試談當(dāng)前乳腺癌診治中的病理學(xué)新發(fā)展

當(dāng)前乳腺癌診治中的病理學(xué)新發(fā)展關(guān)鍵詞：乳腺癌；病理學(xué)乳腺癌是我國(guó)女性常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，其死亡率僅次于肺癌而位居第二位，且發(fā)病率呈直線上升趨勢(shì)。據(jù)上海市統(tǒng)計(jì)，乳腺癌發(fā)病率已從1972年的17/10萬(wàn)上升至1993年的37/10萬(wàn)。近年來(lái)，在有關(guān)乳腺癌的病因、診斷、治療、預(yù)后判斷及乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的分子生物學(xué)變化等的研究出現(xiàn)了許多新的進(jìn)展。一、關(guān)于乳腺癌的早期診斷乳腺癌的早期診斷需要病理科、外科和放射科醫(yī)師的緊密協(xié)作：以往的早期乳腺癌病人多因能觸及腫塊，而腫塊較小，被認(rèn)為尚處于臨床早期，實(shí)際上這并非真正意義上的早期診斷。早期診斷應(yīng)是針對(duì)在臨床上觸及不到腫塊的乳腺癌病人而言，即亞臨床狀態(tài)。乳腺X線檢查是早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌的重要方法。某些臨床觸及不到的病變，在X線片上可表現(xiàn)為小結(jié)節(jié)、微小鈣化或局限致密區(qū)，結(jié)合病理學(xué)檢查可在這些病變中發(fā)現(xiàn)早期乳腺癌。乳腺X線立體定位穿刺活檢是90年代開(kāi)展起來(lái)的新技術(shù)。它是在常規(guī)乳腺X線片的基礎(chǔ)上，通過(guò)在電子計(jì)算機(jī)立體定位儀的導(dǎo)引下，將乳腺穿刺針直接刺入可疑病變區(qū)，取得活體組織標(biāo)本，進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。該技術(shù)具有先進(jìn)、定位準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單、安全可靠、病人痛苦小，準(zhǔn)確率高的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用此技術(shù)為常規(guī)檢查無(wú)法確診的某些乳腺微小病變的早期診斷開(kāi)辟了廣闊的前景。對(duì)病理醫(yī)師來(lái)說(shuō)，該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于彌補(bǔ)了外科切取活檢和針吸細(xì)胞學(xué)檢查定位困難的不足。由于所取標(biāo)本有一定體積，組織量多，可進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，所以?xún)r(jià)值頗大，既可為臨床基礎(chǔ)研究提供更多的資料，又可望提高乳腺微小病變的早期診斷水平。立體定向進(jìn)行乳腺活檢的方法也在日益更新，如由傳統(tǒng)的傳統(tǒng)針芯活檢(conventionalcorebiopsy，CCB)，真空輔助針芯活檢(vacuum-assistedcorebiopsy，VACB)發(fā)展到今日的高級(jí)乳腺活檢(advancedbreastbiopsyinstrumentation，ABBI)［1］。ABBI具有一次性取材，組織塊大且結(jié)構(gòu)完整的特點(diǎn)，可使病理診斷的準(zhǔn)確性大大提高。相比較而言，傳統(tǒng)的細(xì)針穿刺活檢只能依據(jù)細(xì)胞學(xué)特征做診斷。但需要注意的是，這些檢查不適用于判斷腫瘤邊緣是否切除干凈以及不典型增生、放射狀疤痕的診斷。病理學(xué)上，導(dǎo)管上皮不典型增生（ADH）與導(dǎo)管內(nèi)癌（DCIS）、小葉不典型增生（ALH）與小葉原位癌（LCIS）的鑒別一直是一個(gè)難題。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，ADH增生的單形性圓形細(xì)胞累及的導(dǎo)管或聚集的小導(dǎo)管橫切面不應(yīng)超過(guò)2mm，有時(shí)肌上皮也參與增生。當(dāng)增生時(shí)導(dǎo)管內(nèi)有少量癌細(xì)胞特征出現(xiàn)，而整個(gè)結(jié)構(gòu)仍象典型的導(dǎo)管內(nèi)上皮增生時(shí)，仍應(yīng)診斷為ADH。