人體組織的檢驗

人體組織的檢驗第1頁/共12頁一、毛發(fā)檢驗

毛發(fā)結(jié)構(gòu)：毛發(fā)是皮膚的一種特殊的附屬器，是皮膚毛囊細胞產(chǎn)生的一種富有彈性角質(zhì)體。

毛尖-----是毛干的游離末端，毛干向毛尖逐漸變細而尖

毛干-----是裸露于皮膚外部的部分，由角化上皮細胞組成，中心向外可以分為：

毛小皮：人----毛小皮花紋通常為細小波浪狀。

毛皮質(zhì)：人----皮質(zhì)發(fā)達，

毛髓質(zhì)：人---髓質(zhì)不發(fā)達、而且髓質(zhì)不連續(xù)

毛根-----是埋在皮膚內(nèi)的部分。

毛球：毛根起始端膨大和球狀的部分

毛囊：包裹毛根的一管狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)層為上皮根鞘、外層為纖維組織鞘

毛乳頭：毛球和毛囊末端膨大，底面內(nèi)凹，含毛細血管和神經(jīng)的結(jié)締組第2頁/共12頁法醫(yī)意義：

1毛發(fā)容易脫落，在兇殺、強奸、搶劫等案件中均可遺留2毛發(fā)理化性質(zhì)穩(wěn)定，其主要成分為角蛋白，不易腐蝕和毀壞，可長期保存3毛發(fā)可以進行個人識別鑒定注意：1毛發(fā)容易丟失，檢驗時應(yīng)該特別小心，最好帶口罩2選擇合適的背景進行觀察第3頁/共12頁毛發(fā)與其他纖維的鑒別

肉眼觀：毛尖、毛干、毛根顯微鏡：毛小皮、毛皮質(zhì)、毛髓質(zhì)燃燒法：毛發(fā)由特殊的臭味----角蛋白中含有3%~5%的硫人毛與其他動物毛的鑒別

毛小皮毛皮質(zhì)毛髓質(zhì)

形態(tài)邊緣寬度色素寬度連續(xù)性末端人

毛細而不規(guī)則花形細鋸齒狀較寬2/3均勻較窄1/4~1/5不連續(xù)部分缺如動物毛形狀多變粗鋸齒狀較窄1/2~1/3不均勻較寬》1/3連續(xù)直至毛尖第4頁/共12頁毛發(fā)部位的確定毛發(fā)其他特征鑒別

5%~10%亞硝基鐵氰化鈉溶液

脫落----毛根完全角化，干燥萎縮，無根鞘附著，根部色素少。染色不顏色反應(yīng)拔出----毛囊組織附著、毛球濕潤，毛球下端開放呈鉤狀，染色呈紅色。鈍器損傷----鈍器作用部位變寬扁平，皮質(zhì)纖維分離，部分或完全斷裂銳器損傷----斷端平滑整齊、毛干不碎裂、皮質(zhì)纖維不分裂

長

度直徑橫斷面

頭發(fā)~2m《0.1圓形或橢圓形

胡須~30cm0.15鈍的三角形

陰毛3~6cm0.1~0.2長橢圓形

第5頁/共12頁毛發(fā)的個人識別

形態(tài)學(xué)檢查：長度---色澤---黑色、淺褐色、灰色、白色---色素：白色、黑色、紅色形態(tài)---直發(fā)、波狀發(fā)、卷發(fā)斷端---剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂免疫學(xué)檢查：ABO血型----解離試驗

特征：1血型物質(zhì)含量少；2毛小皮沒有血型物質(zhì)，只有皮質(zhì)和髓質(zhì)才有方法：毛發(fā)洗凈--乙醇脫色--充分壓扁--加抗體吸收---滌、解離、RBC注意：1毛發(fā)壓扁，原寬度地~4倍；2抗血清效價》128；3吸收時間充分，過夜4毛發(fā)對照生化學(xué)檢查：有毛根和毛囊的毛發(fā)可以檢測ESD、GLOI、PGM1、ORM等分子生物學(xué)：帶毛囊---DNA提取用chelex-100，STR基因座分析，性別基因鑒定毛干---線粒體DNA多態(tài)性分析

