檢驗科預(yù)防母嬰傳播學(xué)習(xí)培訓(xùn)課件

預(yù)防乙肝、梅毒、艾滋母嬰傳播**市婦幼保健院檢驗科**

乙肝血清學(xué)檢測

一、檢測方法：乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物監(jiān)測方法:酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、金標(biāo)記免疫分析(膠體金)、化學(xué)發(fā)光免疫試驗(CLIA)等。根據(jù)需要可進行單一乙肝表面抗原檢測，或乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物(兩對半)檢測。二、預(yù)期用途HBV感染導(dǎo)致血漿中出現(xiàn)特異性的乙肝病毒表面抗原及其他一系列特異性的血清學(xué)標(biāo)志物。血清中檢測出HBsAg是乙型肝炎早期診斷指標(biāo)之一。初篩檢測方法：膠體金法（定性檢測試劑，不能確定樣本中乙型肝炎病毒含量）確診檢測方法：ELISA、化學(xué)發(fā)光免疫實驗等。HBV感染的臨床診斷HBV感染的主要依據(jù)是HBsAg陽性

慢性HBV感染:指HBsAg陽性持續(xù)6個月以上慢性HBV攜帶:慢性HBV感染肝功正常者。(每6-12個月需復(fù)查肝功和其它必要檢查。)

慢性乙型肝炎:慢性HBV感染患者肝功異常且排除其他原因。HBV血清標(biāo)志物及其臨床意義乙肝感染孕產(chǎn)婦所生兒童干預(yù)乙肝免疫球蛋白注射：

所有乙肝病毒表面抗原陽性孕產(chǎn)婦所生新生兒均應(yīng)于出生后24小時內(nèi)(最好12小時內(nèi)，越早越好)注射乙肝免疫球蛋白100國際單位。同時注射重組酵母乙型肝炎疫苗10ug/0.5ml。注射方法為肌肉注射

梅毒的定義由梅毒螺旋體引起的一種慢性傳染性疾病，螺旋體進入人體后迅速播散至全身各個器官，產(chǎn)生各種癥狀與體征，也可呈潛伏狀態(tài)，還可通過胎盤傳給下一代。傳播方式：

性傳播占95%梅毒孕婦可通過胎盤傳給胎兒，也可通過產(chǎn)道傳染胎兒。危害：

梅毒螺旋體在各妊娠期均可進入胎兒區(qū)域，可發(fā)生自然流產(chǎn)、死產(chǎn)、宮內(nèi)生長受限、早產(chǎn)等梅毒血清學(xué)檢測當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4周~10周左右，血清中可產(chǎn)生：抗類脂抗原的非特異性反應(yīng)素抗體和抗梅毒螺旋體抗體的特異性抗體血清學(xué)檢測包括：初篩：梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）、梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）、膠體金法等。確證：快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗（RPR）、甲苯胺紅不加熱血清學(xué)試驗（TRUST）、非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗

原理（抗心磷脂抗體）：人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來的一種類脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機體產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w產(chǎn)生時間感染3周-4周，硬下疳出現(xiàn)1周-2周一般在感染后5～7周（或硬下疳出現(xiàn)后2～3周）產(chǎn)生?？贵w作用無保護作用，治療監(jiān)測。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。原理和方法反應(yīng)原理抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見抗原基本成分心磷脂、卵磷脂和膽固醇方法包括：快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR)不加熱血清反應(yīng)素(USR)甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）性病研究實驗室試驗(VDRL)等。快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR)

試驗步驟：1、分別取50μLRPR陽性對照和陰性對照均勻鋪在紙卡的兩個圓圈中。2、另吸取50μL待檢血清加在紙卡另一個圓圈中。3、用專用針頭，滴管吸取RPR試劑，分別垂直滴加1滴上述血清中。4、水平轉(zhuǎn)動卡紙8分鐘(100轉(zhuǎn)/分鐘)3分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。結(jié)果判斷：陰性：可見均勻的抗原顆粒無凝集物弱陽：可見較小黑色凝集物陽性：可見中等或較大的黑色凝塊注：陽性者需做定量試驗了解抗體滴度：將待檢血清用生理鹽水作倍比稀釋（原倍1:21:41:81:161:32）對每個稀釋度的血清按定性實驗方法再測定并判讀結(jié)果。

