血細胞分析儀及其臨床應用

第五章血細胞分析儀及其臨床應用永州職業(yè)技術學院1.自動化程度越來越高2.提供參數越來越多3.精密度越來越高4.速度越來越快5.越來越注重環(huán)保6.質控功能得到加強7.智能化程度越來越高一、血細胞分析儀的原理（一）細胞計數及體積測定原理1.電阻抗檢測原理

血細胞是相對不良導體，當血細胞通過小孔電阻增加，出現一個脈沖信號。脈沖大小和振幅高低反應細胞大小，又叫庫爾特（Coulter）原理脈沖信號傳遞步驟：①放大②閾值調節(jié)③甄別④整形⑤計數細胞直方圖：“Y”軸：相對數“X”軸：體積以飛升（fl）為單位。2.流式細胞術加光學檢測原理如圖激光折射，散射，衍射檢測細胞（二）白細胞分類原理1.電阻抗法

標本單個白細胞按體積大小分類溶血素稀釋液電阻抗法淋巴細胞單個核細胞中性粒細胞三群第一群為小細胞區(qū)，35～90fl，淋巴細胞；第二群為中間細胞區(qū)，90～160fl，包括幼稚細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞；第三群為大細胞區(qū)，160fl以上，中性粒細胞2.容量、電導、光散射（VCS）白細胞分類法V:體積電阻抗原理測定

C:電導性高頻電磁探針測定內部結構

S：光散射激光掃描測定顆粒構型和質量單個細胞3.阻抗與射頻技術聯合白細胞分類法（1）嗜酸性粒細胞檢測系統(tǒng)經特殊溶血劑嗜酸性粒細胞通過小孔產生脈沖被計數。（2）嗜堿性粒細胞檢測系統(tǒng)原理同嗜酸性粒細胞（3）淋巴、單核、粒細胞（中性、嗜堿性、嗜酸性）檢測系統(tǒng)采用電阻抗與射頻聯合檢測檢測細胞大?。―C）和核及顆粒的密度（RF）（4）幼稚細胞檢測系統(tǒng)幼稚細胞形態(tài)不受破壞，可通過電阻抗法檢測4.光散射與細胞化學技術聯合白細胞分類計數聯合利用激光散射和過氧化物酶染色技術進行血細胞分類計數5.多角度偏振光散射白細胞分類技術自然態(tài)白細胞多角度光散射分類（三）紅細胞測試原理1.紅細胞（RBC）和血細胞比容（HCT）電阻抗法形成脈沖脈沖的多少：紅細胞數目脈沖高度：單個紅細胞體積脈沖高度疊加：血細胞的比容2.血紅蛋白測定（Hb）

血液釋放Hb540nm比色3.各項紅細胞指數檢測原理

MCV、MCH、MCHC、RDW根據RBC、HCT和Hb換算溶血劑（四）血小板分析原理與紅細胞一起在一個系統(tǒng)進行檢測，2～30fl內檢測（五）全自動血細胞計數儀配置網織紅細胞檢測原理

網織紅細胞胞質中尚殘留RNA，可與特殊染料結合，應用流式細胞儀（FCM）測量時發(fā)出特定顏色熒光，進行RNA定量檢測網織紅二、血細胞分析儀的類型（一）半自動二分群血細胞分析儀（二）全自動三分群血細胞分析儀（三）全自動五分類血細胞分析儀（四）全自動五分類連接網織紅細胞分析儀（二）紅細胞體積分布寬度RDW概念

外周血紅細胞體積大小異質性，用變異系數來表示（CV）參考值

11.6%～14.0%臨床意義：（1）缺鐵性貧血（IDA）早期診斷和療效觀察95%以上的IDA和RDW均異常（2）鑒別IDA和輕型β-地中海貧血均為小細胞低色素貧血，前者RDW增高；后者RDW基本正常。（3）MCV/RDW貧血分類法有助于貧血的形態(tài)學分類4）用于貧血病因學鑒別診斷：腎性貧血RDW正常；肝性貧血RDW增高根據MCV、RDW進行貧血形態(tài)學分類

（三）血小板參數

1.血小板平均體積（MPV）血液中血小板的平均體積，用飛升（fl）表示。參考值6.8～13.6fl臨床意義結合血小板數的變化。（1）MPV增大：①PLT破壞增多，骨髓代償生成增加時，使MPV增大。②作為骨髓造血功能恢復的較早指標，MPV常先于血小板升高。③其他（2）MPV減少：①骨髓造血功能損傷MPV隨PLT同時持續(xù)下降②嚴重感染伴有敗血癥等MPV減少。（四）血細胞體積直方圖的應用正常情況下：紅細胞直方圖：呈正態(tài)分布血小板直方圖：呈非正態(tài)分布白細胞直方圖：根據細胞形態(tài)大小及儀器型號不同呈現不同的曲線，一般是2～3個峰態(tài)曲線五、血細胞分析儀質量控制（一）分析前質量控制1.操作技術人員要求2.儀器安裝條件溫度應在15～25℃，相對濕度應＜80%3.儀器的驗收4.儀器的校準變異應＜3%，攜帶污染率＜2%，重復性＜3%，線性范圍較寬5.標本的采集和運送EDTA-K2抗凝血6h內測定6.校準物和質控物

（二）分析中質量控制

1.每天開機時的檢查2.試劑3.標本要求4.嚴格執(zhí)行操作規(guī)程5.受檢者生理狀態(tài)對實驗結果的影響6.注意儀器的報警、提示7