細(xì)菌與噬菌體的遺傳

關(guān)于細(xì)菌與噬菌體的遺傳19.05.20231第1頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202321.細(xì)菌的遺傳分析細(xì)菌的一般特征大腸桿菌的突變型及篩選細(xì)菌的遺傳重組第2頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.20233大腸桿菌（E.coli

）遺傳:E.coli4.6Mb.4288genes90%encodeproteinInsertionsequences(IS)E.coliK12DNAsequence，19971.1細(xì)菌的一般特征(見《微生物學(xué)》教材)典型代表第3頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202341.２大腸桿菌的突變型及篩選1、大腸桿菌的突變型E.coli突變類型合成代謝功能的突變型：如：甲硫氨酸缺陷型寫作met-

其相應(yīng)的野生型寫作：met+

抗性突變型：如：青霉素抗性菌株寫作：penr

青霉素敏感性菌株寫作：pens

分解代謝功能的突變型：如：乳糖突變型寫作lac-

其相應(yīng)的野生型寫作：lac+

在基本培養(yǎng)基上不能正常生長，只能在相應(yīng)的營養(yǎng)培養(yǎng)基上生長第4頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202352、突變型的篩選（１）選擇培養(yǎng)法：根據(jù)菌株在基本培養(yǎng)基和營養(yǎng)培養(yǎng)基上的生長表現(xiàn)將菌株分為原養(yǎng)型(原生營養(yǎng)型)與營養(yǎng)缺陷型。（２）顯色（３）抗生素在基本培養(yǎng)基上不能正常生長，只能在相應(yīng)的營養(yǎng)培養(yǎng)基上生長第5頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202363、E.coli作遺傳研究材料的優(yōu)點(diǎn)（1）有許多營養(yǎng)缺陷型,且易于選擇和鑒定（2）生活周期短:繁殖快,積累代謝物質(zhì)多；（3）繁殖快,數(shù)量大,易發(fā)現(xiàn)和鑒定突變型；（4）結(jié)構(gòu)簡單:DNA裸露,單倍性,利于基因精細(xì)結(jié)構(gòu)和基因功能表達(dá)調(diào)控的研究第6頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202371.3細(xì)菌的遺傳重組1、細(xì)菌的轉(zhuǎn)化與作圖2、細(xì)菌的接合與中斷雜交作圖3、F′因子和性導(dǎo)4、轉(zhuǎn)導(dǎo)第7頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202381.3.1

細(xì)菌的轉(zhuǎn)化與作圖1.3.1.1概念：轉(zhuǎn)化（trnansformation）：供體DNA片斷不經(jīng)過中間媒介直接被受體吸收并整合到受體染色體上的過程。細(xì)菌的轉(zhuǎn)化：一個(gè)供體菌株的DNA片斷被感受態(tài)受體菌株吸收并整合到受體染色體上的過程。第8頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.20239感受態(tài)細(xì)胞:轉(zhuǎn)化子：由于轉(zhuǎn)化導(dǎo)致基因重組而形成的各種類型的細(xì)菌細(xì)胞。第9頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023101.3.1.2轉(zhuǎn)化與作圖利用轉(zhuǎn)化繪制細(xì)菌連鎖遺傳圖譜的基本原理：相鄰基因發(fā)生共同轉(zhuǎn)化的概率與兩者的距離間成正比關(guān)系，基因間距離越近，發(fā)生共同轉(zhuǎn)化的頻率越高，反之越低。因此可通過測定兩基因共同轉(zhuǎn)化的頻率來指示基因間的相對(duì)距離。第10頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202311第一步：確定兩個(gè)基因是否為連鎖關(guān)系A(chǔ)BAB方法：觀察外源DNA濃度降低時(shí)轉(zhuǎn)化頻率的變化[在一定的范圍內(nèi)（較低的）轉(zhuǎn)化頻率和轉(zhuǎn)化DNA的濃度成正比]。DNA濃度下降比率A轉(zhuǎn)化率下降比率B轉(zhuǎn)化率下降比率A與B共轉(zhuǎn)化率下降比率A與B關(guān)系1/101/101/101/10連鎖1/101/101/101/100不連鎖第11頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202312第二步計(jì)算重組值例:已知枯草桿菌的三個(gè)基因連鎖供體：typ2+his2+tyr1+受體：typ2-his2-tyr1-基因轉(zhuǎn)化子類型typ2his2tyr1合計(jì)+---+++++-+--++++--+-11940366068541826001071180問題：為什么沒有---基因型？第12頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202313RF（typ2-his2）=×100%=34%RF（typ2-tyr1）=40%RF（his2-tyr1）=13%基因轉(zhuǎn)化子類型typ2his2tyr1合計(jì)+---+++++-+--++++--+-1194036606854182600107118013200+67853660+418+2600+107typ2tyr1his234cM13cM問題：40≠13+30？第13頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202314篩選

