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文檔簡介

病理檢驗技術(shù)

免疫組化技術(shù)免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)概述免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)

概述

免疫熒光技術(shù)(immunofluorescencetechnique)和免疫組織化學(xué)技術(shù)相類似,也是把組織學(xué)、細胞學(xué)和免疫學(xué)結(jié)合起來的一門技術(shù),利用免疫學(xué)反應(yīng)在組織切片或細胞涂片上原位顯示組織細胞中的抗原以及抗原的分布和含量,以了解相關(guān)抗原在組織和細胞中的變化及其意義。

所不同的是免疫熒光染色技術(shù)所用的抗體標(biāo)記物是熒光素而不是酶,不需要顯色劑和顯色反應(yīng),通過激發(fā)抗原-抗體結(jié)合物上結(jié)合的熒光素發(fā)出可見熒光,用熒光顯微鏡觀察這些可見熒光來確定是否有抗原表達。眼睛在暗視場觀察抗原部位發(fā)出的熒光比在明視場觀察陽性結(jié)果的顏色要敏感。免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)

用熒光抗體檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法。用已知的熒光抗原標(biāo)記物檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗原法。免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)染色方法有直接法、間接法、補體法、雙重?zé)晒鈽?biāo)記法。直接法是免疫熒光組化技術(shù)最簡單和基本的方法。把熒光抗體(或抗原)滴加于待檢標(biāo)本片上,直接與細胞或組織中相應(yīng)抗原(或抗體)結(jié)合,洗滌后在熒光顯微鏡下即可見抗原(或抗體)存在部位呈現(xiàn)特異性熒光。此法常用于細菌、病毒等的快速檢查和淋巴細胞表面抗原與受體的鑒定。其缺點是敏感性較差。間接法用已知抗體檢測未知抗原時,先用特異性抗體(第一抗體,簡稱“一抗”)與相應(yīng)抗原結(jié)合,再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體(第二抗體,簡稱“二抗”)與特異性抗體結(jié)合,在熒光顯微鏡下可見抗原抗體反應(yīng)部位呈現(xiàn)明亮的特異性熒光。用已知抗原檢測未知抗體時,先用特異性抗原與細胞或組織內(nèi)抗體反應(yīng),再用此抗原的特異性熒光抗體與結(jié)合在細胞內(nèi)抗體上的抗原相結(jié)合,抗原夾在細胞抗體與熒光抗體之間。補體法直接檢查組織內(nèi)免疫復(fù)合物法間接

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