GFβSmad信號(hào)通路在胃癌發(fā)展中的角色轉(zhuǎn)換及機(jī)制百替生物

報(bào)告人：KITA2014-10-17

TGF-β/Smad信號(hào)通路在胃癌發(fā)展中的角色轉(zhuǎn)換及機(jī)制研究背景介紹TGF-β首先結(jié)合II型TGF-β受體（TβRⅡ），然后募集并磷酸化I型TGF-β受體（TβRI），活化的受體隨后磷酸化受體活化介導(dǎo)的Smads（R-Smads），磷酸化的R-Smads再與共同介導(dǎo)的Smads（Co-Smads）即Smad4結(jié)合，形成異源寡聚體復(fù)合物，然后轉(zhuǎn)位進(jìn)入核內(nèi)，直接與DNA結(jié)合或與其它DNA結(jié)合蛋白一起發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子作用，調(diào)節(jié)特異性靶基因的轉(zhuǎn)錄；另一方面，抑制性Smads（I-Smads），包括Smad6和Smad7，可拮抗受體介導(dǎo)的Smads信號(hào)傳遞，形成控制TGF-β反應(yīng)的負(fù)反饋環(huán)路。

Smads蛋白含400-500個(gè)氨基酸，其一級(jí)結(jié)構(gòu)分為3個(gè)功能區(qū)：高度保守的N端的MH1區(qū)C端的MH2區(qū)及中間富含脯氨酸的連接區(qū)MH2區(qū)是功能效應(yīng)區(qū)，可被TβRI識(shí)別并被磷酸化MH1區(qū)是MH2區(qū)的功能抑制區(qū)連接區(qū)含有幾個(gè)磷酸化位點(diǎn)，致使Smads信號(hào)通路與其他信號(hào)MAPK信號(hào)通路有交聯(lián)反應(yīng)。

檢測胃癌不同階段中Smad蛋白的表達(dá)變化，分析其變化規(guī)律，明確起主導(dǎo)作用Smad蛋白；通過胃癌細(xì)胞株模型，在細(xì)胞分子水平上分析TGF-β/Smad通路的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控關(guān)系，驗(yàn)證Linker理論，揭示Smad蛋白在胃癌細(xì)胞中分子機(jī)制及雙向作用的關(guān)鍵差異基因；建立胃癌移植瘤模型，研究Smad2/3蛋白不同表達(dá)對(duì)胃癌生長和轉(zhuǎn)移影響，尋求下調(diào)胃癌TGF-β/Smad通路中關(guān)鍵靶點(diǎn)。檢測胃癌不同階段中Smad蛋白的表達(dá)變化，分析其變化規(guī)律，明確起主導(dǎo)作用Smad蛋白：胃癌組織，胃癌旁正常組織：TGF-β，Smad2、Smad3、p-Smad3(S204)、p-Smad3(S208)、p-Smad3(T179)、p-Smad2(T220)、p-Smad2（S245/250/255）；通過胃癌細(xì)胞株模型，在細(xì)胞分子水平上分析TGF-β/Smad通路的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控關(guān)系，驗(yàn)證Linker理論，揭示Smad蛋白在胃癌細(xì)胞中分子機(jī)制及雙向作用的關(guān)鍵差異基因；選擇胃癌細(xì)胞MGC-803,BGC-823以及SGC-7901；WB本底檢測linker區(qū)域蛋白的表達(dá)linker區(qū)域的Smad2、Smad3、p-Smad3(S204)、p-Smad3(S208)、p-Smad3(T179)、p-