血栓與止血的學(xué)習(xí)課件

血栓與止血的學(xué)習(xí)課件第1頁/共83頁血栓與止血檢測(cè)第2頁/共83頁生理性止血機(jī)制

血管壁止血機(jī)制

血小板止血機(jī)制

凝血機(jī)制

抗凝機(jī)制

纖溶機(jī)制

福建省臨床檢驗(yàn)中心第3頁/共83頁血管壁的止血機(jī)制

正常血管壁的結(jié)構(gòu)：內(nèi)膜層：內(nèi)皮細(xì)胞、基底膜中膜層：彈力纖維、平滑肌、膠原外膜層：結(jié)締組織

福建省臨床檢驗(yàn)中心第4頁/共83頁血管壁的止血機(jī)制

血管受損時(shí)：血管平滑肌收縮，血流減慢，血小板易粘附、聚集。內(nèi)皮細(xì)胞→vWF，使血小板粘附于內(nèi)皮細(xì)胞下膠原。血小板→TXA2、5-HT→血管收縮內(nèi)皮細(xì)胞→內(nèi)皮素ET1、血管緊張素→血管收縮膠原激活Ⅻ，啟動(dòng)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)→纖維蛋白釋放TF，啟動(dòng)外源性凝血系統(tǒng)→纖維蛋白局部血粘度增高。福建省臨床檢驗(yàn)中心第5頁/共83頁血小板的止血機(jī)制

血小板的結(jié)構(gòu)：血小板：糖蛋白、磷脂血小板顆粒：致密顆粒、α顆粒、溶酶體血小板管道系統(tǒng)：開放管道、致密管道血小板骨架蛋白：肌動(dòng)蛋白、微管蛋白

福建省臨床檢驗(yàn)中心第6頁/共83頁血小板的止血機(jī)制

血管受損或受刺激時(shí)：血小板活性反應(yīng)：粘附變形釋放反應(yīng)聚集反應(yīng)

福建省臨床檢驗(yàn)中心第7頁/共83頁血小板的止血機(jī)制

第一相聚集:可逆的vWF介導(dǎo)，GPⅠb-Ⅸ粘附于膠原組織（粘附反應(yīng)）血小板粘附:血小板粘附在血管破損處Fg介導(dǎo)，GPⅡb/Ⅲa相互粘附/聚集（聚集反應(yīng)）血小板聚集:血小板與血小板之間發(fā)生粘附

福建省臨床檢驗(yàn)中心第8頁/共83頁血小板的止血機(jī)制第二相聚集:不可逆的，白色血栓，初期止血屏障血小板釋放反應(yīng)：（起動(dòng)）紅細(xì)胞的ADP、形成的凝血酶δ顆粒：ADP、ATP、5-HT、抗纖溶酶α顆粒：PF4、β-TG、P-選擇素、PDGF、TSP、Fg、vWF

以上物質(zhì)，加速血小板的聚集、變性。

福建省臨床檢驗(yàn)中心第9頁/共83頁血小板的止血機(jī)制血小板促凝活性（PPA）功能：磷脂酰絲氨酸（PS），

PF3→+凝血酶原酶、凝血酶形成血小板血塊收縮功能：

TXA2、5-HT→血管收縮血小板收縮蛋白(肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白)→纖維蛋白網(wǎng)收縮

福建省臨床檢驗(yàn)中心第10頁/共83頁血液凝固機(jī)制凝血因子:12個(gè),Ⅰ～ⅩⅢ表示(缺Ⅵ)

除FⅣ外，余均為蛋白質(zhì)；除TF外，余均存在于血漿。福建省臨床檢驗(yàn)中心第11頁/共83頁血液凝固機(jī)制國(guó)際名稱常用名稱半衰期活性型血漿濃度維持濃度（小時(shí)）(mg/L)(%)Ⅰ纖維蛋白原90纖維蛋白2000～400050-60Ⅱ凝血酶原48～96凝血酶100～20040Ⅲ組織因子0Ⅳ鈣離子(mEq/L)90～100Ⅴ易變因子12～15Ⅴa5～105-10Ⅶ穩(wěn)定因子6～8Ⅶa0.5～25-10Ⅷ抗血友病球蛋白8～12Ⅷa0.130Ⅸ血漿凝血活酶成分12～24Ⅸa530ⅩStuart因子48～72Ⅹa6～86-10Ⅺ血漿凝血激酶先質(zhì)48～84Ⅺa4～620-30Ⅻ接觸因子48～52Ⅻa300ⅩⅢ纖維蛋白穩(wěn)定因子72～120ⅩⅢa291

