dd四次實驗血鈣血磷測定

dd四次實驗血鈣血磷測定第1頁/共19頁(一)實驗原理

血清中鈣離子在堿性溶液中能與甲基麝香草酚藍染料結(jié)合，生成有色復(fù)合物。第2頁/共19頁(二)試劑顯色試劑堿性試劑標準液MTB8-羥基喹啉

乙醇胺

碳酸鈣

2.50mmol/L工作液：顯色試劑與堿性試劑等量混合第3頁/共19頁(三)操作1.檢測參數(shù)主波長：612nm溫度：室溫。2.空白管標準管樣本管工作液2.0ml去離子水20ul）工作液2.0ml工作液2.0ml鈣標準液20ul血20ul第4頁/共19頁3.分別混勻各管，室溫放5分鐘，

以空白管校零，記錄各管吸光度。4.結(jié)果鈣(mmol/L)=樣本管吸光度標準管吸光度×標準液濃度第5頁/共19頁(四)臨床意義1.參考值：2.1—2.9mmol/L。生命危急值：1.7mmol/L，3.3mmol/L。2.增高：甲旁亢、多發(fā)性骨髓瘤、VitD增多癥、代酸等3.降低：甲旁減、尿毒癥、佝僂病等。第6頁/共19頁(五)方法評價1.重復(fù)性、準確度較好、簡便、易于自動化。2.線性：在樣本濃度0-3.75mmol/L范圍內(nèi),

線性良好。3.精密度：批內(nèi)CV≤5％。批間相對誤差≤54.易受干擾。第7頁/共19頁

三、無機磷的測定磷鉬酸還原法臨檢中心推薦染料結(jié)合法氧化酶法同位素質(zhì)譜法決定性方法原子吸收光譜法第8頁/共19頁(一)實驗原理：

血清中無機磷在酸性溶液中與鉬酸銨反應(yīng)生成在340nm處有吸收峰的磷鉬酸銨，其吸光度的變化與無機磷含量成正比。第9頁/共19頁(二)試劑磷試劑硫酸220mmol/L鉬酸銨1.0mmol/L表面活性劑適量校準液：磷酸二氫鉀1.29mmol/L防腐劑適量第10頁/共19頁(三)測定步驟

混勻，以37℃10’在340nm波長處比色。結(jié)果無機磷含量=A樣本/A校準×C校準

空白管校準管標本管磷試劑純化水校準液標本(ml)1.01.01.00.020.020.02第11頁/共19頁(四)臨床意義1.參考值：成人：0.97-1.62mmol/L兒童：1.45-2.10mmol/L2.增高：甲旁減、慢性腎炎晚期、多發(fā)性骨髓瘤、骨折愈合期等。3.減低：甲旁亢、腎小管變性病變時等。第12頁/共19頁(五)方法性能精密度:批內(nèi)變異CV≤5％。線性范圍:

0-4mmol/L。第13頁/共19頁三、試劑空白測定

1.定義：用蒸餾水調(diào)零測定僅僅未加樣品的試劑管，用以扣除試劑干擾對結(jié)果所造成的系統(tǒng)誤差。本次實驗用鈣離子測定的方法進行試劑空白實驗。第14頁/共19頁2.操作試劑空白標準管測定管工作液2.0ml2.0ml2.0ml標準液-----0.02ml-----蒸餾水0.02ml----------標本----------0.02ml室溫放5分鐘，以蒸餾水調(diào)零，612nm測定。第15頁/共19頁計算

空白值=空白OD/標準OD×標準濃度樣本值=×標準濃度樣本OD-空白OD標準OD-空白OD第16頁/共19頁3.試劑空白的選擇原則（1）試劑中某組分在測定波長下對光有吸收；（2）被測試樣本身在測定波長下沒有光吸收；（3）被測試樣中的其他成分與顯色劑作用后在測定波長下沒有光吸收；（4