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中華人民共和國醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB15982——20121一、采樣和采樣原則一、采樣和采樣原則1采樣后盡快對(duì)樣品進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè),送檢時(shí)間不得超過4h;若樣品保存于0--4℃時(shí),送檢時(shí)間不得超過24h。2不推薦醫(yī)院常規(guī)開展滅菌物品的無菌檢查,當(dāng)流行病學(xué)調(diào)查懷疑醫(yī)院感染事件與滅菌物品有關(guān)時(shí),進(jìn)行相應(yīng)物品的無菌檢查。常規(guī)監(jiān)督檢查可不進(jìn)行致病性微生物檢測(cè),涉及疑似醫(yī)院感染暴發(fā)、醫(yī)院感染暴發(fā)調(diào)查或工作中懷疑微生物污染時(shí),應(yīng)進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測(cè)。2
3可使用經(jīng)驗(yàn)證的現(xiàn)場快速檢測(cè)儀器進(jìn)行環(huán)境、物體表面等微生物污染情況和醫(yī)療器材清潔度的監(jiān)督篩查;也可用于醫(yī)院清洗效果檢查和清洗程序的評(píng)價(jià)和驗(yàn)證。3二、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)值(1)各類環(huán)境空氣、物體表面菌落總數(shù)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
環(huán)境類別空氣平均菌落數(shù)物體表面平均菌落數(shù)CFU/cm2CFU/皿CFU/m3Ⅰ類環(huán)境潔凈手術(shù)部符合GB50333要求≦150≦5.0其他潔凈場所≦4.0(30min)Ⅱ類環(huán)境≦4.0(15min)-≦5.0Ⅲ類環(huán)境≦4.0(5min)-≦10.0Ⅳ類環(huán)境≦4.0(5min)-≦10.0CFU/皿為平板暴露法,CFU/m3為空氣采樣器法
4(2)致病性微生物不得檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌等致病菌。2醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)≤10CFU/cm2外科手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)≤5CFU/cm2.52醫(yī)療器材(1)進(jìn)入人體無菌組織、器官或接觸破損皮膚、粘膜的醫(yī)療用品必須無菌。(2)接觸粘膜的醫(yī)療用品細(xì)菌總數(shù)≤20CFU/件(CFU/g或100cm2,,致病性微生物不得檢出。6(3)接觸皮膚的醫(yī)療用品細(xì)菌總數(shù)≤200CFU/件(CFU/g或100cm2,,致病性微生物不得檢出。3.消毒劑類衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(1)使用中消毒劑:細(xì)菌總數(shù)≤100CFU/ml,致病性微生物不得檢出。(2)滅菌用消毒液的菌落總數(shù)應(yīng)為0CFU/ml.(3)無菌器械保存液:必須無菌。7三、檢測(cè)方法1空氣微生物污染檢查方法(1)采樣時(shí)間:消毒處理后與醫(yī)療活動(dòng)前期之間進(jìn)行采樣。(2)采樣方法:Ⅰ類環(huán)境可選擇平板暴露法和空氣采樣器法,參照GB50333《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》要求進(jìn)行檢測(cè)??諝獠蓸悠鞣蛇x擇六級(jí)撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗(yàn)證的空氣采樣器。8要求:按操作說明書。結(jié)果報(bào)告:
采樣器各平皿菌落數(shù)之和(CFU)空氣細(xì)菌總數(shù)(cfu/m3)= ×1000采樣速率(L/min)×采樣時(shí)間(min)9Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境采用平板暴露法。A基本要點(diǎn):平板直徑9cm,采樣高度80—150cm,邊角距離1m,暴露時(shí)間(Ⅱ類環(huán)境暴露15min,Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境暴露5min)。B操作:室內(nèi)面積≦30㎡,設(shè)內(nèi)中外對(duì)角線3點(diǎn),內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻壁1m處;室內(nèi)面積>30㎡,東、西、南、北、中布5點(diǎn)采樣,采樣時(shí)將培養(yǎng)皿蓋扣在培養(yǎng)皿口邊緣,暴露一定時(shí)間后蓋好送實(shí)驗(yàn)室置37℃培養(yǎng)48h作菌落計(jì)數(shù),必要時(shí)分離致病性微生物。10(3)結(jié)果報(bào)告:按平均每皿的菌落數(shù)報(bào)告:CFU/(皿.暴露時(shí)間)2物體表面微生物污染檢查方法(1)采樣時(shí)間:潛在污染區(qū)、污染區(qū)消毒后采樣。清潔區(qū)根據(jù)現(xiàn)場情況確定。(2)采樣面積:被采面積≥100cm2,采樣100cm2。被采面積<100cm2,采全部表面。11)采樣方法:用5cm×5cm滅菌規(guī)格板放在物體表面,用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或N.S的棉拭子各1根在格子內(nèi)橫豎往返涂抹5次,并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子,連續(xù)采樣1--4個(gè)規(guī)格板面積,剪去手接觸部分,將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管內(nèi)送檢。若采樣物體表面有消毒劑殘留時(shí),采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。12實(shí)驗(yàn)操作:將樣品管充分混合后,用無菌吸管吸取不同稀釋倍數(shù)的洗脫液1.0ml接種于滅菌培養(yǎng)皿中(共接種2只平皿,做平行樣),加入熔化的450C滅菌營養(yǎng)瓊脂15ml--20ml混合后,待其凝固,翻轉(zhuǎn)平板置360C±10C培養(yǎng)48h作菌落計(jì)數(shù)。13(4)結(jié)果計(jì)算:
N×采樣液稀釋倍數(shù)物體表面菌落總數(shù)(cfu/cm2)=100N——平均菌落數(shù)×10——換算成10ml,即100cm2采樣面積÷100——面積換算成每cm2報(bào)告小型物體表面的結(jié)果計(jì)算:Ncfu/件。143醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生檢查方法(1)采樣時(shí)間:采取手衛(wèi)生后,在接觸病人前或從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣。(2)采樣方法:令被檢者5指并攏,用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或N.S的棉拭子1支在雙手指曲面從指根到指尖端來回涂15抹兩次(一只手涂抹面積約30cm2),并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉簽,剪去手接觸部分,放入10ml采樣液中送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)(共60cm2面積)。采樣面積按平方厘米(cm2)計(jì)算。若采樣時(shí)手上有消毒劑殘留,采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。16操作:將樣品管充分混合后,用無菌吸管吸取不同稀釋倍數(shù)的洗脫液1.0ml接種于滅菌培養(yǎng)皿中(共接種2只平皿,做平行樣),加入熔化的450C滅菌營養(yǎng)瓊脂15ml混合后,待其凝固,翻轉(zhuǎn)平板置370C培養(yǎng)48h作菌落計(jì)數(shù)。17(5)結(jié)果計(jì)算:N×10細(xì)菌總數(shù)(cfu/cm2)=60N——平均菌落數(shù)×10——換算成10ml,即60cm2采樣面積÷60——面積換算成每cm2報(bào)告184使用中消毒液細(xì)菌總數(shù)測(cè)定(1)采樣方法:用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品,在無菌條件下加入9.0ml含相應(yīng)中和劑的采樣液中混合后送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)(采樣液可以用N.S代)。(2)操作:將樣品管充分混合后,用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品19接種于滅
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