病理技術(shù)的規(guī)范化發(fā)展_第1頁(yè)
病理技術(shù)的規(guī)范化發(fā)展_第2頁(yè)
病理技術(shù)的規(guī)范化發(fā)展_第3頁(yè)
病理技術(shù)的規(guī)范化發(fā)展_第4頁(yè)
病理技術(shù)的規(guī)范化發(fā)展_第5頁(yè)
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(優(yōu)選)病理技術(shù)的規(guī)范化發(fā)展目前一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

回顧過(guò)去,病理學(xué)的重大發(fā)現(xiàn),無(wú)一不是新技術(shù)的發(fā)明和應(yīng)用的結(jié)果。同時(shí)新技術(shù)的應(yīng)用,也受到病理學(xué)診斷水平和科研能力的制約。目前二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

目前,我國(guó)病理技術(shù)主要還是以常規(guī)HE、特染和免疫組化為主,整體水平并不高,處于中等以下水平。在講規(guī)范化的前面,我想先分析一下我國(guó)病理科存在的問(wèn)題:目前三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)一、技術(shù)員存在的問(wèn)題:

目前四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

(1)技術(shù)員隊(duì)伍整體素質(zhì)不高,學(xué)歷偏低。大多數(shù)病理科技術(shù)員都是中專畢業(yè),也有的是由工人轉(zhuǎn)的,有的是由護(hù)士或其它專業(yè)轉(zhuǎn)的。

目前五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

我反對(duì)唯學(xué)歷論,學(xué)歷并不能完全代表一個(gè)人的能力,但在大多數(shù)情況下,學(xué)歷還是能力的體現(xiàn)。經(jīng)歷了大學(xué)或研究生的培養(yǎng)和學(xué)習(xí),他們的知識(shí)面和考慮問(wèn)題的思路都不一樣,他們更有發(fā)展?jié)摿Α?/p>

目前六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)(2)、在主觀上不求上進(jìn)者甚多,我這樣說(shuō)會(huì)引起技術(shù)員的公憤,但事實(shí)的確如此,沒(méi)有理想,不思改進(jìn),做一天算一天,已是很多技術(shù)員的通病。這就和我們的體制有關(guān),只有通過(guò)崗位競(jìng)聘,才會(huì)讓技術(shù)員認(rèn)識(shí)到問(wèn)題的嚴(yán)重性。目前七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

(3)缺少正規(guī)的培養(yǎng)和學(xué)習(xí)的機(jī)會(huì),很多技術(shù)員的技術(shù)都是師傅帶徒弟式的方法教的,也有的自學(xué)了;有的盡管出去進(jìn)修了,但學(xué)回來(lái)的并不一定是正確的。缺少相互交流的機(jī)會(huì),技術(shù)會(huì)議少,技術(shù)員出來(lái)的機(jī)會(huì)就更少。

目前八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)(4)缺少比較:我到過(guò)很多片子做的很差的單位,我發(fā)現(xiàn)醫(yī)生、技術(shù)員的自我感覺都很好,認(rèn)為自己做的很不錯(cuò),對(duì)“好”沒(méi)有概念,如果不知道優(yōu)秀的片子怎么樣,那么對(duì)切片質(zhì)量就不會(huì)有一個(gè)正確的認(rèn)識(shí)。

目前九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

有的技術(shù)員出去學(xué)習(xí),也是走馬觀花,覺得沒(méi)什么好學(xué)的,別人做的和自己沒(méi)什么不一樣。諸不知每一個(gè)人的動(dòng)作都有細(xì)微的差異,正因?yàn)檫@些細(xì)微的差異,導(dǎo)致了每個(gè)人切片質(zhì)量的不一樣。

