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職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)生物化學(xué)檢驗(yàn)的基本知識BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2學(xué)習(xí)目標(biāo)血液標(biāo)本的采集方法真空采血管的種類和用途;常用抗凝劑及抗凝原理尿液標(biāo)本的采集方法;標(biāo)本收檢、分離、儲存和轉(zhuǎn)運(yùn)生物化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目類型危急值、危急值報(bào)告的概念檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放方式生物化學(xué)檢驗(yàn)的項(xiàng)目
與檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放第一節(jié)臨床實(shí)驗(yàn)室及生化室病人臨床醫(yī)師查體病人進(jìn)行檢查生理學(xué)檢查實(shí)驗(yàn)室檢查門診化驗(yàn)室血液體液室臨床生化室臨床免疫室臨床微生物室分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室配血室病理學(xué)檢查影像學(xué)檢查醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請單患者留取標(biāo)本傳送標(biāo)本至檢驗(yàn)科標(biāo)本分發(fā)至各個(gè)專業(yè)組樣品編號按檢驗(yàn)項(xiàng)目要求處理標(biāo)本全自動生化7180的開機(jī)前檢查開機(jī)后的檢查及準(zhǔn)備校準(zhǔn)的安排及實(shí)施(定標(biāo))質(zhì)控操作下達(dá)常規(guī)操作指令常規(guī)標(biāo)本實(shí)施急診登記及操作結(jié)果查詢及傳輸關(guān)機(jī)生化檢驗(yàn)流程
1.普通生化檢驗(yàn)如肝功能試驗(yàn)、腎功能試驗(yàn)、心臟標(biāo)志物測定、血脂測定、血糖測定、電解質(zhì)分析等。
2.特殊生化檢驗(yàn)如毒物分析、治療藥物監(jiān)測、激素測定、DNA分析等。
3.急診生化檢驗(yàn)為臨床緊急需要開展的能迅速回報(bào)結(jié)果的試驗(yàn)。如血糖、尿素、電解質(zhì)、淀粉酶、血?dú)夥治龅取?/p>
4.床旁生化檢驗(yàn)在病人床旁或醫(yī)療現(xiàn)場開展的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目1生物化學(xué)檢驗(yàn)的項(xiàng)目2生物化學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放常規(guī)生化檢驗(yàn)的報(bào)告時(shí)間:一般不超過2天。急診生化檢驗(yàn)的報(bào)告時(shí)間:不超過2小時(shí)。急診標(biāo)本要優(yōu)先。2生物化學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放危急值:指某些檢測結(jié)果出現(xiàn)了可能會危及到患者生命的極限值。危急值報(bào)告:指當(dāng)檢測結(jié)果出現(xiàn)“危急值”后,檢驗(yàn)者要立即通過電話向臨床醫(yī)生或當(dāng)班護(hù)士報(bào)告,并要求接、打電話雙方都要有通話記錄,通話記錄最少包括危急值的項(xiàng)目、危急值和接電話人姓名等內(nèi)容。危急值報(bào)告2生物化學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放要求條碼號、門診號(住院號),病人的姓名、性別、出生日期、申請科室、病室及床號、臨床診斷、檢查項(xiàng)目、標(biāo)本類型、是否急診、采樣時(shí)間、標(biāo)本接收時(shí)間、申請醫(yī)生。必要時(shí)應(yīng)注明治療情況(用藥情況)等。報(bào)告單的格式應(yīng)規(guī)范、整齊,字跡清晰,內(nèi)容全面有標(biāo)本的采集時(shí)間、收檢時(shí)間和出報(bào)告時(shí)間。內(nèi)容:報(bào)告單發(fā)放時(shí)間與辦法、檢驗(yàn)數(shù)據(jù)管理、結(jié)果保密措施、報(bào)告單唯一性標(biāo)志等。2生物化學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告單的發(fā)放1.