動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)緒論課件

動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)

河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院

動(dòng)物基礎(chǔ)科學(xué)系

閆峰賓畜牧樓414第一頁(yè)，共三十六頁(yè)。課程教學(xué)現(xiàn)狀：組織結(jié)構(gòu)大多肉眼看不見(jiàn)摸不著，學(xué)習(xí)起來(lái)很抽象內(nèi)容微細(xì)零散，難以記憶理解，比較枯燥乏味課時(shí)壓縮，知識(shí)的掌握上難度加大

第二頁(yè)，共三十六頁(yè)。注意事項(xiàng)：反復(fù)講解強(qiáng)調(diào)的內(nèi)容為難點(diǎn)、重點(diǎn)、考點(diǎn)“啟發(fā)式”和“問(wèn)題式”教學(xué)不能死記硬背，內(nèi)容要融會(huì)貫通，形態(tài)結(jié)構(gòu)聯(lián)系機(jī)能記好筆記隨機(jī)點(diǎn)名，與平時(shí)成績(jī)掛鉤第三頁(yè)，共三十六頁(yè)。理論教材：

1.動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)楊倩等主編，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2008年，第一版

2.動(dòng)物解剖學(xué)與組織胚胎學(xué)肖傳斌等主編，鄭州大學(xué)出版社，2009年，第一版

3.家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)沈霞芬等主編，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2010年，第四版

實(shí)驗(yàn)教材：家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)第四頁(yè)，共三十六頁(yè)。主要參考材料：(1)馬仲華主編，《家畜解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)》第三版，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社出版，2002；(2)董常生主編.《家畜解剖學(xué)》第三版(獸醫(yī)專業(yè)用)，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社出版，2001；(3)成令忠主編.《組織學(xué)與胚胎學(xué)》.第四版，北京：人民衛(wèi)生出版社，2000(4)秦鵬春等著.《哺乳動(dòng)物胚胎學(xué)》.北京：科學(xué)出版社，2001(5)沈霞芬主編.《家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)》.第三版，北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001(6)王樹(shù)迎王政富主編.《動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)》.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社，2000(7)李德雪尹昕主編.《動(dòng)物組織學(xué)彩色圖譜》.長(zhǎng)春：吉林科技出版社，1995(8)張端蓮主編.組織學(xué)彩色圖譜.科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2000(9)Laboratory

manual

anatomy

﹠Physiology

fifth

edition（10）李霞主編.水產(chǎn)動(dòng)物組織胚胎學(xué).中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006

第五頁(yè)，共三十六頁(yè)。

第一章

緒論

教學(xué)目的：

1．掌握動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念、研究?jī)?nèi)容。

2．了解動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法。

3．掌握動(dòng)物組織學(xué)常用術(shù)語(yǔ)及計(jì)量單位。

重點(diǎn)和難點(diǎn)：

1．動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念、研究?jī)?nèi)容。

2．動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法。

3．動(dòng)物組織學(xué)常用術(shù)語(yǔ)及計(jì)量單位。

第六頁(yè)，共三十六頁(yè)。思考題：

1.簡(jiǎn)述組織學(xué)與胚胎學(xué)的定義及其研究?jī)?nèi)容.

2．常用的組織胚胎學(xué)的研究方法有哪些？

3．名詞解釋：嗜酸性、嗜堿性、異染性、H.E.染色。

第七頁(yè)，共三十六頁(yè)。第一節(jié)動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念

動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)包括細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)和胚胎學(xué)三部分內(nèi)容。

一．

動(dòng)物組織學(xué)（Histology）的定義及其研究的內(nèi)容

1．定義：動(dòng)物組織學(xué)是研究動(dòng)物機(jī)體正常微細(xì)結(jié)構(gòu)及其機(jī)能的科學(xué)。細(xì)胞

2．研究?jī)?nèi)容：微細(xì)結(jié)構(gòu)基本組織

器官組織

第八頁(yè)，共三十六頁(yè)。3．研究方法（1）微觀結(jié)構(gòu)

A光學(xué)顯微鏡及其研究技術(shù)（顯微結(jié)構(gòu)）

B電子顯微鏡及其研究技術(shù)（超微結(jié)構(gòu)）（2）特殊染色方法

A組織化學(xué)技術(shù)

B免疫組織化學(xué)技術(shù)

C同位素示蹤技術(shù)第九頁(yè)，共三十六頁(yè)。3．研究方法：

（1）

微觀結(jié)構(gòu):

A.光學(xué)顯微鏡(Lightmicroscope，LM)

光學(xué)顯微鏡基本結(jié)構(gòu)：1.

