腫瘤標(biāo)記物的臨床應(yīng)用

關(guān)于腫瘤標(biāo)記物的臨床應(yīng)用1第1頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月2

何謂腫瘤標(biāo)記物◆腫瘤組織和細(xì)胞，由于癌基因及其產(chǎn)物的異常表達(dá)，所產(chǎn)生的抗原及生物活性物質(zhì)?！裟[瘤組織侵潤正常組織并引起免疫反應(yīng)和代謝異常，產(chǎn)生的一些生物活性物質(zhì)。

在腫瘤患者體液或組織中存在的比正常人更高水平的一類物質(zhì)。（如酶、糖蛋白、等）第2頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月3

腫瘤標(biāo)記物應(yīng)用的發(fā)展階段

19世紀(jì)中葉1846—至今已有四個階段1、1846發(fā)現(xiàn)“本周氏蛋白”。相繼1928-1959發(fā)現(xiàn)HCGACTH。2、1963-1965，甲胎蛋白、癌胚抗原。3、1979年用單克隆抗體識別糖類抗原（carbohyrafeantigen)

CA19-9、CA12-5、CA15-3、CA72.4、等。4、1980年G.CooperM等發(fā)現(xiàn)癌基因。從而腫瘤標(biāo)記物的檢測從分子水平提高到基因水平。第3頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月4腫瘤標(biāo)記物研究及應(yīng)用的進展

傳統(tǒng)的方法是通過在系列生化、生理、和分子生物學(xué)研究中比較不同的腫瘤中不同基因及產(chǎn)物的表達(dá)水平。以此來鑒定各種腫瘤的特異性標(biāo)記物。

目前腫瘤標(biāo)記物的研究是通過蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成和動態(tài)變化。以此確定新的腫瘤標(biāo)記物。第4頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月5

蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，包括兩個方面:細(xì)胞作圖蛋白質(zhì)組學(xué)、蛋白質(zhì)表達(dá)蛋白質(zhì)組學(xué)高通量技術(shù):即生物芯片技術(shù)(biochip)。它包括DNA芯片及蛋白芯片和組織微陣列技術(shù)。生物信息技術(shù):蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)庫，通過蛋白組學(xué)的進展建立更多的數(shù)據(jù)庫如人的血漿、尿液、腦脊液、正常和腫瘤蛋白的圖譜。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究主要包括：第5頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月6

腫瘤標(biāo)記物的分類

近年來由于免疫學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞工程學(xué)、遺傳工程學(xué)及相關(guān)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)有腫瘤標(biāo)記物50多種。可按其來源、成份、生物作用分別為;腫瘤特異性抗原，腫瘤相關(guān)抗原，激素、受體、酶和同工酶，癌基因及其有關(guān)的單克隆抗體

腫瘤抗原：細(xì)胞癌變過程中具有許多大分子的總稱，存在腫瘤細(xì)胞膜上。腫瘤特異性抗原：腫瘤細(xì)胞上特有的抗原。腫瘤相關(guān)抗原：由病毒感染所造成的。與病毒相關(guān)的抗原。胚胎性抗原。第6頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月7

臨床常用的腫瘤標(biāo)記物

腫瘤產(chǎn)物標(biāo)記物;AFP、CEA、PSA。糖脂和糖蛋白類抗原：CA50、CA72-4CA19-9、CA12-5、CA15-3、CA27.29。酶類抗原：CK-BB、NSE（神經(jīng)系統(tǒng)特異性醇化酶、PAP等。激素類抗原;HCG、ACTH、CT等。其它抗原：FER、2–MG、CIC、IL-2、TNF等。第7頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月8一

腫瘤標(biāo)記物應(yīng)用存在的問題

幾十種腫瘤標(biāo)記物，但仍不盡人意的，原因至今尚未有一個腫瘤標(biāo)記物具有器官的特異性腫瘤標(biāo)記物正常組織產(chǎn)生，非正常組織也產(chǎn)生腫瘤標(biāo)記物可有一過性的升高或一過性的降低

由于上述缺點可以造成假陰性或者假陽性和只測一項所帶來的偏差，用其聯(lián)合測定的方法提高診斷的特異性和敏感性。第8頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月9

臨床評價指標(biāo)

＊特異性真陰性例數(shù)

良性疾病例數(shù)