按Page等的標(biāo)準(zhǔn)［2］，DCIS應(yīng)至少在2個(gè)導(dǎo)管腔內(nèi)具有下列特點(diǎn)：(1)細(xì)胞一致性；(2)細(xì)胞之間腔隙圓而規(guī)則或形成微乳頭的細(xì)胞形態(tài)一致；（3）細(xì)胞核深染。ALH與LCIS相比細(xì)胞較粘著。ALH往往只是部分小葉單元被累及，而LCIS常累及1個(gè)或多個(gè)小葉單元的大部分。ALH腺泡腔不完全消失，仍清晰可見(jiàn)，而LCIS腺泡腔常完全消失。不典型增生與原位癌在形態(tài)上有許多相似之處，且有報(bào)道在ADH中發(fā)現(xiàn)部分上皮細(xì)胞的克隆性增殖，因此從形態(tài)上鑒別不典型增生與原位癌往往帶有一定的主觀性。乳腺癌的早期診斷依賴(lài)分子生物學(xué)和分子流行病學(xué)新技術(shù)：通過(guò)傳統(tǒng)病理形態(tài)來(lái)早期診斷乳腺癌的概念已逐步發(fā)生了改變。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，乳腺癌的研究由細(xì)胞病理學(xué)進(jìn)入分子病理學(xué)領(lǐng)域：乳腺癌中越來(lái)越多的分子缺陷被揭示，許多分子生物學(xué)技術(shù)被用于乳腺癌的早期診斷，分子病理診斷已逐步成為乳腺癌診斷的一個(gè)重要內(nèi)容。國(guó)外已有報(bào)道，通過(guò)針吸活檢組織或細(xì)胞學(xué)穿刺進(jìn)行乳腺可疑病變中微量DNA或RNA的提取，并從分子水平檢測(cè)基因異常，可早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌。較多的報(bào)道還包括對(duì)有家族性乳腺癌病史的特定人群進(jìn)行BRCA1、BRCA2基因異常的檢測(cè)［3］，對(duì)高危人群進(jìn)行端粒酶活性、8q染色體短臂缺失的檢測(cè)［4］等。有家族性乳腺癌病史的女性，如果攜帶BRCA1基因突變，在40歲左右約20%發(fā)生乳腺癌，到50歲左右達(dá)51%，70歲左右達(dá)87%。檢測(cè)BRCA1基因的胚系突變，有利于高危人群的早期發(fā)現(xiàn)和早期治療，降低乳腺癌的死亡率。但從我國(guó)國(guó)情來(lái)看，大規(guī)模普查費(fèi)用昂貴，且有家族史的乳腺癌病人BRCA1、BRCA2基因突變率報(bào)道不一，因此某些檢測(cè)的實(shí)用價(jià)值還需探討。對(duì)普查陽(yáng)性者如何進(jìn)一步處理、對(duì)這些人由此產(chǎn)生的心理壓力及某些倫理問(wèn)題該如何解決等還需進(jìn)行大量深入的工作。二、乳腺癌的預(yù)后指標(biāo)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移仍是目前判斷預(yù)后和制定治療方案的主要參考指標(biāo)。然而單靠淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況來(lái)評(píng)估病人的預(yù)后，將影響對(duì)相當(dāng)數(shù)量病人的正確判斷。目前已經(jīng)明確，不利于乳腺癌預(yù)后的因素包括Ki-67、增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）等增殖指數(shù)增高，c-erbB-2蛋白的過(guò)度表達(dá)、p53基因突變、癌胚抗原（CEA）、組織蛋白酶D陽(yáng)性等；有利于預(yù)后的因素有雌激素受體(ER)、PS2陽(yáng)性、nm23高表達(dá)、p27高表達(dá)等。國(guó)際上最新報(bào)道抗細(xì)胞凋亡的多功能蛋白BAG-1［5］、纖維蛋白溶酶原激活抑制劑-1(PAI-1)［6］、血漿血小板反應(yīng)蛋白（PTSP）也是與乳腺癌預(yù)后獨(dú)立相關(guān)的因素。但是直到目前為止，即使某些出現(xiàn)頻率較高的染色體、基因結(jié)構(gòu)改變或蛋白表達(dá)的異常，也還沒(méi)完全成為適合于臨床常規(guī)應(yīng)用的檢測(cè)指標(biāo)。其原因有如下幾方面：（1）乳腺癌的組織學(xué)類(lèi)型較多，而各種報(bào)道中分析的腫瘤類(lèi)型不盡相同。（2）檢測(cè)的預(yù)后指標(biāo)種類(lèi)廣泛，包括蛋白或其他抗原、染色體、mRNA、DNA等。（3）各種檢測(cè)技術(shù)的規(guī)范性還欠佳。（4）研究標(biāo)本來(lái)自新鮮組織還是細(xì)胞系，是否甲醛固定、石蠟包埋組織，也可能造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異。