食品安全快速檢測(cè)技術(shù)農(nóng)藥殘留檢測(cè)專(zhuān)題

食品安全快速檢測(cè)技術(shù)農(nóng)藥殘留檢測(cè)專(zhuān)題第1頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)回顧上節(jié)課內(nèi)容1.樣品制備2.農(nóng)藥、農(nóng)藥殘留的概念5/5/2023第2頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第3頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第4頁(yè)/共41頁(yè)酶抑制率法5/5/2023第5頁(yè)/共41頁(yè)注意事項(xiàng)5/5/2023第6頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)實(shí)驗(yàn)二、蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)GB/T5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)快速卡法測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)殘快速檢驗(yàn)法及熟悉檢驗(yàn)結(jié)果評(píng)定5/5/2023第7頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)實(shí)驗(yàn)原理膽堿脂酶可催化靛酚乙酸脂（紅色）水解為乙酸與靛酚（藍(lán)色），有機(jī)磷或氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿脂酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變，由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥的存在5/5/2023第8頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)實(shí)驗(yàn)試劑固化有膽堿脂酶和靛酚乙酸脂試紙卡片磷酸鹽緩沖液快速檢測(cè)儀5/5/2023第9頁(yè)/共41頁(yè)快速檢測(cè)試紙法5/5/2023第10頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)四、速測(cè)卡測(cè)定農(nóng)藥殘留的主要步驟1）整體測(cè)定法剪成1cm碎片，取5g放入帶蓋瓶，加入10ml緩沖液，振搖50次，靜置2min。取1片速測(cè)片，用白色藥品蘸取提取液，放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)，每批設(shè)定一個(gè)空白5/5/2023第11頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)四.速測(cè)卡測(cè)定農(nóng)藥殘留的主要步驟2）表面測(cè)定法（粗篩法）滴2-3滴緩沖液溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦取1片速測(cè)卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上放置10min以上，進(jìn)行預(yù)反應(yīng)將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。每批測(cè)定設(shè)一個(gè)空白對(duì)照5/5/2023第12頁(yè)/共41頁(yè)請(qǐng)注意5/5/2023第13頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第14頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)五、速測(cè)卡測(cè)定農(nóng)藥殘留的注意事項(xiàng)1）空白對(duì)照2）次生物質(zhì)3）預(yù)反應(yīng)溫度4）反應(yīng)時(shí)間5）滴加溶液的數(shù)量6）預(yù)反應(yīng)時(shí)間一致7）觀察結(jié)果時(shí)間1min5/5/2023第15頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)六、檢測(cè)結(jié)果判斷

1、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機(jī)磷或氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥抑制（為陽(yáng)性）、未抑制（陰性）表示。與空白對(duì)照卡比較：白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同為陰性結(jié)果。對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品可用其他方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

2、樣品檢測(cè)結(jié)果記錄并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。5/5/2023第16頁(yè)/共41頁(yè)說(shuō)明5/5/2023第17頁(yè)/共41頁(yè)知識(shí)擴(kuò)展15/5/2023第18頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第19頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第20頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第21頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第22頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第23頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第24頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)第二法：酶抑制率分光光度法5/5/2023第25頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第26頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第27頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第28頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第29頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第30頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第31頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第32頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第33頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第34頁(yè)/共41頁(yè)5/5/2023第35頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)5/5/2023開(kāi)機(jī)：插上電源，打開(kāi)儀器背面綠色電源開(kāi)關(guān)，儀器顯示開(kāi)機(jī)畫(huà)面，按畫(huà)面提示操作，按下回車(chē)鍵，儀器開(kāi)始自檢，時(shí)間約1min自檢完畢后，儀器進(jìn)入待機(jī)檢測(cè)狀態(tài)第36頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)2、試劑配制2.1、緩沖液：取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中，攪拌溶解制成磷酸緩沖液（pH7.6）,常溫保存。2.2、顯色劑：取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解，使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存。2.3、底物：取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存；或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時(shí)取20μL，4℃冰箱保存。2.4、膽堿酯酶：酶制劑無(wú)需配制，可直接取用，使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存。5/5/2023第37頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)5/5/20233、樣品提取取2g果蔬樣品（塊莖類(lèi)取4g)，葉菜剪成25px左右見(jiàn)方的碎片，塊莖類(lèi)取橫截面樣品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL緩沖液，振蕩1～2min，倒出提取液，靜置2min，待測(cè)第38頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)4、測(cè)試1）對(duì)照測(cè)試：2.5mL緩沖液——加入100μL酶液——顯色劑——混勻，靜置10min——加入100μL（或20μL）底物——搖勻，立即倒入比色杯中。及時(shí)放入儀器的測(cè)量室第1通道，合上蓋。按〈B〉鍵，顯示屏下方延遲10s后，測(cè)量時(shí)間開(kāi)始倒計(jì)時(shí)，計(jì)時(shí)完畢，顯示屏顯示吸光度增量(ΔC)及抑制率。在進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí)，2～8通道可同時(shí)進(jìn)行樣品測(cè)試。5/5/2023第39頁(yè)/共41頁(yè)項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)4、測(cè)試2）樣品測(cè)試：2.5mL待測(cè)液——加入100μL酶液和顯色劑，混勻——靜置10min——加入100μL（或20μL）底物，搖勻并立即倒