再一次對檢驗(yàn)報(bào)告單內(nèi)容進(jìn)行認(rèn)真復(fù)審。2.對門診患者,未經(jīng)本人同意,不準(zhǔn)將檢驗(yàn)報(bào)告單交給他人。3.報(bào)告單發(fā)放時(shí)間應(yīng)向社會公布,特殊原因不能按時(shí)發(fā)報(bào)告時(shí),應(yīng)及時(shí)告知服務(wù)對象。4.送至臨床各科室的檢驗(yàn)報(bào)告單,送收雙方應(yīng)履行交接簽字手續(xù),避免報(bào)告單丟失或信息外泄。注意事項(xiàng)生物化學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本第二節(jié)標(biāo)本標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)盡可能避免一切干擾因素,選擇最佳的采集時(shí)間;減少飲食和藥物影響,減少晝夜節(jié)律帶來的干擾;對于有創(chuàng)傷性的操作,操作前應(yīng)先與患者溝通建立互信,消除患者的恐懼和緊張情緒。標(biāo)本采集后應(yīng)標(biāo)識清楚,正確采集標(biāo)本是獲得準(zhǔn)確、可靠檢驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵。1標(biāo)本的采集血液標(biāo)本(一)血液標(biāo)本的類型全血:靜脈全血、動脈全血和末梢全血血漿:全血標(biāo)本經(jīng)抗凝、離心去除血細(xì)胞后的淺黃色半透明液體血清:血液離體后自然凝固分離出來的淡黃色透明液體。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿最大的區(qū)別。某些凝血因子也發(fā)生了變化。1標(biāo)本的采集采集方法核對容器準(zhǔn)備病人準(zhǔn)備體位前臂肘窩正中靜脈采血
取針頭將血液沿管壁緩慢注入容器。(1)毛細(xì)血管采血法(略)(2)靜脈采血法(普通采血法)1標(biāo)本的采集采集方法1標(biāo)本的采集注意事項(xiàng)臨床最常用的采血方法,最好是在上午7~9時(shí)采集,受檢者處于空腹?fàn)顟B(tài),門診患者提倡靜坐15分鐘后再采血。根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目、所需采血量選擇注射器;嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作;采血時(shí)切忌將針?biāo)ㄍ赝疲悦庾⑸淦髦械目諝膺M(jìn)入血液循環(huán)而形成氣栓;采血時(shí)不宜過度用力,以免血液產(chǎn)生泡沫而造成溶血;避免充血和血液濃縮;注意膳食對標(biāo)本的影響。1標(biāo)本的采集靜脈采血主要器材:雙向采血針和真空采血管采血前要核對患者姓名、檢驗(yàn)項(xiàng)目,根據(jù)需要選擇相應(yīng)的真空采血管,將條形碼貼到相應(yīng)的試管上,但前提是露出采血管的刻度;再次核對患者名字、檢驗(yàn)項(xiàng)目,避免有漏貼、漏抽的情況發(fā)生。真空采血法1標(biāo)本的采集真空采血管的種類與用途1標(biāo)本的采集步驟多管血液標(biāo)本采集順序注意抗凝劑與血量的比例!采血量為:1.8ml+0.2抗凝劑=2ml凝血功能檢測1標(biāo)本的采集真空采血法1標(biāo)本的采集動脈采血主要用途:血?dú)夥治龃蠖嗖捎脴飫用}采血,肱動脈、股動脈和足背動脈都可以進(jìn)行采血。A.1ml~5ml注射器,用肝素濕潤B.針進(jìn)入血管后,動脈血自動進(jìn)入注射器,取1~2ml血液。C.注射器不能回吸,排出第一滴血立即用橡皮帽封住針頭。D.注射器放在手掌中雙手來回搓動20秒,立即送檢。1標(biāo)本的采集動脈采血注意事項(xiàng):因動脈血的壓力較高,血液會自動注入注射器針筒內(nèi),至2ml后拔出針頭,用消毒干棉簽按壓采血處(穿刺點(diǎn))止血10~15分鐘,防止血腫。立即用軟木塞或橡皮塞封閉針頭(針頭斜面埋入橡皮中即可),以隔絕空氣,切忌漏氣,搓動注射器使血液與肝素混合,并立即送檢,否則將標(biāo)本置于2~6℃冰箱保存,但不應(yīng)超過2小時(shí)。1標(biāo)本的采集常用抗凝劑抗凝:采用物理或化學(xué)方法去除或抑制某種凝血因子的活性,以阻止血液凝固。抗凝劑:能夠阻止血液凝固的物質(zhì),也稱為抗凝物質(zhì)。常用抗凝劑:肝素、氟化鈉-草酸鉀、乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽)、枸櫞酸鹽等。