目前十頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

還有一些技術(shù)員,把一些不規(guī)范的甚至是錯(cuò)誤的東西當(dāng)成了經(jīng)驗(yàn)來(lái)宣傳、使用和推廣。

目前十一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)(5)人的惰性當(dāng)技術(shù)發(fā)展到一定階段,或者做了一段時(shí)間后,就會(huì)慢慢的產(chǎn)生惰性,墨守成規(guī),不思更新,好的規(guī)章制度也會(huì)慢慢的消失,然后固步自封,業(yè)務(wù)水平停頓甚至倒退。目前十二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)(6)不能正確擺正自己的位置。程天民院士曾經(jīng)說(shuō)過(guò),診斷與技術(shù)是二個(gè)輪子,缺一不可,互為依存。我認(rèn)為這個(gè)說(shuō)法不夠確切,容易讓人主次不分。醫(yī)生與技術(shù)員的風(fēng)險(xiǎn)與價(jià)值是不能等同的。

目前十三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)有的技術(shù)員什么事情都要和醫(yī)生比,當(dāng)二者出現(xiàn)差異后,醫(yī)技關(guān)系就開始緊張,有的就和醫(yī)生頂著干,有的自暴自棄,也有的目空無(wú)人,孤芳自賞。

目前十四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)我覺的任何事物都有主次,紅花總要綠葉配,但不能因?yàn)榫G葉重要就可以代替紅花。

目前十五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)病理科也是一樣,醫(yī)生是主角,技術(shù)員是配角,技術(shù)員就是要配合醫(yī)生做好工作,你既然干了技術(shù)這個(gè)工作,就應(yīng)該有這樣的思想準(zhǔn)備,應(yīng)該正確的面對(duì)現(xiàn)實(shí)。病人來(lái)看病,總是沖著醫(yī)生的診斷水平來(lái)的,不會(huì)因?yàn)槟愕钠幼龅煤脹_著你來(lái)。

目前十六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)我覺得病理科更像一輛火車:主任是車頭,醫(yī)生是車箱,技術(shù)員是火車的輪子。技術(shù)是決定火車額定速度的動(dòng)力。最終火車開的好不好,還要靠大家齊心協(xié)力。

目前十七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)常聽技術(shù)員說(shuō)現(xiàn)在技術(shù)員的地位越來(lái)越低了,于是就感到技術(shù)工作沒(méi)前途。

我想這有二方面的因素:第一,你的工作是否已經(jīng)做好。

目前十八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)第二,隨著社會(huì)的發(fā)展,改革的深入,對(duì)知識(shí)重視,醫(yī)生與技術(shù)員之間的差異會(huì)增大,我想這也是正常的,我們不是整天叫中國(guó)要尊重知識(shí)嗎,不能因?yàn)閷?duì)自己不利就不滿意了,我們只有服從這個(gè)社會(huì),而不能叫社會(huì)服從我們。目前十九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)人與人、工作與工作之間由于機(jī)遇不同,性質(zhì)不同,社會(huì)地位就會(huì)不同,沒(méi)必要比來(lái)比去。但如果你不用心去做每一件事,任何一個(gè)工作對(duì)你來(lái)說(shuō)都不會(huì)有好前途。只要你把本職工作做好了,別人就會(huì)尊重你。工作只有分工不同,沒(méi)有貴賤之分。目前二十頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)在國(guó)外,很多國(guó)家的病理科技術(shù)員要比醫(yī)生早上班4個(gè)多小時(shí),也就是說(shuō)在醫(yī)生到科前,你就要把昨天取材的組織做好,放在他的桌上。我想遲早,中國(guó)也會(huì)走上這條路。工作是一個(gè)謀生的手段,敬業(yè),也是為了更好的保住自己的飯碗。目前二十一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)二、醫(yī)生的原因:目前二十二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

很多人會(huì)說(shuō),技術(shù)員工作做的不好,和醫(yī)生沒(méi)什么關(guān)系,其實(shí)不然。最簡(jiǎn)單的如取材,如果醫(yī)生取材厚薄不均,組織就處理不好,HE切片和免疫組化質(zhì)量都會(huì)有影響。

目前二十三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)(1)醫(yī)生工作和學(xué)習(xí)的態(tài)度,在很大程度上影響著技術(shù)員,如果醫(yī)生不喜歡學(xué)習(xí),技術(shù)員一般也不會(huì)學(xué)習(xí)。前面我說(shuō)過(guò)新技術(shù)的應(yīng)用,會(huì)受到病理診斷水平和科研能力的制約。如果醫(yī)生什么都不懂,什么工作都不開展,技術(shù)員的業(yè)務(wù)水平也無(wú)法提高。