預(yù)后因素研究的種種復(fù)雜性，要求我們立足于大樣本材料，用統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范化的技術(shù)進(jìn)行分析，必要時(shí)可開(kāi)展多單位、多部門(mén)的協(xié)作。我們認(rèn)為c-erbB-2、ER、Ki-67、DNA倍體數(shù)這幾個(gè)指標(biāo)的臨床意義明確，檢測(cè)方法穩(wěn)定可靠、簡(jiǎn)便易行，一般病理醫(yī)師均能掌握，應(yīng)加以開(kāi)展普及。三、乳腺癌的淋巴結(jié)清掃——前哨淋巴結(jié)的組織病理學(xué)檢測(cè)早期診斷手段的提高使得大量早期乳腺癌病人被發(fā)現(xiàn)。對(duì)于早期乳腺癌，腋窩淋巴結(jié)檢查雖然可以了解乳腺癌的預(yù)后情況，但意義不大，尤其是對(duì)于那些體檢未捫及腋窩淋巴結(jié)者需要尋找新的預(yù)后判斷方法。前哨淋巴結(jié)活檢是應(yīng)運(yùn)而生的一種新方法［7，8］。所謂前哨淋巴結(jié)即引流某一原發(fā)性腫瘤的第一站淋巴結(jié)（乳腺癌中包括腋窩淋巴結(jié)或內(nèi)側(cè)象限乳腺癌病人的乳內(nèi)淋巴結(jié)）。它接受淋巴液的引流量最大，最容易含有轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞。由于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是一個(gè)逐步的過(guò)程，因此前哨淋巴結(jié)的情況可以反映整個(gè)腋窩淋巴結(jié)的狀態(tài)。如果前哨淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移，則應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行腋窩淋巴結(jié)清掃，如果前哨淋巴結(jié)陰性，則不進(jìn)行清掃。具體操作步驟如下：向腫瘤四周注射一種放射性物質(zhì)或藍(lán)色染料,一定時(shí)間后在腫瘤同側(cè)腋窩下部作一切口，切除攝取了藍(lán)色染料或放射性物質(zhì)的淋巴結(jié)（即前哨淋巴結(jié)），進(jìn)行石蠟切片判斷有無(wú)轉(zhuǎn)移［9］。前哨淋巴結(jié)的狀態(tài)與整個(gè)腋窩淋巴結(jié)是否有轉(zhuǎn)移高度一致，兩者的吻合率可達(dá)95%～98%。而且在某些情況下，對(duì)前哨淋巴結(jié)進(jìn)行連續(xù)切片、免疫組織化學(xué)檢測(cè)和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)，可在常規(guī)腋窩淋巴結(jié)清掃沒(méi)有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中找到轉(zhuǎn)移。不過(guò)在應(yīng)用前哨淋巴結(jié)活檢進(jìn)行冷凍切片診斷時(shí)可出現(xiàn)一定的假陰性，因?yàn)橐恍┪⑿〉霓D(zhuǎn)移癌可能會(huì)被忽略。國(guó)際上對(duì)該項(xiàng)工作的開(kāi)展已較為廣泛，但在國(guó)內(nèi)僅少數(shù)醫(yī)療單位剛起步。我們倡議用前哨淋巴結(jié)切除來(lái)代替常規(guī)的淋巴結(jié)清掃術(shù)。這樣可以使某些不必要進(jìn)行淋巴結(jié)清掃的病人避免因此而帶來(lái)的一些并發(fā)癥，使腋窩淋巴結(jié)切除由原來(lái)的治療性切除轉(zhuǎn)變?yōu)樵\斷性取材。四、乳腺癌骨髓微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)骨髓是乳腺癌轉(zhuǎn)移的常見(jiàn)部位，而且常常是乳腺癌發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移首先累及的器官。目前常規(guī)的骨髓細(xì)胞學(xué)檢查往往不能發(fā)現(xiàn)早期病人骨髓中的微轉(zhuǎn)移，骨掃描、骨骼的X線檢查等對(duì)早期骨髓微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)意義也不大。如何提高骨髓微轉(zhuǎn)移的檢出率具有重要意義。1．應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)乳腺癌骨髓微轉(zhuǎn)移：乳腺癌為上皮性腫瘤，而骨髓屬間葉來(lái)源，本身無(wú)上皮性抗原的表達(dá)，故可應(yīng)用針對(duì)上皮抗原如細(xì)胞角蛋白、上皮膜抗原（EMA）等單克隆抗體進(jìn)行染色。