1標(biāo)本的采集1)肝素:血液化學(xué)成分檢測的首選抗凝劑,常用于血?dú)夥治龊筒糠稚?xiàng)目的測定,使用1.0g/L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液??鼓硗ㄟ^與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合,引起抗凝血酶Ⅲ構(gòu)型發(fā)生變化,加速抗凝血酶-凝血酶復(fù)合體形成而產(chǎn)生抗凝作用。此外,肝素還能抑制凝血酶。最好的肝素抗凝劑是肝素鋰,但其價(jià)格較貴。肝素抗凝血適用于急診時(shí)快速分離進(jìn)行測定,否則放置過久血液又可凝固。肝素對ALT、AST、LDH、ACP無影響,但是對CK等酶有輕微的抑制作用。1標(biāo)本的采集2)氟化鈉-草酸鉀:抗凝原理草酸鉀可與血液中的Ca2+(凝血因子Ⅳ)生成草酸鈣沉淀,從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大,抗凝作用強(qiáng)于氟離子。氟離子能抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解。在氟化鈉的存在下,血糖濃度在25℃可穩(wěn)定24小時(shí),4℃可穩(wěn)定48小時(shí)。因此,氟化鈉-草酸鉀是血糖測定標(biāo)本常使用的抗凝劑。此外草酸鉀可與乳酸、丙酮酸發(fā)生競爭性抑制,又能與LDH、NADH或NAD+形成復(fù)合物,因此用氟化鈉-草酸鉀抗凝劑分離的血漿一般不適用于酶活性的測定。3)枸櫞酸鹽、EDTA:抗凝原理
與血液中的Ca2+結(jié)合形成螯合物,使Ca2+失去凝血功能,凝血過程被阻斷,而阻止血液凝固。1標(biāo)本的采集抗凝血漿一般不適用酶活性的測定!1標(biāo)本的采集(一)尿液標(biāo)本的類型晨尿標(biāo)本1隨機(jī)尿標(biāo)本2計(jì)時(shí)尿標(biāo)本3特殊尿標(biāo)本4中段尿:開始1/3量的尿液棄掉,留取中間1/3處的尿液送檢,可較少尿液污染,較真實(shí)反映實(shí)際情況1標(biāo)本的采集特別提醒提供的尿液采集容器要潔靜、干燥、無污染!在尿液采集容器上要準(zhǔn)確標(biāo)記患者姓名、性別、年齡、留尿日期和時(shí)間、尿量、標(biāo)本種類等信息!張冠李戴可萬萬使不得?。?標(biāo)本的采集晨尿標(biāo)本1早晨起床后第一次排出的尿液特點(diǎn):濃縮優(yōu)勢:有形成分陽性檢出率較高適用范圍:人絨毛膜促性腺激素(hCG)測定。細(xì)胞有形成分檢查。1標(biāo)本的采集2隨機(jī)尿標(biāo)本無需任何準(zhǔn)備、不受時(shí)間限制、隨時(shí)排出的尿液標(biāo)本特點(diǎn):易受飲食、藥物的影響,可能導(dǎo)致漏檢優(yōu)勢:尿標(biāo)本新鮮、易得適用范圍:適合于門診、急診患者的尿液篩檢。1標(biāo)本的采集3計(jì)時(shí)尿標(biāo)本用于化學(xué)成分的定量測定、內(nèi)生肌酐清除率試驗(yàn)和細(xì)胞學(xué)檢查1標(biāo)本的采集計(jì)時(shí)尿標(biāo)本的采集與評價(jià)1標(biāo)本的采集24小時(shí)尿標(biāo)本的采集步驟與要求1標(biāo)本的采集4計(jì)時(shí)尿標(biāo)本尿三杯試驗(yàn):分別采集前段尿、中段尿、末段尿,分裝于3個(gè)尿杯中。培養(yǎng)用尿:留尿前先清洗外陰,再用清潔液消毒尿道口,以無菌容器留取中段尿送檢。1標(biāo)本的采集晨尿隨機(jī)尿3小時(shí)尿12小時(shí)尿24小時(shí)尿特殊尿細(xì)胞有形成分檢查門診、急診患者的尿液篩檢用于尿液有形成分檢查和計(jì)數(shù)尿液有形成份計(jì)數(shù),及尿微量蛋白分析機(jī)體代謝物的定量檢測特殊病理情況的分析尿液標(biāo)本采集后要盡快送檢哦!1標(biāo)本的采集濃鹽酸:酸性防腐甲苯:形成薄末防腐,適用于糖、蛋白質(zhì)、鉀、鈉項(xiàng)目的測定冰醋酸:酸性,適用于24小時(shí)尿醛固酮測定麝香草酚:抑菌防腐,麝香草酚可引起蛋白假陽性,故不適合尿蛋白測定尿液常用防腐劑1標(biāo)本的采集腦脊液標(biāo)本采集腦脊液由臨床醫(yī)師進(jìn)行腰椎穿刺采集必要時(shí)也可以從小腦延髓池或側(cè)腦室穿刺采集穿刺成功后首先進(jìn)行壓力測定。待測定壓力后根據(jù)檢查目的將腦脊液分別收集于三個(gè)無菌容器中第1管用于細(xì)菌學(xué)檢查,第2管用于臨床化學(xué)或免疫學(xué)檢查第3管用于常規(guī)檢查。如疑為惡性腫瘤,再采集1管進(jìn)行脫落細(xì)胞學(xué)檢查標(biāo)本采集后檢驗(yàn)申請單上注明標(biāo)本采集的時(shí)間。