激肽釋放酶原(PK)35激肽釋放酶1.5～5

高分子激肽原(HMWKg)144緩激肽7福建省臨床檢驗(yàn)中心第12頁/共83頁血液凝固機(jī)制凝血過程：第一期:凝血活酶/凝血酶原酶形成期第二期:凝血酶形成期第三期:纖維蛋白形成期福建省臨床檢驗(yàn)中心第13頁/共83頁血液凝固機(jī)制凝血途徑：內(nèi)源性凝血途徑(ICP):因子Ⅻ開始,反應(yīng)緩慢(5～10min)外源性凝血途徑(ECP):組織因子開始,反應(yīng)快(<15s)凝血共同途徑(CCP):凝血酶原酶形成后

福建省臨床檢驗(yàn)中心第14頁/共83頁凝血過程第15頁/共83頁血液凝固機(jī)制內(nèi)外兩種凝血途徑不能截然分開：①Ⅶa能激活Ⅹ﹑Ⅸ②Ⅻa﹑Ⅸa﹑激肽酶參與了Ⅶ的激活③組織因子存在于血管內(nèi)外

福建省臨床檢驗(yàn)中心第16頁/共83頁血液凝固機(jī)制FⅡa的功能：①使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白單體②激活FⅩⅢ，F(xiàn)ⅩⅢa使可溶性纖維蛋白單體(sFM)發(fā)生交聯(lián)，形成不溶性的穩(wěn)定的纖維蛋白。③激活血小板④激活FⅪ、FⅦ、FⅧ、FⅤ和纖溶酶原

福建省臨床檢驗(yàn)中心第17頁/共83頁血液凝固機(jī)制凝血和血塊退縮白色血栓:血小板血栓紅色血栓:激活凝血系統(tǒng)(Fg,RBC,WBC)血塊退縮:血塊收縮蛋白(血小板釋放,加強(qiáng)止血)/（血小板收縮蛋白）福建省臨床檢驗(yàn)中心第18頁/共83頁抗凝血機(jī)制

細(xì)胞抗凝系統(tǒng):

單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)和肝細(xì)胞的吞噬作用對(duì)促凝物質(zhì)、被激活的凝血蛋白進(jìn)行攝取、吞噬、滅活、清除體液抗凝系統(tǒng):

內(nèi)源性凝血的抗凝體系

外源性凝血的抑制因子

福建省臨床檢驗(yàn)中心第19頁/共83頁抗凝血機(jī)制內(nèi)源性凝血的抗凝體系：絲氨酸蛋白酶抑制因子：因子抑制對(duì)象

AT-Ⅲ：Ⅱa,Ⅸa,Ⅹa,Ⅺa,Ⅻa50-67%HCⅡ：Ⅱa,Ⅹaα2-M：Ⅱa,激肽酶,纖溶酶,Ⅻa,Ⅺaα1-AT：Ⅱa,Ⅺa,Ⅻa,激肽酶

α2-PI：纖溶酶,激肽酶,Ⅱa,Ⅹa,Ⅺa,ⅫaC1INH：C1,激肽酶,Ⅻa,Ⅺa福建省臨床檢驗(yàn)中心第20頁/共83頁抗凝血機(jī)制

蛋白C(PC)抗凝系統(tǒng):PC、PS、TM、APCI、PZ，依賴VitKⅡaPS→滅活Ⅴa,ⅧaPC─→APC───Ⅱa+TM㈠→激活纖溶系統(tǒng)

APCI

PZ+ZPI+FⅩa→FⅩa-ZPI-PZ復(fù)合物→滅活FⅩa

福建省臨床檢驗(yàn)中心第21頁/共83頁抗凝血機(jī)制外源性凝血的抑制因子：組織因子途徑抑制物（TFPI）

TFPI-1：抑制FⅦa、FⅩa的作用

TFPI-2：抑制其他絲氨酸蛋白酶和胰蛋白酶的作用

福建省臨床檢驗(yàn)中心第22頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用

凝血生成的纖維蛋白被溶解稱為纖維蛋白溶解（纖溶），纖維蛋白溶解酶（纖溶酶）為一種肽鏈內(nèi)斷酶，是具有絲氨酸殘基的絲氨酸蛋白酶，以纖溶酶原的形式存在于血液中，無纖溶活性。福建省臨床檢驗(yàn)中心第23頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用

PA→溶解Fg,Fb纖溶酶原─→纖溶酶─→→分解Ⅷ,Ⅸ,Ⅹ,Ⅺ,Ⅻ,ⅩⅢ㈠㈠→激活激肽系統(tǒng),補(bǔ)體系統(tǒng)

PAI→抑制血小板粘附,聚集

PI

福建省臨床檢驗(yàn)中心第24頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用液相纖溶:

在血液循環(huán)中發(fā)生的纖溶,可因抗纖溶酶與纖溶酶結(jié)合失去纖溶活性。固相纖溶:

在纖維蛋白中發(fā)生的纖溶,不易受抗纖溶酶的影響。

福建省臨床檢驗(yàn)中心第25頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用纖溶因子的溶血栓作用：內(nèi)激活途徑外激活途徑：t-PA、u-PA外源性激活途徑福建省臨床檢驗(yàn)中心第26頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用