照明燈(Lamp)2.

聚光器(Condenser)3.

載物臺(tái)和切片夾(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.

推進(jìn)器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.

物鏡(Objectives)6.

粗細(xì)螺旋(Courseandfinefocusknob)7.

目鏡(Oculars)8.

照相機(jī)等接口(Connectiontocamera,etc.)第十頁(yè)，共三十六頁(yè)。第十一頁(yè)，共三十六頁(yè)。

光鏡技術(shù)

分辨率(Resolution)也叫分辨力，是指能夠分辨開(kāi)的兩物點(diǎn)之間的最小距離。LM的分辨率約為0.2μm。

例：在明視距離（25cm）之處，正常人眼所能看清相距0.073mm的兩個(gè)物點(diǎn)，這個(gè)0.073mm的數(shù)值，即為正常人眼的分辨距離。

微細(xì)結(jié)構(gòu)的大小及長(zhǎng)度光鏡以微米（μm）作單位，電鏡以納米（nm）作單位。

1m=101dm=102cm=103mm=106um=109nm=1010?=1012pm

第十二頁(yè)，共三十六頁(yè)。切片(Section)

：將組織切薄使光線可以透過(guò)。有石蠟切片、冰凍切片、火棉膠切片。

石蠟切片的制作過(guò)程：取材——→固定——→水洗——→脫水——→透明——→浸蠟——→包埋——→切片——→鋪片——→脫蠟——→復(fù)水——→染色——→水洗——→脫水——→透明——→封存

固定(Fixation):為保存新鮮組織的微觀結(jié)構(gòu)，盡快將組織浸入到酒精，甲醛，苦味酸，Bouin’s液或Zenker’s液等固定劑中。

第十三頁(yè)，共三十六頁(yè)。石蠟包埋(Paraffinembedding):*脫水(Dehydration):用濃度逐漸升高的酒精(70~100%)將組織中的水完全置換出來(lái)。*透明(Clearing):用二甲苯完全置換出酒精。浸蠟(Infiltration):在60~62?C時(shí)，用液態(tài)石蠟完全置換出二甲苯。室溫時(shí)石蠟?zāi)坛晒虘B(tài)，內(nèi)含待切組織。切片:用切片機(jī)將組織切成４~７μm厚的蠟片，然后將其放到溫水上，待其完全展開(kāi)后，裱到有粘附劑的載玻片上。第十四頁(yè)，共三十六頁(yè)。第十五頁(yè)，共三十六頁(yè)。除切片外，還有其他處理組織的方法：*鋪片(Wholemount):用于很薄的組織，如腸系膜。*磨片(Groundsection):用于很堅(jiān)硬的組織，如骨和牙。*涂片(Smear):用于液態(tài)組織，如血液，精液和唾液。第十六頁(yè)，共三十六頁(yè)。哈弗斯管（中央管）骨細(xì)胞胞體骨細(xì)胞突起哈弗斯系統(tǒng)/骨單位（銀染）哈弗斯骨板第十七頁(yè)，共三十六頁(yè)。第十八頁(yè)，共三十六頁(yè)。染色(Staining):染料可以將微觀結(jié)構(gòu)顯示不同的顏色以便觀察鑒別。在染色前，需要脫蠟入水，因?yàn)槿玖鲜撬苄缘摹Ｗ畛Ｓ玫娜玖鲜翘K木素(Hematoxylin,H)和伊紅(Eosin,E)。*蘇木素是堿性染料，藍(lán)紫色，可以使細(xì)胞核等著色。被蘇木素著色的結(jié)構(gòu)本身為酸性，具有嗜堿性(Basophilic)。第十九頁(yè)，共三十六頁(yè)。*伊紅是酸性染料，粉紅色?？梢詫⒋蠖鄶?shù)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)染成紅色。被伊紅著色的結(jié)構(gòu)本身為堿性，具有嗜酸性(Acidophilic)。*不易被蘇木素和伊紅著色的結(jié)構(gòu)具有嗜中性(Neutrophilic)。第二十頁(yè)，共三十六頁(yè)。肥大細(xì)胞的顆粒被甲苯銨藍(lán)(一種藍(lán)色染料)染成紫紅色b.

如果某結(jié)構(gòu)顯示的顏色和染料本身的顏色不同，該結(jié)構(gòu)具有異染性(Metachromasia)。c.