1標(biāo)本的采集漿膜腔積液標(biāo)本采集人體胸膜腔、腹膜腔和心包膜腔統(tǒng)稱為漿膜腔,正常情況下,漿膜腔內(nèi)僅含有少量液體起潤滑作用,如胸膜腔液<20ml,腹膜腔液<50ml,心包膜腔液約為10~30ml。漿膜發(fā)生病變時(shí),漿膜腔內(nèi)有大量的液體潴留而形成漿膜腔積液,因部位不同,漿膜腔積液可分為胸膜腔積液、腹膜腔積液和心包膜腔積液。根據(jù)產(chǎn)生的原因及性質(zhì)不同,漿膜腔積液可分為漏出液和滲出液。檢測漿膜腔積液的某些化學(xué)成分如蛋白質(zhì)、葡萄糖、酶及腫瘤標(biāo)志物等,有助于了解漿膜腔積液的性質(zhì)和病因。1標(biāo)本的采集漿膜腔積液標(biāo)本采集漿膜腔積液標(biāo)本由臨床醫(yī)師行漿膜腔穿刺術(shù)采集,采集中段液體于消毒試管內(nèi),且根據(jù)需要采用適當(dāng)?shù)目鼓齽┯枰钥鼓A硗?,采集一管不加抗凝劑的?biāo)本,用于觀察積液有無凝固現(xiàn)象。2標(biāo)本的收檢血液標(biāo)本收檢血液標(biāo)本拒收的常見原因:①溶血、抗凝標(biāo)本出現(xiàn)凝固;②血液采集容器使用錯誤,容器破損無法補(bǔ)救;③采血量不足或錯誤;④轉(zhuǎn)運(yùn)條件不當(dāng);⑤標(biāo)識脫落、不清楚或者申請單和標(biāo)本標(biāo)識不一致;⑥標(biāo)本污染、標(biāo)本量不符合要求、標(biāo)本與抗凝劑比例不正確;⑦要求與空氣隔絕的標(biāo)本與空氣接觸;⑧標(biāo)本的采集與送檢之間的時(shí)間過長;⑨嚴(yán)重違犯標(biāo)本采集規(guī)程等。注:特殊情況下,對可能會影響到檢測結(jié)果的標(biāo)本進(jìn)行檢測時(shí),應(yīng)在檢驗(yàn)報(bào)告單上對不合格的標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)描述,提醒該標(biāo)本可能會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。2標(biāo)本的收檢尿液標(biāo)本收檢尿液標(biāo)本拒收的情況:標(biāo)本標(biāo)識內(nèi)容與檢驗(yàn)申請單內(nèi)容不一致、申請單的項(xiàng)目不全、尿標(biāo)本類型錯誤、尿量不足、可見糞便或雜物污染、防腐劑使用不當(dāng)、容器破損、標(biāo)本流失等。對不合格標(biāo)本要重新核實(shí)或重新收集標(biāo)本對難以得到的尿標(biāo)本或再次采集確有困難的尿標(biāo)本,必須在檢驗(yàn)報(bào)告上注明標(biāo)本不合格的原因及“檢驗(yàn)結(jié)果僅作參考”的說明。3標(biāo)本的處理尿液標(biāo)本收檢1.標(biāo)本的分離血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)采用離心法分離血清或血漿。加有抗凝劑的血液標(biāo)本應(yīng)立即離心分離血漿;無抗凝劑的血液標(biāo)本分離血清時(shí),可先將標(biāo)本置于室溫或37℃水浴箱里,待血塊部分收縮,出現(xiàn)少許血清時(shí)再離心分離。分離不及時(shí)的血液標(biāo)本可發(fā)生紅細(xì)胞與血清之間成分的相互轉(zhuǎn)移,或細(xì)胞中的某些酶分解待測物等,從而影響一些項(xiàng)目的檢驗(yàn)結(jié)果。分離血清前血液水浴溫度不可過高,對不是因操作不當(dāng)引起的溶血、脂血或膽紅素血,應(yīng)在檢驗(yàn)報(bào)告上注明,供醫(yī)生參考。尿液、腦脊液、漿膜腔積液和羊水等特殊標(biāo)本常需立即離心,取上清液進(jìn)行分析。3標(biāo)本的處理尿液標(biāo)本收檢2.標(biāo)本的儲存分離后的標(biāo)本如果不能及時(shí)檢測,一般應(yīng)放置于4℃冰箱內(nèi)保存,某些檢測項(xiàng)目的標(biāo)本存放于-20℃冰箱更穩(wěn)定。標(biāo)本存放時(shí)需加塞,以防止水分揮發(fā)而使標(biāo)本濃縮。檢驗(yàn)后的標(biāo)本應(yīng)根據(jù)不同檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行標(biāo)本保存,并保證所存標(biāo)本的信息如患者姓名、標(biāo)本種類、標(biāo)本編號等與原始標(biāo)本完全一致。一般標(biāo)本在2℃~8℃保存一周,特殊標(biāo)本置低溫保存兩年或長期保存。保存標(biāo)本的目的主要是為了滿足標(biāo)本復(fù)檢、差錯核對以及出現(xiàn)醫(yī)患糾紛時(shí)實(shí)驗(yàn)室證據(jù)保全的需要。3標(biāo)本的處理尿液標(biāo)本收檢3.標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)
