菌種的提純與復(fù)壯知識(shí)

菌種的提純與復(fù)壯知識(shí)第1頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四長期使用某一品種栽培，或?qū)ζ贩N保存、管理不當(dāng)，會(huì)造成該品種的退化和老化，因此對(duì)菌種必須進(jìn)行經(jīng)常的提純復(fù)壯工作。菌種的退化和老化有兩種不同的含意。退化是指某一良種遺傳性狀發(fā)生改變，造成產(chǎn)量下降的現(xiàn)象。一個(gè)優(yōu)良品種在長期栽培過程中，由于環(huán)境條件的逆境，病蟲害的侵襲，化學(xué)藥物的殺傷，管理不當(dāng)，多次的轉(zhuǎn)管造成人為的創(chuàng)傷的增多，影響菌種遺傳性狀的變異或突變，從而改變了菌種原有的遺傳特性，造成退化現(xiàn)象；其次，在實(shí)踐中往往是幾個(gè)品種在同一環(huán)境下培養(yǎng)，它們之間的自然雜交率也是很高的，品種的自然雜交也會(huì)引起菌種的不純。老化是指菌種菌齡過長，使菌絲體衰老，生活能力下降，抗病能力減弱，吃料慢，長勢(shì)弱，出菇少，畸形多等種種現(xiàn)象。第2頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四菌種提純復(fù)壯途徑1、分離篩選：采用組織分離法及基質(zhì)菌絲分離法獲得母種，經(jīng)轉(zhuǎn)管純化后做栽培試驗(yàn)，進(jìn)行產(chǎn)量、質(zhì)量比較，選優(yōu)去劣。2、育種：通過雜交育種、誘變育種、原生質(zhì)體融合技術(shù)培育新品種。3、加強(qiáng)管理：加強(qiáng)菌種保存工作，創(chuàng)造條件使其處于休眠狀態(tài)，嚴(yán)格控制轉(zhuǎn)管次數(shù)，防止菌種退化、老化。4、注意菌種的選用：選用菌齡適中的菌絲體擴(kuò)繁，取試管菌種時(shí)應(yīng)避開試管邊緣和接種點(diǎn)附近的菌絲，應(yīng)挑取它們中間部分菌絲，最好是挑基質(zhì)菌絲接種；取原種時(shí)去掉瓶口表面菌膜、老菌絲、子實(shí)體原基和菌蕾，盡量挑取瓶中間部分的菌絲接種，達(dá)到選優(yōu)復(fù)壯的目的。5、采用液體菌種：液體菌種培養(yǎng)條件容易控制，生長速度快，培養(yǎng)時(shí)間短，生命力強(qiáng)，菌齡一致，雜菌污染少，操作方便又起到了防止退化的作用。6、改善營養(yǎng)成份：首先改換培養(yǎng)基主料成份，使菌種吸收不同的營養(yǎng)成份，促進(jìn)復(fù)壯。食用菌的復(fù)壯可以用豆芽、棉籽皮、甘薯、玉米粉等等代替馬鈴薯或者采用馬鈴薯培養(yǎng)基和上述培養(yǎng)基交替使用，復(fù)壯效果更好。其次是在培養(yǎng)基中添加各種輔料，使菌絲生長健壯。如在培養(yǎng)基內(nèi)加入適量的麥芽糖、谷氨酸、檸檬酸、酵母膏等有機(jī)營養(yǎng)，或加磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硫酸鋅、銅、鈷、錳等無機(jī)營養(yǎng)，對(duì)防止菌絲老化是有益的。第3頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四菌種復(fù)壯由于環(huán)境條件和營養(yǎng)條件的暫時(shí)改變，常引起菌種退化(大多是非遺傳變異)。菌種復(fù)壯是針對(duì)菌種退化而采取的一種防止措施。從廣義上講，菌種復(fù)壯并不單純只限于采取一些防止退化的措施，也含有不斷提高菌種純度，提高優(yōu)良種性(高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗逆性強(qiáng))的含義。第4頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四〔1〕防止菌種退化的措施

①控制菌種傳代次數(shù)。菌種退化性的變異，是在繁殖過程中發(fā)生的，因此，減少傳代次數(shù)可以防止退化。母種的傳代擴(kuò)接應(yīng)控制在3次以內(nèi)，擴(kuò)接次數(shù)愈多，后代的生活力就愈衰退。原種個(gè)栽培種也應(yīng)盡量減少傳代次數(shù)。②優(yōu)化菌種培養(yǎng)和保藏的環(huán)境條件。菌種退化這有是基因突變引起的，基因突變與環(huán)境條件、代謝產(chǎn)物有關(guān)。一般突變比率隨溫度降低而減少，因此，應(yīng)采用低溫(0～4℃)條件保藏菌種。另外，用木屑或枝條培養(yǎng)基保藏菌種，擴(kuò)接后，成活率高，菌絲生長健壯，也是防止菌種退化的有效措施之一。第5頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四⑵對(duì)已開始退化菌種的復(fù)壯措施①改善營養(yǎng)條件大多菌種退化是由于營養(yǎng)條件的改變或缺乏而引起的，一但營養(yǎng)條件得到改善，就可以恢復(fù)原來優(yōu)良的性狀。實(shí)踐中常用的是采用加富營養(yǎng)的辦法，即除一般培養(yǎng)基成分外，需在加蛋白胨2～5克，酵母膏0.5～2克，牛肉膏2.5克，維生素B10.01～0.05克，必要時(shí)可加入適量的復(fù)合B族維生素和微量蜂王漿。待菌種恢復(fù)良好性狀后，再移植到普通培養(yǎng)基上。②經(jīng)常分離純化菌種如果菌種退化原因是屑純種不純，即已退化的菌株占了優(yōu)勢(shì)，應(yīng)進(jìn)行純種重新分離。生產(chǎn)上使用的菌種，每年要重新分離一次，選具有典型優(yōu)良性狀的子實(shí)體進(jìn)行組織分離、培養(yǎng)。也可每年進(jìn)行一次孢子分離，通過有性繁殖來發(fā)現(xiàn)好的菌株，再用組織分離來鞏固這些優(yōu)良菌株的遺傳性。第6頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四菌球形態(tài)菌種長好后會(huì)看到菌瓶內(nèi)充滿大小均勻，活力旺盛，毛刺明顯的大量菌球，靜置X分鐘后菌球占菌液濃度的X％以上或不分層，若菌球很少或大小不一值可能是質(zhì)量有部題。判斷菌種的質(zhì)量第7頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四菌液澄清度菌液中除菌球以外，無其它固形物，菌液由前期的微渾濁變的澄清透明，多數(shù)是淺黃色或橙黃色,如變的渾濁不清則很可能是染菌判斷菌種的質(zhì)量第8頁，共10頁，2023年，2月20日，星期四菌液氣味到培養(yǎng)后期菌液的糖香味會(huì)逐漸消失，取而代之的是或有或無的菌種特有的清香味，若有臭味、酸味、霉味則可能是染菌。判斷菌種的質(zhì)量第9頁，共10頁，2023年，2月2