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藥物分離與純化技術(shù)課程色譜分離技術(shù)--色譜分離概念、分類及的應(yīng)用色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)大綱1.色譜分離技術(shù)概念2.色譜分離技術(shù)的分類3.色譜分離技術(shù)的特點4.色譜分離技術(shù)的應(yīng)用色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)
色譜分離技術(shù)是一類相關(guān)分離方法的總稱。
利用不同組分在兩相中物理化學(xué)性質(zhì)(如吸附力、分子極性大小、分子親和力、分配系數(shù)等)的差別,通過兩相不斷的相對運動,使各組分以不同的速率移動,而將各組分分離的技術(shù),稱為色譜分離技術(shù)。(一)色譜分離技術(shù)概念色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)色譜分離技術(shù)的機理多種多樣,但都必須包括兩個相。
一相為表面積較大的固體或附著在固體上,且不發(fā)生運動的液體,稱為固定相;固定相能與待分離的物質(zhì)發(fā)生可逆的吸附、溶解、交換等作用,它是色譜的一個基質(zhì),對色譜分離的效果起著關(guān)鍵作用。(一)色譜分離技術(shù)概念色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)
另一相是不斷運動著的氣體或液體,稱為流動相(又稱展層劑、洗脫劑);它攜帶各組分朝著一個方向移動,也是色譜分離中的重要影響因素之一。
當流動相流過固定相時,易分配于固定相中的物質(zhì),隨流動相移動的速度慢,而易分配于流動相中的物質(zhì),隨流動相移動的速度較快,使不同組分發(fā)生差速遷移,從而實現(xiàn)逐步分離。(一)色譜分離技術(shù)概念色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)
色譜分離首先應(yīng)用在分析檢測中,具有較高的分辨率。隨著生物技術(shù)、醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展和科學(xué)的進步,對物質(zhì)純度的要求也越來越高,采用傳統(tǒng)的分離技術(shù)(如超濾、萃取、結(jié)晶等)往往達不到所需的純度要求。、
因此色譜分離逐漸被應(yīng)用于藥物和生物物質(zhì)的分離純化過程中,稱為制備色譜或色譜分離技術(shù),但與一般分離技術(shù)相比,色譜分離的規(guī)模還是相當小的。(二)色譜分離技術(shù)的分類色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)(1)根據(jù)分離時一次進樣量多少的不同,色譜分離可分:
分析色譜
制備色譜
工業(yè)色譜(2)根據(jù)流動相的相態(tài)不同可分為:氣相色譜液相色譜超臨界流體色譜(二)色譜分離技術(shù)的分類色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)(3)根據(jù)固定相形態(tài)不同可分為:
紙色譜薄層色譜柱色譜(4)根據(jù)操作壓力的不同可分為:低壓色譜;中壓色譜;高壓色譜。其中,中、低壓色譜多用于分離純化過程。(二)色譜分離技術(shù)的分類色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)(5)根據(jù)流動相的流向不同可分為:
軸向流色譜
徑向流色譜(6)根據(jù)分離機理的不同可分為:
吸附、分配、離子交換、凝膠、親和色譜等。(7)根據(jù)操作方法的不同可分為:
洗脫展開法、前沿分析法和置換展開法。(二)色譜分離技術(shù)的分類色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)優(yōu)點:分離效率高,應(yīng)用范圍廣,選擇性強,分離速度快,操作條件溫和,高靈敏度的在線檢測,操作方便等優(yōu)點,能適用于各種物質(zhì)的分離;缺點:處理量小,操作周期長,不能連續(xù)生產(chǎn)。(三)色譜分離技術(shù)的特點色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)色譜分離技術(shù)主要應(yīng)用于物質(zhì)的分離純化、物質(zhì)的分析鑒定、粗制品的精制純化和成品純度的檢查等。例如:(1)四環(huán)素生產(chǎn)中產(chǎn)生的脫水四環(huán)素和差向四環(huán)素,其結(jié)構(gòu)與四環(huán)素接近,一般的分離純化方法不能將這兩種影響成品質(zhì)量的雜質(zhì)分離除去,色譜分離則可以將它們分開;
(2)再如鏈霉素中的雜質(zhì)鏈霉胍和二連胍霉胺對成品的毒性影響很大,必須用紙電泳或紙色譜進行檢測;
(3)在維生素B12生產(chǎn)中,應(yīng)用氧化鋁柱色譜可分離除去雜質(zhì)。(三)色譜分離技術(shù)的特點色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)(1)分離混合物
一些結(jié)構(gòu)類似、理化性質(zhì)也相似的化合物組成的混合物,一般應(yīng)用化學(xué)方法分離很困難,但應(yīng)用色譜法分離,有時可得到滿意的結(jié)果。(2)精制提純化合物
混合物中含有少量結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì),不易除去,可利用色譜法分離以除去雜質(zhì),得到純品。(四)色譜分離技術(shù)的應(yīng)用色譜分離概念、分類及的應(yīng)用—色譜分離技術(shù)(3)鑒定化合物
在條件完全一致的情況,純碎的化合物在薄層色譜或紙色譜中都呈現(xiàn)一定的移動距離,稱比移值(Rf值),所以利用色譜法可
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