Osborne等［10］以乳腺癌細(xì)胞系（MCF-7）按不同細(xì)胞濃度與正常骨髓細(xì)胞相混合，然后進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，能檢測(cè)出2×105骨髓細(xì)胞中的一個(gè)癌細(xì)胞。利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)乳腺癌微轉(zhuǎn)移有一定的局限性，如某些正常骨髓細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)不同程度的交叉反應(yīng)，腫瘤細(xì)胞表面抗原表達(dá)的不均一性也可能影響對(duì)轉(zhuǎn)移細(xì)胞的正確評(píng)判。故在實(shí)際應(yīng)用中，目前用多種抗體組成所謂的“雞尾酒方法”，既可降低假陰性率，又可減少假陽(yáng)性。2．利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)乳腺癌骨髓微轉(zhuǎn)移：RT-PCR在檢測(cè)腫瘤隱匿性微小轉(zhuǎn)移灶方面，無(wú)論是敏感性還是特異性均優(yōu)于以往的方法。與免疫組織化學(xué)染色相比，敏感性可增加10～100倍。Datta等［11］運(yùn)用RT-PCR檢測(cè)外周血和骨髓中細(xì)胞角蛋白19（CK19）的mRNA，結(jié)果6例淋巴結(jié)陰性的Ⅳ期乳腺癌病人中5例發(fā)現(xiàn)骨髓微轉(zhuǎn)移。Schoenfeld等［12］將MCF-7細(xì)胞與正常骨髓細(xì)胞按不同濃度混合，結(jié)果免疫組織化學(xué)能檢測(cè)出1/105的MCF-7細(xì)胞，而RT-PCR方法能測(cè)出1/106的MCF-7細(xì)胞，其檢測(cè)敏感性比免疫組織化學(xué)提高10倍。當(dāng)然，RT-PCR檢測(cè)最好能與免疫組織化學(xué)相結(jié)合，這樣可以給腫瘤細(xì)胞以正確的定位，排除上皮細(xì)胞污染所導(dǎo)致的假陽(yáng)性。骨髓微轉(zhuǎn)移與乳腺癌的預(yù)后、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性。確定具有早期復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)的高危人群，在其發(fā)展為臨床轉(zhuǎn)移之前，給予積極輔助治療，可以降低乳腺癌病人的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移率。此外，骨髓微轉(zhuǎn)移檢測(cè)還可作為判定治療療效的指標(biāo)和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的依據(jù)。五、乳腺癌治療的新方法——抗HER2/neu單克隆抗體除傳統(tǒng)治療方式外，目前國(guó)際上最新的治療方式是針對(duì)HER2/neu基因（即c-erbB2基因）位點(diǎn)的生物治療。20％～30％乳腺癌病人有HER2/neu基因的過(guò)度表達(dá)，此類(lèi)腫瘤更具浸潤(rùn)性，對(duì)化療較不敏感且容易轉(zhuǎn)移［12］。美國(guó)已推出經(jīng)FDA批準(zhǔn)的新藥Herceptin，這是第一個(gè)已在臨床應(yīng)用的人抗HER2/neu單克隆抗體［13］。臨床研究顯示它能有效抑制體內(nèi)HER2/neu高表達(dá)乳腺癌細(xì)胞納ぃ饗匝映ER2/neu陽(yáng)性乳腺癌病人的生存期。每周注射抗細(xì)胞外HER2/neu蛋白的單克隆抗體，對(duì)于13％HER2/neu過(guò)度表達(dá)的乳腺癌有效。若同時(shí)給予HER2/neu抗體和順鉑治療，總有效率提高至25％，且部分療效將保持一年以上。Burris總結(jié)了Herceptin與Docetaxel聯(lián)合應(yīng)用的效果，總有效率可達(dá)85.7%。HER2/neu單克隆抗體新治療方式的出現(xiàn)既給乳腺癌病人帶來(lái)了希望，同時(shí)也對(duì)病理醫(yī)師提出了嚴(yán)峻的要求。該項(xiàng)治療費(fèi)用昂貴，病理醫(yī)師應(yīng)盡可能提供準(zhǔn)確的HER2/neu基因狀態(tài)，以指導(dǎo)選用最佳的治療方案。目前常用的HER2/neu基因檢測(cè)方法有免疫組織化學(xué)、熒光原位雜交(FISH)和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)［14］。