在發(fā)生了4次交換的時(shí)候兩邊的兩個(gè)基因我們并沒把交換的結(jié)果當(dāng)重組型計(jì)算，而是當(dāng)親本計(jì)算了。typ2+tyr1+typ2-his2-tyr1-his2+typ2+his2-tyr1+第14頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023151.3.2細(xì)菌的接合

why?營養(yǎng)互補(bǔ)？基因重組？(1)LederbergandTatum(1946年)的實(shí)驗(yàn)頻率1×10-7

1.3.2.1接合現(xiàn)象的實(shí)驗(yàn)證據(jù)

第15頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202316（2）1950年，DavisU型管實(shí)驗(yàn)1:兩菌株細(xì)胞的直接接觸對(duì)野生型的產(chǎn)生是必要的;2:野生型不是營養(yǎng)互補(bǔ)產(chǎn)生的,而是細(xì)菌發(fā)生了基因重組結(jié)論第16頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023171.3.2.2遺傳物質(zhì)的單方向傳遞證據(jù)----HayesW.(1952)的雜交實(shí)驗(yàn)

菌株A：met-thr+leu+thi+;菌株B：met+thr-leu-thi-，鏈霉素處理A或B，只是阻礙它們的分裂，但并不殺死它們。

1）菌株A×菌株B→野生型菌株2）鏈霉素處理的菌株A×菌株B→野生型菌株3）鏈霉素處理的菌株B×菌株A→無野生型菌株

頻率相當(dāng)1:E.coli有相當(dāng)于高等生物的性別;2:其遺傳物質(zhì)是由♂(donor)→♀(receptor)單向傳遞的.結(jié)論第17頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202318接合(conjugation)：遺傳物質(zhì)從供體(donor)(“雄性”)轉(zhuǎn)移到受體(receptor)(“雌性”)的重組過程。

第18頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023191.3.2.3F因子和高頻重組F因子（Ffactor）：

Hayes等進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌在接合中作供體的能力受細(xì)胞內(nèi)一種致育因子(fertilityfactor,F因子;sexfactor,性因子)控制。攜帶F因子的菌株稱供體菌或雄性，用表示，沒有F因子的菌株稱為雌性，用表示。F+F-F因子的化學(xué)本質(zhì)是dsDNA,可自主狀態(tài)存在于細(xì)胞質(zhì)中或整合到細(xì)菌的染色體上;可在細(xì)菌細(xì)胞間進(jìn)行轉(zhuǎn)移并傳遞遺傳物質(zhì)F-第19頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202320復(fù)制原點(diǎn)區(qū)（originregion）：轉(zhuǎn)移的起點(diǎn)，oriT和oriV配對(duì)區(qū)（pairingregion）：該區(qū)域與細(xì)菌染色體上的多處序列相互配對(duì)。致育基因區(qū)（fertilitygeneregion）：使細(xì)菌具有侵染性。含有F因子的菌株稱為F+不含F(xiàn)因子的菌株稱為F-第20頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023211）接合管的形成：菌株靠近→細(xì)胞膜融合→兩細(xì)胞間形成接合管2）F因子轉(zhuǎn)移：F因子從原點(diǎn)斷裂，以原點(diǎn)為先導(dǎo)，邊復(fù)制邊轉(zhuǎn)移,

復(fù)制后的F因子轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞中。細(xì)胞分開，使F-變成F+。在此過程程中，F(xiàn)因子以高頻率從F+菌向F-菌轉(zhuǎn)移,而染色體基因的轉(zhuǎn)移則很少發(fā)生，重組頻率大約只有10-6，因此，F(xiàn)+菌稱為

低頻重組（lowfrequencyrecombination，Lfr）。

細(xì)菌的接合第21頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202322第22頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202323

F+菌株中一個(gè)新的菌株，它在和F-菌株雜交時(shí)，出現(xiàn)重組子的頻率很高，比F+×F-雜交所出現(xiàn)的重組子的頻率高1000倍，該菌株被稱作高頻重組菌株，簡稱為Hfr菌株。