內(nèi)激活途徑:

膠原組織激肽酶原

Ⅻ────→Ⅻa─→Ⅶ

凝血酶激肽酶───→

Ⅶa

纖溶酶原(PLG)─────→纖溶酶(PL)

福建省臨床檢驗(yàn)中心第27頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用外激活途徑:組織型纖溶酶原激活物(t-PA):

血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放尿激酶型纖溶酶原激活物(u-PA):

腎小球和內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放

福建省臨床檢驗(yàn)中心第28頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用外源性激活途徑外源性藥物：鏈激酶(SK)

尿激酶(UK)

葡萄球菌激酶(SaK)

重組t-PA福建省臨床檢驗(yàn)中心第29頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用纖溶系統(tǒng)的抑制因子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI):PAI-1：滅活t-PA、u-PAα2-AP：與PL形成復(fù)合物(PAP)

其他：PAI-2、C1INA、α2-M

纖溶酶抑制因子:α1-PI、α2-M

福建省臨床檢驗(yàn)中心第30頁/共83頁纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP):FgPLX+A+B+C+HPLY+DPLE

sFMC:X’,Y’,E’,D,A,B,C,H

福建省臨床檢驗(yàn)中心第31頁/共83頁血管壁檢測(cè)---出血時(shí)間*原理：在一定條件下，皮膚毛細(xì)血管刺破后血液自然流出到自然停止所需時(shí)間。受PLT數(shù)量和功能及毛細(xì)血管通透性和脆性影響，凝血因子影響較小。參考值：TBT：6.9±2.1min，超9min異常。臨床意義：延長(zhǎng)：①PLT明顯減少，原、繼紫；②PLT功能異常，無力癥、巨大癥；③因子嚴(yán)重缺乏，vWD、DIC；④血管異常，遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥；⑤藥物干擾，乙酰水楊酸。縮短：血栓前狀態(tài)或血栓性疾病，心腦血管病、DIC、妊高癥。備注：敏感性、特異性差，臨床價(jià)值有限。福建省臨床檢驗(yàn)中心第32頁/共83頁血管壁檢測(cè)---束臂試驗(yàn)*原理：手臂加壓，血流受阻，毛細(xì)血管負(fù)荷↑，觀察出血點(diǎn)數(shù)。與其結(jié)構(gòu)和功能、PLT數(shù)量和質(zhì)量及vWF等有關(guān)。參考值：5cm圈出血點(diǎn)數(shù)：男<5，女、兒童<10臨床意義：增加：①血管壁結(jié)構(gòu)和功能缺陷：遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥，過敏性紫癜；②血小板數(shù)量和功能異常：原發(fā)性/繼發(fā)性PLT減少癥、PLT增多癥、先天性/獲得性其PLT功能缺陷癥；③vWD；④其他：高血壓、糖尿病、VitC缺乏、肝硬化、某些藥物。福建省臨床檢驗(yàn)中心第33頁/共83頁血管壁檢測(cè)---vWF:Ag

原理：①免疫火箭電泳法，在瓊脂糖凝膠板上形成抗原-抗體火箭樣沉淀峰。②ELISA。參考值：免疫火箭電泳法：94.1%±32.5%ELISA：70%-150%臨床意義：減低：vWD，診斷vWD及其分型的指標(biāo)之一。增高：①血栓性疾病，心梗、心絞痛、腦血管??；②腎臟疾病，急、慢性腎炎；③其他，妊高癥、糖尿病。福建省臨床檢驗(yàn)中心第34頁/共83頁血管壁檢測(cè)---vWF:A原理：血管性血友病因子活性，待檢血漿加入針對(duì)vWF的血小板結(jié)合位點(diǎn)(GPIb受體)的膠乳單抗，膠乳顆粒與vWF聚集。參考值：O型血人：38%～125.2%

其他血型人：49.2%-～169.7%臨床意義：結(jié)合vWF:Ag、FⅧ:C檢測(cè)，用于vWD分型診斷。福建省臨床檢驗(yàn)中心第35頁/共83頁血管壁檢測(cè)---6-keto-PGF1a

原理：血漿6-酮-前列腺素F1a測(cè)定，ELISA法參考值：22.9±6.3mg/L臨床意義：是血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗凝指標(biāo)之一，并由其合成和分泌，有抗血小板聚集和擴(kuò)張血管的作用，起抗凝作用。減少：血栓性疾?。禾悄虿　⑿墓?、心絞痛、腦血管病、腫瘤轉(zhuǎn)移、腎小球病變、周圍血管血栓形成。福建省臨床檢驗(yàn)中心第36頁/共83頁血管壁檢測(cè)---TM:Ag