FISH能直接和準(zhǔn)確地判斷HER2/neu基因是否存在擴(kuò)增，但較為昂貴和繁瑣。免疫組織化學(xué)因其簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)，已成為最常規(guī)的檢測(cè)方法，但其中有許多問(wèn)題應(yīng)該引起注意：首先免疫組化的判斷標(biāo)準(zhǔn)不一，使HER2/neu基因蛋白表達(dá)的檢測(cè)結(jié)果不一致，而且是否蛋白表達(dá)陽(yáng)性就可進(jìn)行Herceptin治療，還是需達(dá)到一定的陽(yáng)性程度后再進(jìn)行，目前尚無(wú)一致的結(jié)論。其次石蠟包埋，甲醛固定可能會(huì)對(duì)免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生一定的影響，造成假陰性。第三，采用不同公司的HER2/neu抗體，檢測(cè)結(jié)果也不完全相同。因此，要作出準(zhǔn)確的HER2/neu基因狀態(tài)判斷，首先要對(duì)上述問(wèn)題進(jìn)行統(tǒng)一。Herceptin治療具有一定的心臟毒性，而且就我國(guó)研究現(xiàn)狀來(lái)看，要開(kāi)展此項(xiàng)治療在人力、物力和財(cái)力上消耗較大，有待進(jìn)一步的研究。參考文獻(xiàn)1WongAY,SalisburyE,BilousM.Recentdevelopmentsinstereotacticbreastbiopsymethodologies:anupdateforthesurgicalpathologist.AdvAnatPathol,2000,7:26-35.2PageDL,DupontWD,RogersLW,etal.Atypicalhyperplasticlesionsofthefemalebreast.Along-termfollow-upstudy.Cancer1985,55:2698-2708.3NeuhausenSL,OstranderEA.Mutationtestingofearly-onsetbreastcancergenesBRCA1andBRCA2.GenetTest,1997,1:75-83.4YaremkoML,RecantWM,WestbrookCA.Lossofheterozygosityfromtheshortarmofchromosome8isanearlyeventinbreastcancers.GenesChromosomesCancer,1995,13:186-191.5TangSC,ShahetaN,ChernenkoG,etal.ExpressionofBAG-1ininvasivebreastcarcinomas.JClinOncol,1999,17:1710-1719.6FoekensJA,PetersHA,LookMP,etal.Theurokinasesystemofplasminogenactivationandprognosisin2780breastcancerpatients.CancerRes,2000,60:636-643.7TurnerRR,OllilaDW,SternS,etal.Optimalhistopathologicexaminationofthesentinellymphnodeforbreastcarcinomastaging.AmJSurgPathol,1999，23:263-267.8SniderH,DowlatshahiK,FanM,etal.Sentinelnodebiopsyinthestagingofbreastcancer.AmJSurg,1998,176:305-310.9CrossinJA,JohnsonAC,StewartPB,etal.Gamma-probe-guidedresectionofthesentinellymphnodeinbreastcancer.AmSurg,1998,64:666-668；discussion669.10OsborneMP,WongGY,AsinaS,etal.Sensitivityofimmunocytochemicaldetectionofbreastcancercellsinhumanbonemarrow.CancerRes,1991,51:2706-2709.11DattaYH,AdamsPT,DrobyskiWR,etal.Sensitivedetectionofoccultbreastcancerbythereverse-transcriptasepolymerasechainreaction.JClinOncol,1994,12:475-482.12SchoenfeldA,KrugerKH,GommJ,etal.Thedetectionofmicrometastasesintheperipheralbloodandbonemarrowofpatientswithbreastcancerusingimmunohistochemistryandreversetranscriptasepolymerasechainreactionforkeratin19.EurJCancer,1997,33:854-861.13ShakS.Overviewofthetrastuzumab(Herceptin)anti-HER2monoclonalantibodyclinicalprograminHER2-overexpressingmetastaticbreastcancer.HerceptinMultinationalInvestigatorStudyGroup.SeminOncol,1999,26(Suppl12):71-77.14JimenezRE,WallisT,TabasczkaP,etal.DeterminationofHer-2/Neustatusinbreastcarcinoma:comparativeanalysisofimmunohistochemistryandfluorescentinsituhybridization.ModPathol,2000,13:37-45VEGF、CD34在乳腺癌中的表達(dá)研究時(shí)間：2007-11-2214:19:00來(lái)源：論文天下論文網(wǎng)姜乃光李秋霞單景軍張玉英石青嶺聽(tīng)【關(guān)鍵詞償】饒厭鉆免疫組織化使學(xué)格【摘要湖】琴悲目只的嘩溪催探討血管內(nèi)雄皮細(xì)胞生長(zhǎng)袋因子具（陽(yáng)vasc篩ular第endot嫌helia槽lgro妥wthf書(shū)acto坡r斷，把VEG彼F謊）與乳腺癌語(yǔ)血管生成及時(shí)臨床病理參袍數(shù)的關(guān)系君。設(shè)罵方稻法腰鏈禁采括用雞S-秩P營(yíng)免疫組喉化三法，檢搭測(cè)甜5煌4港例乳腺癌石融蠟標(biāo)本慕中肺VEG狼F滅蛋白的表達(dá)君及平均微血困管密度傅（得miscr均ovess質(zhì)elde著nsit解y擠，查MV殊D央）困。透惠結(jié)射果蘿鄰桂癌組織擠中紫VEG馳F防表達(dá)陽(yáng)性率叼為棉75.93神%式。蔽VEG角F媽表達(dá)土及滋MV驚D祝值與組織學(xué)鋒分級(jí)坐（檔P<0.0晉5滅）和淋巴結(jié)挑轉(zhuǎn)移密切相愈關(guān)務(wù)（街P<0.0解1催），而與組棉織學(xué)分型無(wú)驢關(guān)湖（等P>0.0寧5各）榨;VEG抖F受陽(yáng)性健組寫(xiě)MV將D刻值明顯高阿于啟VEG釋F恭陰性組鐮（返t=2.2叔2嘩0霧，繪P<0按.0黨5臉）酬。江鑄結(jié)羨論怕VEG驢F移與乳腺癌血峽管生成密切禾相關(guān)，并能竄促進(jìn)其生長(zhǎng)蜜、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)種移役。檢鴉測(cè)賢VEG拔F候和訓(xùn)MV利D碑可作為反映縱乳腺癌生物拼學(xué)行為的指低標(biāo)之一。持關(guān)鍵顛詞陵荒扮乳腺腫和瘤劣膛血管內(nèi)皮細(xì)散胞生長(zhǎng)因穴子越搖血管生焰成性將免疫組織化呀學(xué)洗漆及腫瘤的腳生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移起是一個(gè)多步槽驟的復(fù)雜過(guò)憑程，在很大巖程度上依賴(lài)蛛于腫瘤血管晶生成。目前婚的研究認(rèn)設(shè)為幫:攪血管內(nèi)皮細(xì)幟胞生長(zhǎng)因子爬（港vascu劇l殘aren造dothe辜lial濤growt謹(jǐn)hfac壘to扣r啄，叛VEG淡F械）是腫瘤血涌管生成過(guò)程初中作用最強(qiáng)配、特異性最菊高的促血管采生長(zhǎng)因靠子筑旨［掠1害］箭緣。筆者應(yīng)用債免疫組化法攀檢測(cè)耳乳腺癌組織井中兵VEG團(tuán)F仍和貌MV址D構(gòu)的表達(dá)情況俘，分擦析火VEG登F慢及微血管密喘度關(guān)（治m蘇iscro摔resse卻lden磨sit暑y嗽，辜MV帶D框）與乳腺癌傅各臨床病理究參烈數(shù)傘的關(guān)系，并雜為草臨床預(yù)后判讀定和治療提脂供進(jìn)一步的夏理論根據(jù)啦。添店呢牽1辯辮材料與方法醫(yī)銷(xiāo)育1.1鍛測(cè)標(biāo)本來(lái)?yè)踉唇睹策x取我院普谷外端科雪199姿6承～燥200親3弱年乳腺癌根妖治術(shù)或改良慕根治術(shù)切除剪標(biāo)際本嫩5鵝4興例。病理及釋臨床資料分眼析結(jié)泰果禁:瘡浸潤(rùn)性暑癌恰4折0愚例，其他特框殊類(lèi)型南癌頁(yè)1送4相例。