Hfr×F--→重組子的頻率很高，但F-細(xì)菌很少有轉(zhuǎn)變?yōu)镕+細(xì)菌的。

Hfr菌株第23頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202324通過交換F因子整合到細(xì)菌染色體上形成Hfr菌株，由于Hfr仍包含F(xiàn)因子，因此具有侵染能力。Hfr菌株的形成第24頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202325Hfr的Ｆ因子轉(zhuǎn)移特點(diǎn):（1）F因子整合后呈線狀；（2）轉(zhuǎn)移起點(diǎn)位于中間；先轉(zhuǎn)移F因子部分,F因子的致育基因最后轉(zhuǎn)移。（3）轉(zhuǎn)移往往會(huì)自發(fā)斷裂，形成部分二倍體。第25頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202326外基因子（exogenote）內(nèi)基因子（endogenote）部分二倍體（partialdiploid）ABab第26頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023271.3.2.４用中斷雜交技術(shù)作連鎖圖

根據(jù)供體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的順序和時(shí)間繪制連鎖圖的技術(shù)，叫中斷雜交技術(shù)（interruptedmating）。

Wollman和Jacob在五十年代設(shè)計(jì)了中斷雜交試驗(yàn)，以證明接合時(shí)遺傳物質(zhì)從供體細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是直線式進(jìn)行的。第27頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202328(1)中斷雜交實(shí)驗(yàn)作圖原理：

①

Hfr染色體上的基因是從某一點(diǎn)（原點(diǎn)：O）開始，以線性方式進(jìn)入Ｆ-的；②離原點(diǎn)愈近的基因進(jìn)入Ｆ-愈早,出現(xiàn)在Ｆ-中的比例愈大,反之,則愈小；第28頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202329（2）實(shí)驗(yàn)過程：兩種菌混合培養(yǎng)，計(jì)時(shí)t=0每隔一定時(shí)間攪拌菌液，打斷結(jié)合管以中斷雜交。稀釋菌液，測試其基因型，以便確定每個(gè)基因轉(zhuǎn)移到F-細(xì)胞的時(shí)間。例如：1′內(nèi)出現(xiàn)受體A基因，則說明A近原點(diǎn)；2′內(nèi)出現(xiàn)AB基因，則B在A之后，；3′內(nèi)出現(xiàn)了ABC基因，則C在AB之后，…。單位：時(shí)間單位（分鐘）

，即：按時(shí)間來定位，標(biāo)出不同基因位于原點(diǎn)的先后位置，

來定位基因。第29頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202330(3)第30頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202331第31頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202332第32頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023331.3.1.5

細(xì)菌接合的重組作圖1.3.2.3中斷雜交實(shí)驗(yàn)乳糖選擇基本培養(yǎng)基第33頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202334注：用后進(jìn)入的基因作為選擇標(biāo)記，才能保證所有基因進(jìn)入受體細(xì)胞。重組值和時(shí)間單位的換算：

1min≈20圖距單位≈20cM第34頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202335

在Hfr菌與F+菌的互相轉(zhuǎn)變過程中，偶爾會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則分離的現(xiàn)象，使F因子攜帶有一段相鄰的細(xì)菌染色體，這種帶有插入細(xì)菌基因的環(huán)狀F因子稱為F′因子(F-primefactor)。帶有F′因子的菌能像F+菌一樣把F因子轉(zhuǎn)移給F-菌，轉(zhuǎn)移F因子的能力很強(qiáng)，同時(shí)也能轉(zhuǎn)移細(xì)菌基因。

利用F`因子將供體菌的基因?qū)胧荏w形成部分二倍體的過程，叫做性導(dǎo)（sexduction）1.3.3F′因子和性導(dǎo)（sexduction）第35頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202336注意：經(jīng)過性導(dǎo)形成的部分二倍體和Hfr形成的部分二倍體一樣嗎？性導(dǎo)第36頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202337F`因子攜帶的細(xì)菌染色體長度是不同的；

F`因子攜帶全部的F因子基因；

F`因子具有侵染性。F`因子的特征：第37頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202338細(xì)菌基因重組的特點(diǎn):(1)細(xì)菌基因重組是在部分二倍體中進(jìn)行;(2)只有偶數(shù)交換才產(chǎn)生有活性的重組子;(3)不出現(xiàn)相反的重組子.小結(jié)第38頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023391、以大腸桿菌為例，F(xiàn)因子三種不同的存在狀態(tài)：

