紫外、熒光分光光度計(jì)

一、設(shè)備名稱：RF-5301PC熒光分光光度計(jì)；二、使用原理1、熒光分光光度計(jì)由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來(lái)。

熒光是光致發(fā)光，任何熒光物質(zhì)都具有激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，發(fā)射波長(zhǎng)總是大于激發(fā)波長(zhǎng)。熒光激發(fā)光譜是通過測(cè)定熒光體的發(fā)光通量隨波長(zhǎng)變化而獲得的光譜，反映不同波長(zhǎng)激發(fā)光引起熒光的相對(duì)效率。熒光發(fā)射光譜是當(dāng)熒光物質(zhì)在固定的激發(fā)光源照射后所產(chǎn)生的分子熒光，是熒光強(qiáng)度對(duì)發(fā)射波長(zhǎng)的關(guān)系曲線，表示在所發(fā)射的熒光中各種波長(zhǎng)相對(duì)強(qiáng)度。由于各種不同的熒光物質(zhì)有它們各自特定的熒光發(fā)射波長(zhǎng)，可用它來(lái)鑒定熒光物質(zhì)。有些發(fā)熒光的物質(zhì)其熒光強(qiáng)度與物質(zhì)的濃度成正比，故可用熒光分光光度法測(cè)定其含量。

在溶液中，當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí),其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。利用某些物質(zhì)受激發(fā)出的熒光，其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的含量成一定函數(shù)關(guān)系的性質(zhì)而制成的。三、組成結(jié)構(gòu)光源、光件、樣品池、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理器1、熒光分光光度計(jì)圖RF5301PC熒光分光光度計(jì)主要是由激發(fā)光源、激發(fā)單色器、樣品池、發(fā)射單色器、檢測(cè)器以及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)幾部分組成1.

光源：

為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm

范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等，故較常用。

2．激發(fā)單色器：

置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。

3．發(fā)射單色器：

置于樣品室和檢測(cè)器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。

4．

樣品室：

通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測(cè)量液體時(shí)，光源與檢測(cè)器成直角安排；測(cè)量固體時(shí)，光源與檢測(cè)器成銳角安排。

5．

檢測(cè)器：

一般用光電管或光電倍增管作檢測(cè)器。可將光信號(hào)放大并轉(zhuǎn)為電信號(hào)四、功能用途1、熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器，掃描范圍200-900nm，通常比紫外分光光度計(jì)檢測(cè)靈敏度高2~3個(gè)數(shù)量級(jí)，能在紫外“力不能及”的領(lǐng)域發(fā)揮作用，是現(xiàn)代分析測(cè)試領(lǐng)域尤其是痕量分析領(lǐng)域一種應(yīng)用廣泛的重要分析儀器，在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)及臨檢、藥學(xué)及藥理學(xué)、生化、食品、環(huán)保、公安等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。1.醫(yī)學(xué)和臨床檢驗(yàn)———生物體試料的臨床分析

2.藥學(xué)和藥理學(xué)———天然藥物分析，藥品質(zhì)量控制和藥物代謝的研究

3.生物化學(xué)———對(duì)于生物體內(nèi)微量物質(zhì)的測(cè)定

4.食品工業(yè)———食品中痕量組分的測(cè)定

5.污染物的分析———大氣污染、環(huán)境衛(wèi)生檢測(cè)，食品污染物研究等

6.有機(jī)和無(wú)機(jī)化學(xué)———用吸光光度法不能測(cè)定的痕量組分分析

五、注意維護(hù)保養(yǎng)1、

儀器一定要安裝在穩(wěn)定牢固的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，遠(yuǎn)離振動(dòng)源。2、氙燈壽命為500h，

超過使用時(shí)間必須更換，否則易引起爆炸。3、熒光分光光度計(jì)

氙燈點(diǎn)亮后需一定時(shí)間穩(wěn)定，故進(jìn)行精密測(cè)試應(yīng)在

30分鐘以上。

關(guān)閉氙燈電源后，若要重新使用，請(qǐng)等待

60秒以后重新觸發(fā)。

4、供試品測(cè)試完畢后應(yīng)及時(shí)取出，長(zhǎng)時(shí)間放置在樣品室中會(huì)污染光學(xué)系統(tǒng)，引起性能下降。樣品室應(yīng)保持干燥，應(yīng)及時(shí)更換干燥劑。六、儀器操作現(xiàn)場(chǎng)具體操作一、設(shè)備名稱：UV2401紫外可見分光光度計(jì)二、使用原理由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同。因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。因?yàn)樵S多物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對(duì)這些物質(zhì)分別進(jìn)行測(cè)定（定量分析和定性分析）。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數(shù)。三、組成結(jié)構(gòu)主要由輻射源（光源）、色散系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動(dòng)記錄器及顯示器等部件組成。四、功能用途1檢定物質(zhì)根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長(zhǎng)雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。2與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測(cè)定條件要相同。3比較最大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性4純度檢驗(yàn)5推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)6氫鍵強(qiáng)度的測(cè)定實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。7絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定8反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究9在有機(jī)分析中的應(yīng)用有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測(cè)定的科學(xué)，它是在有機(jī)化學(xué)和分析