標(biāo)本采集后應(yīng)盡快轉(zhuǎn)運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測分析,標(biāo)本運(yùn)送人員要保證標(biāo)本送達(dá)實(shí)驗(yàn)室的及時(shí)性和安全性,標(biāo)本在轉(zhuǎn)運(yùn)途中要避光、避高溫、避冷凍,避免劇烈震蕩,避免標(biāo)本外溢或污染環(huán)境,保證標(biāo)本質(zhì)量不受影響;如果發(fā)生外溢等意外情況時(shí)能采取合理措施。外送的標(biāo)本或送往委托實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本應(yīng)有相應(yīng)的標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)設(shè)備。應(yīng)盡量減少標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)節(jié),以縮短儲存時(shí)間,標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)應(yīng)做到專人、專業(yè)且有制度約束,才能避免標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)過程中因客觀、主觀因素造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。標(biāo)本管道傳遞系統(tǒng)可加快標(biāo)本傳遞速度和避免標(biāo)本的錯誤傳遞。3標(biāo)本的處理廢棄標(biāo)本的處理要求包裝:醫(yī)療廢物專用包裝物有顯著的警示標(biāo)識和警示說明;運(yùn)送:由專人送到指定的消毒地點(diǎn)集中處理;處理:一般由專門機(jī)構(gòu)采用焚燒的方法處理。實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理的目的:①將操作、收集、運(yùn)輸及處理廢棄物的危險(xiǎn)降至最小;②將其對環(huán)境的有害作用減至最小。因此,生物化學(xué)檢測后廢棄的標(biāo)本、器具應(yīng)由專人負(fù)責(zé)處理。視所有標(biāo)本為傳染品,“高?!睒?biāo)本,要注明標(biāo)識;急癥或危重病人標(biāo)本要特別注明。嚴(yán)禁標(biāo)本直接用口吸取、接觸皮膚或污染器皿的外部和實(shí)驗(yàn)臺。標(biāo)本用后均要做消毒處理,盛標(biāo)本的器皿要消毒處理或毀型、焚燒。標(biāo)本因素對檢驗(yàn)結(jié)果的影響第三節(jié)1生理因素的影響年齡應(yīng)針對項(xiàng)目在不同的年齡段制定相應(yīng)的參考范圍性別需要針對不同的性別制定相應(yīng)的參考范圍運(yùn)動一般需在安靜狀態(tài)下采集標(biāo)本一般主張?jiān)谇宄砍檠≡翰∪丝稍谄鸫睬俺檠?,匆忙起床到門診的病人應(yīng)至少休息15分鐘后采血。1生理因素的影響情緒情緒激動、緊張可影響神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能妊娠妊娠是特殊的生理過程參考范圍與普通人不同體位生化血液標(biāo)本的抽采體位應(yīng)以坐姿為宜采集時(shí)間生化檢驗(yàn)血液標(biāo)本的采集原則上必須是在清晨(7~9點(diǎn))早餐前或進(jìn)食12小時(shí)后采集。2飲食和藥物的影響1.飲食和嗜好不同食物對檢驗(yàn)的結(jié)果影響不同;飲酒、嗜煙、過度饑餓、進(jìn)食等都會影響檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性,因此臨床生化血樣原則上必須堅(jiān)持空腹采血,采血前禁食、煙、酒和各種飲料。2.藥物影響不同藥物對檢驗(yàn)結(jié)果可造成不同程度的影響,藥物對檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜,在采樣檢查之前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥物不可停用,則應(yīng)了解可能對檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生
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