（真陰性+假陽性）＊敏感性真陽性例數(shù)癌癥總例數(shù)（真陽性+假陰性）

＊診斷效率特異性×敏感性×100﹪

要求;特定器官40-70﹪

廣譜30-50﹪

特異性：指一種檢測特定疾病的方法對非疾病測定結(jié)果陰性百分比敏感性：指一種檢測疾病的方法對特定疾病測定結(jié)果陽性百分比×100﹪×100﹪第9頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月10（一）AFP的臨床應(yīng)用AFP(alpha-fetoprotein)屬糖蛋白抗原。由胚胎肝細(xì)胞合成，其次由卵黃囊合成，腸上皮細(xì)胞少量產(chǎn)生。分泌到血清中。胚胎時的AFP，1-2個月合成，3個月達(dá)高峰，5個月后合成下降。分娩時合成停止。主要AFP的生物學(xué)作用;①胚胎時起白蛋白的作用。②保持胎兒不被排斥。③具有免疫抑制作用。④促進腫瘤細(xì)胞的生長第10頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月11AFP的臨床應(yīng)用

拜耳臨床應(yīng)用調(diào)查表：1良性疾病(BenignDiseases)的測定統(tǒng)計

種類例數(shù)0-88.1-20.020.1-500500-1000>1000健康

79378012100

男3973897100

女3963915000良性病

3483161881＊5肝硬化60484215肝炎64518500其它2242176100第11頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月12（表2)惡性疾病(MalignantDiseases)的AFP水平ng/ml病種例數(shù)0-810-2020-500500-1000>1000睪丸癌

精原細(xì)胞瘤41373100非精原細(xì)胞瘤2041051956519肝癌原發(fā)性肝癌802911

20416激發(fā)型肝癌93798501其它泌尿系64548200胃癌40373000卵巢癌78735000胰腺癌18161100

第12頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月13（表3）國內(nèi)學(xué)者AFP的統(tǒng)計調(diào)查表病種例數(shù)%>500(ng/ml)原發(fā)性肝癌

6885（52）

膽道癌

3220胃癌750腸癌711胰腺癌591第13頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月14

AFP是具有相對特異性腫瘤標(biāo)記物。在病灶分化程度接近于壞死、變性、癌組織中結(jié)蹄組織太多，AFP合成減少可導(dǎo)致陰性(20-30)﹪。轉(zhuǎn)移性肝癌占10﹪升高。肝硬化一般<200(ng/ml)

。急性肝炎可>400(ng/ml)

。原發(fā)性肝癌AFP與ALT的結(jié)果呈分離相。內(nèi)胚層的腸道腫瘤AFP200ng/ml（胃、結(jié)腸癌)?；ザ嗵FP升高?？偨Y(jié)總結(jié)第14頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月15(2)CEA(carcinoembryonicantigen)的臨床應(yīng)用

CEA1965年由加拿大學(xué)者發(fā)現(xiàn)結(jié)腸腺癌和胎兒結(jié)腸中提取的腫瘤相關(guān)抗原,所以被認(rèn)為是結(jié)、直腸癌的特異性標(biāo)記。CEA屬腫瘤細(xì)胞的結(jié)構(gòu)抗原，在細(xì)胞漿中形成，通過細(xì)胞膜到細(xì)胞外面，然后進入周圍的體液，因此從血清、腦脊液、乳汁、胃液、胸水、及排泄物中均可以檢出。

肝臟是CEA分解代謝的場所。應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)無器官特異性，但準(zhǔn)確率較高。第15頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月16（表4）拜耳對CEA測定應(yīng)用的統(tǒng)計（良﹪ng/ml）病種例數(shù)0-2.22.6-5.05.0-1010.1-20>20吸煙

15087.384.700不吸煙

22598.51.8000肝硬化

5313.20肝炎540.020.00400腸炎119099.1000胃炎1566.720.0013.30胸膜炎5396.301.900腎、膀胱1283.46.308.30肺炎2969.024.16.900良性息肉23

65.221.913.000第16頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月17表5CEA在惡性疾病中的水平(%ng/ml）病種例數(shù)0-2.52.6-5.05.1-1010.1-20>20直腸癌25037.638.0

肺癌25846.215.810.87.020.2胸膜癌22168.36.8胃癌3560.08.6卵巢癌3582.80胰腺癌4344.220.916.37.011.6肝癌

680.016.7033.30淋巴細(xì)胞癌157510.0000第17頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月18

良良惡惡

<5ng/ml胸水血清灌洗液<5ng/ml>5ng/ml>5ng/ml<5ng/ml>5ng/ml呼吸系統(tǒng)的CEACA12-5+CEA第18頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月19小結(jié)