目前二十四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)2)將就很多醫(yī)生不管技術(shù)員切片做的多差,能將就的就將就,造就了技術(shù)員的惰性,我認(rèn)為這是對(duì)病人的不負(fù)責(zé),對(duì)技術(shù)員的不負(fù)責(zé),也是對(duì)自己不負(fù)責(zé)。目前二十五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)(3)看不起技術(shù)。這樣的病理醫(yī)生其實(shí)很多,認(rèn)為技術(shù)員只是操作工,培養(yǎng)個(gè)2-3個(gè)月就可以做得很好(當(dāng)然這很大程度也有我們技術(shù)員自己造成的,技術(shù)水平越差,醫(yī)生就越看不起,你越看不起,就做的越差,這是一種惡性循環(huán))。

目前二十六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

這就要求我們的醫(yī)生與技術(shù)員,要懂得如何尊重別人。尊重別人,就是尊重自己。要讓別人尊重你,首先你要尊重別人。目前二十七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)而目前我國(guó)大多數(shù)的技術(shù)員(包括我自己)只是涉及到病理技術(shù)的一小部分,只學(xué)會(huì)了一點(diǎn)皮毛,要學(xué)好技術(shù),和國(guó)際接軌,還有很長(zhǎng)的一段路要走。

目前二十八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

重視技術(shù),提高技術(shù)水平,可以減少由于制片質(zhì)量引起的誤診,最終受益的是我們的醫(yī)生和病人。目前二十九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

三、

金錢,是造成很多病理科醫(yī)技關(guān)系緊張的原因之一。在中國(guó),病理醫(yī)生的高風(fēng)險(xiǎn)、高技術(shù)并未在價(jià)值上體現(xiàn)出來(lái),與臨床醫(yī)生相比,相差甚遠(yuǎn)。于是有的醫(yī)生就把目光投向了技術(shù)員的口袋,覺得技術(shù)員的業(yè)務(wù)水平與風(fēng)險(xiǎn)不能與自己相比,自己應(yīng)該比技術(shù)員拿的多。這種觀點(diǎn)對(duì)不對(duì),應(yīng)該說(shuō)完全正確。但是,在中國(guó)這是一個(gè)社會(huì)體制問(wèn)題,我們也認(rèn)為醫(yī)生的收入太少了,多一點(diǎn)也應(yīng)該。無(wú)論從社會(huì)地位,經(jīng)濟(jì)收入上,醫(yī)生與技術(shù)員本身就存在差異,。目前三十頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)如何解決1、不斷的向社會(huì)呼吁,提高人們對(duì)病理的認(rèn)識(shí),提高病理收費(fèi),價(jià)格是價(jià)值的體現(xiàn)。2、醫(yī)技雙方應(yīng)該齊心協(xié)力,多想想如何從醫(yī)院多爭(zhēng)取錢,如何提高業(yè)務(wù)水平,用技術(shù)賺錢,在合法的條件下拓展業(yè)務(wù)賺錢。3、合理的分配醫(yī)技人員比例,把醫(yī)生從簡(jiǎn)單勞動(dòng)中解放出來(lái)。最終以年薪制代替目前的工資獎(jiǎng)金制。目前三十一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)1、

其他原因:1)

有科研能力的與沒(méi)科研能力的病理科之間的差異2)大醫(yī)院與小醫(yī)院之間的差異3)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)與落后地區(qū)的差異

目前三十二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)如何解決這些問(wèn)題:1、

首先技術(shù)員要正確認(rèn)識(shí)自己,擺正自己的位置,樹立遠(yuǎn)大的理想,要有責(zé)任感和緊迫感,懂得自尊,自強(qiáng),自愛。目前三十三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

2、

多學(xué)習(xí)理論知識(shí),多向同行學(xué)習(xí),學(xué)會(huì)總結(jié)經(jīng)驗(yàn),學(xué)會(huì)理論與實(shí)際相結(jié)合,學(xué)會(huì)新的技術(shù),學(xué)會(huì)用腦干活。目前三十四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

