、砷鹽檢查：注射劑中規(guī)定“配制注射劑前的半成品，應(yīng)檢查重金屬、砷鹽，除另有規(guī)定外，含重金屬不得過百萬分之十（附錄ⅨE第二法）；含砷鹽不得過百萬分之二（附錄ⅨF第一法）。本檢查項(xiàng)須進(jìn)行有機(jī)破壞”。常見的問題：砷鹽檢查時(shí)未進(jìn)行有機(jī)破壞或未加固化劑，不能真實(shí)反映砷鹽含量。建議大容量輸液劑應(yīng)進(jìn)行研究，降低含量限度。與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制18第十八頁，共36頁。草酸鹽檢查：要求中藥注射劑中不得檢出。鉀離子：含量一般應(yīng)控制在20-40mg/100ml。樹脂：規(guī)定不得檢出。熾灼殘?jiān)簯?yīng)不得過1.5%（g/ml）?？偣腆w量測(cè)定：注射劑的總固體量是反映所含有效成分、雜質(zhì)和輔料含量的指標(biāo)。建議研究制定其含量幅度范圍，以保證產(chǎn)品所含物質(zhì)的相對(duì)穩(wěn)定。

與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制19第十九頁，共36頁。溶血試驗(yàn)、刺激性試驗(yàn)、過敏試驗(yàn)考察：通過動(dòng)物試驗(yàn)，考察注射劑可能產(chǎn)生的溶血、可能產(chǎn)生的肌肉或血管刺激性或可能產(chǎn)生的過敏反應(yīng)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否將刺激性試驗(yàn)、過敏試驗(yàn)列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。溶血試驗(yàn)列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。異常毒性：注射液一般需要進(jìn)行異常毒性試驗(yàn)，視結(jié)果決定是否列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制20第二十頁，共36頁。熱原和無菌的檢查：目前較常用的方法家兔發(fā)熱試驗(yàn)法（藥典方法）和鱟試驗(yàn)法。注射劑不得含有熱原，也絕對(duì)不允許含任何活細(xì)菌，必須達(dá)到無菌要求。澄明度和不溶性微粒檢查：應(yīng)符合規(guī)定。

與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制21第二十一頁，共36頁。有機(jī)溶劑殘留量的檢測(cè)：注射劑的制備工藝過程中使用的有機(jī)溶劑，如：醋酸乙酯、正丁醇、氯仿等應(yīng)除盡，并要對(duì)有機(jī)溶劑殘留量進(jìn)行研究，建立檢測(cè)方法，列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，規(guī)定不得檢出。

與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制22第二十二頁，共36頁。鑒別研究：原則上應(yīng)對(duì)處方中各藥味進(jìn)行鑒別研究，選定專屬、靈敏、快速、簡便、重現(xiàn)性好的方法作為鑒別項(xiàng)目，列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

定性、定量控制23第二十三頁，共36頁?；疽螅簯?yīng)建立方中藥材、半成品和成品的含測(cè)方法和含量幅度。以有效部位為組份的注射劑，所測(cè)定有效部位的含量應(yīng)不少于總固體量的70%（靜脈用不少于80%）。調(diào)節(jié)滲透壓等的附加劑應(yīng)按實(shí)際加入量扣除。以凈藥材為組份配制的注射劑，所測(cè)定成分的總含量應(yīng)不低于總固體量的20%（靜脈用不少于25%）。定性、定量控制24第二十四頁，共36頁。以有效成分或有效部位為組份的注射劑含量均以標(biāo)示量的上下限范圍表示；以藥材為組份的注射劑含量建議以含量幅度表示。含有毒性藥味時(shí)，必須制定有毒成分的限量范圍。對(duì)含量測(cè)定方法的研究除理化方法外，也可采用生物測(cè)定法或其它方法。組份中含有化學(xué)藥品的，應(yīng)單獨(dú)測(cè)定該化學(xué)藥品的含量，由總固體內(nèi)扣除，不計(jì)算在含量測(cè)定的比例數(shù)內(nèi)。

定性、定量控制25第二十五頁，共36頁。注射劑中的輔料，如：葡萄糖，氯化鈉、甘露醇等應(yīng)建立輔料的含量測(cè)定方法，列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。以葡萄糖為輔料的，同時(shí)要控制藥品中5-羥甲基糠醛的含量，列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)?-HMF是葡萄糖等單糖化合物在高溫或弱酸等條件下脫水產(chǎn)生的一個(gè)醛類化合物，對(duì)人體橫紋肌和內(nèi)臟有損害。同時(shí)，它也代表葡萄糖的分解程度。