化學(xué)分析：微量元素的檢測應(yīng)用：可以推測可能的生活環(huán)境、從事的職業(yè)、判斷是否中毒方法：原子發(fā)射光譜析、原子吸收分光光度、中子活性、氣相色譜、質(zhì)譜第6頁/共12頁二、軟組織檢驗1種類鑒別

肉眼觀察

適合于組織塊比較大的檢材的識別組織切片

HE染色后，在顯微鏡下觀察，鑒別***如果干燥組織可以用5%醋酸浸軟組織以恢復(fù)正常形態(tài)皮膚----復(fù)層鱗狀上皮細胞的表層結(jié)構(gòu)+真皮層的毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪腦組織----神經(jīng)細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞肝臟----肝細胞及膽管構(gòu)成發(fā)肝小葉結(jié)構(gòu)腎臟----腎小球、腎小管、消化道----粘膜層、粘膜下層、肌層、外膜第7頁/共12頁2種屬鑒定免疫學(xué)方法：抗人血清---沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、酶免疫分析**法醫(yī)檢驗中的組織經(jīng)常受各種因素的影響，變性或分解，易產(chǎn)生誤判。分子生物學(xué)：Alu序列含有AluI酶切位點散在重復(fù)序列，由300bp重復(fù)單位，該序列為人類和靈長類特有-----種屬特異性PCR-AFLP：人類130bp的擴增產(chǎn)物

28srRNArRNA=60s（28s+5.8s+5s+50多種多肽）+40

保守區(qū)中的可變區(qū)進化較快，種屬之間差異很大人類108、104、101、99bp，不同動物的擴增產(chǎn)物長度不同

細胞色素b基因位于線粒體上的具有種屬差異的遺傳標(biāo)記人和哺乳類動物區(qū)別AluI酶切位點--酶切片斷的長度不同人和鳥類的動物區(qū)別—NcoI酶切位點---人類不含有該酶切位點

SON基因第8頁/共12頁3個人識別檢驗基礎(chǔ)：正常情況下，同一個體不同組織的血型、酶型、DNA分型結(jié)果相同例外：癌變的組織；腐敗組織----獲得性B物質(zhì)影響因素：環(huán)境因素，干燥能保存，潮濕易破壞溫度、酸堿燒熟（但未焦）的組織可以檢出，自溶和腐敗使組織的血型物質(zhì)及其他的遺傳標(biāo)記更容易被破壞送檢注意：1盡快送檢---2妥善保存---所有檢材不宜用甲醛固定3合理選材---肝臟和脾臟中核酸分解酶豐富，蛋白質(zhì)和DNA降解快，不宜首選，肌肉和腦是提取DNA較理想的檢材第9頁/共12頁血型：ABO血型

ABH抗原不僅分布于人類紅細胞上，也存在于人體各種上皮細胞、血管與淋巴管的內(nèi)皮細胞、心內(nèi)膜及神經(jīng)組織的神經(jīng)細胞及突觸。有些組織的ABH抗原發(fā)育較紅細胞早

方法：吸收試驗---凝集抑制試驗解離試驗---熱解離試驗混合凝集---紅細胞粘連試驗免疫組化---酶標(biāo)抗體的應(yīng)用基因分型---PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR酶型測定

檢材處理：組織制成勻漿，DNA分析

DNA提取：冷凍組織---常規(guī)有機溶劑，量少用Chelex-100

DNA分析

STR或HLA基因分型第10頁/共12頁三、其他組織檢驗

1指甲檢驗—由表皮細胞角化而成，由多層連接牢固的角化細胞構(gòu)成，細胞內(nèi)充滿角質(zhì)蛋白。

ABO血型特點：ABH為水溶性血型物質(zhì)，但不受分泌型的影響，存在于所有的個體。成人和新生兒指甲中的ABH含量無明顯的差異。方法：洗凈---用肥皂水充分的洗滌，再用蒸餾水沖洗數(shù)次軟化---生理鹽水中2小時，晾干脫脂---丙酮或乙醇脫脂壓碎---加大抗血清接觸的面積

mtDNA檢測測定mtDNA多態(tài)性的靈敏度比檢測核DNA的多態(tài)性高

2骨及牙檢驗-----人體最堅硬的組織，抵抗腐敗，長期保存