3、需要醫(yī)生和科主任的大力支持,沒(méi)有醫(yī)生的支持,提高病理技術(shù)是一句空話。4、科學(xué)的管理和規(guī)范化操作,是解決質(zhì)量問(wèn)題的關(guān)鍵。目前三十五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)病理技術(shù)很多是憑經(jīng)驗(yàn)工作,由于經(jīng)驗(yàn)的隨意性較大,導(dǎo)致質(zhì)量的不穩(wěn)定性。和國(guó)際接軌,是我們的奮斗目標(biāo),在這背景下,中華病理學(xué)會(huì)提出了病理技術(shù)規(guī)范化操作。

目前三十六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)病理技術(shù)有很多小竅門,有的是在犧牲制片質(zhì)量的前提下發(fā)明的,使用者往往自己不知道。每個(gè)地方操作方法不同,導(dǎo)致制片質(zhì)量各不相同。目前三十七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)規(guī)范化操作是病理制片質(zhì)量的保證,而量化的管理增加了病理制片質(zhì)量的穩(wěn)定性。目前三十八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

所謂規(guī)范化,就是在操作過(guò)程中,對(duì)使用試劑種類、pH值、濃度、溫度、時(shí)間以及操作的步驟都有詳細(xì)的規(guī)定,盡可能的減少人為的影響,減少各種變量,減少影響制片質(zhì)量的條件。特別是在做分子技術(shù)時(shí),更應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程做。目前三十九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)所謂量化,就是把以前經(jīng)驗(yàn)的東西用量來(lái)判定。

目前四十頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)下面我就講一下病理技術(shù)的規(guī)范化操作目前四十一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)一、建立完善的規(guī)章制度

沒(méi)有規(guī)矩不成方圓,沒(méi)有制度就沒(méi)有質(zhì)量的保證。目前四十二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)目前四十三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)目前四十四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)目前四十五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)有了制度最重要的是要去執(zhí)行二、建全監(jiān)督機(jī)制

成立省質(zhì)量控制中心,定期進(jìn)行室間質(zhì)控和室內(nèi)質(zhì)控檢查

目前四十六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)室間質(zhì)控全省各醫(yī)療機(jī)構(gòu)的病理科都必須嚴(yán)格實(shí)施質(zhì)量管理,按規(guī)定參與質(zhì)控檢查工作,接受室間質(zhì)控的評(píng)價(jià)。組織專家定期對(duì)全省各級(jí)醫(yī)院病理科進(jìn)行基本設(shè)施、設(shè)備、人員結(jié)構(gòu)、開展工作項(xiàng)目、完成質(zhì)量進(jìn)行抽檢考評(píng),并與等級(jí)醫(yī)院、文明醫(yī)院評(píng)審掛鉤。目前四十七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)室內(nèi)質(zhì)控各項(xiàng)制度、規(guī)范應(yīng)該健全、完善,做到有章可依,落實(shí)到人。每天自檢制片質(zhì)量,及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,確保質(zhì)量穩(wěn)定,并做好評(píng)價(jià)、記錄、以及整改措施。嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本驗(yàn)收、報(bào)告發(fā)送、登記、歸檔、資料借閱等規(guī)章制度。定期檢查實(shí)驗(yàn)用試劑及儀器性能,并完整的作好維修、維護(hù)、庫(kù)存等記錄。目前四十八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)HE切片的規(guī)范化管理1、固定液的種類、濃度,固定的時(shí)間,溫度。2、脫水:脫水液濃度,脫水的時(shí)間,溫度。以及更換試劑的方法。3、浸蠟的溫度及包埋時(shí)的注意點(diǎn)。4、染色的控制和染色液的更換。5、脫水、透明、封片。目前四十九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)檢查切片(石蠟、冰凍)的完整性:厚薄均勻、無(wú)皺褶、無(wú)刀痕、無(wú)污染、色彩分明、樹膠適當(dāng)、無(wú)氣泡、編號(hào)清楚。對(duì)有問(wèn)題的重新處理,并做好記錄。目前五十頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)冰凍的規(guī)范化管理1、快速冷凍,防止冰晶2、合適的冷凍室溫度3、固定液的選擇4、切片必須快速固定5、切片、染色必須在10分鐘內(nèi)完成目前五十一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)免疫組化的規(guī)范化操作1、固定液的選擇和固定的時(shí)間2、緩沖液的PH值3、反應(yīng)的溫度與時(shí)間4、適當(dāng)?shù)目贵w稀釋比及有效期5、抗原修復(fù)方法的選擇6、合理的使用檢測(cè)系統(tǒng)7、阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和內(nèi)源性生物素(設(shè)立陽(yáng)性片與陰性片)8、正確的陽(yáng)性結(jié)果與定位目前五十二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)特殊染色規(guī)范化操作1、水質(zhì)(蒸餾水或雙蒸水)2、器皿要干凈,不能使用金屬鑷子3、注意試劑的有效期限和保存方法4、注意:pH值,溫度,濃度和時(shí)間5、鏡下控制分化目前五十三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

