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/項目三卵磷脂的生產(chǎn)相關(guān)知識名稱:卵磷脂(lecithin)化學(xué)名稱:磷脂酰(Phosphatidylcholine)簡稱:PC形態(tài):純凈的卵磷脂常溫下為一種無色無味的白色固體,由于制取或精制方法、儲存條件不同被氧化而呈現(xiàn)淡黃色至棕色。卵磷脂被譽為與蛋白質(zhì)、維生素并列的“第三營養(yǎng)素”,1844年法國人Gohley從蛋黃中發(fā)現(xiàn)卵磷脂(蛋黃素),并以希臘文命名為Lecithos(卵磷脂),通用藥品名稱為Lecithin。卵磷脂按照其純度的高低,一般分為PC50、PC60、PC70、PC80、PC90、PC95等產(chǎn)品形式。最高可以提純到98%,因為其純度越高,還原性能越強,故提純到98%的卵磷脂需要做氫化處理。然后保存。未經(jīng)過氫化處理的卵磷脂,一般要求在充氮的密封容器中。純凈的卵磷脂常溫下為一種無色無味的白色固體,由于制取或精制方法、儲存條件不同被氧化而呈現(xiàn)淡黃色至棕色.磷脂酰膽堿(PC)在醇中的溶解度比磷脂酰乙醇胺(PE)及磷脂酰肌醇(PI)高,故根據(jù)溶解性能的不同使之分離提純(一)卵磷脂的功效營養(yǎng)功效人體營養(yǎng)需要對血清脂質(zhì)的調(diào)節(jié)作用胞囊纖維變性時對吸收脂肪的影響健康心臟有益大腦柔潤延緩衰老調(diào)劑心理功效主要用于動脈粥樣硬化,急、慢性肝炎,脂肪肝,肝硬化,神經(jīng)衰弱等。制成軟膏可用于慢性潰瘍等.促進肝細胞再生可以促進大腦神經(jīng)系統(tǒng)與腦容積的增長、發(fā)育是一種天然的解毒劑,它能分解體內(nèi)過多的毒素卵磷脂的來源卵磷脂在體內(nèi)多與蛋白質(zhì)結(jié)合,以脂肪蛋白質(zhì)(脂蛋白)的形態(tài)存在著,所以卵磷脂是以豐富的姿態(tài)存在于自然界當(dāng)中蛋黃中含有豐富的卵磷脂牛奶、動物的腦、骨髓、心臟、肺臟、肝臟、腎臟大豆和酵母中都含有卵磷脂。如果能攝取足夠種類的食物,就不必?fù)?dān)心會有缺乏的問題,同時也不需要額外補充卵磷脂的營養(yǎng)品實訓(xùn)工藝圖實訓(xùn)目的(1)學(xué)習(xí)和掌握卵磷脂的提取和鑒定方法(2)掌握薄層層析的原理、方法和應(yīng)用四.實訓(xùn)原理卵磷脂可在植物的水化油或動物的腦和蛋黃中提取,尤以蛋黃中含量最高。卵磷脂溶于乙醇,不溶于丙酮,因此可以利用乙醇從蛋黃中提取粗卵磷脂,而甘油三脂、甾純?nèi)苡诒?所以可用丙酮將卵磷脂從粗卵磷脂中沉淀出來,得到精卵磷脂。因為卵磷脂能與鋅等二價重金屬離子反應(yīng)生成絡(luò)合物,因此可利用金屬鹽將卵磷脂從溶液中提取出來,后再用適當(dāng)溶劑萃取出無機鹽和其他磷脂雜質(zhì),從而提高卵磷脂的純度。實驗試劑與儀器原材料:雞蛋試劑:無水乙醇、95%乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、甲醇、鉬酸銨、硅膠G、羧甲基纖維素Na儀器:電熱恒溫水浴、強力電動攪拌器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、真空干燥箱、薄層色譜掃描儀、凍干機。實訓(xùn)步驟(一)蛋黃卵磷脂的粗提1、首先將蛋黃均質(zhì)放入帶塞瓶中備用,稱取10ml均質(zhì)蛋黃放入潔凈的帶塞三角瓶中,加入兩倍體積的95%乙醇,混合攪拌,離心5min(3000r/min);取上清液,然后加入1/3乙醇用量的乙醚,攪拌15min后,靜置,接著過濾;濾渣進行二次提取,加入乙醇與乙醚的混合液(體積比為3:1),無需攪拌靜置浸漬2、第二次過濾,合并二次液,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中60℃蒸餾至近干。加入一定量丙酮除雜,卵磷脂即沉淀出來,過濾,濾餅用丙酮沖洗幾次,至到?jīng)_洗液無色,即得到卵磷脂粗品,在真空干燥箱中干燥后,充入氮氣低溫保存。(二)柱層析分離純化卵磷脂將適量的柱硅膠(60~100目)用氯仿打成漿狀,濕法裝柱,準(zhǔn)確稱量卵磷脂粗品(EPC)2.63g用盡可能少的氯仿溶解后,倒入柱子內(nèi)。用不同濃度梯度的氯仿/甲醇混合液連續(xù)沖洗(氯仿:甲醇分別用40:1、35:1、30:1、25:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、2:3、1:2、1:3),每個濃度以100ml總量分批加入,當(dāng)加入氯仿/甲醇濃度為1:1時,以后的溶液加入量根據(jù)需要變大,即洗脫液梯度變化要慢些.根據(jù)柱中色帶及薄層層析不停的檢測收集液的結(jié)果,分開收集各種不同成份的洗脫液,把出現(xiàn)單一斑點,且在同一塊薄層板上與標(biāo)品卵磷脂有同一Rf值的洗脫液收集在一起,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成膏狀,再在凍干機上干燥,即得我們所期望的純白色的卵磷脂精品,充入氮氣低溫保存。卵磷脂的檢測薄層層析法將卵磷脂樣品與對照品分別配成2%氯仿溶液,用GF254硅膠板進行層析,展開劑為氯仿:甲醇:水(65:25:4),層析完畢后,取出薄板,干燥,碘蒸氣顯色。紫外吸收光譜測定將一定量卵磷脂樣品溶于無水乙醇,配成0。1%乙醇溶液,用紫
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