藥理學研究的一般性問題

科研全過程訓練概況專業(yè)課程、專業(yè)外語、統(tǒng)計學、文獻檢索、常用軟件應用（Word,Excel,圖表制作軟件，Photoshop,SPSS,PowerPoint,etc）閱讀文獻，確定課題（查閱文獻能力）設(shè)計實驗實驗研究（取得初步結(jié)果，可以申請基金）統(tǒng)計分析資料；撰寫論文答辯、會議報告（Chinese,English）目前一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點一、藥理學研究的類型根據(jù)研究目的分類基礎(chǔ)研究：受體、遞質(zhì)、蛋白質(zhì)、神經(jīng)通路、信號轉(zhuǎn)導、基因開發(fā)研究：圍繞新藥研發(fā)的藥理學研究應用研究：提高治療效果、減少不良反應的臨床藥理學目前二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點一、藥理學研究的類型根據(jù)研究內(nèi)容和研究方法分類藥效及作用機制研究藥動學研究實驗研究整體動物實驗離體器官、細胞實驗臨床研究目前三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點二、定位與選題〝三定〞:明確的目標定研究方向很穩(wěn)定定研究領(lǐng)域相對穩(wěn)定定研究課題非常活躍如何定位:學科發(fā)展的前景與可行性單位的可能條件個人興趣目前四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點如何選題

導師：給方向、提供條件、審閱文章、組織答辯（不同于technician）根據(jù)導師的研究方向基金資助情況確有興趣的探索可以做出開創(chuàng)性的工作二、定位與選題目前五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點三、要求獨立研究工作的基本能力掌握信息,復習文獻的能力科學實驗設(shè)計能力（創(chuàng)新思維能力）科學實驗操作能力科學論文撰寫發(fā)表能力科學基金申請能力良好的素質(zhì)，杜絕造假、剽竊文章的可信率、實驗的可重復率目前六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四、怎樣寫好實驗記錄認真、客觀、全面的記錄。格式和內(nèi)容實驗方法試劑稱量配制時間氣候儀器設(shè)備動物結(jié)果目前七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四、怎樣寫好實驗記錄一般要求記錄本應事先印有頁碼，不得撕掉或挪作他用，即使寫錯了亦應如此。封面或首頁應寫明科研課題名稱，開始工作年、月、日，工作者姓名，每本記錄前1～2頁應留作寫實驗目錄及頁次之用，便于查閱。所有數(shù)據(jù)，必須立即用不掉色的筆直接清晰地記錄在記錄本上，嚴禁用鉛筆記錄，因為容易退色和被涂改。如有寫錯不得涂改擦抹，必須改正時，可在錯誤處畫道線或打×，然后寫上正確數(shù)據(jù)，并由課題負責人簽字，防止弄虛做假。電腦測得的數(shù)據(jù)應輸入電腦，自動打印，貯存，最好拷貝一份，以防丟失或損壞。目前八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四、怎樣寫好實驗記錄寫記錄的要求立即不能先記在心上，實驗后補寫記錄，因為記憶有時不可靠。直接要直接寫在記錄本上，不能先寫在紙條上，然后重抄，因為重抄有時抄錯，有時甚至把紙條丟掉。清晰字體清楚，不要潦草，不要詞不達意，自己能看懂，別人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自動儀器打印的數(shù)據(jù)、結(jié)果、圖譜等必須將原件依順序貼在記錄本上，有條件的還可輸入電腦保存。目前九頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四、怎樣寫好實驗記錄記錄的內(nèi)容年、月、日。有的實驗還應注明室溫實驗名稱目的材料實驗方法，應注明引用參考文獻；結(jié)果：包括原始數(shù)據(jù)，圖，表，統(tǒng)計方法討論或小結(jié)

目前十頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點五、研究設(shè)計三要素處理因素（自變量）試驗對象（人、動物；器官、組織、細胞、分子）試驗效應（因變量）藥物、方法和模型的關(guān)系目前十一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點六、實驗設(shè)計的基本原則對照原則并行對照配對對照自身對照前后對照潛在對照目前十二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點六、實驗設(shè)計的基本原則隨機原則排除實驗者的主觀性，使每個實驗單位都有同等機會被分配到實驗組和對照組。重復原則實驗的取樣例數(shù)或?qū)嶒灤螖?shù)目前十三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

如何針對課題復習文獻目前十四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點1.站在巨人肩上看世界知識爆炸時代:廣博、交叉學科

