高中生物動(dòng)物細(xì)胞工程

關(guān)于高中生物動(dòng)物細(xì)胞工程第1頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

救治燒傷病人的有效方法是取其自身皮膚進(jìn)行自體移植(若用他人的皮膚呢?_____.),但這對(duì)大面積燒傷者來(lái)說(shuō)做不到,有什么辦法獲取大量的自體皮膚嗎?---將自身皮膚的細(xì)胞培養(yǎng)成皮膚!---這叫“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)”.第2頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)---查書P44-45回答上述問(wèn)題.1.什么叫動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作過(guò)程是怎樣的?第3頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月什么叫動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖(即分裂).▲提示:人造皮膚第4頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官和組織(如肝臟)剪碎組織胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞▲動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程(簡(jiǎn)要)細(xì)胞貼著瓶壁生長(zhǎng)第5頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程(詳細(xì)):細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無(wú)限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變(癌變)

動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官第6頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6.解釋以下名詞概念:①原代培養(yǎng):②傳代培養(yǎng):③接觸抑制:提示與思考:

把一些組織細(xì)胞放在培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),稱作原代培養(yǎng);

等到培養(yǎng)瓶里的細(xì)胞太多(因不斷分裂)放不下時(shí),便把一些細(xì)胞移到新的培養(yǎng)瓶里繼續(xù)培養(yǎng),稱作傳代培養(yǎng).

兩者無(wú)本質(zhì)區(qū)別,只是細(xì)胞代數(shù)不同,"輩分"不同,常表現(xiàn)出不同的生物學(xué)特征(如細(xì)胞形態(tài),抗藥性,特異結(jié)合性等).

但是,二者的先后順序是_______;細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象會(huì)發(fā)生在____和_____培養(yǎng)階段,而細(xì)胞的癌變(不死性,無(wú)限分裂)會(huì)在_____培養(yǎng)階段;

接觸抑制的細(xì)胞將會(huì)衰亡死去.第7頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。

細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。

細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)10代（原代培養(yǎng)）就成為細(xì)胞株，10-50代（傳代培養(yǎng)）少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，獲得不死性（類似癌細(xì)胞），成為細(xì)胞系

第8頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程(詳細(xì)):細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無(wú)限傳代細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變

動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官第9頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲思考回答:1.用于培養(yǎng)的動(dòng)物的器官、組織、細(xì)胞要從什么樣的動(dòng)物身體上獲取?____為什么?_____.2.胰蛋白酶的作用是什么?______.

能換用胃蛋白酶嗎?為什么?____________.3.為什么要將動(dòng)物組織分解成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)?___________________________.

若取用的培養(yǎng)材料是單個(gè)的動(dòng)物細(xì)胞,還要用胰蛋白酶處理嗎?________.提示:用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織細(xì)胞的時(shí)間不能太長(zhǎng),否則會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu).第10頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.用專門配制的培養(yǎng)液將已經(jīng)分散的動(dòng)物細(xì)胞稀釋成“細(xì)胞懸液”,置于適宜條件下,其中的細(xì)胞將進(jìn)行連續(xù)的___________,產(chǎn)生一代一代的新細(xì)胞.有絲分裂5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還要經(jīng)過(guò)“脫分化”的過(guò)程嗎?為什么?___________________________________.不要.因?yàn)檫@些細(xì)胞本來(lái)就仍具有分裂能力.第11頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。與植物培養(yǎng)基相比其特點(diǎn)是：（1）液體培養(yǎng)基（2）含有動(dòng)物血清（一）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞大都生活在液體的環(huán)境第12頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月什么叫“培養(yǎng)基”?含有一定營(yíng)養(yǎng)成分，供組織培養(yǎng)植物生長(zhǎng)的基質(zhì).培養(yǎng)基的組成成分:無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分：C，H，O大量元素及部分微量元素.有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分:①含N物質(zhì)：包括維生素和氨基酸.②碳源：2%—5%的蔗糖.