定性、定量控制26第二十六頁，共36頁。大分子動(dòng)物蛋白注射劑臨床不良反應(yīng)是常見的，只是發(fā)生時(shí)間、程度不一。中藥中含動(dòng)物蛋白的注射劑，要考慮工藝中必須嚴(yán)格去除雜質(zhì)蛋白，并在質(zhì)控項(xiàng)目中加以檢測(cè)和控制。應(yīng)從所用動(dòng)物原料開始控制，動(dòng)物腐敗會(huì)產(chǎn)生致敏物質(zhì)。建議建立所用動(dòng)物原料（如活性單位、貯存條件等）、中間體質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（如比活及雜質(zhì)控制）。對(duì)其提取工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與穩(wěn)定性試驗(yàn)均應(yīng)采用適宜生物活性控制，不能僅以蛋白質(zhì)含量高低作指標(biāo)。

含動(dòng)物類蛋白注射劑質(zhì)量控制要點(diǎn)

27第二十七頁，共36頁。對(duì)分離所得蛋白（包括主成分及其他活性成分）的組成、結(jié)構(gòu)如氨基酸組成、分子量（至少二個(gè)以上方法）、等電點(diǎn)都應(yīng)有相應(yīng)的資料確證和闡明；并使各組分在批與批間具有一致性。根據(jù)各品種主成分的結(jié)構(gòu)及自身分子量，以確定分子量范圍及大分子限度.必要時(shí)將動(dòng)物致敏試驗(yàn)列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

含動(dòng)物類蛋白注射劑質(zhì)量控制要點(diǎn)28第二十八頁，共36頁。含有多糖的中藥注射劑，要研究明確多大分子量范圍的是有效的多糖，并盡可能地進(jìn)行分離純化，建立定性、定量的質(zhì)量控制方法，如分子量分布，指紋圖譜、含量測(cè)定等，制定專屬性質(zhì)控方法。常見的問題是未明確有效多糖組分的分子量，或未進(jìn)行分子量的分布研究，分離純化不夠，分子量分布過于寬泛，從十幾萬到幾十萬，建立的定性、定量方法專屬性差等。

含多糖的注射劑質(zhì)量控制要點(diǎn)29第二十九頁，共36頁。建立指紋圖譜的意義：中藥發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)是其化學(xué)成分。由于中藥的復(fù)雜性，對(duì)所含的大多數(shù)成分進(jìn)行定量控制幾乎是不可能，通過指紋圖譜研究，希望能對(duì)全成分進(jìn)行定性控制，表達(dá)所含物質(zhì)的穩(wěn)定，達(dá)到批間質(zhì)量的穩(wěn)定。為加強(qiáng)中藥注射劑的質(zhì)量，以保證中藥注射劑批間質(zhì)量的一致性。國家藥品監(jiān)督管理局在2001年初頒發(fā)了《關(guān)于加強(qiáng)中藥注射劑管理有關(guān)事宜的通知》，要求中藥注射劑所用的中藥材，在固定產(chǎn)地的前提下，制定指紋圖譜。并于2001年8月份頒發(fā)了《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求（暫行）》。中藥注射劑的指紋圖譜30第三十頁，共36頁。指紋圖譜的基本要求指紋圖譜是對(duì)中藥注射劑進(jìn)行定性質(zhì)量控制的方法之一。要求所用藥材在固定中藥材品種、產(chǎn)地的前提下，制定中藥材、有效部位或中間體、成品的指紋圖譜。指紋圖譜供試品的制備應(yīng)根據(jù)注射劑、有效部位或中間體中所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)和檢測(cè)方法的需要，選擇適宜的方法進(jìn)行制備。必須確保該注射劑、有效部位或中間體主要化學(xué)成分在指紋圖譜中的再現(xiàn)”。需要根據(jù)具體情況，在深入研究的基礎(chǔ)上，對(duì)所含的各類成分進(jìn)行控制，建立多張指紋圖譜。

中藥注射劑的指紋圖譜31第三十一頁，共36頁。常見問題：未針對(duì)各類成分建立多張指紋圖譜，大多數(shù)只一張指紋圖譜，不能反映產(chǎn)品所含成分的全貌。未分析藥材、中間體和成品的相關(guān)性成品中的色譜峰較少，不能客觀地控制所含成分。未進(jìn)行充分的方法學(xué)研究。案例：

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