知識廣博與深入、專業(yè)化間的矛盾〝開卷有益〞？目前十五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點2.按科研需要來復習文獻充分占有文獻〝方向〞─專業(yè)人員水平領(lǐng)域─專家水平課題─No.1專家水平目前十六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點2.按科研需要來復習文獻文獻分類書教科書:相關(guān),交叉學科的基礎(chǔ)知識專著編著(資料性)著作(文獻性)(方向)(領(lǐng)域)綜述資料性(方向)(領(lǐng)域)文獻性(領(lǐng)域,課題)Originalpaper課題領(lǐng)域(個別)Datapaper快報摘要會議匯編自己定位不要變,別被文獻牽著走目前十七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點3.如何看文獻精讀與瀏覽看懂:問題的提出(Background)目的設(shè)計思想與依據(jù)研究對象與方法重要結(jié)果結(jié)論與啟示熟悉程度方向:一般涉及;基礎(chǔ)知識;學科水準;當前重大進展與趨勢領(lǐng)域:了解焦點與熱點;已/正/將進行的課題課題:(全面)歷史現(xiàn)狀展望；主要方法、手段目前十八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點4.如何收集文獻檢索重要文獻;實驗室或?qū)W者追蹤;確定本學科的重要(核心)期刊分層次收集資料課題有關(guān)文獻;盡可能收集原著/快報;要新,全本領(lǐng)域非課題文獻;新綜述,影響大的原著本方向非本領(lǐng)域文獻:經(jīng)典專著/綜述不同方向相關(guān)知識:專著,教科書目前十九頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點5.文獻整理運用自己專業(yè)知識按照文獻的熱點與焦點參照相關(guān)綜述模式例TGFβ在腎纖維化中的意義(作用)

㈠背景知識

①腎纖維化

②TGFβ的理化特征

③TGFβ的生成與代謝、組織分布等

㈡腎纖維化病程中TGFβ的變化

①血漿的和腎組織的，蛋白與基因表達

②病程中的動態(tài)變化與臨床病理生理表現(xiàn)

的（相關(guān)）關(guān)系目前二十頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點5.文獻整理㈢TGFβ的生物學（腎）效應：整體，器官，細胞及分子效應

①外源或刺激內(nèi)源TGFβ的效應（在正常和疾病條件）

②拮抗或促失活的效應㈣TGFβ效應的機理

受體及細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導機理

TGFβ的基因表達和細胞表型改變的機理㈤腎臟疾病的TGFβ高/低表達的機理㈥TGFβ與其他已知腎纖維化因子間的關(guān)系（包括遺傳易感因素）目前二十一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點5.文獻整理㈦TGFβ參與腎纖維化發(fā)病的臨床意義：診斷，治療，預防策略此外，常用方法學和技術(shù)的整理

腎纖維化整體活離體模型；相關(guān)細胞的培養(yǎng)；細胞增殖表型轉(zhuǎn)變；膠元測定；

TGFβ受體表達與活性檢測……目前二十二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點三.如何撰寫文獻綜述目的學科帶頭人與學科骨干寫科研工作人員開題前寫科學情報人員寫研究生畢業(yè)論文(?)基層人員為寫而寫文獻性與資料性,大綜述與小專論目前二十三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點三.如何撰寫文獻綜述小專論內(nèi)容

審定好內(nèi)容與題目(如上述例子)

要有思路，有觀點，提煉科學問題，要告訴讀者什么？概述問題的提出--研究的歷史與背景--本問題(課題)的意義背景知識及相關(guān)基本知識（不要寫成教科書或講義）本專論要論述的主要內(nèi)容,注意從課題與背景聯(lián)系的學科高度分析小結(jié)存在的問題與今后的方向目前二十四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點三.如何撰寫文獻綜述資料處理按專業(yè)知識列好提綱;文獻(作的摘要)編號后按提綱歸類背景材料,基礎(chǔ)知識,立論依據(jù);權(quán)威甚或經(jīng)典;“教科書式或講義式”語言不同意見,學術(shù)觀點與資料如何處理資料的準確性,尤其是翻譯,講不清楚不如不講老課題文獻多,新課題文獻太少目前二十五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點三.如何撰寫文獻綜述如何表達自己的學術(shù)觀點:評述?自引?邏輯分析內(nèi)容集中,目標明確,不要廣證博引(與研究生論文不同)參考文獻:新(5年內(nèi)2/3);背景材料,