F因子

F`因子

Hfr2、帶有自由狀態(tài)的F因子的菌株--------F+菌株不帶F因子的菌株------------------F-菌株

F因子整合到染色體上的------------Hfr菌株含F(xiàn)`因子的菌株------------------F`菌株3、四種菌株之間的相互侵染及轉(zhuǎn)變關(guān)系。小結(jié)第39頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202340Lederberg和N.zinder等1956年在對(duì)傷寒沙門氏菌的研究中發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。A:phe-trp-tyr-his＋B:phe＋trp＋tyr＋his-

1.3.４轉(zhuǎn)導(dǎo)（Transduction）

混合培養(yǎng)出現(xiàn)約10-5的野生型菌株，說明有遺傳重組。U形管實(shí)驗(yàn)第40頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202341U形管實(shí)驗(yàn)LT-2LT-22第41頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202342LT22是攜帶p22的溶源性細(xì)菌，LT2是對(duì)p22敏感的非溶源性細(xì)菌。LT22突變型釋放p22到培養(yǎng)液中穿過隔膜侵染LT2LT2裂解，釋放p22及轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體穿膜侵染LT22，發(fā)生基因重組LT22原養(yǎng)型第42頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202343轉(zhuǎn)導(dǎo)（Transduction）：

以噬菌體為媒介，將細(xì)菌的小片段染色體或基因從一個(gè)細(xì)菌轉(zhuǎn)移到另一細(xì)菌的過程。分類:普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)（Generalizedtransduction）特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)（Specializedtransduction）

具有轉(zhuǎn)導(dǎo)功能的噬菌體稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。第43頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023441.3.４.1普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與作圖普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：供體基因組中所有基因具有同等機(jī)會(huì)被轉(zhuǎn)導(dǎo)形成部分二倍體，經(jīng)交換和重組后形成不同的轉(zhuǎn)導(dǎo)子，這種轉(zhuǎn)導(dǎo)稱為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)。機(jī)理：第44頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202345普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程：第45頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202346普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點(diǎn)：（1）頻率很低；一般只有0.3%的噬菌體是轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。（2）如果細(xì)菌的兩個(gè)基因距離較大，大于噬菌體的染色體長度，一般就不能同時(shí)被轉(zhuǎn)導(dǎo)。（3）如果細(xì)菌的兩個(gè)基因被同時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)說明兩個(gè)基因緊密連鎖，這稱為共轉(zhuǎn)導(dǎo)或并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)（cotransduction）。共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率越高說明兩個(gè)基因的距離越近，連鎖越緊密；反之，說明兩個(gè)基因離得越遠(yuǎn)。細(xì)菌的基因作圖。第46頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202347普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的應(yīng)用：第47頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202348第48頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202349共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率和圖距的關(guān)系公式:

d(圖距)=L(1-√x)L-----轉(zhuǎn)導(dǎo)DNA的平均長度

X-----兩個(gè)基因的共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率3第49頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023501.3.４.2局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)：

一些溫和性噬菌體只能轉(zhuǎn)移供體染色體上原噬菌體整合位置附近的特定基因，這種轉(zhuǎn)導(dǎo)稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)，又稱特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)

。

λ噬菌體特異的轉(zhuǎn)導(dǎo)gal+和bio+

基因。例：溫和性噬菌體λ，它可以自主狀態(tài)存在，也可以整合到大腸桿菌K12染色體上的特定位點(diǎn)attB，形成原噬菌體。第50頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202351a）溶源性細(xì)菌的產(chǎn)生b）原初裂解物的產(chǎn)生原噬菌體不正常環(huán)出離開細(xì)菌染色體時(shí)帶走整合位點(diǎn)附近的基因gal，但是丟掉自己的部分基因，成為一個(gè)有缺陷的噬菌體，記作：λdgal+或λdbio+，但是仍具有侵染力，所有可以將bio或gal基因轉(zhuǎn)導(dǎo)。λ噬菌體的轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制第51頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202352C）λdgal+與已整合的野生型λ通過單交換進(jìn)行同源重組而形成λ/λdgal+，其裂解物中，具有等量大量的λ和λdgal+，感染gal-受體菌時(shí)，轉(zhuǎn)導(dǎo)子gal+出現(xiàn)的頻率非常高，故稱為高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（HFT）。雙重溶源菌highfrequencytransduction雙重溶源菌

第52頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023532噬菌體遺傳分析

2.1噬菌體的生物學(xué)特性

第53頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202354（2）溫和噬菌體----感染細(xì)菌后，一般不出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象的噬菌體，被稱為溫和噬菌體，又稱溶源性細(xì)菌。