TRUST試驗步驟同RPR：結(jié)果判讀：3+～4+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的紅色絮狀物，液體清亮。2+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小到大的紅色絮狀物，液體較清亮。1+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小的紅色絮狀物，液體渾濁?！簣A圈內(nèi)僅見紅色集中于中央一點或均勻分散。發(fā)報告流程(僅供參考)1.快速法陽性，非酶(RPR或TRUST)陰性，即單陽性，轉(zhuǎn)免疫室做酶法，給臨床醫(yī)生打電話進一步復(fù)查，把非酶陰性報告發(fā)出去，第二天報酶法陰或陽性報告單.2.快速法陽非酶陽，要做定量滴度，即雙陽不需再轉(zhuǎn)免疫室直接報結(jié)果。臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個月，試驗抗體滴度下降2個稀釋度，6個月下降4個稀釋度。一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽性早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。傳播途徑

性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長，傳染性越來越小到感染后2年，通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播在妊娠7周時，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經(jīng)治療者，雖已無性傳播（病期>2年），但妊娠時仍可傳染給胎兒病期越長，傳染性越小;輸血傳染間接傳播：日常用品、接吻、哺乳、醫(yī)療器械等途徑（接觸部位附有梅毒螺旋體）。妊娠梅毒診斷

各期梅毒臨床表現(xiàn)不同，每個妊娠期婦女必須在妊娠早期檢測是否感染。梅毒潛伏期10-90天，多數(shù)在6周，梅毒感染時間不足2-3周者，血清學(xué)可以是陰性，所以高危者應(yīng)在孕早期，孕28周和分娩前復(fù)查孕婦梅毒初篩試驗陽性者，必須做確診試驗。如初篩試驗陽性，確診試驗陰性，無臨床表現(xiàn)則考慮梅毒血清學(xué)假陽性，4周后復(fù)查。梅毒感染的孕產(chǎn)婦每月做1次非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗定量檢測感染孕產(chǎn)婦分娩前必須進行非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗定量檢測，以便與所生新生兒非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗定量檢測結(jié)果進行比較，作為后續(xù)診治的依據(jù)。早期先天梅毒診斷（我國）（1）暗視野顯微鏡，皮膚及粘膜損害中查到梅毒螺旋體，為確診依據(jù)。（2）嬰兒血清梅毒螺旋體IgM抗體陽性，為確診依據(jù)。（3）嬰兒出生時非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗滴度≥母親分娩前滴度的4倍，且梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陽性，可確診。（4）嬰兒出生時不能診斷先天梅毒的兒童，任何一次隨訪發(fā)現(xiàn)RPR由陰轉(zhuǎn)陽或滴度上升，結(jié)合梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陽性，可確診。（5）上述嬰兒隨訪至18月齡時梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗仍持續(xù)陽性，可回顧性確診。什么是艾滋病艾滋病醫(yī)學(xué)全稱是‘獲得性免疫缺陷綜合征’（英文縮寫AIDS）人類免疫缺陷病毒（HIV）主要侵犯和破壞CD4+T淋巴細胞，使機體細胞免疫功能受損，通過血液和體液進入人體的各個系統(tǒng)器官，從而并發(fā)各種嚴(yán)重的感染和腫瘤窗口期：一般人體感染HIV后到外周血液中能夠檢測出HIV抗體的這段時間，一般為2周~3個月，這段時間血液中檢測不到HIV抗體，但人體具有傳染性。潛伏期：無癥狀感染期，一般2-10年，最短6個月，HIV-2感染時較長，最長可達20年，一旦發(fā)病通常在18個月內(nèi)死亡。潛伏期長短與機體免疫狀態(tài)和感染病毒量有關(guān)。艾滋病的傳播途徑HIV攜帶者的血液、精液、陰道分泌物、唾液、尿液、母乳及腦、皮膚、骨髓等組織內(nèi)存在著HIV。一般感染源為血液、精液、陰道分泌物、母乳等。傳播途徑：1.性接觸傳播2、血液傳播3、母嬰傳播HIV血清學(xué)檢測篩查試驗：酶聯(lián)免疫試驗（ELISA）免疫膠體金快速試驗放射免疫法、免疫斑點法確認試驗：免疫印跡試驗（WB）常用放射免疫沉淀試驗（RIPA）免疫熒光試驗（IFA）HIV檢測流程艾滋病的母嬰傳播約90%的15歲以下兒童艾滋病感染是通過母嬰傳播的感染傳播方式：宮內(nèi)傳播（出生后48h血HIV+）分娩期傳播（非母乳喂養(yǎng)，出生后1周內(nèi)血HIV－

，7~90天轉(zhuǎn)+）母乳傳播（母乳喂養(yǎng)，出生后90天內(nèi)HIV－

，90天后轉(zhuǎn)+）（在不進行干預(yù)的情況下母親傳給下一代幾率是15%-35%進行干預(yù)的情況下，其感染幾率最低可降到2%以下）新生兒艾滋病早診目標(biāo)及適應(yīng)范圍艾滋早診總目標(biāo)