原理：血漿凝血酶調(diào)節(jié)蛋白抗原測(cè)定采用放射免疫法參考值：20-35μg/L臨床意義：是血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗凝指標(biāo)之一，并表達(dá)其表面，與循環(huán)血液中的凝血酶形成1:1復(fù)合物。增高：見于血栓性疾病：糖尿病、心梗、腦血栓、深靜脈血栓、SLE、DIC、血栓性血小板減少性紫癜。福建省臨床檢驗(yàn)中心第37頁/共83頁血小板檢測(cè)---PLT計(jì)數(shù)*原理：利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，計(jì)算后得出。壽命7-10天，70%置血流，30%置脾。參考值：100-300*109/L臨床意義：減少：①生成障礙，再障、白血病、巨幼貧、骨纖；②破壞或消耗亢進(jìn)，原紫、DIC、SLE；③分布異常，脾腫大。增多：①原發(fā)性：骨髓增生性疾病，慢粒、真紅，②反應(yīng)性：急、慢性炎癥、缺鐵貧福建省臨床檢驗(yàn)中心第38頁/共83頁血小板檢測(cè)---CRT*原理：血塊收縮試驗(yàn)是在PRP中加鈣或凝血酶，PLT被活化，聚集，釋放血小板收縮蛋白，血漿凝固，纖維蛋白網(wǎng)收縮，血清析出，測(cè)血清體積或凝塊重量。參考值：⑴凝塊法：65.8%±11%

收縮率(%)=<血清/全血*(100%-Hct%)>*100%，⑵血塊收縮時(shí)間：2h開始收縮，18-24h完全收縮臨床意義：收縮不良/不收縮：PLT無力癥、減少癥，嚴(yán)重凝血因子缺乏、凝血障礙，纖維蛋白或凝血酶嚴(yán)重減少，紅細(xì)胞增多癥。收縮過度：ⅩⅢ乏癥、嚴(yán)重貧血。

福建省臨床檢驗(yàn)中心第39頁/共83頁血小板檢測(cè)---PAIg

原理：血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)測(cè)定；ELISA法，F(xiàn)CM，免疫熒光顯微術(shù)；

PAIg包括PAIgG、PAIgA、PAIgM；ITP、SLE有自身抗PLT抗體。參考值：PAIgG：0-78.8，PAIgA：0-2.0，

PAIgM：0-7.0，（ng/107PLT）臨床意義：增高：①ITP；②同種免疫性、藥物免疫性血小板減少性紫癜，惡性淋巴瘤，慢活肝炎，慢淋，多發(fā)性骨髓瘤；③90%ITP患者的PAIgG增高，同時(shí)測(cè)定PAIgA、PAIgM，陽性率達(dá)100%，靈敏度較高，但特異性不強(qiáng)。福建省臨床檢驗(yàn)中心第40頁/共83頁血小板檢測(cè)---PAdT原理：血小板粘附試驗(yàn)(PAdT)

有玻珠柱法、玻璃球法、玻璃濾器法;PLT具粘附于損傷的血管表面或異物表面的特性;測(cè)定粘附前后PLT差數(shù)占總數(shù)百分率。參考值：(粘附率)玻珠柱法:62.5±8.61%，玻璃球法:34.9±5.95%，玻璃濾器法:31.9±10.9%臨床意義：增高：血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，心梗、心絞痛、糖尿病、深靜脈血栓形成、妊高癥、口服避孕藥；減低：無力癥、巨大癥、vWD、MDS、尿毒癥、肝硬化。備注：PAdT是檢測(cè)體外粘附功能，不能反映體內(nèi)粘附功能，臨床應(yīng)用價(jià)值有限。福建省臨床檢驗(yàn)中心第41頁/共83頁血小板檢測(cè)---PAgT

原理：血小板聚集試驗(yàn)(PAgT)是在富含PLT血漿(PRP)中加誘導(dǎo)劑，發(fā)生聚集，濁度變化，透光度增加，光濁度匯成曲線。參考值：參考值與誘導(dǎo)劑的種類、濃度、作用時(shí)間有關(guān)，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義：增高：血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，心梗、心絞痛、糖尿病、腦血管病、DVT、妊高癥、口服避孕藥；減低：無力癥、巨大癥、vWD、MDS、尿毒癥、肝硬化、急白。福建省臨床檢驗(yàn)中心第42頁/共83頁血小板檢測(cè)---P選擇素原理：P選擇素又稱血小板α顆粒膜蛋白-140(GMP-140)，是血小板被激活和破壞后入漿，用抗GMP-140單克隆抗體測(cè)定。參考值：(1.61±0.72)*1010分子數(shù)/ml臨床意義：增高：血栓性疾病:心梗、腦血管??；自身免疫性疾?。篠LE、ITP；代謝性疾病：糖尿病伴發(fā)周圍血管病變。福建省臨床檢驗(yàn)中心第43頁/共83頁血小板檢測(cè)---PPA