③瓊脂：起支持作用(常溫下是固態(tài)).④生長(zhǎng)激素：生長(zhǎng)素，細(xì)胞分裂素和赤霉素.培養(yǎng)基的PH值：5.0－6.0.植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基:第13頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)皿(或培養(yǎng)瓶)能密封起來(lái)嗎?為什么?________.細(xì)胞培養(yǎng)中所需的O2和CO2各起什么作用?_____.1.為什么要在培養(yǎng)液里加入血清?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液里的血清相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)基里的什么成分?______________.植物生長(zhǎng)激素提供有利于細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所需的激素、生長(zhǎng)因子或提供合成培養(yǎng)基所缺乏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

第14頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲我們已知,應(yīng)用植物組織培養(yǎng)可將植物細(xì)胞培育(克隆)成新植物;

但能將動(dòng)物細(xì)胞(如肝細(xì)胞)培養(yǎng)成新的動(dòng)物嗎?為什么?____________________________.動(dòng)物細(xì)胞的全能性受較大抑制1.無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境2.營(yíng)養(yǎng)3.溫度和pH4.氣體環(huán)境▲動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:

--課本P46.第15頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲那么動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有何用處?

---查書P46—47.生產(chǎn)有價(jià)值的蛋白質(zhì)制品，（如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體、動(dòng)物激素）檢測(cè)有毒物質(zhì)用于某些器官移植▲動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用:第16頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖蔗糖植物激素葡萄糖動(dòng)物血清快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白等植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系第17頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲昨日黃花---克隆羊“多莉”又是啥來(lái)歷呢?它是由一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)而來(lái)嗎?---查書P47--48.“動(dòng)物體細(xì)胞核移植和克隆動(dòng)物”的文、圖.第18頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲克隆羊培育過(guò)程:黑面綿羊去核卵細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利▲核移植技術(shù)第19頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月供體細(xì)胞培養(yǎng)（MⅡ卵母細(xì)胞）減數(shù)第二次分裂中期去核的卵母細(xì)胞供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞受體細(xì)胞激活，完成減數(shù)分裂、發(fā)育胚胎移植第20頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月思考:1.用動(dòng)物細(xì)胞克隆動(dòng)物實(shí)際上是通過(guò)__________技術(shù)實(shí)現(xiàn)的().2.在動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)中,提供細(xì)胞核(供體細(xì)胞)的是優(yōu)良動(dòng)物的_____(選:體細(xì)胞;生殖細(xì)胞),接受細(xì)胞核(受體細(xì)胞)的是另一動(dòng)物的_____細(xì)胞(此前應(yīng)將該細(xì)胞的細(xì)胞核_______).

受體細(xì)胞為什么選用卵母細(xì)胞(實(shí)為減數(shù)第二次中期的次級(jí)卵母細(xì)胞—MⅡ期)?__________________________________.

細(xì)胞核移植卵母還有胚胎移植技術(shù)具有較好的發(fā)育潛力(能分裂分化;細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)豐富).第21頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5.為了促使受體動(dòng)物排卵,要給其注射6.促使細(xì)胞核和無(wú)核卵母細(xì)胞融合的方法有_________________.4.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用10代以內(nèi)的細(xì)胞,為什么?______________________________分裂能力強(qiáng)且遺傳物質(zhì)尚未改變.3.你認(rèn)為克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞核供體動(dòng)物的100%的復(fù)制(COPY)嗎?為什么?____.

在由上述二者所構(gòu)成的新的“重組細(xì)胞”中的遺傳物質(zhì)包括:__________________________________________________________________.供體細(xì)胞的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)和受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì).注射促性腺激素.微電流第22頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲體細(xì)胞核移植技術(shù)在實(shí)際中的應(yīng)用:

---查書P49--50注意:1.看課文P49的圖2-22,思考回答:①供體細(xì)胞和受體細(xì)胞各是______.②為什么培育成的組織器官和病人是“免疫匹配”的?▲體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題.---見課文P50.因?yàn)檫@些器官的遺傳特性和供體(即病人)相同.第23頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲動(dòng)物細(xì)胞融合

與單克隆抗體第24頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲還記得“番茄—馬鈴薯”植株是依靠什么技術(shù)培育成功的嗎?________________.

這種技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是能夠克服遠(yuǎn)緣雜交(即不同的種、屬、科等植物之間的雜交)所存在的____________.植物體細(xì)胞雜交生殖隔離▲那么,不同動(dòng)物的細(xì)胞是否也能進(jìn)行雜交呢?