●

所有內(nèi)胚層來源的腫瘤均有

CEA升高現(xiàn)象●結(jié)腸癌有40-60%的升高●結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移肝臟陽性高于AFP●體液的CEA值高于血清值●是療效觀察，愈后復(fù)發(fā)的指標(biāo)第19頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月20CEA(carcinoembryonicantigen)在上述疾病中可以看出敏感度，特異性均很差，但臨床實驗確認(rèn)聯(lián)合測定可以提高其準(zhǔn)確性。第20頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月21

（三）糖類抗原CA12-5的臨床應(yīng)用

1984年應(yīng)用放射免疫技術(shù)建立了CA125的單克隆抗體的檢測。CA125廣泛分布在漿膜表面上皮（胸膜、腹膜、心包膜)和苗勒氏管的衍生物(如輸卵管內(nèi)皮、子宮、及宮頸內(nèi)膜）。

OC12-5單抗

如圖說明CA12-5一種與卵巢癌(ocariancencar)相關(guān)的抗原。素細(xì)胞黑色(±)卵巢漿液細(xì)胞（+）其他腫瘤細(xì)胞(–)

胚胎細(xì)胞(–)第21頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月22表5CA12-5臨床應(yīng)用調(diào)查（良)%

病種例數(shù)

>35U/ml

未絕經(jīng)婦女3544.9

絕經(jīng)婦女3045.6懷孕1540喂奶4117月經(jīng)期1118子宮內(nèi)膜增生27

37子宮纖維瘤110

卵巢囊腫3642

盆腔炎1213

胰腺炎

2955第22頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月23

表6CA12-5在惡性腫瘤疾病的水平%病種例數(shù)

>35U/ml手術(shù)前卵巢癌37752胸膜癌2945肺癌3149子宮癌3438腸癌2413第23頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月24表7婦科上皮癌血清CA12-5結(jié)果(國內(nèi)）類別例數(shù)%>65U/ml陽數(shù)漿膜性腺瘤900粘膜性腺瘤714.21惡性瘤槳液性囊腺癌2692.324粘膜性囊腺瘤11001內(nèi)膜樣癌41004透明細(xì)胞瘤875.06惡性纖維上皮癌11001惡性間皮癌21002第24頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月25文獻報道●

卵巢癌在女性生殖腫瘤中發(fā)病率為第3位，死亡為第一位?！?/p>

在診斷非粘液性卵巢癌時陽性率較高。漿液性卵巢癌100%?！裥啬ぱ讜r可高達(dá)長常值得10倍以上，與CEA聯(lián)合測定可鑒別診斷量與惡。腹水大于血漿●臨床的值于病程分期呈正相關(guān)Ⅲ〉Ⅱ〉Ⅰ●

非良性疾病的病例盆腔炎，子宮肌瘤，卵巢腫瘤一般小于正常5倍●肝硬化有報道78%（55）的升高第25頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月26卵巢癌

胰腺癌肺癌小結(jié)以上組織在惡性疾病時均由不同程度的增高，聯(lián)合測定，可提高陽性率。CA12-5炎癥3-5倍癌癥>10倍

CA12-5CA12-5第26頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月27（四）

▲

CA19-9是1979年用人的結(jié)腸癌細(xì)胞株免疫鼠與骨髓瘤進行雜交所得一株編號為1116NS19-9的單克隆抗體所識別的抗原。1983年應(yīng)用于臨床90年代得到推廣和使用。在消化道腫瘤中應(yīng)用之廣。一般認(rèn)為對胰腺癌、膽囊癌、膽管癌的陽性率在80%以上?，F(xiàn)將國內(nèi)外的報道總結(jié)如下：CA19-9測定的臨床應(yīng)用第27頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月28表8

拜耳CA19-9測定結(jié)果（炎癥與癌癥）病種例數(shù)范圍（U/ml)正常人3000-29良性病111-137肝炎252.8-22.3肝硬化240-112胰腺炎90-86.2病種例數(shù)范圍U/ml胰腺癌140﹡5.7–13591直腸癌1462–0.88胸膜癌154.8–172.0食道癌95.7–77.5胃癌290–51156肝癌19﹡0–796076卵巢癌150–258第28頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月29CA19-9國內(nèi)學(xué)者的臨床結(jié)果觀察種類例數(shù)%>37.0U/ml食道癌1118.1胃癌6842.7結(jié)腸癌2339.1肝癌1827.8膽囊癌35﹡71.0胰腺癌20﹡75.0小結(jié)胰腺癌、CA19-9CA12-5膽囊癌、CA19-9CEA肝癌、CA19-9AFP第29頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月30（五）CA15-3的臨床應(yīng)用⊙糖蛋白抗CA15-3