原理：血小板促凝活性(PPA)指血小板膜上的磷脂酰絲氨酸與FⅩa、FⅤa、Ca2+結(jié)合，形成凝血酶原酶，后者使凝血酶原→凝血酶，使血漿凝固。參考值：流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測(cè)磷脂酰絲氨酸，正常人陽性率為30%。臨床意義：減低見于血小板第三因子缺陷、PLT無力癥、巨PLT綜合癥、肝硬化、尿毒癥、MDS、異常蛋白血癥、DIC、SLE、急性白血病。增高見于血栓病和血栓前狀態(tài)。福建省臨床檢驗(yàn)中心第44頁/共83頁血小板檢測(cè)---TXB2

原理：血漿血栓烷B2(TXB2)

采用ELISA法測(cè)定參考值：76.3±48.1ng/L臨床意義：增高：見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，心梗、心絞痛、動(dòng)脈粥樣硬化、肺梗死、腎小球疾病、高脂血癥、糖尿病、腫瘤、妊高癥、大手術(shù)后。減低：見于環(huán)氧酶或TXA2合成酶缺乏癥，服用抑制環(huán)氧酶或TXA2合成酶的藥物，如阿司匹林等。福建省臨床檢驗(yàn)中心第45頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---APTT*原理：活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(APTT)血漿中加部分凝血活酶磷脂和鈣，測(cè)定血漿凝固時(shí)間，反映內(nèi)源凝血系統(tǒng)。參考值：正常:31-43s，異常:延長(zhǎng)>10s臨床意義：延長(zhǎng)：Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ明顯減少，Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ、PK、HMPK嚴(yán)重缺乏，重癥肝病，新生兒出血，口服抗凝劑，應(yīng)用肝素，纖維亢進(jìn)?？s短：高凝狀態(tài)和血栓性疾病，靈敏度、特異性差。備注：APTT較CT敏感，為監(jiān)測(cè)肝素治療和診斷狼瘡抗凝物質(zhì)的常用試驗(yàn)。福建省臨床檢驗(yàn)中心第46頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---CT*原理：凝血時(shí)間(CT)是靜脈血離體后發(fā)生凝固所需時(shí)間，反映因子Ⅻ被負(fù)電荷表面激活到纖維蛋白形成（內(nèi)源凝血系統(tǒng)）。參考值：試管法：6-12分，硅管法：15-32分，塑料管法：10-19分臨床意義：同APTT福建省臨床檢驗(yàn)中心第47頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---PT*原理：血漿凝血酶原時(shí)間是指血漿中加組織凝血活酶和鈣，測(cè)定血漿凝固時(shí)間，反映外源凝血系統(tǒng)。參考值：正常:11-13s，異常:延長(zhǎng)>3sPTR:1.0±0.05,INR:1.0±0.1,INR=PTRISI臨床意義：延長(zhǎng)：①Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ先天缺乏，②VitK缺乏、重癥肝病、纖維亢進(jìn)、DIC、口服抗凝劑、含肝素和FDP等抗凝物?？s短：高凝狀態(tài)和血栓性疾病，DIC早期、心梗、腦血栓、DVT、多發(fā)性骨髓瘤、口服避孕藥。但靈敏度、特異性差。其他：為監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的首選指標(biāo)(INR2.0-2.5)。福建省臨床檢驗(yàn)中心第48頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ原理：血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測(cè)定，一期法，受檢血漿中分別加乏因子基質(zhì)血漿、白陶土磷脂、鈣，計(jì)錄出現(xiàn)纖維絲時(shí)間，據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算百分率。參考值：Ⅷ:103±25.7%，Ⅸ:98.1±30.4%Ⅺ:100±18.4%，Ⅻ:92.4±20.7%臨床意義：增高：血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，DVT、肺栓塞、妊高癥、晚期妊娠、口服避孕藥、腎病綜合征、惡性腫瘤。減低：①Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺乏(血友病)，②肝病、VitK缺乏、DIC、口服抗凝劑。福建省臨床檢驗(yàn)中心第49頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ原理：血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測(cè)定，一期法，受檢血漿中分別加乏因子基質(zhì)血漿、兔腦粉浸出液、鈣，計(jì)錄出現(xiàn)纖維絲時(shí)間，據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算百分率。參考值:Ⅱ:97.7±16.7%,Ⅴ:102.4±30.9%Ⅶ:103±17.3%,Ⅹ:103±19.0%臨床意義：增高：血栓前狀態(tài)和血栓性疾病減低：①Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏，②肝病、VitK缺乏、DIC、口服抗凝劑。福建省臨床檢驗(yàn)中心第50頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---Fg原理：血漿纖維蛋白原(Fg)測(cè)定采用凝血酶比濁法（WHO推薦的Clauss法），血漿中加凝血酶，使產(chǎn)生纖維蛋白，通過比濁計(jì)算。其他：快速測(cè)定法、半定量法、雙縮脲法、免疫擴(kuò)散法。參考值：2-4g/L臨床意義：增高：心梗、糖尿病、妊高癥、急性腎炎、多發(fā)性骨髓瘤、風(fēng)濕病、急性腎小球腎炎、腎病綜合綜、休克、急性感染、大手術(shù)后、惡性腫瘤等。減低：DIC消耗性低凝期及纖溶期、原纖、嚴(yán)重肝病、肝硬化。福建省臨床檢驗(yàn)中心第51頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---ⅩⅢ