若能,其雜交的過(guò)程、原理、及意義又是怎樣的?--查書P52的文、圖及“生物技術(shù)資料卡”第25頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲動(dòng)物細(xì)胞融合

(即雜交)第26頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲思考與提示細(xì)胞融合是常見的正常的生命活動(dòng),如:兩個(gè)細(xì)胞正在融合

受精作用細(xì)胞融合的內(nèi)在原因是:_______________細(xì)胞膜的流動(dòng)性.第27頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合完整的雜交細(xì)胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）注意：動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞（一）動(dòng)物細(xì)胞融合第28頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）動(dòng)物細(xì)胞融合1.過(guò)程：誘導(dǎo)方式物理法化學(xué)法生物法：滅活的病毒仙臺(tái)病毒紫外線喪失感染性（不感染細(xì)胞）保留融合活性（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）第29頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.過(guò)程：滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞（細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性）第30頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月無(wú)論是由幾個(gè)細(xì)胞所融合而成的一個(gè)雜交細(xì)胞,其細(xì)胞核只有___個(gè),其細(xì)胞核里的染色體數(shù)為__________,其遺傳性質(zhì)包括了_________.人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有:_____________________.與人工誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交的方法相比多了一個(gè)________,此方法的原理是:______________(見課本P52的“生物資料卡片”).化學(xué)的、生物的物理的、第31頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。3.應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體第32頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲請(qǐng)先回答:

抗體是由什么結(jié)構(gòu)、在什么情況下、在什么地方(生物的體內(nèi)還是體外)產(chǎn)生的?

它有何作用?▲再查書P52最后一段,回答:

在以前,人們是采用什么方法獲得抗體的?這有何弊端?為什么會(huì)有這樣的弊端?第33頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

抗體1?？乖瓌?dòng)物體內(nèi)刺激效應(yīng)B

抗原動(dòng)物體內(nèi)刺激效應(yīng)B

抗體抗原不純抗體不純篩選單一效應(yīng)B細(xì)胞不能增值產(chǎn)生大量抗體2。特異性差、純度低；產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏第34頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

有何方法能夠?yàn)槿祟惿a(chǎn)數(shù)量巨大、特異性強(qiáng)(即只針對(duì)一種抗原的一種抗體)、靈敏度高的抗體呢?---查書P53.▲思考:

要制備數(shù)量巨大、特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗體所面臨的問(wèn)題是什么?如何解決?提示:

一個(gè)B細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體,但B細(xì)胞不可能無(wú)限分裂(為什么?),所以不可能獲得數(shù)量巨大的抗體.

顯然,如果能夠使這種(個(gè))B細(xì)胞獲得無(wú)限分裂的能力,問(wèn)題不就迎刃而解嗎?

如何使B細(xì)胞獲得無(wú)限分裂的能力呢?天下有沒有能夠無(wú)限分裂的細(xì)胞呢?......第35頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲妙招:

運(yùn)用雜交瘤技術(shù)大量制備單克隆抗體.---查書P53—54的文圖.注意:

單克隆抗體的制備過(guò)程.第36頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲思考回答:1.看左圖說(shuō)出制備過(guò)程.第37頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月▲思考與提示:單克隆抗體制備過(guò)程:

注射抗原(即免疫小鼠)B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合;篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)大量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔單克隆抗體2.為何要給小鼠注射抗原(即免疫)?________.

為何要選用骨髓瘤細(xì)胞?______________.3.雜交瘤細(xì)胞的遺傳組成包括:______________;功能特點(diǎn):____________________________________________.兩細(xì)胞的遺傳物質(zhì)既能產(chǎn)生特異性抗體又能無(wú)限分裂(大量快速繁殖)第38頁(yè)，課件共43頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.在單克隆抗體制備過(guò)程中,要運(yùn)用______培養(yǎng)基對(duì)進(jìn)行融合的細(xì)胞進(jìn)行篩選(第一次篩選),目的是除去________________________細(xì)胞而保留___________________細(xì)胞(這種細(xì)胞叫做_______________.5.上述被除去的“雖已融合但具有相同核”的細(xì)胞是指_____________________________________.自行融合的