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檢驗儀器分析技術滄州醫(yī)學高等?？茖W校代榮琴滄州醫(yī)學高等?？茖W校王鳳玲臨床分析化學儀器儀器的工作原理高效液相色譜儀高效液相色譜（HPLC）儀，是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器。優(yōu)點：分離效率高、選擇性好、檢測靈敏度高和分析速度快等。HPLC儀廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環(huán)境研究中。儀器的工作原理儀器的工作原理

高壓輸液泵將儲液器中的流動相泵入系統(tǒng)，樣品溶液經由進樣器進入流動相，并被流動相載入色譜柱(固定相)內。由于樣品液在兩相中作相對運動時，經歷多次反復的吸附-解吸附分配過程，而各組分在流動相和固定相中分配系數(shù)不同，其移動速度差別較大，因此被分離成單個組分依次從柱內流出。通過檢測器時樣品濃度被轉換成電信號并傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。儀器的工作原理依據(jù)分離機制差異，HPLC可分為以下幾類：液固吸附色譜法液液分配色譜法（正相與反相）離子交換色譜法離子對色譜法分子排阻色譜法HPLC原理分類儀器的工作原理儀器的工作原理液固色譜法：使用固體吸附劑。根據(jù)固定相對組分吸附力大小不同而使組分得以分離。分離過程是一個吸附－解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，粒度5～10μm。適用于分離分子量200～1000的組分，大多數(shù)用于非離子型化合物。儀器的工作原理液液色譜法：根據(jù)被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。根據(jù)極性不同正相色譜法（NPC）

反相色譜法（RPC）根據(jù)固定相工藝不同涂布式

化學鍵合式儀器的工作原理離子交換色譜法：固定相是離子交換樹脂，主要用于分析有機酸、氨基酸、多肽及核酸。儀器的工作原理離子對色譜法：又稱偶離子色譜法，是液液色譜法的分支。主要用于分析離子強度大的酸堿物質。儀器的工作原理

分子排阻色譜法：固定相是有一定孔徑的多孔性填料，流動相是可

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