原理：血漿因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)，F(xiàn)ⅩⅢ在鈣的作用下，能使溶于尿素的纖維蛋白聚合物變?yōu)槔w維蛋白凝塊，即缺乏FⅩⅢ的聚合物可溶于尿素。參考值：24h內(nèi)凝塊不溶解臨床意義：異常：①FⅩⅢ缺乏，②肝病、SLE、原纖、惡性貧血、膠原病、淋巴瘤、轉(zhuǎn)移性肝癌、惡性貧血、DIC等。福建省臨床檢驗(yàn)中心第52頁/共83頁凝血因子檢測(cè)---sFMC原理：可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(sFMC)測(cè)定，在凝血酶作用下，纖維蛋白原先后丟失纖維蛋白肽A(FPA)和肽B(FPB)，剩余的纖維蛋白單體(FM)可自行聚合成復(fù)合物，可溶解于尿素溶液。參考值：ELISA:(48.5±15.6)mg/L，放免法:(50.5±26.1)mg/L臨床意義：增高：DIC、急性白血病、肝硬化失代償期、惡性腫瘤、嚴(yán)重感染、嚴(yán)重創(chuàng)傷、外科大手術(shù)、產(chǎn)科意外等。減低無臨床意義。備注：sFMC是凝血酶生成的敏感和特異的分子標(biāo)志物、反映其活性。福建省臨床檢驗(yàn)中心第53頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---TT*原理：血漿凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定，凝固法，加“標(biāo)準(zhǔn)化”凝血酶、纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白、測(cè)凝固時(shí)間。參考值：對(duì)照：16-18s，異常：延長(zhǎng)>3s臨床意義：延長(zhǎng)：DIC纖溶亢進(jìn)、低/無纖維蛋白原血癥、FDPs增高、肝素或類肝素物存在、肝病、SLE?？s短：無臨床意義。福建省臨床檢驗(yàn)中心第54頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)*

原理：血漿游離肝素時(shí)間測(cè)定或甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)，甲苯胺藍(lán)呈堿性，可中和肝素的抗凝作用。在TT延長(zhǎng)患者的血漿中加甲苯胺藍(lán)后測(cè)TT。參考值：TT縮短>5s：有肝素或肝素類增多；

TT不縮短：TT延長(zhǎng)不是肝素類物質(zhì)所致。臨床意義：類肝素類物質(zhì)可能增多：嚴(yán)重肝病、DIC、過敏性休克、應(yīng)用氮芥類藥物、放療后、肝葉切除術(shù)后、肝移植后。福建省臨床檢驗(yàn)中心第55頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---APTT交叉試驗(yàn)*APTT延長(zhǎng)

1份受檢血漿+1份正常新鮮血漿APTT正常延長(zhǎng)可能有凝血因子缺乏可能存在抗凝物質(zhì)福建省臨床檢驗(yàn)中心第56頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---狼瘡抗凝物質(zhì)原理：本測(cè)定是改良的Russell蝰蛇毒稀釋試驗(yàn)。①Lupo實(shí)驗(yàn)：蝰蛇毒試驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)，加正常混合血漿仍延長(zhǎng)→存在狼瘡抗凝物質(zhì)。②Lucor實(shí)驗(yàn)：加含過量腦磷脂(能中和狼瘡抗凝物質(zhì))，致凝固時(shí)間縮短或正常。參考值:Lupo實(shí)驗(yàn)Ⅱ:31-44s,Lucor實(shí)驗(yàn):30-38s，