如果某結(jié)構(gòu)能將銀離子還原成銀原子，并吸附銀原子而使自身顯示棕黑色，該結(jié)構(gòu)具有嗜銀性(Argyrophilic)。第二十一頁(yè)，共三十六頁(yè)。網(wǎng)狀纖維具有嗜銀性，因此可以用銀鹽染色來(lái)顯示。第二十二頁(yè)，共三十六頁(yè)。H&E染色的中等動(dòng)靜脈不同的染色方法，其結(jié)果不同。第二十三頁(yè)，共三十六頁(yè)。醛復(fù)紅染色的中等動(dòng)靜脈（彈性纖維）第二十四頁(yè)，共三十六頁(yè)。B.EM技術(shù):.EM可分為透射電鏡(TEM)和掃描電鏡(SEM)2類。.EM的原理和LM相似，但用電子束代替光線，磁場(chǎng)代替玻璃透鏡。分辨率約為0.2nm，放大幾萬(wàn)，幾十萬(wàn)，甚至上百萬(wàn)倍。

第二十五頁(yè)，共三十六頁(yè)。.EM的組織的制備與LM的相似，但有以下不同:a.

通常使用戊二醛和四氧化鋨作雙重固定。b.

切片超薄

(厚度小于90nm)，塑膠包埋。c.

用重金屬鹽如醋酸鈾或醋酸鉛等染色。因此，所有原始的電鏡圖片都是黑白的。電子密度高（深）、電子密度低（淺）、正染色、負(fù)染色第二十六頁(yè)，共三十六頁(yè)。TEM顯示胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。第二十七頁(yè)，共三十六頁(yè)。SEM顯示巨噬細(xì)胞表面第二十八頁(yè)，共三十六頁(yè)。（2）.特殊的染色方法:A.組織化學(xué)(Histochemistry,

細(xì)胞化學(xué))法:通過(guò)生物化學(xué)的方法在原位產(chǎn)生不溶解的有顏色的反應(yīng)產(chǎn)物，來(lái)顯示微細(xì)結(jié)構(gòu)的位置，然后用顯微鏡觀察。

PAS反應(yīng):用來(lái)顯示多糖的分布。先用過(guò)碘酸(Periodicacid)將多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛結(jié)構(gòu)，然后用無(wú)色亞硫酸品紅(Schiff試劑)還原戊二醛形成紫紅色沉淀。第二十九頁(yè)，共三十六頁(yè)。肝臟的PAS染色第三十頁(yè)，共三十六頁(yè)。B免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry)染色法:a.

待測(cè)結(jié)構(gòu)或化學(xué)物質(zhì)被看作抗原(Antigen)，通過(guò)非常敏感和專一的免疫反應(yīng)使抗原和被標(biāo)記的抗體(Antibody)結(jié)合，然后顯示標(biāo)記物，在原位產(chǎn)生不溶有色的反應(yīng)產(chǎn)物，最后用顯微鏡觀察。第三十一頁(yè)，共三十六頁(yè)。b2種基本染色法:*直接法:第一抗體被標(biāo)記。*間接法:第一抗體也被看作抗原，而第二抗體被標(biāo)記。因?yàn)樾盘?hào)被放大，因此更加敏感。C.放射自顯影(Autoradiography):給細(xì)胞所要代謝的物質(zhì)分子上標(biāo)記放射性物質(zhì)如I125等，間隔照相，從而追蹤該物質(zhì)代謝途徑。第三十二頁(yè)，共三十六頁(yè)。二．動(dòng)物胚胎學(xué)定義及其研究?jī)?nèi)容

1．定義：研究動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育的過(guò)程及其變化規(guī)律的科學(xué)。

胚前發(fā)育

廣義動(dòng)物胚胎學(xué)（發(fā)育生物學(xué)）胚胎發(fā)育

2.研究?jī)?nèi)容胚后發(fā)育

狹義動(dòng)物胚胎學(xué)（胚胎發(fā)育）

第三十三頁(yè)，共三十六頁(yè)。1.

組織學(xué)又叫微觀解剖學(xué)(Microanatomy)，是解剖學(xué)知識(shí)的進(jìn)一步完善。2.

結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，學(xué)好組織學(xué)是學(xué)好生理學(xué)(Physiology)的基礎(chǔ)。3.

只有了解正常結(jié)構(gòu)，才能學(xué)習(xí)其異常變化。因此組織學(xué)是病理學(xué)(Pathology)的基礎(chǔ)。第二節(jié)動(dòng)物組胚學(xué)在畜牧獸醫(yī)教育中的地位第三十四頁(yè)，共三十六頁(yè)。附實(shí)驗(yàn)課應(yīng)注意的問(wèn)題:1.

體內(nèi)結(jié)構(gòu)為立體的，三維的，而課本、講義和顯微鏡