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第三章基因工程第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具01基因工程基因工程:指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫作DNA重組技術(shù)?;蚬こ痰膭e名DNA重組技術(shù)實(shí)質(zhì)基因重組操作環(huán)境生物體外操作對象基因操作水平DNA分子水平基本過程剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)結(jié)果定向改造生物的遺傳性狀轉(zhuǎn)移A生物B生物螢火蟲普通動植物發(fā)光基因基因工程的基礎(chǔ)理論a、DNA是遺傳物質(zhì)的證明b、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的建立c、遺傳密碼的破譯相關(guān)技術(shù)的發(fā)展a、基因表達(dá)載體和工具酶相繼發(fā)現(xiàn)b、DNA合成和測序技術(shù)的發(fā)明c、DNA體外重組得以實(shí)現(xiàn),重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)獲得成功基因能夠拼接的基礎(chǔ)a、基本組成單位相同b、空間結(jié)構(gòu)相同c、堿基互補(bǔ)配對方式相同外源基因能夠在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的基礎(chǔ)a、生物界共用同一套遺傳密碼b、相同的遺傳信息在不同的生物體內(nèi)可表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)基因
非轉(zhuǎn)基因“分子手術(shù)刀”—限制酶“分子縫合針”—DNA連接酶“分子運(yùn)輸車”—載體重組DNA技術(shù)所需工具02“分子手術(shù)刀”-限制酶“分子手術(shù)刀”----限制性內(nèi)切核酸酶(1)簡稱(2)來源
(3)種類(4)特點(diǎn)(5)作用部位
(6)結(jié)果限制酶數(shù)千種能識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開主要來源于原核生物產(chǎn)生黏性末端或平末端磷酸二酯鍵EcoRI限制酶①識別的序列是─GAATTC──CTTAAG─②切割位點(diǎn)為GA之間EcoRⅠSmaI限制酶
①
識別的序列是─CCCGGG──GGGCCC─②切割位點(diǎn)是CG之間幾種常見的限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)不同酶的識別序列一般不同酶的專一性推斷限制酶切割一次可斷開幾個(gè)磷酸二酯鍵?產(chǎn)生多少游離的磷酸基團(tuán)?產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端?消耗幾分子水?斷開2個(gè)磷酸二酯鍵產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)產(chǎn)生2個(gè)或0個(gè)黏性末端消耗2分子水寫出下列限制酶切割形成的黏性末端,不同限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端是否一定不同?把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割,會怎樣呢?會形成相同的黏性末端以下黏性末端是由
種限制酶作用產(chǎn)生的三為什么限制酶不切割原核生物本身的DNA分子?含某種限制酶的細(xì)菌的DNA分子不具備這種限制酶的識別序列,或者甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到了限制酶所識別序列的堿基上,使限制酶不能將其切開推測限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么?限制酶是原核生物的一種防御工具,用來切割侵入細(xì)胞的外源DNA,以保證自身安全。...ATGAGAATTCATG目的ATGGAATTCCG......TACTCTTAAGTAC基因TACCTTAAGGC...AATTCATG目的ATGGGTAC基因TACCTTAA...ATGAG...TACTCTTAAAATTCCG...GGC...獲取目的基因
獲取目的基因
下圖中,選擇哪種限制酶來獲得抗病
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