Lupo實(shí)驗(yàn)Ⅱ/Lucor:1.0-1.2(凝固法)臨床意義：陽性見于有狼瘡抗凝物質(zhì)存在的患者:SLE、自發(fā)性流產(chǎn)、某些血栓性疾病、抗磷脂抗體綜合癥。Lupo和/或Lucor實(shí)驗(yàn)延長(zhǎng)，Lupo/Lucor<1.2：可出現(xiàn)于Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ缺乏、應(yīng)用華法林或肝素。福建省臨床檢驗(yàn)中心第57頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---AT:A原理：血漿抗凝血酶活性(AT:A)測(cè)定，發(fā)色底物法，加過量凝血酶，AT與之形成1:1復(fù)合物，剩余者與底物作用、顯色，顔色深淺與剩余凝血酶呈正相關(guān)，與AT活性負(fù)相關(guān)。參考值：108.5±5.3%臨床意義：增高：血友病、白血病、再障等的急性出血期，口服抗凝劑、應(yīng)用黃體酮。減低：①先天性和獲得性AT缺乏，②肝病、DIC、外科術(shù)后、血栓前狀態(tài)和血栓性疾病福建省臨床檢驗(yàn)中心第58頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---PC:A原理：血漿蛋白C活性(PC:A)測(cè)定，發(fā)色底物法，PC被從蛇毒液中提取的protac激活后成APC，APC與底物作用后顯色，顯色深淺與PC:A成正比。參考值：100.24%±13.18%臨床意義：減低：①遺傳性或先天性PC缺乏，②獲得性PC缺乏：DIC、肝病、外科術(shù)后、口服抗凝劑、急性呼吸窘迫綜合征。福建省臨床檢驗(yàn)中心第59頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---FPS/TPS原理：血漿游離蛋白S(FPS)和總蛋白S(TPS)測(cè)定，火箭電泳法參考值：FPS:100.9±29.1%TPS:96.6±9.8%臨床意義：減低：①先天性PS缺乏，②獲得性PS缺乏：肝病、口服抗凝劑、DIC等。福建省臨床檢驗(yàn)中心第60頁/共83頁抗凝系統(tǒng)檢測(cè)---TAT原理：血漿凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物(TAT)測(cè)定，ELISA法參考值：（1.45±0.4）μg/L臨床意義：增高：心梗、不穩(wěn)定型心絞痛、DIC、DVT、腦梗死、急性白血病。備注：本試驗(yàn)反映凝血酶活性的試驗(yàn)。

福建省臨床檢驗(yàn)中心第61頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---ELT*原理：優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間(ELT)測(cè)定，優(yōu)球蛋白中含纖維蛋白原、纖溶酶原和纖溶酶原激活物，不含纖溶酶抑制物。致受檢血漿于醋酸中使優(yōu)球蛋白沉淀，離心除纖溶酶抑制物，沉淀物溶于緩沖液中，加鈣或凝血酶使其凝固。37℃下完全溶解所需時(shí)間。參考值：加鈣法:(129.8±41.1)min，加酶法:(157.0±59.1)min，一般認(rèn)為＜70min為異常臨床意義：70min內(nèi)完全溶解：纖溶活性增強(qiáng)，見于⑴原纖，⑵繼纖：手術(shù)、應(yīng)激狀態(tài)、創(chuàng)傷、休克、變態(tài)反應(yīng)、前置胎盤、胎盤早期剝離、羊水栓塞、急性白血病、DIC等。120min內(nèi)不溶解：纖溶活性減低，見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和應(yīng)用抗纖溶藥等。福建省臨床檢驗(yàn)中心第62頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---D-dimer*原理：血漿D-二聚體(D-dimer,D-D)測(cè)定,膠乳凝集法，ELISA法，D-D是纖溶酶作用于交聯(lián)纖維的特異性分子標(biāo)記物參考值：膠乳法:陰性，

ELISA法:0-0.256mg/L臨床意義：陽性：①繼發(fā)性纖溶癥，②血栓形成和臨床出血時(shí)也可出現(xiàn)。陰性是排除DVT和肺血栓栓塞的重要試驗(yàn)。備注：特異性低，敏感性高。福建省臨床檢驗(yàn)中心第63頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---FDPs*原理：血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPs)測(cè)定，膠乳凝集法，ELISA參考值：陰性，ELISA法<5mg/L臨床意義：增高：①原發(fā)性纖溶，②繼發(fā)性纖溶：DIC、惡性腫瘤、急性早糼粒細(xì)胞白血病、肺血栓栓塞、肝病、腎臟疾病、肺梗死、DVT、溶栓治療。福建省臨床檢驗(yàn)中心第64頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---t-PA原理：血漿組織纖溶酶原激活物活性測(cè)定(t-PA:A)，發(fā)射底物法參考值：0.3-0.6活化單位/ml臨床意義：增高：纖溶亢進(jìn)，見于原發(fā)、繼發(fā)纖溶癥(如DIC)；減低：纖溶減弱，見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，如動(dòng)脈血栓形成、DVT、高脂血癥、口服避孕藥、缺血性中風(fēng)。福建省臨床檢驗(yàn)中心第65頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---PAI-1:A原理：血漿纖溶酶原激活抑制物-1活性(PAI-1:A)測(cè)定，發(fā)射底物法參考值：0.1-1.0抑制單位/毫升臨床意義：增高：纖溶活性減低，見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低：纖溶活性增高，見于原發(fā)性纖溶、繼發(fā)性纖溶。福建省臨床檢驗(yàn)中心第66頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---3P試驗(yàn)原理：血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)，硫酸魚精蛋白可使sFM與FbDP復(fù)合物解離釋放出纖維蛋白單體，后者自行聚合成肉眼可見的纖維狀物。參考值：陰性臨床意義：陽性：DIC的早、中期。陰性：正常人、晚期DIC和原發(fā)性纖溶癥。假陽性：惡性腫瘤、上消化道出血、外科大手術(shù)后、敗血癥、腎小球疾病、人流、分娩等。備注：本試驗(yàn)特異強(qiáng)、敏感性低，是原發(fā)纖溶和繼發(fā)纖溶的鑒別試驗(yàn)之一。福建省臨床檢驗(yàn)中心第67頁/共83頁纖溶活性檢測(cè)---PAP原理：血漿纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)測(cè)定，ELISA法，反映纖溶酶活性。參考值：0-150ng/ml臨床意義：增加：見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，DIC、急性心肌梗死、腦血栓形成、肺梗死、DVT、腎病綜合征、糖尿病等。福建省臨床檢驗(yàn)中心第68頁/共83頁檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用