最早發(fā)現(xiàn)于乳腺癌細(xì)胞中。因而作為乳腺癌的診斷標(biāo)記物應(yīng)用于臨床。其特異性報道如下：CA15-3良性乳腺病←N=314<38U/ml

N=97>38U/ml→乳腺癌第30頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月31CA15-3種類例數(shù)﹪>38（U/ml)胃癌297腸癌4326肺癌4743胰腺癌4547卵巢癌5056肝癌2055前列腺癌3418子宮癌2013在其它腫瘤疾病的水平第31頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月32國內(nèi)良與惡性疾病CA15-3的病種例數(shù)

>38.0(U/ml)

范圍U/ml乳腺癌1585920-250卵巢癌587112-250漿液性癌307712-250粘液性癌105014-65子宮內(nèi)膜樣147812-120未分化癌36620-130纖維瘤242012-46子宮內(nèi)膜異位188-25水平第32頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月33

國內(nèi)時宏珍報道：CA15-3對乳腺癌等腫瘤疾病的診斷是

靈敏度

%特異性%

乳腺癌65.995.6

肝癌42.080.0

胃癌24.293.7

直腸癌20.6100

CA15-3不應(yīng)用血漿、肝素使結(jié)果偏低、EDTA是結(jié)果偏高注意：第33頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月34

（六）PSA的臨床應(yīng)用☆前列腺特異抗原(PSA)國外推薦應(yīng)對40-50年齡的高危男性每年進行一次血清學(xué)的定量檢查。結(jié)合直腸指檢來篩選，以提高前列腺癌的早期診斷的準(zhǔn)確性和特異性?！袅夹郧傲邢僭錾摺粲^察前列腺癌的療效◆判斷轉(zhuǎn)移及預(yù)后評價第34頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月35

PSA分子結(jié)構(gòu)

tPSA5-40第35頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月36

正常人tPSA4<ng/ml◆PSA>20ng/ml提示前列腺癌▲PSA4-10ng/ml視為灰色區(qū)易造成漏檢?！裼胒PSA/tPSA的比值，及fPSA和cPSA的等分子測定可以解決上述問題，提高特異性。▼

fPSA>25﹪為良性，<10﹪為前列腺癌。第36頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月37cPSAfPSA在4oC或20oC放置24小時，室溫放置6小時，4oC以下放置一周，其結(jié)果無變化。

在4oC或20oC下24小時4-9﹪的損傷。室溫5.5小時。在離心3.5﹪損傷。在4oC或20oCfPSA/tPSA的比率下降11-13﹪和10-11﹪。第37頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月38表10拜耳PSA測定的臨床應(yīng)用（ng/ml)﹪病種例數(shù)0-4.04.0-1010.0-40>40.0平均正常女100100000<0.06男（40-70）

2831000000.71前列腺15246.732.920.004.37肥大前列腺癌191513肺癌101000000.08腎癌61000000.37胸腔癌101000000.08其它泌尿3900.42胃腸癌1291.7008.30.90第38頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月39國內(nèi)吳俊淵在2002年第9卷第1期《標(biāo)記免疫分析與臨床》報道●當(dāng)fPSA/tPSA比值在1.3，tPSA<2.0ng/ml時其fPSA/tPSA的敏感度和特異性分別在100﹪和57﹪?！癞?dāng)血清tPSA含量大于20.0ng/mlfPSA/tPSA比值的靈敏度和特異性分別在62.1﹪、66.7﹪?！癞?dāng)tPSA2-20ng/ml，fPSA/tPSA的敏感度和特異性分別在93.6﹪、89.9﹪.

可見，只有在tPSA2-20ng/ml時，fPSA/tPSA比值才有意義。第39頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月40cPSA測定的臨床應(yīng)用

有報道158例經(jīng)病理組織活檢驗證的前列腺增生及前列腺癌患者進行了cPSA、

tPSA、fPSA檢測。其中100例前列腺癌患者

cPSA與tPSA兩種指標(biāo)相比

Χ=8.1P<0.01cPSA與

fPSA/tPSA兩種指標(biāo)相比Χ=9.39P<0.01

分別在表1和表2、表3所示第40頁，課件共47頁，創(chuàng)作于2023年2月41

表1

100例前列腺癌患者cPSA與tPSA結(jié)果比較

cPSA合計+

-