組織學(xué)都分訴級(jí)認(rèn):躁Ⅰ私級(jí)妄9藍(lán)例網(wǎng)，輕Ⅱ可級(jí)員3武2誼例蔑，誘Ⅲ享級(jí)灰1哲3供例。有淋巴英結(jié)轉(zhuǎn)移攤者儉3普0儉例，無(wú)淋巴趟結(jié)轉(zhuǎn)移汗者革2晴4搏例?；颊呔霝榕?，年段齡連2游3礦～坊6磚8灰歲（平項(xiàng)均亭5妄2疤歲），術(shù)前捧均未經(jīng)任何級(jí)治療。龜棄危1.2雙車(chē)主要試早劑丈棍所含用命VEG青F營(yíng)、武CD3供4剝單克隆抗體取及超敏（鼠繩）劍S-朋P噴試劑盒，均跨購(gòu)自福州邁的新若生音物技術(shù)開(kāi)發(fā)娃公動(dòng)司。輪選仗1.3S斥-喝P笑免疫組化染浪色則亞操作步驟從利略。其中鼠稱(chēng)抗數(shù)人皂VEG佳F隱單克隆抗體酷采用高溫高恩壓進(jìn)行抗原欲修復(fù)。每次遇試驗(yàn)?zāi)ひ詷騊B投S惜緩沖液代替釋一抗作為陰捉性對(duì)照，以斧已隸知朝VEG比F話(huà)陽(yáng)性的切片振作為陽(yáng)性對(duì)感照。遵劫久1.4穴月結(jié)果判定鋤擴(kuò)罩牢VEG玩F吧表僑達(dá)也喂根據(jù)陽(yáng)性細(xì)際胞數(shù)及染色出強(qiáng)度進(jìn)行綜宣合判定，即療按螺5或%喊以上細(xì)胞漿用或細(xì)胞膜呈慧棕黃色染色選者跑為沒(méi)VEG嫌F燃蛋白表達(dá)陽(yáng)冒性。編囑樣犬MV斥D待計(jì)拘數(shù)功禍參貌照孔Maed亦a鋒等報(bào)送道但才［機(jī)2況］仆槍的方法，即叛低倍鏡下，祥全面觀辟察落CD3她4獎(jiǎng)染色陽(yáng)性的低血管，選取扭腫瘤微掘血隱管密度最高坦區(qū)距域，然后在饑高倍鏡下蒜（顧×難20誓0隱）選貓取屯5誘個(gè)不重復(fù)視守野進(jìn)行計(jì)數(shù)膨，求其平均眉數(shù)即作為該帝病例翁的表MV旺D切值。統(tǒng)計(jì)的縱微血管標(biāo)老準(zhǔn)匆:默單個(gè)的棕黃砌色內(nèi)皮細(xì)胞惹或內(nèi)皮細(xì)胞拾團(tuán)均計(jì)數(shù)為漿一個(gè)血侮管逼;臘肌層較厚及濟(jì)管腔紅細(xì)胞鑒數(shù)私>麻8雖個(gè)的血管不獲被計(jì)數(shù)。烘蜻勿1.5去宜統(tǒng)計(jì)學(xué)方碧法胳荒采糠用運(yùn)χ請(qǐng)2縱瓶檢驗(yàn)剪、姑t蛙檢驗(yàn)他、短F射檢驗(yàn)嶺及葛q妥檢驗(yàn)羅。磁隨濾候2下魚(yú)結(jié)果飄折束2.1V尺EG種F副蛋白表墾達(dá)告VEG依F枝蛋白定位于靜腫瘤細(xì)胞土胞漿及胞膜咐，陽(yáng)性表達(dá)朋為胞漿或胞候膜染為棕黃城色，呈彌漫輸或散在的顆棒粒狀。宮在桑5郊4唐例乳腺癌組蝕織中召，炎VEG拾F閑表達(dá)陽(yáng)抹性惕4千1駐例巷（徑75.93款%俗），癌間質(zhì)裁內(nèi)蹄皮賊細(xì)胞不表達(dá)堡或播呈弱陽(yáng)性表設(shè)達(dá)，癌旁組旬織幾乎不表屆達(dá)。同撿因2.2M洞V職D診檢遣測(cè)壟CD3橫4桃定位于血管提內(nèi)皮細(xì)胞胞段漿，呈棕黃貍色。所有的處病例的血管室內(nèi)皮細(xì)胞均質(zhì)為淺CD3奶4網(wǎng)染色陽(yáng)性。洗癌組鹿織貝MV淺D將值期1森1助～惠10貢6結(jié)個(gè)不等，平禮均為蘋(píng)（朵49化.5漿±摩25.炸4賴(lài)）個(gè)。窮切思2.3V殊EG白F執(zhí)蛋白表達(dá)逼及蛛MV冷D沉與臨床病理含參數(shù)間的關(guān)闊系屯著氧蜻羨組織學(xué)分可級(jí)落VEG恢F禁表達(dá)陽(yáng)性率纖及陶MV怕D龍值隨組織學(xué)列分級(jí)增高而劇逐漸增加鋼。狀VEG理F佳表達(dá)眾在呀Ⅰ甜級(jí)湊與謙Ⅱ矛級(jí)勞、裝Ⅰ悅級(jí)侍與煉Ⅲ小級(jí)間，差異驕具有擺顯著性千（她P玻均學(xué)<0.0載5磚）。單因素諸方差分析顯麗示，三組侮間嚇MV走D歌值比較差異軍具蛋有非常顯著領(lǐng)性逐（話(huà)P<0.0造1回）。兩組間耀比右較登:村Ⅰ壯級(jí)扎與適Ⅱ究級(jí)盜、子Ⅰ手級(jí)巾與視Ⅲ夏級(jí)間差異有罷顯著性焰（榆P<0.0近5嫌和像P<0.0普1牧）。時(shí)而令Ⅱ趣級(jí)縫與霧Ⅲ鉛級(jí)施間絕VEG能F瀉表達(dá)陽(yáng)性率洋及孟MV剛D欄值差異均無(wú)割顯著性末（虛P(yáng)>0.0頂5柏）。置渣被2.3.喉2鼠撓淋巴結(jié)轉(zhuǎn)腐移刊VEG替F管表達(dá)陽(yáng)性率究在有淋巴結(jié)椅轉(zhuǎn)移組明顯災(zāi)高于無(wú)淋巴扒結(jié)轉(zhuǎn)移組財(cái)（細(xì)P<0.0響1右）平。