立論依據(jù);權(quán)威經(jīng)典;

專論內(nèi)容:新,反映進展,可引會議,摘要及個人咨詢,準確發(fā)表:刊登進展/綜述的專業(yè)雜志(如“進展”“國外醫(yī)學”);專業(yè)論文雜志;查閱國內(nèi)類似綜述有無,避免重復.按雜志稿約修改(留底)目前二十六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四.如何進行科研課題設(shè)計原則:目標明確;構(gòu)思新穎;立論依據(jù)充分;實驗方法恰當選題(科研目標,目的)目標具體:用實驗手段解決科學問題,問題是什么,攻關(guān)，攀科學高峰，“關(guān)”、“高峰”是什么,在哪里?(目的與手段,工具的關(guān)系)射箭中的,忌打哪兒指哪兒，看看有什么變化，研究甚少，填補空白等。“三定”基礎(chǔ)上明確該課題的學科地位(與原創(chuàng)新關(guān)系);注意工作的積累和發(fā)展;可參考文獻整理中發(fā)現(xiàn)的和未解決的問題；將確定的目標逐字推敲寫下來。目前二十七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四.如何進行科研課題設(shè)計創(chuàng)新構(gòu)思Idea的來源:臨床;文獻;交叉學科啟迪;(學科發(fā)展)自己工作的連續(xù)性，避免被文獻牽著鼻子走，或趕時髦;新技術(shù)應用更重視新思維;交叉學科別交叉走了(轉(zhuǎn)向)目前二十八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四.如何進行科研課題設(shè)計設(shè)計思想合理,依據(jù)充分

如:證明某因子(TGFβ)是某疾病(腎纖維化)的發(fā)病因素.設(shè)計:疾病時高表達,與病程發(fā)展以及某些病理變化相關(guān)外源TGFβ或誘導內(nèi)源TGFβ高表達加劇發(fā)病拮抗TGFβ或抑制內(nèi)源TGFβ生成或促進滅活,消除疾病上述思路與文獻(or臨床)是否相悖?目前二十九頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四.如何進行科研課題設(shè)計方法恰當(方法先進)

方法選擇：目的決定方法選擇；實驗條件選方法；工作者熟練程度選方法；假設(shè)全部順利，所得結(jié)果能否達到設(shè)計目標？模型經(jīng)典與新建；是否需與人一致或接近；可行性；模型與分組適合研究目的為原則觀察指標多（廣）或少（精）好？明確每個指標的原理和意義背景指標如證實疾病模型復制成功的指標；反映質(zhì)控的指標；反映陰性或陽性的對照指標等→必須是肯定的結(jié)果探索性指標前瞻性指標目前三十頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四.如何進行科研課題設(shè)計建立操作程序落實每個方法預試成熟，建立程序設(shè)計實驗記錄與觀察內(nèi)容實驗記錄表；單項歸納表；匯總表目前三十一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

6.總體設(shè)計的預測評估

⑴預期結(jié)果陰性或陽性的解釋與再證實；審定設(shè)計能否達到目標

⑵預期結(jié)果追蹤深入研究的方向和可行性

⑶預期結(jié)果圖表設(shè)計（發(fā)表是否單?。?/p>

⑷預期結(jié)果的學術(shù)價值和地位

（寫論文的Introduction,M&M）目前三十二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點藥物效應的測量目前三十三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

一、藥物-受體相互作用的測定生化結(jié)合研究（全部受體）功能研究（部分受體）realtimemeasurementstoptimemeasurement目前三十四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點1種配體與3種不同受體群的相互作用

目前三十五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點配體與受體結(jié)合的特異性是相對的，與藥物濃度有關(guān)目前三十六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點二、放射受體結(jié)合研究20世紀60年代，125I-ACTH、125I-血管緊張素;preparation:制備基本原理：配基與受體特異性結(jié)合，以放射性強弱表示結(jié)合容量。與放免分析相似（1955年發(fā)明，Yalow）目前三十七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

放射配基結(jié)合過程圖解

目前三十八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點已知藥物濃度，可得到受體結(jié)合劑量-反應曲線加入大劑量非標記配基，封閉受體，得到非特異性結(jié)合相應公式計算非特異性結(jié)合、總結(jié)合固定配基濃度，改變受體量符合一級動力學：隨時間增加，結(jié)合達最大值；能被無藥物介質(zhì)逆轉(zhuǎn)目前三十九頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點受體結(jié)合研究時的平衡情形