一期止血缺陷篩選試驗(yàn)的應(yīng)用一期止血缺陷：血管壁和血小板缺陷所致出血性疾病篩選試驗(yàn)：血小板計(jì)數(shù)(PC)和出血時(shí)間測(cè)定(BT)BT和PC都正常:正常人、血管性紫癜(過敏性、單純性紫癜)BT延長(zhǎng)、PC減少：血小板減少性紫癜(原發(fā)性、繼發(fā)性)BT延長(zhǎng)、PC增多：血小板增多癥(原發(fā)性、繼發(fā)性)BT延長(zhǎng)、PC正常：血小板功能異?；蚰承┮蜃尤狈?無力癥、貯存池病、低/無纖維蛋白原血癥、vWD)

福建省臨床檢驗(yàn)中心第69頁/共83頁檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用二期止血缺陷篩選試驗(yàn)的應(yīng)用二期止血缺陷：凝血因子缺乏或病理性抗凝物質(zhì)存在篩選試驗(yàn)：APTT、PTAPTT、PT都正常:正常人、遺傳性和獲得性FⅩⅢ缺乏嚴(yán)重肝病、肝腫瘤、惡性淋巴瘤、白血病、抗FⅧ抗體、自身免疫性溶血性貧血、惡性貧血等APTT延長(zhǎng)、PT正常:內(nèi)源性凝血途徑缺陷血友病A、B，Ⅺ、Ⅻ缺乏，凝血因子抗體，DIC，肝病，口服抗凝劑APTT正常、PT延長(zhǎng):外源性凝血途徑缺陷遺傳性FⅦ缺乏癥APTT、PT都延長(zhǎng):共同凝血途徑缺陷遺傳性和獲得性因子Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、Ⅰ缺乏癥，應(yīng)用肝素

福建省臨床檢驗(yàn)中心第70頁/共83頁檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用纖溶活性亢進(jìn)性出血篩選試驗(yàn)的應(yīng)用指纖維蛋白(原)和某些凝血因子被纖溶酶降解所引起的出血，可選用FDPs、DD試驗(yàn)。FDPs、DD都正常：纖溶活性正常，出血可能與纖溶無關(guān)FDPs陽性、DD陰性：理論上為原纖，多數(shù)為FDP假陽性見于肝病、術(shù)后大出血、重癥DIC、纖溶初期、RF陽性、抗RhD存在等。FDPs陰性、DD陽性：理論上為繼纖，多數(shù)為FDP假陰性見于DIC、靜脈血栓、動(dòng)脈血栓、溶栓治療。FDPs、DD都陽性：纖維蛋白原、纖維蛋白同時(shí)被降解見于繼纖，如DIC、溶栓治療。該情況臨床最為多見。

福建省臨床檢驗(yàn)中心第71頁/共83頁檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用血栓前狀態(tài)(PTS)也稱血栓前期，指血液有形成分和無形成分的生物化學(xué)和流變學(xué)發(fā)生某些病理生理變化。在這一狀態(tài)下，血液有可能形成血栓或血栓栓塞疾病。PTS可反映血管內(nèi)皮細(xì)胞受損或受刺激；血小板和白細(xì)胞被激活或功能亢進(jìn)；凝血蛋白含量增高或被激活；抗凝蛋白含量減少或結(jié)構(gòu)異常；纖溶因子含量減低或活性減弱；血液粘度增高和血流減慢等一系列的病理狀態(tài)。常見于心、腦血管疾病，DVT，妊高癥，糖尿病伴血管病變，腎病綜合征，DIC，惡性腫瘤，器官移植等。福建省臨床檢驗(yàn)中心第72頁/共83頁檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用PTS篩選試驗(yàn)：

①APTT和(或)PT可能縮短②Fg可能增多③血小板聚集試驗(yàn)(PAgT)的聚集率可能增高④血液粘度一般增高PTS常用試驗(yàn)：vWF:Ag↑,β-TG↑,sFMC↑,AT:A↓,FDPs↓,DD↓PTS特殊試驗(yàn)：TM↑、ET-1↑，P-selectin↑、11-DH-TXB2↑，F(xiàn)PA↑，TAT↑，TF↑，PAP↓福建省臨床檢驗(yàn)中心第73頁/共83頁檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用易栓癥（thrombophilia）指易引起血栓栓塞的抗凝因子缺乏、凝血因子缺