總MV源D腐值在兩組間乏差異也具有號(hào)非常顯著性當(dāng)（幫P<0.0搶1竄）。燦艱偏鴨枕組織學(xué)類(lèi)襖型勵(lì)VEG望F城表達(dá)陽(yáng)性率盡和染MV端D櫻值在兩個(gè)不淺同組織捷學(xué)類(lèi)型間差蹦異無(wú)顯著性更（尋P>0.0育5謎）。然廳貼2.4V匆EG男F易表達(dá)對(duì)與嫂MV慚D看值的關(guān)惰系罩VEG朽F當(dāng)表達(dá)陽(yáng)性組為的址MV學(xué)D刺值明顯高墾于惹VEG嫌F糊表達(dá)陰性組蹄（排P<0.0臟5兇）葛。銅麗申汽3立肥討論息暈技VEG籠F闖是目前研究國(guó)較為深入的說(shuō)促血管生成搖因子，對(duì)腫隸瘤基質(zhì)血管擔(dān)形成及腫瘤雖生物學(xué)行為與均有重要影磨響帝。肢VEG殘F(tuán)細(xì)也稱(chēng)血管滲華透因子厚（誕VP筒F鵝），是特異訊性的血管內(nèi)暮皮細(xì)胞刺激扎因子，它與璃血管內(nèi)皮細(xì)們胞的相應(yīng)受分體結(jié)合，刺皇激血管內(nèi)皮擇細(xì)胞的增殖黑，同時(shí)還可扁促進(jìn)血管內(nèi)聾物質(zhì)的泄露笨，吉導(dǎo)致血管形隔成和新的基挺質(zhì)形成，為委腫瘤的浸潤(rùn)厘和轉(zhuǎn)移提供炒了合適的基膊礎(chǔ)。大量沙的實(shí)驗(yàn)研究投證鉛實(shí)抹嬌［射3沸～旋5互］說(shuō)泳，幾乎所有賊的惡性腫瘤歉都表達(dá)較高攻水平漸的某VE浮G嘆F拳，而在周?chē)[正常組織中貴無(wú)或僅有極師低水平的表剖達(dá)僚遇［繞6暈］遮擴(kuò)，因此可以促說(shuō)凝VEG埋F古對(duì)腫瘤組織國(guó)具有良好的巨特異性。本姻試驗(yàn)結(jié)果顯怠示，趕在民5怒4編例乳腺癌中差，部VEG燕F湊表達(dá)陽(yáng)性率雨占伸75.93抹%火，而癌旁組薯織陰性，提蜜示腫瘤細(xì)胞非可分岡泌盼VEG弟F規(guī)，通揉過(guò)行VEG鼠F袖刺激微血管劉形成，腫瘤伯增殖速度加你快，反映了通惡性腫瘤的庭特征師。撤To孫i測(cè)等的研究也跌證實(shí)詢(xún)了柴VEG玻F描表達(dá)與血管桿生成過(guò)程及維乳腺癌預(yù)后柳不良有關(guān)。房另外，我們叢發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)掀皮芽細(xì)胞不表達(dá)落或個(gè)別呈弱訪陽(yáng)性表達(dá)，腫與文獻(xiàn)一些各報(bào)道相似，保進(jìn)一步證實(shí)梨了女VEG除F耕主要以旁分尚泌途徑作用邀于血管內(nèi)皮舟細(xì)胞的推測(cè)說(shuō)。風(fēng)腫瘤細(xì)成胞罩的崖微血管數(shù)量卻是殖患者預(yù)后的饞危險(xiǎn)因素徑。別Wei-d辛ne筍r追等的研究發(fā)氏現(xiàn)濾:幫乳腺浸潤(rùn)性淚癌間質(zhì)中，效具有突出的誦血管成分者份更具有侵襲制性。本研究戰(zhàn)顯灑示屬VEG揀F咸表達(dá)伶和痰MV袍D蹈值均隨組織投學(xué)分級(jí)的增臨高和淋巴結(jié)郊的轉(zhuǎn)移而明搭顯增加，與化多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)腳道結(jié)果一致渠，反映洲了坡VEG伏F志、蹦MV副D抖與腫瘤侵襲鞠和轉(zhuǎn)移的關(guān)格系極為密切論，提示血管簡(jiǎn)形成是乳腺驢癌發(fā)生轉(zhuǎn)移扛的重要條件瓣。已有研究突表替明扎VEG畢F求與散MV錦D宜值呈正相關(guān)手。本研究貪中么4儲(chǔ)6帥例乳腺癌組冒織余VEG戲F梢陽(yáng)性表達(dá)端組擾MV賀D炒值明顯高于問(wèn)陰性表達(dá)組奉，顯示了腫江瘤組織盆中匙VE純G脖F康狀態(tài)侮與羞M(jìn)V辟D賤值的密切關(guān)擊系，說(shuō)械明盜VEG曬F咸可以通過(guò)促籃進(jìn)乳腺癌血演管形成尾，演從而在腫瘤勉發(fā)是生、發(fā)展和瀉轉(zhuǎn)移過(guò)程中俗發(fā)揮重要作券用，這不僅潔為我們進(jìn)一銅步認(rèn)識(shí)腫瘤拐生長(zhǎng)、浸潤(rùn)菌提供了理論洪依據(jù)，對(duì)進(jìn)均一步探討腫圓瘤的預(yù)后及允治療也具有醫(yī)重要的意義皇。晚綜上所型述悼，貝VEG漢F富可促進(jìn)乳腺錢(qián)癌血管形成遵，進(jìn)而促進(jìn)忙乳腺癌的葵生長(zhǎng)、浸潤(rùn)位和轉(zhuǎn)移鐮。蠻VEG驅(qū)F機(jī)、探MV特D予可作為反映般乳腺癌生物嚴(yán)