目前四十頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

放射性配基結(jié)合實驗中不同水平的特異性結(jié)合

目前四十一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點特別注意點去除非特異性結(jié)合在一定濃度的敏感“窗”內(nèi)進行目前四十二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點三、功能性研究測定功能性反應方法多樣經(jīng)典生理反應酶活性第二信使水平反應、表達產(chǎn)物測定報告物質(zhì)（酶、基因等）目前四十三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點要求： 大的信-噪比：機體、儀器 基礎(chǔ)狀態(tài)穩(wěn)定辦法：找出衰減規(guī)律 設(shè)對照（不常用） 也必須在穩(wěn)定的“窗”內(nèi)進行目前四十四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

圖5

生物制備的穩(wěn)定窗

目前四十五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點不同受體制備進行實驗的前提敏感性和反應性不變（實際不可能）糾正系統(tǒng)不穩(wěn)定性平衡周期達穩(wěn)態(tài)對照目前四十六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

圖6

移動基線對劑量-反應曲線的影響

目前四十七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點激動劑作用后指數(shù)性細胞死亡對劑量－反應曲線的影響

目前四十八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點組織失去敏感性后，最大反應也丟失一個系統(tǒng)不太可能充當不同組織間基礎(chǔ)反應變化的良好對照數(shù)據(jù)必須在穩(wěn)定的“窗”內(nèi)進行，避免繼發(fā)作用靠一個劑量得到的反應不能下結(jié)論目前四十九頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖8生物制備反應窗

目前五十頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖9劑量－反應曲線形狀的改變顯示繼發(fā)反應

目前五十一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點生物放大的基本原則具有終端器官反應的細胞體系具有很大價值目前五十二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖10細胞代謝指示物氫離子從細胞釋放調(diào)控示意圖

目前五十三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點四、藥物反應的表述基礎(chǔ)與給藥狀態(tài)的差值原發(fā)反應變異性較大利用差值較好有多種轉(zhuǎn)換方法目前五十四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖11兩種描述藥物反應的方法

目前五十五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖12生物制備劑量－反應曲線誤差范圍

目前五十六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點

實驗的藥物數(shù)據(jù)的不同處理直接反應以對數(shù)濃度作圖有較高精確性藥物反應減去基礎(chǔ)值降低反應測量誤差反應值以基礎(chǔ)水平的百分數(shù)表示變異大以最大反應值的百分數(shù)表示較好；需要較少的實驗次數(shù)目前五十七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖13直接反應以對數(shù)濃度作圖

目前五十八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖14從圖13顯示的數(shù)據(jù)所計算的delta反應

目前五十九頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖15反應以基礎(chǔ)值的百分率表示

目前六十頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖16Delta反應以最大delta反應的百分數(shù)計算

目前六十一頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點圖17連續(xù)累積劑量－反應曲線

目前六十二頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點研究結(jié)果的表達目前六十三頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點一、研究文章的撰寫確定投哪本雜志文章的質(zhì)量與雜志的檔次要相稱發(fā)表周期目前六十四頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點論文撰寫基本格式與要求Bacon:Writingmakesanexactman.目前六十五頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點二、基本要求值得研究數(shù)據(jù)真實、經(jīng)過統(tǒng)計學處理按照國際科學界公認的格式編排文體要好，含義確切、合乎邏輯目前六十六頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點1978年1月美、加、英醫(yī)學期刊編輯：《溫哥華宣言》1991年國際醫(yī)學期刊編輯委員會修改BrMedJ1991;302:338-3411995年

人民軍醫(yī)出版社《醫(yī)學生物學文獻方法學》目前六十七頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點題目（title）作者姓名（author’sname）作者單位地址（address）摘要（abstract）關(guān)鍵詞（keywords）引言（introduction）Nature例外材料與方法（materialsandmethods）結(jié)果（results）討論（discussion）總結(jié)或結(jié)論（conclusionorsummary）致謝（acknowledgement）參考文獻（reference）目前六十八頁\總數(shù)七十四頁\編于二十三點題目（title）：短！具體；簡潔：通常不超過20個字確切；通常在論文寫完后確定“甲氨蝶呤加四物湯治療白血病46例”避免“關(guān)于……的研究、調(diào)查、分析、觀察”作者姓名（author’sname）：第一作者……correspondence;contributedequally作者單位地址（address）目前六