特別要注意的是:

規(guī)范化不是教條,規(guī)范化不是一成不變,規(guī)范化不是墨守成規(guī),規(guī)范化也應(yīng)該不斷地創(chuàng)新。目前五十四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)謝謝謝謝目前五十五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)目前五十六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)固定

固定是技術(shù)室工作的第一步,也是在整個(gè)制片過(guò)程中無(wú)法補(bǔ)救的一步。所謂“固定”,就是組織離體后,用各種辦法使其細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過(guò)程。

目前五十七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

固定的目的是為了防止組織細(xì)胞自溶與腐敗,防止細(xì)胞內(nèi)的酶對(duì)蛋白質(zhì)的分解作用,使細(xì)胞內(nèi)的各種成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),以保持原有的結(jié)構(gòu)和生活時(shí)相仿。另外,組織固定后,均呈一定的硬化狀態(tài),增加了組織的韌性,而且不易變形,有利于以后的組織處理。

目前五十八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

所以組織一旦離體必需及時(shí)固定,固定液的量應(yīng)為組織的5倍以上。固定的關(guān)鍵主要與固定的及時(shí)性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時(shí)間有關(guān)。最常用的固定液為10%福爾馬林。由于10%福爾馬林受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時(shí)的揮發(fā)和取材時(shí)帶入水分的影響,濃度容易被降低致組織固定不足,而高濃度的福爾馬林,降低了對(duì)組織的穿透性,形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。所以可以適當(dāng)?shù)脑黾痈栺R林的濃度,以12%左右為佳。

目前五十九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)pH7.0中性福爾馬林對(duì)大多數(shù)抗原有很好的保存作用,普通福爾馬林略差,通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)證明,二者有差異但并不十分明顯,通過(guò)對(duì)抗原修復(fù)液、檢測(cè)系統(tǒng)和修復(fù)方法的不同選擇,可以減少二者的差異。

目前六十頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)由于HE染色時(shí)細(xì)胞核的最佳著色點(diǎn)pH為3.5--4.5,中性福爾馬林對(duì)蘇木素染色有一定影響,細(xì)胞核容易發(fā)灰。而病理診斷,主要還是以HE切片為主,就常規(guī)HE規(guī)范化而言,用普通福爾馬林比中性福爾馬林要好(這僅為我個(gè)人觀點(diǎn),爭(zhēng)議會(huì)很大,需病理同仁們進(jìn)一步探討)。目前六十一頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)目前六十二頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

如果每95毫升12%的福爾馬林液內(nèi)加入適量的冰醋酸效果會(huì)更佳。當(dāng)然如果根據(jù)常規(guī)切片、免疫組織化學(xué)和分子生物學(xué)的需要不同選用二種或二種以上不同的固定液分開制片是最好的解決辦法。目前六十三頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

脫水

所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來(lái),以利于有機(jī)溶劑的滲入,這一過(guò)程稱為脫水。脫水是否徹底,直接關(guān)系到組織是否能充分透明。一般我們總認(rèn)為脫水主要跟高濃度酒精有關(guān),而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系。低濃度的酒精可以減少細(xì)胞的收縮,使組織更好切。