（1）烈性噬菌體----使宿主菌發(fā)生裂解的噬菌體

二者第54頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202355（1）烈性噬菌體的繁殖遺傳學(xué)上應(yīng)用較廣泛的是大腸桿菌的T噬菌體。2.２噬菌體的繁殖第55頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202356（2）溫和性噬菌體的繁殖溫和噬菌體侵入細(xì)菌后，細(xì)菌并不裂解，即它們有溶源性的生活周期。例如λ和P1噬菌體。λ噬菌體附著在大腸桿菌染色體的gal和bio位點(diǎn)之間的attλ座位上，它能通過交換而整合到細(xì)菌染色體上，整合的噬菌體稱為原噬菌體。含有原噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌，對(duì)同種噬菌體不敏感，具有免疫性。溫和性噬菌體的繁殖方式：和烈性噬菌體一樣第56頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202357２.３第57頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202358第58頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202359透明/小半透明/大透明/大半透明/小第59頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202360大第60頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202361第61頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202362第62頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023631、噬菌體遺傳的幾個(gè)特征（1）從單個(gè)混合感染的細(xì)菌中可以得到親本和重組噬菌體２.4噬菌體的基因重組與作圖兩個(gè)不同的噬菌體共同感染一個(gè)細(xì)菌復(fù)制后發(fā)生重組裂解釋放親本和重組噬菌體A+B-、A-B+、A+B+、A-B-A+B-A-B+A+B+A-B-第63頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202364（2）三親本重組體的出現(xiàn)三個(gè)不同的突變型噬菌體共同感染一個(gè)細(xì)菌，重組可以多次在三個(gè)噬菌體間發(fā)生。（3）重組體比例隨宿主細(xì)胞破裂時(shí)間而改變E.Colix+y+z-x+y-z+x-y+z+X-y-z-第64頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023652、噬菌體的突變型（1）快速溶菌突變型裂解細(xì)菌細(xì)胞速度快，能形成大的四周清晰的噬菌斑的突變型。野生型r+噬菌斑小、中心清晰、四周模糊突變型r噬菌斑大、四周清晰（2）寄主范圍突變型能侵入并裂解原來具有抗性的細(xì)菌細(xì)胞的突變。野生型h+能侵染E.Coli菌株B，不能侵染B/2菌株用h+侵染B和B/2的混合菌，形成半透明噬菌斑突變型h能侵染E.Coli菌株B，也能侵染B/2菌株用h+侵染B和B/2的混合菌，形成透明噬菌斑第65頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202366(1)用兩個(gè)不同的T2噬菌體共同侵染E.coli

B菌株基因型h+r

（半透明，大噬菌斑）基因型hr+（透明，小噬菌斑）（2）把釋放出的子代噬菌體接種在培養(yǎng)有B和B/2的培養(yǎng)基上，可以看到四種不同的噬菌斑，統(tǒng)計(jì)不同的噬菌斑的數(shù)量。3、hr基因的重組第66頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202367（3）計(jì)算重組值

RF（h-r）=×100%

重組型噬菌斑數(shù)量總噬菌斑數(shù)量三個(gè)基因間的三點(diǎn)測交自學(xué)(hr)+(h+r+)第67頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023681、噬菌體的條件致死突變型概念：條件致死突變(conditionallethalmutations)

噬菌體大部分基因的功能是復(fù)制和產(chǎn)生子代噬菌體所必需的，這些基因的突變是致死的，不能形成噬菌斑，其中有些致死突變在限制條件下是致死的，而在許可條件下可形成噬菌斑，這種突變稱為條件致死突變。

２.5噬菌體基因的精細(xì)作圖第68頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202369表野生型與幾種突變型的區(qū)別

表現(xiàn)型

不同大腸桿菌平板上噬菌斑表型BK()

野生型小噬菌斑小噬菌斑rI大噬菌斑小噬菌斑rII大噬菌斑無噬菌斑（致死）rIII大噬菌斑小噬菌斑Benzer實(shí)驗(yàn)所用的T4的rⅡ突變就是一個(gè)條件致死突變型。第69頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.2023702Benzer的重組實(shí)驗(yàn)與精細(xì)作圖：Benzer最初得到8個(gè)rII獨(dú)立的突變型，將8種突變型兩兩組合感染E.coliB菌株（雙重感染），從混合培養(yǎng)物中提取噬菌體顆粒感染E.coliK(λ)菌株。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：E.coliK(λ)上出現(xiàn)野生型噬菌斑。第70頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.05.202371RF=×100%=×100%2×r+噬菌斑數(shù)2×K12（λ）上的噬菌斑數(shù)總噬菌斑數(shù)B上的噬菌斑數(shù)K12（λ）B第71頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月19.