脫水的關(guān)鍵是如何使低濃度的酒精脫水時(shí)間和高濃度的酒精脫水時(shí)間的正確搭配。目前六十四頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

其實(shí)75-80%濃度的酒精具有極強(qiáng)的穿透力,在短時(shí)間內(nèi)可以置換出大量的水份,而高酒精容易使蛋白質(zhì)凝固,在組織的表面形成一層硬殼,使酒精難以滲透到組織塊中間去,導(dǎo)致組織脫水不佳;其實(shí)高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份,如果純酒精時(shí)間過(guò)久,或在脫水時(shí)加溫過(guò)高(超過(guò)36℃),使用丙酮等等,都容易導(dǎo)致組織收縮過(guò)度和組織發(fā)硬、發(fā)脆。

目前六十五頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

組織脫水引起的組織發(fā)脆有二種原因:一種是組織脫水過(guò)度,其現(xiàn)象是切起來(lái)組織如粉狀或組織特別硬,出現(xiàn)一絲一絲的現(xiàn)象或出現(xiàn)一棱一棱的現(xiàn)象;另一種是假脆,是脫水不足引起的,切起來(lái)也是組織硬,也會(huì)出現(xiàn)一棱一棱的現(xiàn)象,還會(huì)使組織整塊整塊往外崩,這種現(xiàn)象主要表現(xiàn)在子宮肌瘤和纖維結(jié)締組織多的組織中;嚴(yán)重脫水不足的組織中間發(fā)軟,甚至還會(huì)有水。目前六十六頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

為了使組織脫水恰到好處,大小標(biāo)本應(yīng)該分開脫水,一般情況下,大標(biāo)本脫水時(shí)間(35℃),75%酒精1.5小時(shí),85%酒精1.5-2小時(shí)、95%酒精(2道)各1.5-2小時(shí)、純酒精(2道)各1小時(shí)。小標(biāo)本脫水時(shí)間應(yīng)相應(yīng)縮短。脫水時(shí)間長(zhǎng)短,與室溫高低、固定程度、組織類型、厚薄有密切的相關(guān)。純酒精只需要脫去5%的水份,所以并不需要很長(zhǎng)時(shí)間。組織在高濃度酒精里隨著時(shí)間的延長(zhǎng),硬度、脆度也在不斷增加。目前六十七頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

我們?cè)趯?shí)踐中發(fā)現(xiàn),室溫在12--15℃時(shí),可作為一個(gè)臨界溫度范圍。當(dāng)室溫高于此溫度范圍時(shí),組織容易脫水,可適當(dāng)縮短脫水時(shí)間;而室溫低于該溫度范圍時(shí),應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)脫水時(shí)間。從規(guī)范化角度出發(fā),應(yīng)該盡可能的減少變量,也就是:溫度、濃度和作用時(shí)間。如果一年四季都在一個(gè)恒定的溫度下(35℃)最好,有條件的應(yīng)該買全封閉自動(dòng)脫水機(jī)。

目前六十八頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)更換脫水液,應(yīng)以量為基礎(chǔ),定量更換。根據(jù)我科經(jīng)驗(yàn),如試劑用量為500ml,每500個(gè)蠟塊更換一次為宜。在更換脫水液時(shí),不提倡全部試劑向前退的方法,因?yàn)榇朔ú荒鼙WC低濃度的酒精的濃度(往往會(huì)偏高),也不能用比重計(jì)去測(cè)量脫過(guò)水的酒精濃度,因?yàn)槊撨^(guò)水的酒精內(nèi)含有大量的脂肪、蛋白質(zhì),比重計(jì)不能反映出酒精的真正濃度。

目前六十九頁(yè)\總數(shù)七十四頁(yè)\編于二十一點(diǎn)

所以我們認(rèn)為85%的酒精不能退到85%的酒精里,95%的酒精不能退到85%的酒精里,無(wú)水酒精不能退到95%的酒精里,而第二道的95%的酒精可以退到第一道95%的酒精里,第二道無(wú)水酒精也可以退到第一道無(wú)水酒精里

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